- PHẦN 3: VẬT LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP:
3.2 Phương pháp phân tích
3.2.4 Phương pháp xác định pectin
Nguyên tắc: - Trong mơi trường kiềm lỗng, pectin hồ tan sẽ giải phĩng ra nhĩm methoxyl thành rượu methylic và acid pectic tự do. Acid pectic tự do trong mơi trường khi cĩ mặt acid acetic sẽ kết hợp với CaCl2 thành dạng muối kết tủa canxi pectat. Từ hàm lượng muối kết tủa cĩ thể tính được hàm lượng pectin cĩ trong mẫu phân tích.[16]
Hố chất:
- Dung dịch CaCl2 2N: hịa tan 230-250g CaCl2 trong 1000ml nước cất - NaOH 0.1N
- CH3COOH 1N - AgNO3 [13]
Tiến hành:
Xác định hàm lượng pectin trong mẫu nguyên liệu
Cân 5g nguyên liệu, thêm 100ml nước cất, đun cách thủy ở 900C trong 3 giờ, thêm H2O đủ thể tích bằng 100ml. Lấy 20ml dung dịch này cho vào erlen rồi thêm 100ml NaOH 0,1M để yên 7 giờ (cĩ thể qua đêm). Sau đĩ thêm 50ml dung dịch CH3COOH 1M, sau 5 phút thêm 50ml dung dịch CaCl2 2M để yên 1 giờ. Đem đun sơi 5 phút và lọc qua giấy lọc đã được sấy khơ đến trọng lượng khơng đổi, rửa kết tủa Ca-pectat bằng nước cất nĩng cho đến khi nước rửa khơng cịn ion Cl- (dùng dung dịch AgNO3 1% để thử Cl-). Sau khi sạch kết tủa, cho giấy lọc kết tủa vào chén cân và sấy khơ ở 1050C cho đến trọng lượng khơng đổi. Sự khác nhau về trọng lượng giấy lọc chưa cĩ và cĩ kết tủa cho ta biết được trọng lượng của Ca_pectat.
Vì hàm lượng canxi trong Ca-pectat là 8% nên khi tính hàm lượng pectin ta phải nhân trọng lượng Ca-pectat với 0,92.[13]
Tính kết quả:
Hàm lượng pectin (P) tính theo cơng thức:
P= [(B x 0,92 x 100)/m] x (V/v).
Trong đĩ: B: Trọng lượng Ca-pectat (g).
V: Tổng thể tích dung dịch chiết được (100ml). v: Thể tích dung dịch đem xác định (20ml). m: Trọng lượng mẫu (g).[18]