+ Thí nghiệm 3 : Sử dụng chế phẩm cellulase
3.3.2.3Thí nghiệm 7: Sử dụng kết hợp 3 chế phẩm pectinase,
hemicellulase và cellulase.
Thí nghiệm 7.1: Chọn hàm lượng chế phẩm pectinase, hemicellulase và cellulase cần sử dụng.
- Trong thí nghiệm nầy, chúng tơi tiến hành thay đổi hàm lượng 3 loại chế phẩm enzym pectinase, hemicellulase và cellulase nhằm thu được hiệu suất thu hồi chất chiết là cao nhất.
- Dựa vào kết quả thí nghiệm 2,3 chúng tơi chọn pH và nhiệt độ xúc tác sao cho cả 3 enzym cùng hoạt động tốt nhất, thời gian thủy phân là 30 phút.
- Sau quá trình thủy phân, mẫu được lấy ra gia nhiệt đến 900C trong 3 phút và làm lạnh ở nhiệt độ phịng để vơ hoạt enzym rồi đem đi xác định hiệu suất thu hồi chất chiết và các chỉ tiêu khác. Trong từng thí nghiệm đều thực hiện mẫu đối chứng là mẫu khơng sử dụng chế phẩm enzym, khơng chỉnh pH.
- Thí nghiệm được lặp lại 3 lần và dùng thống kê ANOVA để kiểm tra sự khác biệt cĩ ý nghĩa.
Bảng 3.8: Bố trí thí nghiệm chọn hàm lượng chế phẩm pectinase, hemicellulase và cellulase Chế phẩm Hàm lượng sử dụng (%w/w) Pectinase 0.02 0.02 0.02 0.02 0.02 0.04 0.04 0.04 0.04 Hemicellulase 0.02 0.02 0.02 0.04 0.06 0.02 0.02 0.02 0.04 Cellulase 0.02 0.04 0.06 0.02 0.02 0.02 0.04 0.06 0.02 Tổng (%w/w) 0.06 0.08 0.1 0.08 0.1 0.08 0.1 0.12 0.1
Thí nghiệm 7.2: Chọn thời gian xúc tác khi sử dụng kết hợp 3 chế phẩm pectinase, hemicellulase và cellulase:
- Trong thí nghiệm nầy, chúng tơi tiến hành thay đổi thời gian thủy phân lần lượt là 15, 30, 45, 60, 75 phút khi sử dụng đồng thời cả 3 loại enzym pectinase, hemicellulase và cellulase trong quá trình xử lý nhằm thu được hiệu suất thu hồi chất chiết cao nhất.
- Dựa vào kết quả thí nghiệm 1,2,3 chúng tơi chọn pH và nhiệt độ xúc tác sao cho cả ba chế phẩm enzym cùng hoạt động tốt nhất, hàm lượng chế phẩm enzym sử dụng được chọn từ kết quả của thí nghiệm 7.1.
- Sau quá trình thủy phân, mẫu được lấy ra gia nhiệt đến 900C trong 3 phút và làm lạnh ở nhiệt độ phịng để vơ hoạt enzym rồi đem đi xác định hiệu suất thu hồi chất chiết. Trong từng thí nghiệm đều thực hiện mẫu đối chứng là mẫu khơng sử dụng chế phẩm enzym, khơng chỉnh pH.
- Thí nghiệm được lặp lại 3 lần và dùng thống kê ANOVA để kiểm tra sự khác biệt cĩ ý nghĩa.