Nguyên tắc
Tổng số vi sinh vật hiếu khí là tổng số những vi khuẩn thuộc nhóm vi khuẩn hiếu khí tồn tại trong môi trường. tổng số vi sinh vật này trong thực phẩm có thể
xác định bằng phương pháp nuôi cấy trên bề mặt thạch, thông qua đếm số lượng khuẩn lạc trên đĩa peptri cho phép xác định được lượng vi sinh vật còn có khả năng sinh trưởng trong môi trường trong mẫu ban đầu.
Cách tiến hành
Pha loãng 10g mẫu + 90ml dung dịch pha loãng => độ pha loãng 101.. Các bước tiếp phan tương tựđến nồng độ 105.
Môi trường PCA sau khi được hấp tiệt trùng, được làm nguội đến khoảng 500C sau đó đổ vào đĩa peptri vô trùng. Đĩa peptri vô trùng được làm khô bề mặt bằng cách sấy trong tủ sấy ở nhiệt độ 350C.
Dùng pipet vô trùng hút chính xác 0,1ml hoặc 0.3ml nhỏ trên bề mặt môi trường trong đĩa petri. Trải đều dung dịch vi sinh vật lên bề mặt môi trường bằng que trải tam giác thủy tinh. Các đĩa petri được đểở nhiệt độ phòng 15 – 20 phút cho khô bề mặt, lật ngược cho vào tủấm, nuôi ở 300C trong 72h.
Mỗi mẫu cấy 3 nồng độ, mỗi nồng độ cấy 3 hộp petri, sau đó lấy ra kiểm tra.
Tính kết quả
∑C
N(CFU/ml) =
(n1vd1+ ...+ nivdi)
Trong đó:
N là số tế bào (đơn vị hình khuẩn lạc) vi khuẩn trong 1ml mẫu. (CFU: colony forming units);
C: tổng số khuẩn lạc đếm được trên các hộp đĩa petri đã chọn (có số
khuẩn lạc từ 25 – 250 khuẩn lạc/ đĩa).
ni: sô hộp petri cấy tại độ pha loãng thứ I. di: hệ số pha loãng tương ứng.
v: thể tích dịch mẫu (ml) cấy vào trong môi trường.
3.4.3. Phương pháp xử lý số liệu
Số liệu phân tích được xử lý trên phần mềm Irristat 5.0 và Microsoft Excel
PHẦN 4. KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN