Làm giàu trình tự toàn bộ exon của gen ARID1B trong u nguyên bào thần kinh

U nguyên bào thần kinh (UNBTK) là khối u đặc phổ biến ở trẻ dưới 15 tuổi, được hình thành từ các tế bào thần kinh sơ khai thuộc mô thần kinh giao cảm. Bệnh lý chiếm 7% các loại ung thư ở trẻ em và khoảng 15% các ca tử vong do ung thư ở trẻ em.

Nghiên cứu Y học Y Học TP Hồ Chí Minh * Phụ Bản Tập 20 * Số * 2016 LÀM GIÀU TRÌNH TỰ TỒN BỘ EXON CỦA GEN ARID1B TRONG U NGUYÊN BÀO THẦN KINH Lê Võ Hồng Ngọc*, Nguyễn Thị Dung, Đỗ Thị Thu Hằng**, Hồ Trần Bản***, Bùi Chí Bảo**** TĨM TẮT Mở đầu: U ngun bào thần kinh (UNBTK) khối u đặc phổ biến trẻ 15 tuổi, hình thành từ tế bào thần kinh sơ khai thuộc mô thần kinh giao cảm Bệnh lý chiếm 7% loại ung thư trẻ em khoảng 15% ca tử vong ung thư trẻ em Ngoài đột biến gen hay thay đổi cấu trúc nhiễm sắc thể biết, nghiên cứu gần giải trình tự gen hệ cho thấy đột biến thuộc ngoại di truyền (epigenetics) có vai trò quan trọng đến diễn tiến bệnh, bật đột biến gen ARID1B ARID1B có vai trò nhân tố phiên mã phức hợp SWI/SNF tái cấu trúc nhiễm sắc chất (chromatin remodeling) Tuy nhiên, mối quan hệ UNBTK ARID1B chưa hiểu rõ Trong nghiên cứu này, bước đầu tối ưu quy trình thu nhận 20 exon gen ARID1B bệnh nhân UNBTK dựa vào phương pháp PCR Đây bước quan trọng cho giải trình tự đột biến ARID1B bệnh nhân UNBTK Mục tiêu: Làm giàu sản phẩm toàn exon gen ARID1B nhằm thực cho giải trình tự hệ bệnh nhân UNBTK Phương pháp: Khảo sát mồi in silico, khảo sát điều kiện bắt cặp điều kiện PCR cho exon gen ARID1B Mẫu bệnh khối u bệnh nhân UNBTK thu nhận từ bệnh viện Nhi đồng II Tp.HCM Mẫu tiến hành phân loại nhóm mô (>50% tế bào nhỏ đặc trưng UNBTK thu nhận), tách chiết DNA, PCR khuếch đại toàn exon ARID1B Một số sản phẩm PCR giải trình tự Sanger để kiểm chứng Kết quả: Thu nhận sản phẩm 19 exon tổng số 20 exon gen ARID1B, exon giàu GC nên sản phẩm PCR chưa đặc hiệu Kết giải trình tự mẫu bệnh nhân cho thấy sản phẩm PCR cho sóng trình tự tốt Tuy nhiên, vùng trình tự khuếch đại cặp mồi 20c, 20d, 20e có vùng homopolymer A/T nên tín hiệu sau vùng bị nhiễu Kết luận: Chúng xây dựng thành cơng quy trình PCR tồn exon gen ARID1B, trừ PCR exon cần tối ưu hóa thêm Ngồi ra, kết giải trình tự ban đầu cho thấy exon 20 có số vùng homopolymer A/T gây khó khăn đọc kết giải trình tự, bổ sung mồi giải trình tự cho nhiều đoạn ngắn Nhìn chung kết bước đầu cho nghiên cứu sâu thơng tin gen ARID1B Từ khóa: u ngun bào thần kinh, ARID1B, PCR, giải trình tự Sanger ABSTRACT TARGETED GENE ENRICHMENT FOR HIGH THROUGHPUT SEQUENCING OF ARID1B IN NEUROBLASTOMA Le Vo Hong Ngoc, Nguyen Thi Dung, Do Thi Thu Hang, Ho Tran Ban, Bui Chi Bao * Y Hoc TP Ho Chi Minh * Supplement of Vol 20 - No - 2016: 144 - 150 Background: Neuroblastoma is a solid tumor which originates from primitive neural cells of sympathetic system It is a common disease in children under 15 years of age with disease prelevence and mortility in children cancer group are 7% and 15%, respectively Recent studies using next generation sequencing showed that   Đại học Khoa học Tự nhiên Tp HCM Khoa Y - Đại học Quốc Gia Tp HCM  Bệnh viện Nhi đồng II Tp.HCM Trung tâm Y sinh học phân tử, Đại học Y Dược Tp HCM Tác giả liên lạc: TS Bùi Chí Bảo ĐT: 0909708225 Email: bcbao@ump.edu.vn  144 Chuyên Đề Nội Khoa II Y Học TP Hồ Chí Minh * Phụ Bản Tập 20 * Số * 2016 Nghiên cứu Y học epigenetic mutations, particularly in ARID1B, aslo participated in tumor formation and progression, together with genetic mutations and chromosomal rearrangement ARID1B serves as transcription factor which takes part in chromatin-remodeling complex SWI/SNF Relationship between neuroblastoma and ARID1B, however, is not fully understood In this study, we ebstablished a protocol targeting 20 exons of ARID1B by conventional PCR in neuroblastoma patients for further investigations Objectives: Targeting 20 exons of ARID1B by conventional PCR for further DNA sequencing in neuroblastoma patients Methods: We conducted a sets of optimization for PCR including primer designs, temperature and conditional pipeline for whole exomes of ARID1B Samples are collected from patients who were diagnosed neuroblastoma and undergone surgical dissection in Children hospital II Ho Chi Minh city DNA were extracted and amplified by conventional PCR targeting 20 exons of ARID1B Specificity were checked by DNA Sanger sequencing Results: The completed 19 exons of ARID1B were on right PCR size But Exon contains several sites of GC content, so PCR products were unqualified yet DNA sequencing of patient samples confirmed the right PCR products and specific with ARID1B Of note, the amplicon of primer pairs 20c, 20d and 20e consists of homopolymer A/T showed noises and hindering DNA sequencing Conclusions: The results ebstablished in-house protocol for targeting exons of ARID1B from Neuroblastomas Exon products are needed further technical target on high GC contents DNA sequencing data were confirmed some homopolymeric regions hindered sequencing regions dute to homopolymer A/T at exon 20 This research is fundamental for the further study going on to build up the next generation sequencing of large samples of Neuroblastomas Key words: neuroblastoma, ARID1B, PCR, Sanger sequencing Đặc biệt, Sausen cs (2013) phát đột ĐẶT VẤN ĐỀ biến ARID1B khảo sát 71 bệnh nhân UNBTK loại ung thư có nguồn gốc từ UNBTK độ tương quan đột biến ARID1B tế bào thuộc mào thần kinh Đây loại u đến thời gian sống bệnh nhân(8) đặc, nằm ngoại vi não, thường xuất phát từ Gen ARID1B (AT rich interactive domain tuyến thượng thận hay hạch thần kinh giao 1B), có tên khác BAF250B, nằm cánh cảm vùng cổ, ngực, bụng cột sống Bệnh lý dài nhiễm sắc thể vị trí 6q25.3 với chiều thường xảy trẻ sơ sinh trẻ em 15 dài 432934 bp, bao gồm 20 exon Protein tuổi Đây loại u ác tính đặc ngoại vi não phổ ARID1B thành viên họ ARID, chứa biến hàng thứ hai dạng u đặc phổ biến domain quan trọng tương tác với trình tự trẻ nhỏ(1) Các biến đổi di truyền đặc trưng DNA giàu AT(12) Nó thành phần bệnh bao gồm khuếch đại gen MYCN, khuếch phức hợp tái cấu trúc nhiễm sắc chất SWI/SNF đại hay đột biến kích hoạt ALK, thay đổi cấu trúc Các nghiên cứu gần cho thấy đột biến nhiễm sắc thể 1p, 3p, 11q 17q(9,11) Mặt khác, ARID1B có vai trò tiềm hình biển đổi thuộc ngoại di truyền mô thành khối u số ung thư gan, vú, buồng tả như: methyl hóa DNA (CASP8, RASSF1A), trứng u nguyên bào tủy ARID1B miRNA (let7a, miR-9, miR-17-92a) đột biến xem gen ức chế khối u ung thư phức hợp tái cấu trúc nhiễm sắc chất tuyến tụy hay ức chế đường tín hiệu Wnt/bSWI/SNF tiểu đơn vị BRG1, catenin ung thư biết đến ARID1 BRN đóng vai trò quan trọng trong driver gen UNBTK(4,8,10) Tuy nhiên việc trưởng thành tế bào mào thần kinh(3,5) chưa có tài liệu công bố nghiên cứu UNBTK Thần kinh 145 Nghiên cứu Y học Y Học TP Hồ Chí Minh * Phụ Bản Tập 20 * Số * 2016 với đột biến gen ARID1B bệnh nhân Việt Nam Nghiên cứu phần đầu công việc thu thập mẫu tối ưu điều kiện để thu nhận toàn exon ARID1B cho giải trình tự ĐỐI TƯỢNG-PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU Đối tượng nghiên cứu Khối mô UNBTK (từ 2013-2015) Bệnh viện Nhi đồng II Tp HCM Tiêu chuẩn chọn mẫu Bệnh nhân chẩn đoán bệnh lần đầu tiên, chưa trải qua điều trị, không tái phát chẩn đốn ung thư, bệnh di truyền khác Mẫu lấy đồng thuận gia đình bệnh nhân Phương pháp nghiên cứu Ly trích DNA từ mẫu mô tươi Lấy khoảng 20 mg mô rã đông nghiền dung dịch PBS để tạo hỗn hợp đồng Tiếp theo hỗn hợp chuyển sang falcon 15 mL, ly tâm bỏ dịch Sau tiến hành tách chiết DNA tồn phần kit Wizard Genomic DNA Purification (Promega) theo qui trình nhà sản xuất Thiết kế mồi Mồi PCR exon sử dụng cho giải trình tự thiết kế nằm intron cách đầu exon khoảng 50 nucleotide Chiều dài mồi khoảng từ 18 đến 24 nucleotide, %GC Bảng 1: Trình tự mồi cho 20 exon ARID1B STT 10 11 12 13 14 146 Tên 1F 1R 2F 2R 3F 3R 4F 4R 5F 5R 6F 6R 7F 7R khoảng từ 40-60% ba nucleotide cuối đầu 3’ có đến nucleotide G/C Mồi cho 20 exon gen ARID1B thiết kế dựa phần mềm CLC Genomics Workbench 5.5 (CLC Bio) dựa trình tự gen ARID1B tham khảo tải từ NCBI với mã số NG_032093 PCR khuếch đại exon Sử dụng kit Hot Start Taq Polymerase (Takara) Sau đó, điện di sản phẩm PCR gel 2% 75V 40 phút để kiểm tra sản phẩm khuếch đại Giải trình tự exon Sản phẩm PCR nạp vào đĩa 96 giếng giải trình tự Sanger (VNDAT), kèm theo mồi giải trình tự để thực tinh đọc kết giải trình tự KẾT QUẢ Thiết kế mồi Dựa vào số tiêu chí chung, thiết kế 23 cặp mồi dùng để khuếch đại 20 exon gen ARID1B (Bảng 1) Trong đó, cặp mồi 14F 15R cho sản phẩm gồm exon 14 15 khoảng cách hai exon 257 bp Riêng exon 20 có kích thước lên đến 4613 bp nên thiết kế cặp mồi (20a, 20b, 20c, 20d, 20e) cho vùng trình tự khuếch đại cặp mồi chồng lấp lên Trình tự 5’-3’ TCACCATGAAAGCACACAGC GGCAAAGAAAGAAACTCAGG TTGCTGGATGTTTTGTCAGG AGCAGAAAATCCGTGCAATG TAATAAGCCACAGGGCCAAG GTATCATCAAGCAGGACATG CCCTTCATGTTGCTGAATTG GACAGGAAGATGATTCAGAG GATGGAGTCTCCCTACATTG ACTTATCCAGGACTACAGAG CCAGAAAACCTTCATCTCTG CTTAATATGTGGCCACTAGG TAAATGTGGCTGTGTCTTGG CTCCTCTCCATATTTGTTGG Kích thước sản phẩm PCR Exon 2068 459 289 315 491 467 343 Chuyên Đề Nội Khoa II Y Học TP Hồ Chí Minh * Phụ Bản Tập 20 * Số * 2016 STT 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31 32 33 34 35 36 37 38 39 40 41 42 43 44 45 46 Tên 8F 8R 9F 9R 10F 10R 11F 11R 12F 12R 13F 13R 14F 15R 16F 16R 17F 17R 18F 18R 19F 19R 20Fa 20Ra 20Fb 20Rb 20Fc 20Rc 20Fd 20Rd 20Fe 20Re Nghiên cứu Y học Trình tự 5’-3’ GGAGAATCTTATGGTACCAG ACAAACCTGTCAGGTAACAG GTGCTGATCGCATTGTTGGA GGGAACAATGCAGCTATGTG TAGTAGAAATGACTGCCAGG CCGTTTAGGCAGATTCACTG CACTCTGTAACTTGTGTTGG AAAATGAAGGCATGCAGAGG GCCTGAACTAGTAGCCTTCA CGACTTTCACACAGGCTTAG GTGGGAGTAATGAGCATTAG AAGTCCCAAGTTCCCTGTTG CTGTATAACTAGCAAGGCAG GAGTGAAAGGTGAACTGTTG GAGATGACTAGAAGGGATGG TATTGTCATCAGTGGCTCAG AGTCAGGGTTCCAGAAATGG TGACTTCAACATCCCAGGAG TCAGTGTGTGACATGGTGTA ATCCCTTTAAGATGAGCAGG CGCTTAACTGTCCTTGAGAG TCAGTGCTCATCAACTCAGG TGATGGAAAGGTATTGACGG TCGTGGTGAAGAAGAATCAG AAAGTCACCGGAACATCAAG TCTTCACTCACACATGCTTG GCTGGATATCTCGATATCAG CAGCTGCTCTCCTGAAATCG TCATTAGGGCCATATCTCCA GTAACAGTCAATGACCCAGG GCATTTAGTTTACTCCACCG TAGCTATTGCTGAGCAGACG Kích thước sản phẩm PCR Exon 430 507 309 10 317 11 495 12 445 13 732 14-15 330 16 357 17 1072 18 373 19 1033 1053 1141 20 1053 1188 Kiểm tra hoạt động mồi kích thước sản phẩm dự đốn cặp mồi (Hình 1, Hình 2) Cặp mồi 20c thu sản phẩm PCR mờ, cần tiến hành tối ưu hóa thêm Tiếp theo, kiểm tra khả hoạt động mồi thực tế phản ứng PCR Trong 23 cặp mồi, chúng tơi có 21 cặp mồi cho sản phẩm PCR băng có tín hiệu sáng, rõ nét có kích thước phù hợp với 491 467 459 289 315 507 343 430 10 11 12 495 309 317 Hình 1: Sản phẩm PCR cặp mồi đến 12 1: exon 2; 2: exon 3; 3: exon 4; 4: exon 5; 5: exon 6; 6: exon Thần kinh 147 Y Học TP Hồ Chí Minh * Phụ Bản Tập 20 * Số * 2016 Nghiên cứu Y học 7; 7: exon 8; 8: exon 9; 9: exon 10; 10: exon 11; 11: exon 12; 12: thang 1kb plus 445 107 732 481 357 103 105 105 373 10 11 118 Hình 2: Sản phẩm PCR cặp mồi 13 đến 20e (trừ 20c).1: exon 13; 2: exon 14, 15; 3: exon 16; 4: exon 17; 5: exon 18; 6: exon 19; 7: exon 20a; 8: exon 20b; 9: exon 20d; 10: exon 20e; 11: thang 1kb plus khơng có sản phẩm kí sinh bổ sung thêm Tối ưu hóa PCR cho cặp mồi MgCl2 (Hình 4) Băng diện di sáng rõ tương ứng nồng độ MgCl2 thêm vào mM 1,5 mM, 2068 nhiên khơng có khác biệt đáng kể nên chọn nồng độ MgCl2 bổ sung mM nồng độ tối ưu Hình 3: Sản phẩm PCR mồi 1: Thang kb plus; 2: exon 1; 3: chứng âm Phản ứng PCR cặp mồi cho lượng sản phẩm thấp (Hình 3) Do đó, chúng tơi tiến hành tối ưu hóa số điều kiện như: gradient nhiệt độ bắt cặp mồi, nồng độ DNA, nồng độ MgCl2, số chu kỳ Tuy nhiên, phản ứng PCR có thêm sản phẩm không đặc hiệu mồi chạy không ổn định Tối ưu hóa PCR cho cặp mồi 20c Cặp mồi 20c cho kết điện di vạch mờ nên chúng tơi tiến hành tối ưu hóa để tăng lượng sản phẩm PCR Nồng độ MgCl2 khảo sát có vai trò cofactor hoạt động DNA polymerase, làm tăng hiệu suất phản ứng Nồng độ Mg2+ thường sử dụng phản ứng PCR từ 0,5 đến mM(7) Vì buffer PCR 10X có 1,5 mM MgCl2 nên khảo sát khoảng bổ sung thêm 0,5-1,5 mM MgCl2 Kết cho thấy sản phẩm PCR cho băng điện di sáng hơn, rõ nét 148 Hình 4: Sản phẩm PCR mồi 20c (1141 bp) 1: thang kb plus; 2: không bổ sung MgCl2; 3: bổ sung 0,5 mM MgCl2; 4: bổ sung mM MgCl2; 5: bổ sung 1,5 mM MgCl2; 6: chứng âm Như vậy, khuếch đại 18 exon ARID1B với thành phần chu trình PCR trình bày Bảng Sau thu sản phẩm PCR cặp mồi, tiến hành giải trình tự mẫu bệnh Kết giải trình tự cho thấy cặp mồi khuếch đại đặc hiệu exon gen ARID1B Tín hiệu nucleotide thể qua đỉnh sóng rõ hầu hết exon Tuy nhiên, đọc tín hiệu khoảng 262 nucleotide Chuyên Đề Nội Khoa II Y Học TP Hồ Chí Minh * Phụ Bản Tập 20 * Số * 2016 phía đầu vùng trình tự exon 20c sau Nghiên cứu Y học homopolymer T (Hình 5) Bảng 2: Thành phần chu trình PCR exon gen ARID1B Exon 2-20e (trừ exon 20c) 20c Thành phần PCR Buffer PCR 10X 1X dNTP 2,5 mM 0,25 mM Mồi xuôi (10 M) 0,5 M Mồi ngược (10 M) 0,5 M Takara Taq HS U/L 0,5 U gDNA 50-60 ng Nước PCR Bổ sung thêm: MgCl2 25 mM mM Chu trình nhiệt chu kỳ: o 98 C phút 40 chu kỳ: o + 98 C 10 giây, o + 56 C 20 giây, o + 72 C 90 giây chu kỳ: o 72 C phút Giải trình tự exon Hình 5: Kết giải trình tự exon 20c vùng có homopolymer T trăm GC lên đến 74,6% nên gây khó khăn Tương tự, kết giải trình tự exon 20d có tối ưu hóa nên khảo sát chất đỉnh sóng nhiễu tồn có vùng phụ gia dùng khuếch đại trình tự giàu GC homopolymer A phần đầu Sau đó, DMSO, betain, glycerol, polyethylene chúng tơi phát thêm ba vùng homopolymer glycol, formamide, betaine hay sử dụng kit A/T tiến hành rà sốt trình tự gen chuyên dụng(6) Mặt khác, exon 20 chứa vùng ARID1B tham khảo vị trí exon 20c, 20d 20e homopolymer A/T làm nhiễu tín hiệu sóng phía (Bảng 3) sau vùng tượng trượt (slippage) Bảng 3: Các vùng homopolymer A/T exon 20 DNA polymerase Giải trình tự hai chiều bao Số lượng Tên Exon Vị trí gồm mồi xi mồi ngược vị trí nucleotide A/T g.435112homopolymer thiết kế cặp mồi giải Homopolymer 20c 10 435121 trình tự cho vùng nằm hai vị trí g.435718Homopolymer 20c 18 homopolymer cho tín hiệu tốt Các 435735 g.435880nghiên cứu giải trình tự gen ARID1B gần sử Homopolymer 20c-20d 10 435889 dụng hệ thống giải trình tự hệ khơng g.436131Homopolymer 20d 14 đề cập đến vấn đề mà gặp phải(2,8) 436144 Tuy nhiên, nghiên cứu sử dụng g.437709Homopolymer 20e 14 437722 quy trình PCR phân tích kết giải trình tự BÀN LUẬN Sanger đơn giản tốn so với giải trình tự hệ Tiếp theo, cần tiến hành Exon với chiều dài 1542 nucleotide chứa khảo sát đột biến gen ARID1B số lượng nhiều trình tự GC lặp lại phần đầu phần Thần kinh 149 Nghiên cứu Y học Y Học TP Hồ Chí Minh * Phụ Bản Tập 20 * Số * 2016 lớn bệnh nhân để hiểu rõ vai trò ARID1B UNBTK KẾT LUẬN Chúng khuếch đại 19 exon, exon 20c cần bổ sung thêm mM MgCl2 Exon chưa cho sản phẩm PCR đặc hiệu Tiếp theo, chúng tơi giải trình tự 19 exon khuếch đại có 18 exon cho kết giải trình tự bình thường, tương đồng với trình tự tham khảo, exon 20 chứa vùng homopolymer A/T làm nhiễu tín hiệu sóng phía sau vùng Sau đó, cần tiến hành khảo sát đột biến gen ARID1B số lượng lớn bệnh nhân để hiểu rõ vai trò ARID1B UNBTK Nghiên cứu tài trợ Quỹ Phát triển khoa học công nghệ Quốc gia (NAFOSTED) đề tài mã số 106-YS.06-2014.48 TÀI LIỆU THAM KHẢO 150 Brodeur GM (2003) Neuroblastoma: biological insights into a clinical enigma Nat Rev Cancer, 3(3): 203-16 Cajuso T (2014) Exome sequencing reveals frequent inactivating mutations in ARID1A, ARID1B, ARID2 and ARID4A in microsatellite unstable colorectal cancer Int J Cancer, 135: 611–623 Decock A, et al (2011) Neuroblastoma epigenetics: from candidate gene approaches to genome-wide screenings Epigenetics, 6(8): 962-70 10 11 12 Khursheed M, et al (2013) ARID1B, a member of the human SWI/SNF chromatin remodeling complex, exhibits tumour-suppressor activities in pancreatic cancer cell lines Br J Cancer, 108(10): 2056-62 Louis CU, Shohet JM (2015) Neuroblastoma: Molecular Pathogenesis and Therapy Annu Rev Med, 66: 49–63 Musso M (2006) Betaine, Dimethyl Sulfoxide, and 7Deaza-dGTP, a Powerful Mixture for Amplification of GC-Rich DNA Sequences J Mol Diagn, 8(5): 544–550 Roux KH (2009) Optimization and Troubleshooting in PCR In: Dieffenbach C, Dveksler G (eds) PCR Primer: A Laboratory Manual, 2nd edition, pp 56-62 Cold Spring Harbor Laboratory Press, NY Sausen M, et al (2013) Integrated genomic analyses identify ARID1A and ARID1B alterations in the childhood cancer neuroblastoma Nature genetics, 45(1): 12-17 Trương Đinh Kiều Diễm cs (2015) Xây dựng quy trình phân loại nhóm nguy u nguyên bào thần kinh khuyếch đại MYCN Y học Tp.HCM, phụ tập 19, số 5: 1-7 Vasileiou G, et al (2015) Chromatin-Remodeling-Factor ARID1B Represses Wnt/b-Catenin Signaling The American Journal of Human Genetics, 97: 445–456 Vũ Đình Quang cs (2013) Đánh giá khuếch đại gen MYCN bệnh nhân u nguyên bào thần kinh Y Khoa, 6(1): 68-73 Wilsker D, et al (2005) Nomenclature of the ARID family of DNA-binding proteins Genomics, 86(2): 242-251 Ngày nhận báo: 24/11/2015 Ngày phản biện nhận xét báo: 30/11/2015 Ngày báo đăng: 15/02/2016 Chuyên Đề Nội Khoa II ... Bảng Sau thu sản phẩm PCR cặp mồi, chúng tơi tiến hành giải trình tự m u bệnh Kết giải trình tự cho thấy cặp mồi khuếch đại đặc hi u exon gen ARID1B Tín hi u nucleotide thể qua đỉnh sóng rõ h u hết... catenin ung thư biết đến ARID1 BRN đóng vai trò quan trọng trong driver gen UNBTK(4,8,10) Tuy nhiên việc trưởng thành tế bào mào thần kinh( 3,5) chưa có tài li u cơng bố nghiên c u UNBTK Thần kinh. .. nhân UNBTK loại ung thư có nguồn gốc từ UNBTK độ tương quan đột biến ARID1B tế bào thuộc mào thần kinh Đây loại u đến thời gian sống bệnh nhân(8) đặc, nằm ngoại vi não, thường xuất phát từ Gen ARID1B