tình hình nhiễm bệnh cầu trùng trên đàn lợn nuôi tại huyện thanh ba, tỉnh phú thọ và biện pháp phòng trị

Các nhà khoa học đã nghiên cứu và phát hiện được hai loài cầu trùng thuộc hai giống Eimeria và Isospora đó là Eimeria debliecki và Isospora suis ký sinh và gây bệnh đường tiêu hóa của lợ

BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO TRƯỜNG ĐẠI HỌC NÔNG NGHIỆP HÀ NỘI

- -CHỬ ĐỨC TUYấN

TÌNH HÌNH NHIỄM BỆNH CẦU TRÙNG TRấN ĐÀN LỢN NUễI TẠI HUYỆN THANH BA, TỈNH PHÚ THỌ

HÀ NỘI - 2011

LỜI CAM ĐOAN

Tôi xin cam đoan đây là công trình nghiên cứu của riêng tụi Cỏc sốliệu và kết quả trình bày trong luận văn là trung thực và chưa từng có ai công

bố trong bất cứ công trình nào khác

Tôi cam đoan rằng mọi sự giúp đỡ cho việc thực hiện luận văn này đãđược cảm ơn và các thông tin trích dẫn trong luận văn đều đã được chỉ rõnguồn gốc./

Tác giả luận văn

Chử Đức Tuyên

Tôi xin chân thành cảm ơn Phòng Nông nghiệp và PTNT, Trạm Thú yhuyện Thanh Ba tỉnh Phú Thọ, cùng toàn thể đồng nghiệp cùng bạn bè đãđộng viờn, giúp đỡ tôi thực hiện đề tài.

Nhân dịp hoàn thành luận văn tôi xin được bày tỏ lòng biết ơn sâu sắctới gia đình, người thân cùng toàn thể bạn bè, đồng nghiệp đã giúp đỡ, độngviên tôi trong suốt thời gian qua

Hà Nội, ngày 23 tháng 11 năm 2011

Tác giả luận văn

Chử Đức Tuyên

1.1 Tính cấp thiết của đề tài 1

1.2 Mục tiêu của đề tài 2

PHẦN II: TỔNG QUAN TÀI LIỆU 3

2.1 Lịch sử nghiên cứu về cầu trùng 3

2.2 Phân loại cầu trùng 3

2.3 Cầu trùng ký sinh gây bệnh ở lợn 4

2.4 Vòng đời phát triển của cầu trùng 9

2.5 Tình hình nghiên cứu cầu trùng trên thế giới và trong nước

152.5.1 Trên thế giới 15

2.5.2 Nghiên cứu trong nước 22

2.6 Đặc điểm bệnh lý và lâm sàng của lợn bị bệnh cầu trùng 30

2.8.2 Điều trị bệnh 38

PHẦN III: ĐỊA ĐIỂM, ĐỐI TƯỢNG, NỘI DUNG, NGUYÊN LIỆU

VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 433.1 Địa điểm nghiên cứu 43

3.2 Đối tượng nghiên cứu 44

3.3 Nguyên liệu nghiên cứu 44

3.4 Nội dung nghiên cứu 44

3.4.1 Đánh giá tình hình nhiễm cầu trùng ở đàn lợn nuôi tại

huyện Thanh Ba tỉnh Phú Thọ 44

3.4.2 Theo dõi triệu chứng lâm sàng và bệnh tích đại thể lợn bị

mắc bệnh cầu trùng 45

3.5 Phương pháp nghiên cứu 45

3.5.1 Phương pháp lấy mẫu nghiên cứu: 45

3.5.2 Phương pháp thu nhận mẫu 46

3.5.3 Phương pháp xét nghiệm mẫu phân 47

3.5.4 Phương pháp xác định triệu chứng lâm sàng và bệnh tích:

483.5.5 Phương pháp xác định hiệu lực thuốc điều trị: 48

3.6 Bố trí thí nghiệm 49

3.6.1 Xác định loài cầu trùng ký sinh ở lợn 49

3.6.2 Tỷ lệ và cường độ nhiễm cầu trùng tại các điểm nghiên cứu

493.6.3 Tỷ lệ và cường độ nhiễm cầu trùng ở lợn theo quy mô và

phương thức chăn nuôi 49

3.6.4 Tỷ lệ và cường độ nhiễm cầu trùng theo tưng lứa tuổi

503.6.5 Tỷ lệ và cường độ nhiễm cầu trùng theo mùa vụ 50

3.6.6 Nghiên cứu triệu chứng lâm sàng và bệnh tích lợn mắc cầu

trùng qua thực địa 50

3.6.7 Thử nghiệm thuốc điều trị 51

3.7 Phương pháp xử lý số liệu 51

PHẦN IV: KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 52

4.1 Tình hình nhiễm cầu trùng trên đàn lợn tại huyện Thanh Ba,tỉnh Phú Thọ 52

4.1.1 Thành phần loài cầu trùng ký sinh ở lợn52

4.1.2 Tỷ lệ và cường độ nhiễm cầu trùng ở lợn theo các xã

554.1.3 Tỷ lệ và cường độ nhiễm cầu trùng theo lứa tuổi của lợn

574.1.4 Tỷ lệ và cường độ nhiễm cầu trùng ở lợn theo quy mô và

phương thức chăn nuôi 60

4.1.5 Tỷ lệ và cường độ nhiễm cầu trùng ở lợn theo mùa vụ

trong năm 62

4.2 Một số đặc điểm bệnh lý chủ yếu của lợn mắc bệnh cầu trùng

644.2.1 Các triệu chứng lâm sàng 64

TÀI LIỆU THAM KHẢO 77

DANH MỤC BẢNG

Bảng 4.1: Thành phần loài cầu trùng ký sinh trên đàn lợn tại huyện

Thanh Ba, tỉnh Phú Thọ 53

Bảng 4.2: Tỷ lệ và cường độ nhiễm cầu trùng ở lợn theo các xã 55

Bảng 4.3: Tỷ lệ và cường độ nhiễm cầu trùng theo lứa tuổi của lợn 58

Bảng 4.4: Tỷ lệ và cường độ nhiễm cầu trùng ở lợn theo quy mô, phương thức chăn nuôi 61

Bảng 4.5: Tỷ lệ và cường độ nhiễm cầu trùng ở lợn theo mùa vụ 63

Bảng 4.6: Những triệu chứng lâm sàng của lợn mắc bệnh cầu trùng 65

Bảng 4.7: Bệnh tích đại thể ở lợn mắc bệnh cầu trùng 69

Bảng 4.8: Kết quả điều trị cầu trùng bằng thuốc Nova-coc 72

Bảng 4.9: Kết quả điều trị cầu trùng bằng thuốc RTD-Cocsistop 73

DANH MỤC HèNH

Hình 2.1: Cấu trúc phân biệt noãn nang cầu trùng Eimeria và

Isospora 4

Hình 2.2: Hình thái Oocyst cầu trùng qua các giai đoạn 9

Hình 2.3: Sơ đồ vòng đời phát triển của cầu trùng lợn 10

Hình 2.4: Cấu tạo Oocyst giống Eimeria gây bệnh 25

Hình 4.1: Thành phần loài cầu trùng ký sinh trên đàn lợn tại huyện Thanh Ba, tỉnh Phú Thọ 54

Hình 4.2: Tỷ lệ nhiễm cầu trùng ở lợn theo các xã 56

Hình 4.3: Biểu đồ tỷ lệ nhiễm cầu trùng theo lứa tuổi của lợn 59

Hình 4.4: Biểu đồ tỷ lệ nhiễm cầu trùng ở lợn theo quy mô và phương thức chăn nuôi 62

Hình 4.5: Tỷ lệ nhiễm cầu trùng ở lợn theo mùa vụ trong năm 63

Hình 4.6: Một số hình ảnh triệu chứng lâm sàng của lợn mắc bệnh cầu trùng 67

Hình 4.7: Một số hình ảnh về hình thái của oocyst cầutrùng qua các giai đoạn phát triển ở trong phân và môi trường Bichromate Kali 2,5% 68

Hình 4.8: Một số hình ảnh bệnh tích của lợn mắc bệnh cầu trùng 71

PHẦN I: MỞ ĐẦU

1.1 Tính cấp thiết của đề tài

Trong những năm gần đây, ngành chăn nuôi nước ta có những bướcphát triển đáng kể Với những tiến bộ vượt bậc trong công tác giống, thức ăn,thuốc phòng và trị bệnh đã từng bước đáp ứng một lượng thực phẩm lớncho nhu cầu thực phẩm trong nước và tiến tới xuất khẩu Nhiều hình thứcchăn nuôi trang trại kỹ thuật cao đã xuất hiện ở Việt Nam Đây là những tínhiệu đáng mừng đối với ngành chăn nuôi, trong đú có chăn nuôi lợn

Cùng với sự phát triển chung của cả nước, ngành chăn nuôi của tỉnhPhú Thọ nói chung và huyện Thanh Ba nói riêng đó có những bước tiến vượtbậc Là huyện trung du miền núi phía Tõy bắc tỉnh Phú Thọ, Thanh Ba cóđiều kiện tự nhiên khí hậu, đất đai phù hợp với việc phát triển sản xuất chănnuôi, đặc biệt là chăn nuôi lợn Theo số liệu thống kê của Chi cục Thống kêhuyện Thanh Ba, tính đến 1/10/2011 toàn huyện có 51.706 con lợn (không kểlợn sữa), trong đó đàn lợn nỏi cú 5.971 con Chăn nuôi lợn góp phần quantrọng trong việc xúa đúi, giảm nghèo và từng bước làm giàu cho bà con nhândân địa phương

Tuy nhiên, chăn nuôi trên địa bàn huyện nhìn chung vẫn ở quy mônhỏ lẻ, phân tán, chưa tạo thành vùng sản xuất hàng hóa, mức độ đầu tưthâm canh thấp do đó hiệu quả kinh tế chưa cao Bên cạnh đó, tình hìnhdịch bệnh trong những năm vừa qua diễn biến rất phức tạp, đây là yếu tốgây thiệt hại đáng kể cho ngành kinh tế này Ngoài những bệnh truyềnnhiễm nguy hiểm thường gặp như Lở mồm long móng, Dịch tả, Tụ huyết

trựng, Phú thương hàn còn phải kể đến các bệnh do ký sinh trùng đường

ruột gây nên, trong đó có bệnh cầu trùng Lợn bị nhiễm cầu trùng thường bịtiêu chảy, giảm năng suất và hiệu quả chăn nuôi, mở đường cho các căn

nhân gây bệnh khác xâm nhập (Lê Minh và cs (2008)) Mặt khác, một bộphận lớn người chăn nuôi vẫn chưa quan tâm thỏa đáng đến việc phòng vàtrị bệnh, đặc biệt đối với các hộ chăn nuôi với quy mô nhỏ lẻ nên thiệt hại

do cầu trùng gây ra càng lớn

Bệnh cầu trùng (Coccidiosis) là một trong những bệnh phổ biến ở lợn

và nhiều loài gia súc gia cầm Cầu trùng là những động vật đơn bào ký sinh

và phá hủy tế bào biểu mô ruột, gõy viờm và xuất huyết, làm cho lợn bị tiêuchảy (Lâm Thị Thu Hương (2002))

Lê Minh và cs (2008) cho biết: lợn nuôi tại một số huyện của tỉnh ThỏiNguyờn nhiễm cầu trùng khá cao tới 51,12% Đặc biệt trong điều kiện vệ sinhchuồng trại và khu vực chăn nuôi kộm thỡ tỷ lệ nhiễm càng cao

Xuất phát từ thực tiễn sản xuất, nhằm mục đích hiểu kỹ hơn về bệnh,cũng như ảnh hưởng của nó tới chăn nuôi lợn, chúng tôi tiến hành nghiên cứu

đề tài: “Tỡnh hình nhiễm bệnh cầu trựng trờn đàn lợn nuôi tại huyện Thanh Ba, tỉnh Phú Thọ và biện pháp phòng trị”.

1.2 Mục tiêu của đề tài

- Xác định thành phần loài cầu trùng ký sinh trên đàn lợn tại huyệnThanh Ba, tỉnh Phú Thọ

- Đánh giá được tình hình nhiễm cầu trùng của đàn lợn nuôi tại huyện Thanh

Ba, tỉnh Phú Thọ

- Làm rõ triệu chứng lâm sàng và bệnh tích đại thể của lợn mắc bệnhcầu trùng

- Thử nghiệm hiệu lực điều trị bệnh của 2 loại thuốc trị cầu trùng, từ đó

đề xuất biện phỏp phũng, trị bệnh hiệu quả

PHẦN II: TỔNG QUAN TÀI LIỆU

2.1 Lịch sử nghiên cứu về cầu trùng

Cầu trùng là động vật đơn bào có hình cầu, hình trứng, hình bầu dục,hình trụ hay hình elip (phụ thuộc vào từng loài cầu trùng) Cầu trùng ký sinhchủ yếu ở tế bào biểu bì ruột của nhiều loài gia súc, gia cầm và cả ở người

Cầu trùng trong thú y được phát hiện từ những năm 370 về trước Song,các công trình nghiên cứu trên thế giới về cầu trùng và bệnh do chúng gây racũn khỏ ít ỏi Các công trình tập trung nghiên cứu về phân loại, tính miễndịch, sức đề kháng và khả năng gây bệnh của cầu trùng

Gần đây nhiều nhà khoa học đã nghiên cứu và chú ý đến vấn đề sinhbệnh học trong bệnh cầu trùng Năm 1863, bệnh cầu trùng gà đã được nghiêncứu bởi Rivelta, ụng đó tìm thấy ở phân gà có 1 loại ký sinh trùng Đến năm

1864, Eimeria đã xác định đây là một loại nguyên sinh động vật sinh sản theo bào tử thuộc lớp Sporozoa bộ Coccida, bộ phụ Eimeria.

Ngày nay, người ta đã xác định được hàng trăm loại cầu trùng ký sinhkhông những trong cơ thể động vật có xương sống mà cả động vật khôngxương sống Sự ký sinh có tính chất riêng biệt, nghiêm ngặt trên mỗi ký chủ,thậm chí trên mỗi cơ quan, tế bào nhất định

2.2 Phân loại cầu trùng

Trong hệ thống phân loại động vật, cầu trùng ký sinh ở lợn được Levine

et ai, 1980 (dẫn theo Lương Văn Huấn và cs (1997)) phân loại như sau:

Ngành : Protozoa (Nguyên sinh động vật)

Lớp : Sporozoasida

Bộ : Eucoccidiorida

Họ : Eimeriidae

Giống : Eimeria

Loài: Eimeria debliecki, Eimeria scabra, Eimeria polica, Eimeria spinosa, Eimeria neodebliecki, Eimeria perminuta, Eimeria porci, Eimeria suis

Giống: Isospora

Loài: Isospora suis

2.3 Cầu trùng ký sinh gây bệnh ở lợn

Đã có rất nhiều tài liệu công bố về các loài cầu trùng gây bệnh ở thỏ vàgia cầm Nhưng riêng những loại ký sinh ở lợn, thì nguồn tài liệu đề cập đếncòn rất ít ỏi, gần đây, có một số nghiên cứu về cầu trùng lợn

Các nhà khoa học đã nghiên cứu và phát hiện được hai loài cầu trùng

thuộc hai giống Eimeria và Isospora đó là Eimeria debliecki và Isospora suis

ký sinh và gây bệnh đường tiêu hóa của lợn

N.A Kolapxki và cs (1980) cho biết: ở lợn người ta đã xác định có 6 loài

cầu trùng thuộc giống Eimeria và hai loài thuộc giống Isospora.

Nguyễn Thị Kim Lan và cs (2008) đã tổng hợp các kết quả nghiên cứu

về các loài cầu trùng gây bệnh ở lợn cho biết: đã tìm thấy 11 loài cầu trùng

thuộc giống Eimeria và Isospora

Hình 2.1: Cấu trúc phân biệt noãn nang cầu trùng Eimeria và Isospora

* Cầu trùng giống Eimeria:

+ Eimeria debliecki (Dowes, 1921): đõy là loài phổ biến nhất, có độc

lực gây bệnh cao nhất và là nguyên nhân chính gây bệnh cầu trùng lợn

E.debliecki có 2 dạng Oocyst:

Dạng thứ nhất: Có kích thước rất lớn 50 x 25 m gồm có hai lớp vỏ rõ

rệt, không có lỗ noãn (Micropyle), hình trứng, dưới kính hiển vi nhìn thấy các

hạt nội nhân rõ rệt Thời gian hình thành bào tử nang là 7 – 9 ngày

Dạng thứ hai: Có kích thước nhỏ hơn 18 - 24 x 15 - 20 m, nhưng có

Micropyle và dưới kính hiển vi không nhìn thấy các hạt nội nhân Thời gian

hình thành bào tử nang là 2 – 3 ngày

Theo Phạm Văn Khuê và Phan Lục (1996): loài E debtiecki cư trú ở tá

tràng, làm cho niêm mạc ruột viêm cata rồi xuất huyết và hoại tử

Lê Văn Năm (2003) cho biết, loài E debliecki có độc lực mạnh ở lợn

con, nhưng khi ký sinh ở lợn trưởng thành chúng ít có khả năng làm lợn phátbệnh

+ Eimeria suis (Voller, 1921): Oocyst hình elip hoặc hình cầu Kích

thước 13 - 20 x 11 – 15 m (ngoại lệ 20 - 24 x 18 – 21 m ) Vỏ nhẵn, màu

vàng nhạt, không có Miropyle, thời gian hình thành bào tử 6 ngày Vị trí ký

sinh chưa rõ

+ Eimeria neodebliecki (Henry, 1931): Oocyst có hình elip, kích thước trung bình 21,2 - 15,8 m, không có Micropyle, thời gian hình thành bào tử

nang 13 ngày

+ Eimeria scabra (Henry, 1931): Oocyst hình trứng hoặc bầu dục hoặc

hơi có dạng elip Vỏ có 2 lớp, xù xì tựa như phủ đầy gai, màu vàng nâu Có lỗnoãn ở phần hẹp của nang trỳng, cú một hoặc nhiều hạt cực Kích thước: 25 -35,5 x 16,8 - 25,5 m Thời gian hình thành bào tử 9 - 12 ngày, trong bào tử

có thể cặn Vị trí ký sinh ở trực tràng và không tràng của lợn

+ Eimeria spinosa (Henry, 1931): Oocyst hình elip, vỏ màu nâu đục,

toàn bộ mặt ngoài được bảo hộ với những cái gai dài khoảng 1 m Kích

thước: 16 - 24 x 12,8 – 16 m Không có Micropyle Thời gian hình thành bào

tử là 15 ngày Ký sinh ở trong ruột non của lợn

+ Eimeria perminuta (Henry, 1931): Oocyst hình trứng hoặc gần tròn, đôi

khi hình cầu Kích thước: 11,2 - 16 x 9,6 - 12,8 m Vách Oocyst xù xì, màu vàng, không có Micropyle Có một hạt cực, thời gian hình thành bào tử 11 ngày

+ Eimeria scrofae (Galli-Valerio, 1935): Oocyst hình trụ, kích thước 24

– 15 m Có Micropyle, người ta chưa biết nhiều về loài này, có thể đây là một biến chủng của E debliecki.

+ Eimeria polita (Pellerdy, 1949): Oocyst hình trứng hoặc bầu dục Kích thước 23 - 27 x 10 – 27 m Vỏ Oocyst nhẵn, màu vàng nâu, không có Micropyle Thời gian hình thành bào tử 8 - 10 ngày trong tự nhiên Loài này gần giống E debliecki nhưng kích thước lớn hơn Ký sinh ở không tràng và

hồi tràng của lợn

+ Eimeria porci (Vetteling, 1963): Oocyst hình trứng, kích thước: 18

-27 x 13-18 m Vách nhẵn, không màu và Micropyle không rõ ràng.

+ Eimeria cerdonis, Vetterling (1965): Oocyst hình elip, kích thước: 26

- 32 x 20-23 m Vỏch nhám, màu vàng đến không màu, không có Micropyle.

Ký sinh ở đoạn cuối hồi tràng và không tràng của lợn

* Cầu trùng giống Isospora

+ Isospora suis (Biester và Murray, 1934): Oocyst hình cầu hoặc hình

gần tròn, kích thước 17 - 25 x 16 – 21 m, thon đều, không màu, có một lớp

vỏ dày 0,5 - 0,7 m, không có Micropyle, hạt cực và thể cặn Sporocyst hình

elip, kích thước 13 - 14 x 8 – 11 m, nằm đảo ngược nhau, có hoặc không có

thể cặn Stieda Sporocyst hình miếng xúc xích với một đầu nhọn Kích thước

9 - 11 x 3 - 4 m Thời gian hình thành bào tử nang 3 - 5 ngày Ký sinh ở

ruột non đôi khi ở kết tràng lợn

+ Isospora almaataensis (Paichuk, 1951): Oocyst hình bầu dục hay

gần tròn Vỏ trơn nhẵn, màu xám đậm hay xám nhạt Hạt cực thường có ởnhững nang trứng tròn Kích thước 24,6 - 31,9 x 23,2 – 29 m Thời gian hìnhthành bào tử 3 - 5 ngày Vị trí ký sinh chưa rõ

Ở môi trường bên ngoài cầu trùng tồn tại ở dạng noãn nang và phát

triển qua 3 giai đoạn: noãn nang chưa gây nhiễm, noãn nang chứa bào tử vànoãn nang gây nhiễm (chứa bào tử con) theo hình thức sinh sản bảo tử

2.2.1 Noãn nang chưa

gây nhiễm

2.2.2 Noãn nang chứa

túi bào tử

2.2.3 Noãn nang gây nhiễm (chứa bào tử con)

Hình 2.2: Hình thái Oocyst cầu trùng qua các giai đoạn

Cấu trúc của Oocyst cầu trùng: Oocyst (Noãn nang) cầu trùng có nhiều

hình dạng khác nhau: hình tròn, hình cầu, hình trứng, bầu dục, quả lê với kíchthước cũng khác nhau thay đổi tuỳ thuộc theo từng loài Tuy nhiên, nhìn

chung Oocyst cầu trựng cú một số đặc điểm cấu tạo như sau:

Oocyst màu sáng hoặc không màu, màu vàng nhạt hoặc nâu nhạt Mặt ngoài của Oocyst thường nhẵn, cũng có loài xù xì (Eimeria spinosa) Thành vỏch kép, gồm 2 màng: màng ngoài (ectocyst) dày hơn, màng trong (endocyst) mỏng hơn Theo Monne và Honin (1954) đã nghiên cứu đặc tính

quang học và hoá học của thành tế bào cho biết như sau: màng trong và màng

ngoài có thể tách rời nhau bằng cách làm nóng Oocyst trong nước hoặc xử lý

bằng axớt sulfuric (H2SO4) đặc

Về cấu tạo hoá học: vỏ ngoài là lớp quinone protein, vỏ trong là lớplipit kết hợp protein để tạo nên khúc xạ kép (lipoprotein)

2.4 Vòng đời phát triển của cầu trùng

Vòng đời phát triển của cầu trùng được tính từ khi gia súc ăn phải noãnnang có sức gây bệnh, qua quá trình sinh trưởng, phát triển trong và ngoài cơthể cho đến khi chúng lại tạo ra những noãn nang có sức gây bệnh Hàng

ngàn, thậm chí hàng triệu tế bào biểu bì ruột sẽ bị phá huỷ bởi các giai đoạn

sinh sản của Oocyst cầu trùng

Để thích nghi với đời sống ký sinh, sinh vật không chỉ tăng khả năngsinh sản, tăng sản phẩm sinh dục mà ở nhiều nhóm ký sinh trong đó có cầutrùng, trong chu trình phát triển của chúng có sự xen kẽ giữa sinh sản hữu tính

và sinh sản vô tính Đõy chớnh là đặc điểm nâng cao khả năng thích nghi củacầu trùng

Sự lưu truyền rộng khắp của cầu trựng trờn hành tinh chúng ta là nhờvào cấu trúc và vòng đời phức tạp cũng như khả năng thích nghi nhanh để tiếptục phát triển, tồn tại lâu trong thiên nhiên (Lê Văn Năm (2003)) Tuy nhiên,

vòng đời phát triển của cầu trùng giống Eimeria đã được các nhà khoa học tập trung nghiên cứu kỹ hơn là Isospora, bởi vì giống Eimeria phổ biến hơn, có

nhiều loại hơn và cũng gây nhiều bệnh hơn cho gia súc, gia cầm

Chu trình phát triển sinh học của các loài cầu trùng lợn giống như ở cácloài động vật khác

Hình 2.3: Sơ đồ vòng đời phát triển của cầu trùng lợn

Chú thích:

I Giai đoạn phát triển bào tử nang (Sprogonie).

II Giai đoạn phát triển thể phân lập (Shizogonie).

III Giai đoạn phát triển giao tử (Gametogonie).

1, 2, 3 Quá trình phát triển thành Sporocyst.

4 Các tiền bào tử được giải phóng khỏi bào tử nang thâm nhập

và ký sinh trong các tế bào biểu bì ký chủ

5 Quá trình sinh trưởng, sinh sản để hình thành nên thể phân lậpthế hệ 1

6 Thể phân lập thế hệ 1 được giải phóng và tiếp tục xâm nhập vào

tế bào biểu bì mới và sinh trưởng, phát triển tạo thành thể phân lập thế hệ 2,3

7, 8 Hình thành giao tử đực và cái

9, 10, 11 Quá trình sinh sản hữu tính tạo ra các hợp tử (noãn nang)

12 Oocyst được đào thải ra ngoài môi trường theo phân

Cả hai giống cầu trùng Eimeria và Isospora đều có quá trình phát triển

giống nhau (Nguyễn Thị Kim Lan và cs (2008))

* Vòng đời cầu trùng giống Eimeria

Theo Phạm Văn Khuê và Phan Lục (1996): chu trình phát triển của

cầu trùng giống Eimeria ở bất cứ loại động vật nào cũng trải qua 3 giai

đoạn phát triển:

+ Giai đoạn sinh sản vô tính (Schizogonie)

+ Giai đoạn sinh sản hữu tính (Gametogonie)

+ Giai đoạn sinh sản bào tử (Sporogonie)

Hai giai đoạn đầu tiến hành trong cơ thể ký chủ nên gọi là thời kỳ nộisinh sản Thời kỳ nội sinh sản diễn ra trong tế bào biểu bì ruột gia súc (N.AKolapxki và cs (1980)) Giai đoạn sau tiến hành ngoài cơ thể ký chủ nên gọi

là thời kỳ ngoại sinh sản Cụ thể như sau:

+ Sinh sản vô tính (Schizogonie):

Sau khi lợn ăn uống phải Oocyst có sức gây bệnh, dưới tác động của dịch

dạ dày, ruột, dịch mật, vỏ cứng của Oocyst bị phá vỡ và giải phóng ra 4 bào tử cầu trùng (4 Sporozoite), 4 bào tử được giải phóng ra, lập tức chui vào các tế bào

biểu bì ruột để kí sinh Trong mỗi bào tử đã hình thành 2 thể bào tử, chúng lớn

lên rất nhanh, có hình bầu dục, hình tròn và biến thành thể phân lập (Schizont).

Nhân của mỗi thể phân lập tự chia đôi nhiều lần để tạo thành các tế bào nhiều

nhân và được gọi là thể phân lập thế hệ 1 (Schizont 1) Ở thể phân lập thế hệ 1,

xung quanh mỗi nhân, nguyên sinh chất xuất hiện và bao quanh để hình thànhdạng kí sinh trùng nhỏ hình bầu dục Lúc này chúng được gọi là thể phân lập

trung gian (Merozoite) Thể phân lập trung gian phát triển làm phá vỡ tế bào biểu bì ruột nơi chúng cư trú và giải phóng ra nhiều Merozoite trưởng thành Các Merozoite lập tức xâm nhập ngay vào tế bào biểu bì mới để tiếp tục phát triển trở thành thể phân lập thế hệ mới gọi là Schizont 2.

Quá trình sinh sản vô tính như vậy được lặp đi lặp lại nhiều lần và tạo

ra thể phân lập thế hệ 3, 4, 5… Mỗi chủng cầu trùng khác nhau có giai đoạnsinh sản vô tính khác nhau, để hình thành nờn cỏc thể phân lập và số thế hệ thểphân lập tuỳ theo loài Sau khi kết thúc giai đoạn sinh sản vô tính, chúng chuyểnsang giai đoạn sinh sản hữu tính

+ Giai đoạn sinh sản hữu tính (Gametogonie): giai đoạn sinh sản hữu

tính bắt đầu phát triển từ thể phân lập thế hệ cuối cùng của cầu trùng Từ thểphân lập thế hệ cuối cùng, chúng phân chia thành các thể phân đoạn và xâm

nhập vào các tế bào biểu bì kí chủ, biến thành các thể sinh dưỡng Các thểsinh dưỡng này lại tiếp tục phát triển tạo nên các giao tử đực

(Microgametocyte) và giao tử cái (Macrogametocyte) Sau đú các tế bào giao

tử cái biến thành những tế bào sinh dục cái lớn, ít hoạt động và có lỗ noãn.Giao tử đực nhỏ hơn và nhân của nó cũng nhỏ hơn, chúng chuyển động nhanh

nhờ 2 lông roi Qua lỗ noãn (Micropyle) của giao tử cái, giao tử đực chui vào

và thực hiện quá trình thụ tinh tạo ra hợp tử Hợp tử được bao bọc bởi một lớp

màng bọc gọi là noãn nang (Oocyst), có hình bầu dục, hình tròn, hình quả

trứng, hình quả lê hoặc hình elip (phụ thuộc vào từng loài cầu trùng) Đến

đây, các Oocyst rơi vào lòng ruột và kết thúc giai đoạn sinh sản hữu tính.

Màng vỏ bọc của Oocyst cầu trùng gồm 2 lớp, còn chất nguyên sinh ở

dạng hạt Đôi khi ở một số loài cầu trùng riêng biệt, một trong 2 cực của nangtrứng có cả nắp trứng, lỗ noãn, điểm sáng hay hạt cực Như vậy tuỳ loài cầutrùng mà hình dạng và kích thước nang trứng khác nhau, có hay không có nắptrứng, lỗ noãn, điểm sáng (hạt cực), cũng như khi sinh sản bào tử (hình thànhbào tử hay túi bào tử), có hay không có thể cặn trong nang trứng hay trongbào tử

+ Giai đoạn sinh sản bào tử (Sporogonie):

Sau khi noãn nang rơi vào lòng ruột và được thải ra ngoài cựng phõn,chỳng bắt đầu giai đoạn phát triển mới ở ngoài môi trường (giai đoạn ngoạisinh sản)

Theo Bhurtei J.E (1995), có từ 70% - 80% Oocyst thải ra vào ban ngày,

tập trung khoảng thời gian từ 9 giờ sáng đến 13 giờ chiều, mặc dù lúc này chỉ

có 25% lượng phân thải ra

Trong điều kiện môi trường khắc nghiệt hoàn toàn khác với môitrường bên ngoài cơ thể kí chủ, cỏc noón nang muốn tiếp tục duy trì được

sự sống buộc phải thích nghi với điều kiện mới của nhiệt độ, ẩm độ, ánhsáng, khụng khớ… luụn thay đổi Nang trứng tự bảo vệ bằng cách nhanhchóng tạo vỏ cứng dày, gồm một đến hai lớp với màu sắc khác nhau phụthuộc vào chủng loại cầu trùng Tiếp theo, Oocyst hình thành 4 nguyên bào

tử (Sporoblast), hình bầu dục, xung quanh nguyên bào tử được bọc mộtmàng mỏng và trở thành túi bào tử Trong mỗi túi bào tử, nhân lại chia đôi

về 2 phía được ngăn cách bởi một màng mỏng và hình thành thể bào tử,hình lưỡi liềm gọi là bào tử

Như vậy, trong quá trình sinh sản bào tử, đối với cầu trùng thuộc

giống Eimeria, từ mỗi nang trứng (Oocyst) hình thành 4 tiền bào tử (Sporozoite), trong mỗi túi bào tử lại chứa 2 thể bào tử (Sporoblast) Tất cả 8

thể bào tử được bao bọc chung quanh bởi một vỏ cứng dày gồm 2 lớp gọi là

bào tử nang (Sporocyst), kết thúc giai đoạn 3 của quá trình phát triển cầu trùng Chỉ có các Oocyst sau khi trở thành Oocyst gây bệnh mới có khả năng

gây bệnh và truyền bệnh từ gia súc này sang gia súc khác, (N.A.Kolapxki và

cs (1980))

* Vòng đời của cầu trùng giống Isospora

Chu trình phát triển của giống cầu trùng Isospora hoàn toàn giống như cầu trùng Eimeria Chỉ khác là trong giai đoạn sinh sản bào tử ở ngoài cơ thể, trong mỗi Oocyst chỉ hình thành 2 túi bào tử (Sporozoite) chứ không phải là 4 túi bào tử như Eimeria Nhưng trong mỗi túi bào tử lại hình thành ra 4 thể bào

tử, tất cả được bao bọc chung bởi một lớp vỏ cứng dày 2 lớp Bào tử nangđược hình thành cũng chứa 8 thể bào tử, kết thúc giai đoạn phát triển sinh sản

bào tử giống như Eimeria.

2.5 Tình hình nghiên cứu cầu trựng trờn thế giới và trong nước

2.5.1 Trên thế giới

Trên thế giới đã có nhiều nghiên cứu về cầu trùng lợn và bệnh docầu trùng gây ra Các công trình tập trung nghiên cứu về phân loại, tínhmiễn dịch, sức đề kháng và khả năng gây bệnh của cầu trùng Khả năng

đề kháng của cầu trùng đối với hóa chất cũng được một số tác giả tậptrung nghiên cứu

Khi so sánh khả năng đề kháng với nhiệt độ cao của Oocyst trước và

sau khi hình thành bào tử, N.Glullough, 1952 thấy rằng: ở nhiệt độ cao

chúng có khả năng đề kháng như nhau, cụ thể: chúng đều bị chết ở 400Csau 96 giờ, ở 450C sau 3 giờ và 500C sau 30 phút (dẫn theo Nguyễn ThịKim Lan và cs (2008))

Long P.L và cs (1979) cho rằng: Oocyst có thể tồn tại qua mùa đông

giá lạnh, nhưng không chịu được nhiệt độ cao

Theo Horton Smith (1963), cầu trùng sống được ở sân chơi ngoài trời

14 tuần và tồn tại lâu trong đất ở độ sâu 5- 7 cm Ở trong đất, Oocyst duy trì

sức sống từ 4 - 9 tháng, ở sân chơi râm mát từ 15 - 18 tháng

Khi Oocyst theo phân ra ngoài môi trường, ẩm độ có vai trò quan

trọng ảnh hưởng đến thời gian hình thành bào tử và khả năng tồn tại của

Oocyst cầu trùng.

Theo Ellis C.S (1986), ở nhiệt độ không thay đổi Oocyst sẽ bị chết khi

ẩm độ giảm Nhiệt độ từ 180C - 400C, ẩm độ 21% - 30% thỡ chỳng dễ bị chếtsau 4 – 5 ngày

Goodrich H.P (1994) đã đưa ra kết luận: lớp vỏ ngoài đã giữ cho

Oocyst không bị thấm chất lỏng, nhưng nó lại dễ nứt trong điều kiện khô hạn.

Stotish và cs (1978), cùng nghiên cứu về bản chất hoá học của thành

Oocyst qua xử lí bằng Sodium hypochlorid 5% lại cho rằng, chất này không tác động được đến màng Oocyst mà chủ yếu tác động đến Micropyle (trường hợp E maxima) bởi vì hypochlorid làm suy thoái màng Oocyst và làm tiêu tan Micropyle.

Nyberg và Knapp (1976) qua kính hiển vi điện tử cho thấy, lớp ngoài

có thể khử bằng dung dịch Sodiumhypochlorid 2-3% trong 15 phút, (theo dẫn

liệu của Nguyễn Thị Kim Lan và cs (2008))

Sự chịu đựng đặc biệt với môi trường biến đổi do có sức đề khángvới một số chất tẩy trùng là yếu tố quan trọng để duy trì sự tồn tại và lây

truyền của cầu trùng Oocyst cầu trựng cú sức đề kháng cao với các loại hóa chất và thuốc sát trùng thông thường Perard (1925) cho biết, Oocyst

có thể sinh bào tử sau nhiều ngày tiếp xúc với dung dịch sát trùng:KMnO4 0,1%, Formol 5%, H2SO4 10% và HCl 10 % Tuy vậy, một số

chất lại diệt được Oocyst nờn đã được áp dụng để làm chất tiêu độc

chuồng trại như dung dịch Amoniac 10%, Metyl bromid (theo theo dẫnliệu của Nguyễn Thị Kim Lan (2008))

William R.B (1997) đã nghiên cứu cho biết: tác dụng của dung dịch

amoniac 10% trong 12 giờ liên tục có thể làm cho 100% Oocyst không sinh

được bào tử và có thể dùng tiêu độc tốt

Theo các tác giả Reley (1933), Stois (1978): đối với nhiều loại hoáchất, chất sát trùng nhưng noãn nang không có khả năng phát triển trong điềukiện khô và nhiệt độ cao Theo Palimpsestor và Litvis (1958) thỡ noón nangcầu trùng tồn tại trong đất tốt nhất là ở độ sâu 5 – 7cm, noãn nang chết dướitác dụng của các huyễn dịch Formol - dầu hoả; Xaxilin - nhựa thông với nồng

độ 5 – 10%, ở nhiệt độ 40 – 500C noãn nang bị chết đi bởi dung dịch Creolin

5% Nhiệt độ thích hợp nhất để noãn nang thực hiện sự phân chia là 25 –

300C Ở 00C, nang trứng bảo tồn tối đa 2 tháng, nếu ở nhiệt độ thích hợpchúng lại phân chia

Vấn đề ảnh hưởng của các tia tử ngoại đến sức sống của cầu trùng cũngđược một số nhà khoa học đề cập đến

Theo Wamer D.E (1933), Oocyst tồn tại 18 tuần trong đất râm mát một

phần, 21 tuần trong đất râm mát hoàn toàn

Ánh nắng chiếu trực tiếp tác động gây hại đến Oocyst, nhưng cỏ dại đã

bảo vệ chỳng trỏnh tia X (Long P.L và cs, 1979)

Theo kết quả nghiên cứu của Fish (1932) ở phòng thí nghiệm, các

Oocyst bị tiêu diệt khi chiếu tia tử ngoại ở cường độ vừa phải (dẫn theo

Nguyễn Thị Kim Lan (2008))

Về vai trò của cầu trùng trùng trong hội chứng tiêu chảy Eutis S.L và cs

(1981) đã kiểm tra 45 lợn con ỉa chảy thấy 28 lợn có nhiễm cầu trùng kết hợpvới virus (dẫn theo Nguyễn Thị Kim Lan (2008))

Cùng nghiên cứu vấn đề này Nilsson O và cs (1984), cho biết: những

lợn bị viêm ruột ỉa chảy ở Thụy Điển khi kiểm tra thấy có mặt của Isospora suis và Rotavirus Các tác giả này đã khẳng định Rotavirus kếp hợp với Isospora suis là nguyên nhân gây bệnh ỉa chảy ở lợn

Cầu trùng ký sinh trong đường tiêu hóa của lợn không những gây bệnhtiêu chảy cho ký chủ mà chỳng cũn thường xuyên đào thải mần bệnh ra môitrường làm phát tán mần bệnh Nghiên cứu về vấn đề này Bhurtei J.E (1995)

cho biết: Có từ 70%- 80% Oocyst thải ra ngoài vào ban ngày, tập trung trong

khoảng thời gian từ 9 giờ sáng đến 13 giờ chiều, mặc dù lượng phân lúc nàychỉ chiếm 25% lượng phân thải ra trong ngày

Khi nghiên cứu vỏ cấu trúc Oocyst, Goodrick (1994) cho rằng, lớp ngoài là vỏ bọc liên tục kể cả khi có Micropyle và sau khi thụ tinh Micropyle

đóng lại và không bao giờ mở ra nữa, và đây không phải là con đường mà

Sporpzoite thoát ra khỏi Oocyst: Việc thoát ra của Sporozoite bằng con đường

nào, cách nào, điều kiện ra sao đều chưa rõ ràng

Theo Netaner (1903), Trypsin là men đặc biệt giúp giải phóng

Sporozoite của E sticidae, độ pH từ 7- 8 là thích hợp nhất cho giai đoạn này Trong điều kiện phòng thí nghiệm (invitro) và nhiệt độ 370C thì Sporozoite

được “nở” ra chỉ sau 1 giờ và nhiều nhất là 5 - 7 giờ, (dẫn theo Nguyễn ThịKim Lan và cs (2008))

Long P.L (1979) kế thừa nghiên cứu của Wetser D.H (1903), Smetana

F.M (1933), cho biết: Sporozoite của E sticidae thoát qua lỗ noãn (Micropyle)

dưới tác động của men Trypsin Nhưng Goodrich H.P (1994) thì không cho là

như vậy mà cho rằng vách Oocyst bị vỡ ra do tác động cơ giới và men Trypsin Ông đã cho Oocyst vào dung dịch trypsin 5% ở nhiệt độ 370C và sau 5 - 10 phỳt

thỡ cho thấy Sporozoite chui ra khỏi chỗ vỡ của thành vỏ.

N.A.Kolapxki và cs (1980) nghiên cứu tớnh chuyên biệt của cầu trùng

cho biết: cầu trùng giống Eimeria biểu hiện không chỉ đối với kí chủ của chúng

mà còn đối với nơi chỳng kớ sinh trong cơ thể gia súc VD: E tenella chỉ sống

trong màng niêm mạc manh tràng gà, còn E acervulina trong tá tràng gà E bukidnonensis kí sinh ở niêm mạc ruột non bò trong khi đó E cylindrica cũng ở

những bò nhưng chúng chỉ kí sinh trong niêm mạc ruột già Những loài cầutrùng riêng biệt ký sinh ở những gia súc khác nhau thường khó phân biệt vềmặt hình thái VD: một số loài cầu trùng cừu, dê hoặc gà tây và gà rất giốngnhau về đặc điểm hình thái

Những thí nghiệm của M.V.Krulop (1963) đã chỉ rõ, cầu trùng cừukhông nhiễm vào dê được X.K.Svonbaep (1968) khi nghiên cứu các cầutrùng gà tây, những loài này về mặt hình thái rất giống với một số loài cầutrùng gà, song, khi cho nhiễm bệnh chộo ụng đó phát hiện ra rằng hai loài cầutrùng trên không đồng nhất với nhau: cầu trùng gà không gõy bệnh cho gà tây

và ngược lại (theo Nguyễn Thị Kim Lan (2008) tổng hợp)

Để làm rõ đường lây truyền của bệnh N.A Kolapxki và cs (1980) đónghiờn cứu và cho biết: loài gặm nhấm (Chuột), côn trùng cũng làm lan rộngbệnh Điều này được Lê Minh và cs (2008) làm sáng tỏ, khi nhóm tác giả này

nghiên cứu khả năng mang Oocyst cầu trùng của các động vật có ở chuồng

lợn và xung quanh chuồng kết quả cho thấy: tất cả động vật và côn trùng đều

có thể mang mầm bệnh trong đó Kiến là 27,27%, Ruồi là 22,22% và dán là16,67% Vì vậy, tác giả đã sơ bộ kết luận các loại côn trùng như: Giỏn, Ruồi,

Chuột là tác nhân mang Oocyst cầu trùng từ bên ngoài vào.

Phần lớn bệnh do ký sinh trùng gây ra cho lợn con đang trong thời kìsinh trưởng mạnh, khi sức đề kháng còn yếu, dễ cảm nhiễm cầu trùng, bệnhphát triển nhanh và mạnh hơn động vật trưởng thành Động vật trưởng thành

và càng già thì biểu hiện lâm sàng của bệnh càng ít

Chae C (1998) nghiên cứu và cho biết, lợn con trước cai sữa ở các trại

lợn nhiễm Isospora suis với tỷ lệ khá cao, chiếm 50 - 70% các trại lợn được

khảo sát

Morgot A.A (2000) đã nghiên cứu và cho thấy, ở những cơ sở chănnuôi có điều kiện chăm sóc tốt, vệ sinh chuồng trại nghiêm ngặt thì tỷ lệnhiễm cầu trùng là 5- 10%, còn ở những cơ sở chăn nuôi có điều kiệnkhông đảm bảo thì tỷ lệ nhiễm là từ 30 - 69% (dẫn theo Nguyễn Thị KimLan và cs (2008))

Tính miễn dịch của cầu trùng cũng đã được các nhà khoa học quantâm nghiên cứu, Tyzzer (1929) cho biết: miễn dịch được tạo ra tương đốibền vững đối với loài cầu trùng phát triển sâu trong mô bào, miễn dịch kémbền vững với loài cầu trùng chỉ phát triển trong lớp biểu bì niêm mạc Cóhai mức miễn dịch trong bệnh cầu trùng:

Mức một: phát sinh sau khi con vật nhiễm một lượng nhỏ cầu trùng.Khi đó sẽ tạo ra miễn dịch yếu và nếu gây nhiễm cho chúng một lượng cầutrùng cao hơn (liều siêu nhiễm) chúng sẽ mắc bệnh lại

Mức hai: phát sinh khi con vật bị nhiễm một lượng lớn cầu trùng.Trong trường hợp này sẽ có miễn dịch khi con vật mắc bệnh lại Tác giả chorằng cường độ miễn dịch có liên quan đến số lượng cầu trùng xâm nhập vào

cơ thể

Theo Bachman G.W (1930), miễn dịch theo tuổi hình thành ở gia súc

do chỳng tỏi nhiễm cầu trùng nhiều lần Điều này đã được Horton Smith(1963) chứng minh, khi tác giả này nuôi cách ly gà đến 6 tháng tuổi, khôngcho tiếp xúc với cầu trùng Sau 6 tháng tuổi, cho nhiễm tự nhiên thấy gà rất

cảm thụ với E tenella, nhưng sau đó khi nuôi bình thường thì gà không bị nhiễm E tenella nữa

Bằng thực nghiệm Biester và Shwarr (1934) cho thấy: ở lợn đã nhiễmbệnh, sức chống đỡ với mần bệnh rõ hơn trong một thời gian ngắn so với lợnchưa nhiễm lần nào Khi cho lợn nuốt một lượng lớn noãn nang trong nhiềutháng liền thì gây được một miễn dịch ngắn hạn, vì chỉ 21 ngày sau khi kếtthúc lợn có thể bị tái nhiễm lại

Wilsenhutter E và cs (1962), đó gõy nhiễm thực nghiệm cho lợn bằng

E.debliecki kết quả thấy: lợn thải Oocyst từ ngày thứ 7 đến ngày thứ 14 rồi không thấy thải Oocyst nữa, cho đến khi nhiễm lại lần thứ 2 Nếu 3 hay 4

tuần lễ sau khi lại cho lợn nuốt một lượng lớn Oocyst cầu trùng nữa, thì số lượng Oocyst thải ra thấp hơn lần thứ nhất Để có tính miễn dịch vững chắc phải cho nuốt Oocyst hàng ngày, ít nhất 100 ngày (dẫn theo Nguyễn Thị

Kim Lan và cs (2008))

Ngoài ra Rommel M (1970) cũng đã nghiên cứu phản ứng miễn dịch

với E.scabra thấy: huyết thanh miễn dịch có tác dụng ngăn cản sự nhiễm Oocysst cầu trùng, nhưng đã không thành công lắm.

Cơ chế đáp ứng miễn dịch cầu trùng:

Cầu trùng cũng như các sinh vật khác khi xâm nhập vào cơ thể đượccoi là một kháng nguyên kích thích cơ thể sinh ra kháng thể

Mặt khác, bản chất của quá trình đáp ứng miễn dịch bao gồm: đáp ứngmiễn dịch tế bào và đáp ứng miễn dịch dịch thể (Nguyễn Ngọc Lanh (1982),Nguyễn Như Thanh và cs, (1997))

Nghiên cứu về quá trình đáp ứng miễn dịch của cơ thể ký chủ với độngvật đơn bào, R.Tizard (1982) cho biết: nguyờn sinh động vật (trong đó có cầutrùng) kích thích cả đáp ứng miễn dịch dịch thể và miễn dịch tế bào (dẫn theoNguyễn Thị Kim Lan và (2008))

Adams D.O., Hamilton T.A (1984) cho biết: đại thực bào có vai trò

quan trọng trong việc ức chế sự di chuyển của Schizont Tế bào lymphoB

hoạt hoá trở thành tương bào sản sinh ra kháng thể dịch thể Dưới sự kích

thích của các Merozoit và Schizont, cùng với sự hỗ trợ của tế bào lymphoT, các tế bào lymphoB phân chia biệt hóa thành tế bào plasma (tương bào), các tương bào tiết kháng thể chống lại các Merozoit và Schizont Ngoài các nhân tố trờn thỡ Cystokin và Lymphokin cũng có vai trò trong tạo miễn dịch

đối với vật nuôi

Horton Smith (1963) nghiên cứu phản ứng tế bào biểu bì ruột thỏ với cầutrùng thấy như sau: một phần tế bào biểu bì cuộn vào bên trong, cách li khỏi cầutrùng, làm cho các giao tử cầu trựng khú kết hợp với nhau Theo ụng thỡ cỏc

Merozoit trong tế bào biểu bì ruột đã kích thích sự hình thành kháng thể.

Bằng kỹ thuật gây bệnh thực nghiệm, Tyzzer (1929) đã chứng minhcường độ miễn dịch không đồng đều, phụ thuộc vào nhiều yếu tố như: loài gâybệnh, đường xâm nhập vào cơ thể và trạng thái sức khoẻ vật nuôi Những loàicầu trùng gây bệnh ở tầng sâu thường kích thích cơ thể sản sinh kháng thể mạnhhơn những loài cầu trùng chỉ kí sinh ở bề mặt niêm mạc Xâm nhiễm qua quátrình tiờu hoỏ tự nhiên kích thích sinh miễn dịch tốt hơn tiêm thẳng vào ruột, sứckhoẻ vật nuôi khoẻ đáp ứng miễn dịch tốt hơn khi ốm đau

Như vậy, nghiên cứu về miễn dịch cầu trùng ở vật nuôi có ý nghĩa quantrọng nó mở ra hướng mới cho công tác phòng chống bệnh cầu trùng cho giasúc, gia cầm có hiệu quả

2.5.2 Nghiên cứu trong nước

Do tính chất nguy hiểm của cầu trùng gây ra đối với gia súc, gia cầmnên ngày càng có nhiều tác giả trong nước chú ý nghiên cứu về cầu trùng vàbệnh cầu trùng Tuy nhiên, các nghiên cứu này cũn ớt và chưa đầy đủ, trong

đó một số nghiên cứu có ý nghĩa

Năm 2004, Lâm Thị Thu Hương đã tìm thấy cầu trùng ở các trại lợn

của thành phố Hồ Chí Minh, ngoài Isospora suis và Crytosporidium, cũn có 5 loài Eimeria: E porci, E neodebliecki, E scabra, E perminuta và E debliecki Nguyễn Thị Kim Lan và cs (2005), khi nghiên tình hình nhiễm cầu

trùng lợn tại một số dịa phương thuộc tỉnh Thỏi Nguyờn cho biết: lợn nuôi tại

đây bị nhiễm 7 loài cầu trùng gồm: E porci, E neodebliecki, E scabra, E perminuta, E debliecki, E suis và Isospora suis.

Sức đề kháng của cầu trùng là khả năng chống lại các tác nhân bênngoài tác động đến sự sinh trưởng và phát triển bình thường của cầu trựng.Cỏc yếu tố ngoài môi trường như nhiệt độ, độ ẩm, các chất hóa học, nóichung đều tác động vào Oocyst, điều này có ý nghĩa rất lớn trong nghiên cứudịch tễ học bệnh cầu trùng và phương pháp phòng chống bệnh cầu trùng trongchăn nuôi

Lương Văn Huấn và cs (1997) cho biết: Oocyst của E debliecki, E scabra có thể tồn tại trong môi trường bên ngoài 15 tháng ở nhiệt độ từ - 40Cđến 400C

Nhiệt độ thích hợp cho quá trình phát triển bào tử nang ngoài cơ thể là

15 - 350C Nhiệt độ lạnh -150C và núng trờn 400C bào tử nang sẽ chết (Lê VănNăm (2003))

Nghiên cứu về sức đề kháng của cầu trùng đối với tia tử ngoại, Phạm

Văn Chức và cs (1991) cho rằng, Oocyst khi bị xử lý bức xạ ở mức 20 - 35

Krad cho giá trị bảo hộ tốt nhất (100%), dưới 10 Krad (80%), nhưng nếu liều

quá thấp hoặc quá cao thì không có hiệu quả phòng bệnh Oocyst chưa sinh bào tử ít mẫn cảm đối với tia X hơn Oocyst đã sinh bào tử tới 15 lần.

Độ ẩm của đất có vai trò quan trọng trong sự phát triển và tồn tại của

Oocyst gây bệnh trong thiên nhiên Nghiên cứu về vấn đề này, Lê Minh và cs

(2008) cho biết: đất có độ ẩm 10 – 20% thuận lợi nhất cho sự phát triển và tồn

tại của Oocyst 100% Oocyst phát triển thành Oocyst gây bệnh trong 5 – 15

ngày, sau đó có thể tồn tại trong đất đến 75 ngày; đất có độ ẩm 20 đến trên

40% có khả năng lưu giữ sự sống của Oocyst gây bệnh dài nhất là 70 ngày; đất có độ ẩm thấp (dưới 10%) chỉ có 23% Oocyst phát triển thành Oocyst có

sức gây bệnh, sau đó chỉ tồn tại tối đa là 15 ngày

Theo kết quả tổng hợp và nghiên cứu của Phạm Văn Khuê và cs (1996):khi noãn nang bị hút vào trong bụng ruồi vẫn còn khả năng gây bệnh trong thờigian 24 giờ Trong đất ẩm cầu trùng có thể sống được 4 – 5 năm (Charles, 1967).Noãn nang vẫn tiếp tục sinh sản bào tử sau nhiều ngày tiếp xúc với dung dịchKMnO4 0,1%, formol 5%, CuSO4 5%, H2SO4 10%, HCl 10% (Pernard, 1925)

Nguyễn Thị Kim Lan (2008) nghiên cứu và tổng hợp các kết quảnghiên cứu cho biết: Bệnh cầu trùng gây thiệt hại lớn cho ngành chăn nuôilợn bởi những lý do sau:

- Tỷ lệ chết cao ở lợn con (tỷ lệ chết từ 10 - 20%)

- Giảm tốc độ sinh trưởng, tăng trọng kém

- Tiêu tốn thức ăn và các chi phí khác tăng cao như: chi phí về thuốcđiều trị, thuốc sát trùng, chăm sóc nuôi dưỡng

Theo Lê Văn Năm (2003), lợn con, bờ, nghộ non khi bị cầu trùng màcác kỹ thuật viên có sai sót trong chẩn đoán thì 30 - 50% số gia súc non bịchết, số còn lại còi cọc chậm lớn

Đào Trọng Đạt và cs (1984) cho biết, tỷ lệ nhiễm cầu trùng ở lợn là7,29%, trong đó lợn ỉa phân trắng là 4,2%

Nghiên cứu cấu trúc của Oocyst cầu trùng Nguyễn Thị Kim Lan và cs (2008) cho biết: Oocyst cầu trùng có nhiều hình dạng khác nhau: hình cầu,

hình gần tròn, hình trứng, hình bầu dục, kích thước cũng khác nhau thay đổi

theo loài Tuy nhiên, phần lớn Oocyst cầu trựng cú đặc điểm cấu tạo như sau:

Oocyst màu sáng hoặc không màu, màu vàng nhạt hoặc nâu nhạt Vỏ ngoài của Oocyst thường nhẵn, cũng có loài vỏ xù xì (E spinosa) Vỏ chia làm

hai lớp: Lớp vỏ ngoài dày, vỏ trong mỏng, vỏ ngoài và vỏ trong có thể tách rời

nhau bằng cách làm nóng Oocyst ở trong nước hoặc xử lý bằng axit H2SO4

Vỏ ngoài là lớp quinonon protein, vỏ trong là lớp lipit kết hợp với

protein để tạo nên khúc xạ kép (Lipoprotein) Lớp trong của vỏ Oocyst chiếm

80% gồm: một lớp glycoprotein (dày 90 àm), được bao bọc bởi một lớp lipit

dày (10 àm) Lớp lipit chủ yếu là phospho lipit, chính lớp này bảo vệ Oocyst

cầu trùng chống lại sự tấn công về mặt hoá học

Một số loài cầu trùng ở phía đầu nhọn có một cái “nắp” khúc xạ được

gọi là Micropyle Micropyle là vị trí có khe hở của màng bao quanh Macrogamete khi thụ tinh Sau khi thụ tinh thì khe hở đóng lại và vì vậy nhiều loài cầu trùng không thấy Micropyle nữa.

Hình 2.4: Cấu tạo Oocyst giống Eimeria gây bệnh

1 Nắp Oocyst (Micropyle cap) 6 Hạt triết quang lớn trong Sporozoite

(Large Refractile Globule in Sporozoite)

2 Hạt cực (Polar granule) 7 Bào tử trùng (Sporocyst)

3 Lỗ Oocyst (Micropyle) 8 Thể cặn Sporocyst (Sporocyst residuum)

4 Thể Stieda (Stieda Body) 9 Thể cặn Oocyst (Oocyst residuum)

5 Hạt triết quang nhỏ trong Sporozoite

(Small Refactile Globule in Sporozoite)

10 Lớp vỏ trong (inter layer of Oocyst

wall)

11 Lớp vỏ ngoài (Outer layer of Oocyst wall)

Tớnh chuyên biệt của cầu trùng là sự thích nghi phức tạp và lâu dài của

cầu trùng với cơ thể kí chủ hoặc cụ thể hơn đối với các cơ quan, cỏc mụ bào,hay tế bào nhất định phù hợp cho sự tồn tại và phát triển của chúng (Lê VănNăm (2003)).

Thời gian gần đây, đã có nhiều dẫn liệu chứng tỏ rằng giống cầu

trùng Eimeria có tính chuyên biệt nghiêm ngặt và chỉ có thể nhiễm vào loại kí

chủ mà chỳng đó thích nghi trong quá trình tiến hoá VD: các cầu trùng cừukhông thể nhiễm vào bò và các gia súc khỏc Cỏc cầu trùng thỏ chỉ nhiễm vào

kí chủ của nó mà không thể nhiễm vào bất kỳ loài gia súc nào khác

Như vậy, nếu xem xét tớnh chuyờn biệt của cầu trựng thỡ giống

Eimeria biểu hiện rất rõ rệt, tớnh chuyờn biệt đú đó hình thành trong quá trình

thích ứng lâu dài của ký sinh trùng đối với một ký chủ nhất định cũng như đốivới từng cơ quan, từng mô bào riêng biệt Theo dẫn liệu của Khayxin (1947),

đó là điều kiện cơ bản giúp cho nhiều loài cầu trùng ký sinh đồng thời trêncùng một ký chủ, (theo dẫn liệu của Nguyễn Thị Kim Lan và cs (2008))

Đối với tớnh chuyờn biệt của giống Isospora: Lê Văn Năm (2003) nhận xét như sau: Khi so sánh tớnh chuyờn biệt giữa hai giống cầu trùng Eimeria

và Isospora thấy Eimeria có tính chuyên biệt cao hơn giống Isospora

Cùng quan tâm đến vấn đề này Nguyễn Thị Kim Lan và cs (2008)sau khi tổng hợp kết quả nghiên cứu của I.G.Galuzo (1971) cho biết:Chuột, culi, chuột cống, thỏ, chuột đồng, chuột nhắt, cừu, linh dương, dêsừng, hoẵng, bồ câu, chim sẻ, vịt, rùa, rắn và kể cả con người…đều bị mắc

bệnh khi cho nuốt noãn nang có khả năng gây bệnh của Isospora bigemina Ngoài ra, tác giả còn cho biết Toxoplasma thuộc giai đoạn phát triển của Isospora bigemina Vì vậy, cầu trùng loài Isospora bigemina không có

tớnh chuyờn biệt

Như vậy, có thể nói rằng tuỳ theo loài cầu trùng mà chúng có thể sống

ở trên vật chủ này hay vật chủ khác, hoặc các vị trí ký sinh khác nhau trêncùng một cơ thể gia súc, gia cầm Điều này có ý nghĩa quan trọng giúp mộtphần trong việc phân loại cầu trùng được chính xác hơn.

Nghiờn cứu về các đặc điểm dịch tễ học của bệnh, các tác giả cho thấy:tất cả các giống lợn nhà và lợn rừng đều có thể mắc bệnh Nguồn bệnh lànhững lợn ốm đã khỏi nhưng vẫn mang cầu trùng, những lợn mang cầu trùngnhưng không biểu hiện triệu chứng hoặc lợn mắc bệnh, những lợn này thường

xuyên bài xuất Oocyst cầu trùng qua phân ra ngoài ngoại cảnh Oocyst được

phát tán rộng rãi ở ngoài tự nhiên và quá trình sinh sản bào tử bắt đầu đều tạo

thành các Oocyst có khả năng gây bệnh.

Bạch Mạnh Điều và cs (1999) đã kiểm tra 420 mẫu xe cải tiến, quangthúng thấy tỷ lệ nhiễm cầu trùng là 4,28%

Hoàng Thạch (1999) khảo sát 250 mẫu từ ủng dùng trong khu vựcchuồng nuôi, tỷ lệ nhiễm là 5,6% và khảo sát 250 mẫu từ dụng cụ dọn vệ sinhchuồng nuôi, tỷ lệ nhiễm là 11,2%

Nguyễn Thị Kim Lan và Trần Thu Nga (2005), cho biết tỷ lệ và cường

độ nhiễm cầu trựng cú sự khác nhau theo tình trạng vệ sinh thú y trong chănnuôi Lợn nuôi trong điều kiện vệ sinh kém nhiễm cao nhất

Theo một nghiên cứu khác của Nguyễn Thị Kim Lan và cs (2006), tỷ lệnhiễm cầu trùng ở trạng thái phân bình thường và phân lỏng có sự khác nhau

rõ rệt Lợn bị tiêu chảy có tỷ lệ nhiễm cầu trùng là 56,32% cao hơn hẳn so vớitrạng thái phân bình thường (36,50%), xét về mức độ nhiễm, lợn bị tiêu chảynhiễm cầu trùng ở mức độ nặng hơn so với lợn phân bình thường

Mùa vụ khác nhau thì mức độ nhiễm cầu trùng cũng khác nhau, LêMinh và cs (2008) cho biết: tỷ lệ và cường độ nhiễm ở vụ hè thu (53,72%)cao hơn so với vụ đụng xuõn (48,53%)

Khi nghiên cứu về con đường xâm nhập của cầu trùng vào cơ thể,Nguyễn Thị Kim Lan và cs (2008) cho biết: tiêu hóa là con đường duy nhất

mà Oocyst có thể xâm nhập vào cơ thể lợn để gây bệnh Song, cầu trùng có

thể lây nhiễm theo 2 cách: Lây nhiễm trực tiếp, lây nhiễm gián tiếp

+ Lây nhiễm trực tiếp: Lợn bệnh thải Oocyst cầu trùng qua phân, do đó Oocyst sẽ dễ dàng được phát tán trên khắp nền chuồng, máng ăn, máng uống

và dụng cụ chăn nuôi Tập tính của lợn là thường hay sục sạo, liếm láp nên dễ

nuốt phải Oocyst có sức gây bệnh.

+ Lây nhiễm gián tiếp: Qua vật môi giới trung gian truyền bệnhnhư: Dụng cụ chăn nuôi, người chăn nuôi, giầy, dép, ủng, phương tiện vận

chuyển cũng đóng vai trò quan trọng trong việc mang Oocyst cầu trùng từ

ngoài vào chuồng nuôi gia súc hoặc từ ô chuồng này sang ô chuồng khác.Ngoài ra, loài gặm nhấm, côn trùng cũng là nguyên nhân làm phát tánmần bệnh

Xét nghiệm tìm Oocyst (noãn nang) cầu trùng trong gần 600 mẫu cặn

nền chuồng, sân chơi và khu vực quanh chuồng, tại 13 xã thuộc tỉnh ThỏiNguyờn, Nguyễn Thị Kim Lan và cs (2005) cho thấy: thời gian phát triển của

Oocyst cầu trùng tới giai đoạn cảm nhiễm phụ thuộc vào nhiệt độ và ẩm độ môi trường ngoại cảnh: loài E debliecki từ 101 - 141 giờ, E suis từ 96 - 136 giờ, E porci từ 102 - 130 giờ, I suis từ 69 - 98 giờ.

Tổng hợp các nghiên cứu của một số tác giả về sự phân bố của bệnhcầu trùng lợn, Nguyễn Thị Kim Lan và cs (2008) đã rút ra kết luận: bệnh cầutrùng lợn phân bố không đồng đều qua cỏc thỏng trong năm Vào nhữngthỏng cú khí hậu ẩm ướt, mưa nhiều, nhiệt độ từ 18 – 350C bệnh thường xuấthiện và dễ bựng phỏt hơn cỏc thỏng khỏc Vì vậy, ở nước ta mùa hè và mùaxuân có tỷ lệ nhiễm cầu trùng cao hơn mùa đông và mùa thu

Lê Minh và cs (2008) sau khi nghiên cứu tình hình nhiễm cầu trùnglợn ở một số huyện của tỉnh Thỏi Nguyờn, cho biết: Tỷ lệ nhiễm cầu trùng ở

vụ Hè - thu cao hơn hẳn ở vụ Đông – Xuân (53,72% và 48,53%) Cường độnhiễm vụ Hè – thu cũng cao hơn

Lợn con từ 1 - 3 tháng tuổi rất dễ bị nhiễm căn nguyên, đặc biệt lợn con

từ 15 - 60 ngày rất dễ nhiễm bệnh và bệnh dễ dàng bùng nổ ở thể cấp tính vàdưới cấp tính Lợn trên 3 tháng tuổi chỉ mang trùng, rất ít khi bị bệnh (LêVăn Năm (2003)) Cùng kết luận về vấn đề này, Nguyễn Thị Kim Lan và cs(2005), tỷ lệ và cường độ nhiễm cầu trùng giảm dần theo tuổi, nặng nhất ở lợncon dưới 2 tháng tuổi

Lê Minh và cs (2008) nhận định: cường tỷ lệ và cường độ nhiễm cầutrùng có chiều hướng giảm dần theo tuổi lợn

Như vậy, động vật non đang trong thời kỳ sinh trưởng mạnh dễ bị bệnh

và bệnh phát triển nhanh hơn, nặng hơn so với động vật trưởng thành Độngvật đã trưởng thành và động vật già các biểu hiện lâm sàng bệnh cầu trựng

ớt Song, chúng lại là những động vật mang trùng và là nguồn bệnh nguyhiểm nhất đối với động vật non (Nguyễn Thị Kim Lan và cs (2008))

Qua kiểm tra 3.698 mẫu phân lợn từ 4 - 50 ngày tuổi ở các trại chăn nuôilợn công nghiệp ở thành phố Hồ Chí Minh, Lâm Thị Thu Hương (2004) cho

biết: tỷ lệ nhiễm Isospora suis cao hơn Eimeria sp và Cryptosporidium Lợn

trong giai đoạn 8 - 14 ngày tuổi tỷ lệ nhiễm 42,70%, cao hơn các lứa tuổi khác.Sau 21 ngày tuổi tỷ lệ nhiễm có khuynh hướng giảm dần Tỷ lệ nhiễm cầu trùng

ở lợn nuụi trờn nền ximăng cao hơn rất nhiều so với lợn nuụi trờn nền sàn Tỷ lệ

nhiễm Isospora suis ở nền xi măng là 52,65%, nền sàn là 35,60%.

Nguyễn Thị Kim Lan và cs (2005) đã nghiên cứu tỷ lệ nhiễm cầu trùng ở

3 điều kiện vệ sinh đó là: điều kiện vệ sinh tốt, trung bình và kém cho biết: lợn