Đặc Điểm Dịch Tễ, Phân Lập, Xác Định Yếu Tố Gây Bệnh Của Vi Khuẩn E.Coli, Salmonella Trong Hội Chứng Tiêu Chảy Ở Lợn Từ Sau Cai Sữa Tại Tỉnh Phú Thọ Và Biện Pháp Phòng Trị

Đại Học Thái Nguyên Trường đại học nông lâm Nguyễn Tất Thành đặc điểm dịch tễ, phân lập, xác định yếu tố gây bệnh của vi khuẩn E.coli , Salmonella trong hội chứng tiêu chảy ở lợn t

Đại Học Thái Nguyên

Trường đại học nông lâm

Nguyễn Tất Thành

đặc điểm dịch tễ, phân lập, xác định yếu tố gây bệnh

của vi khuẩn E.coli , Salmonella trong hội chứng tiêu chảy ở lợn

từ sau cai sữa tại tỉnh Phú Thọ và biện pháp phòng trị

Luận văn

Thạc sĩ khoa học nông nghiệp

Thái nguyên - 2007

§¹i Häc Th¸i Nguyªn

Lời cam đoan

Tôi xin cam đoan đây là công trình nghiên cứu của riêng tôi Các số liệu, kết quả nêu trong luận văn là trung thực và ch−a từng đ−ợc ai công bố trong bất cứ công trình nào khác

Các tài liệu tham khảo, trích dẫn đều có nguồn gốc rõ ràng

Tác giả luận văn

Nguyễn Tất Thành

Lời cảm ơn

Tôi xin chân thành cảm ơn Trường Đại học Nông lâm Thái Nguyên, Viện Thú y Quốc gia, Chi cục Thú y tỉnh Phú Thọ đD cho phép và tạo điều kiện giúp

đỡ tôi hoàn thành luận văn này

Xin bày tỏ lòng biết ơn PGS.TS Nguyễn Thị Kim Lan; PGS.TS Cù Hữu Phú; TS Đỗ Ngọc Thuý đD tận tình hướng dẫn, chỉ bảo, giúp đỡ tôi hoàn thành luận văn

Tôi xin chân thành cảm ơn Khoa sau Đại học - Trường Đại học Nông lâm Thái Nguyên; Bộ môn vi trùng - Viện Thú y Quốc gia, cùng toàn thể các bạn bè

đồng nghiệp đD tận tình giúp đỡ tôi hoàn thành luận văn

Xin chân thành cảm ơn đồng chí Đặng Văn Chương - Chi cục trưởng, đồng chí Hoàng Hoa Thám - Phó chi cục trưởng và toàn thể cán bộ viên chức Chi cục Thú

y tỉnh Phú Thọ đD tạo mọi điều kiện thuận lợi nhất cho tôi hoàn thành luận văn

Xin chân thành cảm ơn các đồng chí Trạm thú y huyện Lâm Thao, Phù Ninh và Thị xD Phú Thọ; cảm ơn các bạn thú y viên cơ sở, các hộ chăn nuôi thuộc xD Tứ XD, Vĩnh Lại, Xuân Huy, Hà Thạch, Văn Lung, Phú Hộ, Tiên Du,

Tử Đà và An đạo, cùng toàn thể bạn bè đồng nghiệp đD tận tình cộng tác giúp đỡ tôi hoàn thành luận văn

Để góp phần thực hiện thành công luận văn này, tôi đD nhận được sự giúp

đỡ động viên đáng kể của gia đình và đồng nghiệp

Nhân dịp này, tôi xin bày tỏ lòng biết ơn chân thành đối với mọi sự giúp

đỡ quý báu đó

Xin trân trọng cảm ơn!

Thái Nguyên, tháng 4 năm 2007

Nguyễn Tất Thành

1.1 Một số hiểu biết chung về hội chứng tiêu chảy 3

1.1.3 Bệnh lý, lâm sàng của hội chứng tiêu chảy 7 1.1.4 Một số đặc điểm dịch tễ hội chứng tiêu chảy 9 1.1.5 Biện pháp phòng trị bệnh tiêu chảy cho lợn 11

1.2 Một số nghiên cứu về vi khuẩn E.coli gây bệnh đường tiêu hoá 13

1.2.4 Khả năng kháng kháng sinh của vi khuẩn E.coli 22

1.2.5 Vai trò của vi khuẩn E.coli trong hội chứng tiêu chảy 24

1.3 Những nghiên cứu về Salmonella gây bệnh đường tiêu hoá 25

1.3.3 Cơ chế gây bệnh 27

1.3.5 Vai trò của vi khuẩn Salmonella trong hội chứng tiêu chảy 29

1.4 Tình hình dịch bệnh trên đàn lợn của tỉnh Phú Thọ 31 1.4.1 Một số đặc điểm tự nhiên ảnh hưởng đến bệnh tiêu chảy 31

Chương 2: Đối tượng, vật liệu, nội dung và phương

pháp nghiên cứu

33

2.1 Đối tượng, địa điểm, thời gian nghiên cứu 33

2.4.2 Phương pháp thu thập mẫu và phân lập vi khuẩn 38

3.1 Một số đặc điểm dịch tễ hội chứng tiêu chảy ở lợn sau cai sữa tại Phú

3.2 Nghiên cứu xác định vai trò của vi khuẩn E.coli và Salmonella trong

hội chứng tiêu chảy ở lợn con sau cai sữa

3.2.4 Kết quả xác định serotyp của các chủng vi khuẩn phân lập đ−ợc 74

3.2.5 Kết quả xác định yếu tố gây bệnh của các chủng vi khuẩn E.coli

Danh môc c¸c b¶ng sè liÖu

3.1 Tû lÖ lîn tiªu ch¶y vµ chÕt do tiªu ch¶y t¹i mét sè huyÖn 50 3.2 So s¸nh nguy c¬ m¾c tiªu ch¶y ë lîn gi÷a c¸c huyÖn 52 3.3 So s¸nh nguy c¬ chÕt ë lîn m¾c tiªu ch¶y gi÷a c¸c huyÖn 53 3.4 Tû lÖ lîn m¾c tiªu ch¶y vµ chÕt do tiªu ch¶y theo mïa vô 54 3.5 So s¸nh nguy c¬ lîn m¾c tiªu ch¶y gi÷a c¸c mïa 56 3.6 Tû lÖ lîn tiªu ch¶y vµ chÕt do tiªu ch¶y theo ph−¬ng thøc ch¨n nu«i 58 3.7 So s¸nh nguy c¬ lîn tiªu ch¶y theo ph−¬ng thøc ch¨n nu«i 61 3.8 Tû lÖ lîn tiªu ch¶y, tû lÖ chÕt do tiªu ch¶y theo løa tuæi 62 3.9 So s¸nh nguy c¬ m¾c tiªu ch¶y gi÷a c¸c tuæi lîn 64 3.10 Tæng hîp c¸c triÖu chøng ë lîn m¾c tiªu ch¶y 66 3.11 KÕt qu¶ ph©n lËp vi khuÈn tõ c¸c mÉu bÖnh phÈm vµ ph©n lîn m¾c

E.coli và Salmonella phân lập được

3.19 Kết quả điều trị thực nghiệm một số phác đồ điều trị bệnh tiêu chảy

lợn sau cai sữa

3.1 So sánh tỷ lệ lợn tiêu chảy và chết do tiêu chảy giữa 3 huyện 51

3.2 So sánh tỷ lệ lợn mắc tiêu chảy và chết theo mùa vụ 55

3.3 So sánh tỷ lệ lợn mắc tiêu chảy và chết theo theo phương thức

AEEC : Adhenicia Enteropathogenic Escherichia coli BHI : Brain-heart infusion

cs : Céng sù

CPU : Colinial Forming Unit

ED : Edema disease

EDP : Edema disease pathogenic

EHEC : Entero haemorrhagic

EMB : Eosin Methylene Blue Agar

EPEC : Enteropathogenic Escherichia coli

ETEC : Enterotoxigenic Escherichia coli

Trong những năm gần đây, cùng với sự phát triển của nền kinh tế quốc dân, ngành chăn nuôi nói chung và chăn nuôi lợn nói riêng đD có những bước phát triển mạnh mẽ, trở thành ngành sản xuất quan trọng, chiếm tỷ lệ đáng kể trong xuất khẩu các sản phẩm chăn nuôi và xoá đói giảm nghèo

ở tỉnh Phú Thọ, chăn nuôi lợn có tốc độ tăng trưởng khá nhanh, mức tăng

đàn lợn bình quân là 5 - 6%/ năm Tổng đàn lợn 524.316 con (Số liệu thống kê tính đến 1/8/2006) [4] Ngày 21/2/2002, UBND tỉnh đD có Quyết định số 624/2002/QĐ-UB về một số chính sách khuyến khích phát triển chăn nuôi, chế biến thịt lợn xuất khẩu vùng trọng điểm tỉnh Phú Thọ giai đoạn 2002 - 2006 Chính sách này đD thúc đẩy chăn nuôi lợn thịt hướng nạc phát triển Nhiều trang trại, nhiều hộ gia đình đD đẩy mạnh chăn nuôi lợn nái, lợn thịt hướng nạc với quy mô 50 - 100 con/trại Chăn nuôi lợn đD bắt đầu chuyển theo hướng sản xuất hàng hoá và xuất khẩu

Tuy nhiên, người chăn nuôi lợn còn gặp nhiều khó khăn, trong đó có vấn

đề dịch bệnh Trong nhiều năm qua, hội chứng tiêu chảy thường gặp ở lợn, gây thiệt hại đáng kể cho người chăn nuôi Hội chứng tiêu chảy không những xảy ra

ở lợn con theo mẹ mà còn thấy khá phổ biến ở lợn giai đoạn sau cai sữa Theo nhiều tác giả, hội chứng tiêu chảy do rất nhiều nguyên nhân gây ra (virus, vi khuẩn, độc tố, thức ăn, thời tiết, vệ sinh, chăm sóc, nuôi dưỡng ), trong đó, vi

khuẩn E coli và Salmonella thuộc họ vi khuẩn đường ruột (Enterobacteriacae)

Sau nhiều năm công tác ở Chi cục Thú y tỉnh Phú Thọ và qua thực tế theo dõi tình hình dịch bệnh trên đàn lợn, chúng tôi nhận thấy hội chứng tiêu chảy ở lợn từ sau cai sữa đến 6 tháng tuổi xảy ra khá phổ biến, gây nhiều thiệt hại cho người chăn nuôi

Xuất phát từ yêu cầu cấp thiết của thực tiễn sản xuất, chúng tôi đD tiến

hành đề tài: "Đặc điểm dịch tễ, phân lập, xác định các yếu tố gây bệnh của vi khuẩn E coli, Salmonella trong hội chứng tiêu chảy ở lợn từ sau cai sữa tại tỉnh Phú Thọ và biện pháp phòng trị"

2 Mục tiêu nghiên cứu

- Xác định một số đặc điểm dịch tễ hội chứng tiêu chảy ở lợn từ sau cai sữa

- Xác định vai trò gây bệnh của vi khuẩn E coli và Salmonella trong hội

chứng tiêu chảy của lợn

- Xây dựng và đề xuất phác đồ điều trị bệnh tiêu chảy ở lợn sau cai sữa đạt hiệu quả

3 ý nghĩa khoa học và thực tiễn

- Công trình đD chứng minh vai trò của vi khuẩn E coli và Salmonella trong

bệnh tiêu chảy ở lợn sau cai sữa tại tỉnh Phú Thọ Kết quả nghiên cứu của đề tài là cơ sở khoa học phục vụ cho các nghiên cứu tiếp theo, đồng thời đóng góp tư liệu tham khảo, nghiên cứu cho cán bộ thú y và người chăn nuôi

- Kết quả nghiên cứu đưa ra phác đồ điều trị có hiệu quả, giúp cho thú y cơ

sở, các hộ chăn nuôi trong phòng trị bệnh tiêu chảy cho lợn, góp phần giảm thiệt hại và tăng thu nhập trong chăn nuôi lợn

Chương 1 Tổng quan tài liệu

1.1 Một số hiểu biết chung về hội chứng tiêu chảy

1.1.1 Khái niệm về hội chứng tiêu chảy

Hội chứng tiêu chảy là hội chứng bệnh lý đường tiêu hoá, là hiện tượng con vật ỉa nhanh, nhiều lần trong ngày, trong phân có nhiều nước do rối loạn chức năng tiêu hoá (ruột tăng cường co bóp và tiết dịch) (Phạm Ngọc Thạch, 1996 [51]), hoặc chỉ phản ánh đơn thuần sự thay đổi tạm thời của phân gia súc bình thường khi gia súc đang thích ứng với những thay đổi trong khẩu phần ăn Tiêu chảy xảy ra ở nhiều bệnh và bản thân nó không phải là bệnh đặc thù (Archie.H, 2000 [1])

Tuỳ theo đặc điểm, tính chất, diễn biến bệnh, hoặc loài gia súc, hoặc nguyên nhân chính gây bệnh mà hội chứng tiêu chảy được gọi bằng tên khác nhau như: bệnh xảy ra đối với gia súc non theo mẹ, gọi là bệnh lợn con ỉa phân trắng, hay bê nghé phân trắng…; còn ở gia súc sau cai sữa là chứng khó tiêu, chứng rối loạn tiêu hoá, hoặc hội chứng rối loạn tiêu hoá… Nếu xét về nguyên

nhân chính gây bệnh thì có các tên gọi như: bệnh Colibacillosis do vi khuẩn E

coli gây ra, bệnh phó thương hàn lợn do vi khuẩn Samonella spp gây ra, bệnh viêm dạ dày ruột truyền nhiễm (TGE) do Coronavirus gây ra,…

Song, với bất kỳ cách gọi thế nào thì tiêu chảy luôn được đánh giá là hội chứng phổ biến trong các dạng bệnh của đường tiêu hoá, xảy ra ở mọi nơi, mọi lúc (Archie H, 2000 [1]) với các triệu chứng chung là: ỉa chảy, mất nước và chất

điện giải, suy kiệt, dẫn đến có thể chết

1.1.2 Một số nguyên nhân gây tiêu chảy ở lợn

Tiêu chảy là một hiện tượng bệnh lý có liên quan đến nhiều yếu tố, có yếu

tố là nguyên nhân nguyên phát, có yếu tố là nguyên nhân thứ phát Vì vậy việc phân biệt rạch ròi giữa các nguyên nhân gây tiêu chảy là rất khó khăn (Phạm Ngọc Thạch, 1996 [51], Lê Minh Chí, 1995 [3]) Có thể liệt kê một số nguyên nhân quan trọng như sau:

1.1.2.1 Do môi trường ngoại cảnh

Môi trường ngoại cảnh là một trong 3 yếu tố cơ bản gây ra bệnh dịch, mối quan hệ giữa Cơ thể – Mầm bệnh – Môi trường là nguyên nhân của sự không ổn

định sức khoẻ, đưa đến phát sinh bệnh (Nguyễn Như Thanh, 2001 [50])

Môi trường ngoại cảnh bao gồm các yếu tố: nhiệt độ, ẩm độ, các điều kiện

về chăm sóc nuôi dưỡng, vệ sinh chuồng trại, sự di chuyển, thức ăn, nước uống…

Khi gia súc bị nhiễm lạnh kéo dài sẽ làm giảm phản ứng miễn dịch, giảm tác dụng thực bào, làm cho gia súc dễ bị nhiễm khuẩn gây bệnh (Hồ Văn Nam và

cs, 1997 [22])

Khẩu phần ăn cho vật nuôi không thích hợp, trạng thái thức ăn không tốt, thức ăn kém chất lượng như mốc, thối và nhiễm các tạp chất, các vi sinh vật có hại dễ dẫn đến rối loạn tiêu hoá kèm theo viêm ruột, ỉa chảy ở gia súc (Trịnh Văn Thịnh, 1985a [55], Hồ Văn Nam, 1997 [22])

Khi gặp điều kiện ngoại cảnh không thuận lợi, thay đổi đột ngột về thức ăn, vitamin, protein, thời tiết, vận chuyển…làm giảm sức đề kháng của con vật thì vi khuẩn thường trực sẽ tăng độc tố và gây bệnh (Bùi Quý Huy, 2003 [15])

Như vậy, nguyên nhân môi trường ngoại cảnh gây bệnh tiêu chảy không mang tính đặc hiệu mà mang tính tổng hợp Lạnh và ẩm gây rối loạn hệ thống

điều hoà trao đổi nhiệt của cơ thể lợn, dẫn đến rối loạn quá trình trao đổi chất, làm giảm sức đề kháng của cơ thể, từ đó các mầm bệnh trong đường tiêu hoá có thời cơ tăng cường độc lực và gây bệnh

1.1.2.2 Nguyên nhân do vi sinh vật

Vi sinh vật bao gồm các loại virus, vi khuẩn và nấm mốc Chúng vừa là nguyên nhân nguyên phát, cũng vừa là nguyên nhân thứ phát gây tiêu chảy

* Tiêu chảy do vi khuẩn

Trong đường tiêu hoá của gia súc có hệ vi khuẩn gọi là hệ vi khuẩn đường ruột, được chia thành 2 loại, trong đó vi khuẩn có lợi, có tác dụng lên men phân

giải các chất dinh dưỡng, giúp cho quá trình tiêu hoá được thuận lợi và vi khuẩn

có hại, khi có điều kiện thì gây bệnh

Họ vi khuẩn đường ruột là họ vi khuẩn cộng sinh thường trực trong đường ruột Họ vi khuẩn này, muốn từ vi khuẩn cộng sinh trở thành gây bệnh phải có 3

điều kiện (Jones, 1980, dẫn theo Lê Văn Tạo, 1997a [46]):

- Trên cơ thể vật chủ có cấu trúc giúp cho vi khuẩn thực hiện được chức năng bám dính

- Vi khuẩn phải có khả năng sản sinh các yếu tố gây bệnh, đặc biệt là sản sinh độc tố, trong đó quan trọng nhất là độc tố đường ruột Enterotoxin

- Có khả năng xâm nhập vào lớp tế bào biểu mô của niêm mạc ruột, từ đó phát triển nhân lên

Một số vi khuẩn thuộc họ vi khuẩn đường ruột là E coli, Salmonella sp.,

Shigella, Klebsiella, C perfringens… Đó là những vi khuẩn quan trọng, gây rối loạn tiêu hoá, viêm ruột tiêu chảy ở người và nhiều loài động vật

Đào Trọng Đạt và cộng sự (1996) [10] cho biết: chiếm tỷ lệ cao nhất trong

số các vi khuẩn đường ruột gây tiêu chảy là E coli (45,6%) Cũng theo tác giả, vi khuẩn yếm khí C perfringens gây bệnh khi có điều kiện thuận lợi và khi nó trở

thành vai trò chính

Hồ Văn Nam và cs (1997) [22], Archie.H (2001) [1] nhấn mạnh: vi khuẩn

đường ruột có vai trò không thể thiếu được trong hội chứng tiêu chảy

Nguyễn Như Pho (2003) [34] cho rằng, khả năng gây bệnh của các loại vi khuẩn đối với lứa tuổi lợn khác nhau Đối với lợn con theo mẹ, lợn sau cai sữa

hoặc giai đoạn đầu nuôi thịt thì tỷ lệ mắc tiêu chảy do Salmonella cao hơn; giai

đoạn từ lúc sơ sinh đến sau khi cai sữa thường do E coli; lứa tuổi 6 - 12 tuần thì thường do xoắn khuẩn Treponema hyodysenterriae; còn vi khuẩn yếm khí

C.perfringens thường gây bệnh nặng cho lợn con theo mẹ trong khoảng 1 tuần tuổi đến cai sữa

* Tiêu chảy do virus

Virus cũng là tác nhân gây bệnh tiêu chảy ở lợn Sự xuất hiện của virus đD làm tổn thương niêm mạc ruột, làm suy giảm sức đề kháng của cơ thể và thường gây ỉa chảy ở dạng cấp tính với tỷ lệ chết cao (Phạm Ngọc Thạch, 1996 [51])

Khooteng Huat (1995) [76] đD thống kê có hơn 10 loại virus có tác động

làm tổn thương đường tiêu hoá, gây viêm ruột ỉa chảy như: Enterovirus,

Rotavius, Coronavirus, Adenovirus type IV, virus dịch tả lợn…

Rotavirus và Coronavirus là những virus gây tiêu chảy quan trọng ở gia súc non mới sinh như nghé, dê cừu con, lợn con, ngựa con và đặc biệt là bê do những virus này có khả năng phá huỷ màng ruột và gây tiêu chảy nặng (Archie.H, 2000 [1]) Các nghiên cứu trong nước của Lê Minh Chí (1995) [3] và

Nguyễn Như Pho (2003) [33] cũng đD cho rằng: Rotavirus và Coronavirus gây

bệnh tiêu chảy chủ yếu cho lợn con trong giai đoạn theo mẹ, với các triệu chứng tiêu chảy cấp tính, nôn mửa, mất nước với tỷ lệ mắc bệnh và tỷ lệ chết cao

* Tiêu chảy do nấm mốc

Thức ăn khi chế biến hoặc bảo quản không đúng kỹ thuật dễ bị nấm mốc Một

số loài như: Aspergillus, Penicillium, Fusarium…có khả năng sản sinh nhiều loại độc

tố, nhưng quan trọng nhất là nhóm độc tố Aflatoxin (Aflatoxin B1, B2, G1, G2, M1 )

Độc tố Aflatoxin gây độc cho người và gia súc, gây bệnh nguy hiểm nhất cho con người là ung thư gan, huỷ hoại gan, độc cho thận, sinh dục và thần kinh Aflatoxin gây độc cho nhiều loài gia súc, gia cầm, mẫn cảm nhất là vịt, gà, lợn và các gia súc khác Lợn khi nhiễm độc thường bỏ ăn, thiếu máu, vàng da, ỉa chảy,

ỉa chảy ra máu Nếu trong khẩu phần có 500 - 700àg Aflatoxin/kg thức ăn sẽ làm cho lợn con chậm lớn, còi cọc, giảm sức đề kháng với các bệnh truyền nhiễm khác (Lê Thị Tài, 1997 [43])

1.1.2.3 Tiêu chảy do ký sinh trùng

Có nhiều loại ký sinh trùng gây bệnh tiêu chảy ở lợn như: cầu trùng

Eimeria , Isospora suis, Crytosporidium, Ascaris suum, Trichuris suis… hoặc một

số loài giun tròn lớp Nematoda (Ascaris suum, Trichuris suis, Strongloides,

Haemonchus, Mecistocirrus…)

Bệnh do Isospora suis, Crytosporidium thường tập trung vào giai đoạn lợn

con từ 5- 25 ngày tuổi, còn ở lợn trên 2 tháng tuổi do cơ thể đD tạo được miễn dịch đối với bệnh cầu trùng, nên lợn chỉ mang mầm bệnh mà ít khi xuất hiện triệu chứng tiêu chảy (Nguyễn Như Pho, 2003 [33])

Cầu trùng và một số loại giun tròn (giun đũa, giun tóc, giun lươn) là một trong những nguyên nhân gây tiêu chảy ở lợn sau cai sữa nuôi trong các hộ gia

đình tại Thái Nguyên (Nguyễn Thị Kim Lan và cs, 2006a [19]) Đặc điểm chủ yếu của tiêu chảy do ký sinh trùng là con vật mắc bệnh bị tiêu chảy nhưng không liên tục, có sự xen kẽ giữa tiêu chảy và bình thường, cơ thể thiếu máu, da nhợt nhạt, gia súc kém ăn, thể trạng sa sút

Như vậy có thể thấy, có rất nhiều nguyên nhân gây tiêu chảy, nhưng theo một số chuyên gia chuyên nghiên cứu về bệnh tiêu chảy ở lợn như Nguyễn Thị Nội (1985) [29], Lê Văn Tạo (1993) [44], Hồ Văn Nam (1997) [22] thì dù nguyên nhân nào gây tiêu chảy cho lợn đi nữa, cuối cùng cũng là quá trình nhiễm khuẩn, vi khuẩn kế phát làm viêm ruột, tiêu chảy nặng thêm, có thể dẫn đến chết hoặc viêm ruột tiêu chảy mDn tính

1.1.3 Bệnh lý lâm sàng của hội chứng tiêu chảy

1.1.3.1 Cơ chế sinh bệnh

Cơ chế sinh bệnh của hội chứng tiêu chảy là quá trình rối loạn chức phận

bộ máy tiêu hoá và nhiễm khuẩn Hai quá trình này có thể diễn ra đồng thời, hoặc cũng có thể quá trình này trước, quá trình kia sau và ngược lại, song không thể phân biệt rõ được từng quá trình

Theo Phạm Ngọc Thạch (1996) [51], khi thiếu mật thì tới 60% mỡ không tiêu hoá được, gây ra chứng đầy bụng, khó tiêu và ỉa chảy, hoặc việc giảm hấp thu cũng dẫn đến ỉa chảy

Vũ Văn Ngữ và cs (1975) [24], Trịnh Văn Thịnh (1985b) [56] cho rằng: do một tác nhân bất lợi nào đó, trạng thái cân bằng của khu hệ vi khuẩn đường ruột

bị phá vỡ, tất cả hoặc chỉ một loài nào đó sinh sản quá nhiều sẽ gây hiện tượng loạn khuẩn, gây ra sự biến động ở nhóm vi khuẩn đường ruột, cũng như ở nhóm

vi khuẩn vDng lai, các vi khuẩn gây bệnh có cơ hội tăng mạnh cả về số lượng và

độc lực, các vi khuẩn có lợi cho quá trình tiêu hoá do không cạnh tranh nổi nên giảm đi, cuối cùng loạn khuẩn xảy ra, hấp thu bị rối loạn, gây tiêu chảy

1.1.3.2 Bệnh lý, lâm sàng của hội chứng tiêu chảy

Bệnh lý, lâm sàng của hội chứng tiêu chảy ở gia súc đó là sự biến đổi về tổ chức, tình trạng mất nước và chất điện giải, trạng thái trúng độc của cơ thể bệnh

Khi nghiên cứu về tiêu chảy ở lợn do vi khuẩn E coli, Nguyễn Như Pho

(2003) [33] cho rằng, ruột chỉ xung huyết, không thấy xuất huyết, không có vết loét hoặc hoại tử như trong bệnh phó thương hàn

Sự mất nước kéo theo mất các chất điện giải trong dịch thể, đặc biệt là các ion: HCO3-, K+, Na+, CL-…đồng thời, khi gia súc bị rối loạn tiêu hoá thì cũng làm cản trở đến khả năng tái hấp thu nước ở gia súc ỉa chảy, nếu lượng dịch mất đi trong đường ruột vượt quá lượng dịch đưa vào khi ăn hoặc uống, thận sẽ có gắng

bù lại bằng cách cô đặc nước tiểu để giảm lượng nước thải ra Nếu thận không bù

được, mức dịch thể trong tổ chức bị giảm và máu bị đặc lại Hiện tượng này gọi là mất nước và triệu chứng lâm sàng là yếu, bỏ ăn, thân nhiệt thấp và có thể truỵ tim, mắt bị hõm sâu, nhìn lờ đờ, da khô và khi véo da lên, nếp da chậm trở lại vị trí cũ (Archie.H, 2000 [1]) Lợn bị tiêu chảy gầy sút nhanh, da nhăn, tính đàn hồi da kém; nếu tiêu chảy lâu ngày, lợn gầy nhô xương sống, da thô, lông dựng ngược

Mặt khác, khi cơ thể mất nước và chất điện giải sẽ kéo theo sự biến đổi của hàng loạt các bệnh lý khác nhau

Hiện tượng trúng độc xảy ra do thức ăn lên men phân giải sinh độc tố, hệ vi khuẩn đường ruột sinh sôi, sản sinh ra nhiều độc tố Các độc tố đó cùng với các sản phẩm của viêm, tổ chức phân huỷ, ngấm vào máu, tác động vào gan làm chức năng gan rối loạn, gia súc bị trúng độc, đồng thời tác động cản trở quá trình tiêu hoá tiếp tục gây tiêu chảy nặng hơn, tăng nguy cơ nhiễm độc máu và gây tử vong

1.1.3.3 Hậu quả trong hội chứng tiêu chảy

Hậu quả trực tiếp và nặng nề của hiện tượng tiêu chảy là sự mất nước và mất các chất điện giải của cơ thể, kéo theo hàng loạt các biến đổi bệnh lý (Lê Minh Chí, 1995 [3]) Hiện tượng mất nước rất nghiêm trọng và có thể gây chết nếu không được điều chỉnh Gia súc non dự trữ dịch thể tương đối thấp nên đặc biệt mẫn cảm với sự mất nước Chính vì vậy, biện pháp phòng chống và bù nước trong điều trị tiêu chảy luôn luôn phải đặt ra (Archie.H, 2000 [1])

Lợn bị tiêu chảy giảm khả năng tiêu hoá, chuyển hoá và hấp thụ các chất dinh dưỡng, nên lợn gầy còm, chậm tăng trọng, dễ dàng mắc các bệnh khác(Phạm Sỹ Lăng và cs, 1997 [21])

ở lợn, hiện tượng tiêu chảy thường có quá trình nhiễm khuẩn Khi tiêu chảy do nhiễm khuẩn, các triệu chứng trầm trọng hơn và hậu quả để lại nặng nề hơn Bệnh có thể lây lan và kế phát nhiều bệnh khác, gây thiệt hại cho ngành chăn nuôi Như vậy, với mỗi một nguyên nhân gây bệnh khác nhau thì cũng để lại những hậu quả khác nhau

1.1.4 Một số đặc điểm dịch tễ hội chứng tiêu chảy

Hội chứng tiêu chảy ở gia súc do nhiều nguyên nhân gây ra Chính vì vậy,

sự xuất hiện của bệnh phụ thuộc vào sự xuất hiện các nguyên nhân và sự tương tác giữa nguyên nhân với cơ thể gia súc Các yếu tố như tuổi gia súc, mùa vụ,

thức ăn, chuồng trại, điều kiện chăm sóc nuôi dưỡng… đều có ảnh hưởng đến bệnh tiêu chảy ở gia súc

ở lợn, hội chứng tiêu chảy có thể xảy ra ở mọi lứa tuổi Archie.H (2000) [1], Fairbrother.J.M (1992) [70] cho rằng khi bệnh tiêu chảy xảy ra, thường gây thiệt hại lớn cho ngành chăn nuôi Bệnh thường xuất hiện ở 3 giai đoạn phát triển của lợn:

- Giai đoạn sơ sinh (1 - 4 ngày tuổi)

- Giai đoạn lợn con theo mẹ (5 - 21 ngày tuổi)

- Giai đoạn lợn sau cai sữa (> 21 ngày tuổi)

Tỷ lệ mắc bệnh tiêu chảy trong một số cơ sở chăn nuôi lợn phụ thuộc vào

điều kiện chăm sóc, vệ sinh thú y ở đó, còn tỷ lệ chết, mức độ trầm trọng của bệnh ở một đàn phụ thuộc vào giai đoạn mắc bệnh (Đoàn Kim Dung, 2003 [7], Hoàng Văn Tuấn, 1998 [59])

Khi nghiên cứu một số đặc điểm dịch tễ hội chứng tiêu chảy ở lợn từ sau cai sữa của các hộ chăn nuôi gia đình tại Thái Nguyên, Nguyễn Thị Kim Lan và

cs (2006b) [20] cho rằng, bệnh chịu ảnh hưởng rõ rệt của lứa tuổi mắc bệnh, mùa

vụ trong năm, các loại thức ăn, nền chuồng và tình trạng vệ sinh thú y

Về độ tuổi mắc bệnh, tỷ lệ lợn tiêu chảy giảm theo tuổi, cao nhất ở giai

đoạn sau cai sữa đến 2 tháng (13,9%), sau đó giảm dần và chỉ còn 5,55% ở lợn trên 6 tháng tuổi (Nguyễn Thị Kim Lan và cs, 2006b [20])

Về mùa vụ, bệnh tiêu chảy ở lợn con theo mẹ xảy ra quanh năm, nhưng cao nhất là tháng 5 – 8 (Hoàng Văn Tuấn và cs, 1998 [59]) Trong năm, lợn nuôi

ở mùa xuân và mùa hè mắc tiêu chảy cao hơn (13,67 – 14,75%) so với hai mùa còn lại (9,18 – 9,68%) (Nguyễn Thị Kim Lan và cs, 2006b [20])

Về thức ăn, lợn nuôi thức ăn tổng hợp dạng viên, không qua chế biến, mắc tiêu chảy với tỷ lệ 8,96% Tỷ lệ này tăng lên khi cho thức ăn truyền thống mang tính tận dụng và ăn rau sống (16,1%) (Nguyễn Thị Kim Lan và cs, 2006b [20])

Điều kiện chuồng trại và vệ sinh cũng có ảnh hưởng khá rõ rệt đến tỷ lệ mắc tiêu chảy ở lợn Lợn nuôi trong nền lát gạch có tỷ lệ tiêu chảy là 9,49%, tăng lên ở chuồng có nền láng xi măng (12,64%) và cao nhất ở chuồng nền đất nện (20,37%) Lợn được nuôi ở điều kiện vệ sinh thú y tốt tỷ lệ tiêu chảy là 8%, thấp hơn rõ rệt so với nuôi trong điều kiện vệ sinh thú y kém (20,35%) (Nguyễn Thị Kim Lan và cs, 2006b [20])

Ngoài các vấn đề nêu trên, hội chứng tiêu chảy còn bị ảnh hưởng bởi các tác nhân gây bệnh do virus, vi khuẩn…Các tác giả đều cho rằng, khi lợn mắc tiêu chảy do các tác nhân vi sinh vật, thường làm tăng tỷ lệ mắc bệnh và tỷ lệ chết

1.1.5 Biện pháp phòng trị tiêu chảy cho lợn

1.1.5.1 Phòng bệnh

Phòng bệnh là biện pháp chủ động không để bệnh xảy ra Các biện pháp phòng bệnh đều xoay quanh các vấn đề về môi trường, vật chủ và mầm bệnh

Các tác giả Trịnh Văn Thịnh (1985b) [56], Đào Trọng Đạt (1985) [9] đề xuất biện pháp phòng bệnh là: giữ ẩm và sưởi cho lợn sơ sinh vào mùa đông, dọn phân, rác thải trong chuồng đem ủ nhiệt sinh vật, định kỳ tẩy uế tiêu độc chuồng trại và dụng cụ chăn nuôi

Phạm Khắc Hiếu, Trần Thị Lộc (1998) [14] cho rằng: để phòng bệnh tiêu chảy, trước hết cần hạn chế, loại trừ các yếu tố stress sẽ mang lại hiệu quả tích cực, đồng thời khắc phục những yếu tố khí hậu, thời tiết bất lợi để tránh rối loạn tiêu hoá, giữ ổn định trạng thái cân bằng giữa cơ thể và môi trường Lợn con đẻ

ra phải được sưởi ấm ở nhiệt độ 37oC trong 7 ngày, sau đó giảm nhiệt độ dần, nhưng không được thấp hơn 30oC

Một số tác giả đD tập trung nghiên cứu chế tạo và sử dụng vacxin phòng bệnh nhằm kích thích cơ thể chủ động sản sinh kháng thể chống lại mầm bệnh Nguyễn Thị Nội (1985) [29] dựa trên kết quả xác định tần suất các serotype O

của E coli gây bệnh phân trắng lợn con để chọn các serotype O có tần suất xuất

hiện cao chế vacxin Lê Văn Tạo (1996) [45] đD chọn chủng vi khuẩn E coli

mang kháng nguyên K88 kết hợp với ít nhất 2 yếu tố gây bệnh khác nhau là Ent

và Hly dùng để sản xuất vacxin cho uống và tiêm phòng bệnh lợn con phân trắng Còn các tác giả Nguyễn Thị Nội, Nguyễn Ngọc Nhiên, Cù Hữu Phú (1989b) [31] tiến hành nghiên cứu một loại vacxin tổng hợp gồm các chủng vi khuẩn

Salmonella, E coli và Streptococcus để phòng bệnh tiêu chảy cho lợn Việc sử dụng vacxin phòng bệnh tiêu chảy cho đến hiện nay vẫn đang được tiếp tục nghiên cứu

Ngoài sử dụng vacxin, một số tác giả đD đi sâu nghiên cứu các chế phẩm dùng để phòng bệnh tiêu chảy Đây là biện pháp vừa giúp tăng khả năng đề kháng, vừa khống chế sự phát triển quá mức của một số loài vi khuẩn có hại cho cơ thể gia súc Tạ Thị Vịnh, Đặng Thị Hoè (2002) [63] đD sử dụng chế phẩm

VITOM 1.1 (có chứa Bacillus subtilis chủng VKPMV-7092) để phòng và trị

bệnh tiêu chảy cho lợn con từ sơ sinh đến 3 tuần tuổi Trần Thị Hạnh và cs

(2004) [12] đD chế tạo sinh phẩm E coli – sữa và C perfringens- toxoid dùng

phòng bệnh tiêu chảy cho lợn con

Như vậy, vấn đề phòng bệnh tiêu chảy cho lợn đD có rất nhiều tác giả nghiên cứu Mỗi một công trình nghiên cứu đều đi sâu vào một số khía cạnh, một

số nguyên nhân gây bệnh và đD đạt được một số kết quả khả quan Tuy nhiên, do

có nhiều nguyên nhân và yếu tố gây bệnh, nên vẫn còn nhiều vấn đề thực tiễn đòi hỏi phải giải quyết trong phòng bệnh tiêu chảy cho lợn

1.1.5.2 Điều trị bệnh

Lê Minh Chí (1995) [3] cho rằng: trên thực tế lâm sàng, điều trị mất nước là

điều trị bắt buộc và là điều kiện để hạ thấp mức độ thiệt hại do bệnh tiêu chảy gây ra

Phạm Ngọc Thạch (2005) [52] cho biết, để điều trị hội chứng tiêu chảy ở gia súc, nên tập trung vào 3 khâu là:

- Loại trừ những sai sót trong nuôi dưỡng như: loại bỏ thức ăn kém phẩm chất (ôi mốc ), giảm thức ăn xanh chứa nhiều nước, chăm sóc nuôi dưỡng tốt; loại bỏ thức ăn không tiêu hoá được, đang lên men trong đường ruột

- Khắc phục rối loạn tiêu hoá và chống nhiễm khuẩn – những vi khuẩn đD phân lập được ở gia súc viêm ruột ỉa chảy

- Điều trị hiện tượng mất nước và chất điện giải

Hiện nay, để điều trị hội chứng tiêu chảy ở lợn, nhiều tác giả đD nghiên cứu và cho rằng, cần phải xác định được nguyên nhân gây bệnh, hiểu rõ cách sinh bệnh và triệu chứng bệnh Việc sử dụng kháng sinh trong điều trị tiêu chảy

do nhiễm khuẩn được nhiều người nghiên cứu và đưa ra nhiều phác đồ khác nhau, nhưng các tác giả đều thống nhất rằng: sử dụng kháng sinh có hiệu quả cần phải xem xét khả năng mẫn cảm và tính kháng thuốc của vi khuẩn Vấn đề này, chúng tôi sẽ trình bày rõ hơn ở các phần tiếp sau

1.2 Một số nghiên cứu về vi khuẩn E coli gây bệnh đường tiêu hoá

Vi khuẩn Escherichia coli (E coli) trước đây được gọi là Bacterium coli

commune hay Bacilus coli communis, lần đầu tiên phân lập được từ phân trẻ em bị

tiêu chảy năm 1885 và được đặt theo tên của người bác sĩ nhi khoa Đức Theodor Escherich (1857 –1911) (Nguyễn Vĩnh Phước, 1974 [37], Nguyễn Lân Dũng, 1976 [8], Nguyễn Như Thanh và cs, 1997 [49], Lê Văn Tạo, 1997a [46])

Vi khuẩn E coli thuộc họ Enterobacteriaceae, là họ vi khuẩn thường trực

ở trong ruột, chiếm tới 80% các vi khuẩn hiếu khí (Hoàng Thuỷ Nguyên và cs,

1974 [23]), vừa là vi khuẩn cộng sinh thường trực đường tiêu hoá, vừa là vi khuẩn gây nhiều bệnh ở đường ruột và ở các cơ quan khác (Lê Văn Tạo, 1997a [46])

Trong điều kiện bình thường, E coli khu trú thường xuyên ở phần sau của ruột,

ít khi có ở dạ dày hay đoạn đầu ruột non của động vật Khi gặp điều kiện thuận lợi, chúng phát triển nhanh về số lượng, độc lực, gây loạn khuẩn, bội nhiễm đường tiêu hoá

và trở thành nguyên nhân gây bệnh tiêu chảy (Nguyễn Vĩnh Phước, 1978 [38])

1.2.1 Đặc điểm hình thái, cấu trúc của vi khuẩn

1.2.1.1 Đặc điểm hình thái

Vi khuẩn E coli là một trực khuẩn hình gậy ngắn, có kích thước 2 - 3àm x 0,3 - 0,6àm; ở môi trường nuôi cấy, trong canh khuẩn già, xuất hiện những trực khuẩn dài 4 - 8 àm Trong cơ thể người và động vật, vi khuẩn thường có hình cầu

trực khuẩn, đứng riêng lẻ, đôi khi xếp thành chuỗi ngắn Phần lớn vi khuẩn E coli

có khả năng di động do có lông ở xung quanh thân, không sinh nha bào, có thể có giáp mô Vi khuẩn bắt màu gram âm, có thể bắt màu đều hoặc sẫm ở hai đầu, khoảng giữa nhạt hơn Nếu lấy vi khuẩn từ khuẩn lạc nhầy để nhuộm, có thể thấy giáp mô, nhưng khi soi tươi thì thường không nhìn thấy được

1.2.1.2 Đặc điểm cấu trúc:

Vi khuẩn E coli được chia làm các serotype khác nhau dựa vào cấu trúc

kháng nguyên thân O, giáp mô K, lông H và kháng nguyên bám dính F Bằng phản ứng ngưng kết, các nhà khoa học đD tìm ra được 250 serotype O, 89 serotype K, 56 serotype H và một số serotype F (Fairbrother.J.M, 1992 [70]) Khi

xác định serotype đầy đủ của 1 chủng vi khuẩn E coli thì phải xác định đủ cả 3

loại kháng nguyên nói trên

- Kháng nguyên O (Kháng nguyên thân – Ohne Hauch) được coi như là một yếu tố độc lực có thể tìm thấy ở thành tế bào và có liên hệ trực tiếp với hệ thống miễn dịch Kháng nguyên O khi gặp kháng huyết thanh tương ứng sẽ xảy ra phản ứng ngưng kết Ngưng kết kháng nguyên O tạo thành những hạt nhỏ, khó tan

- Kháng nguyên H (kháng nguyên lông - Hauch) là thành phần lông của

vi khuẩn, có bản chất protein, kém bền vững hơn so với kháng nguyên O Kháng nguyên H không phải là yếu tố độc lực của vi khuẩn, nhưng có khả năng tạo miễn dịch mạnh Phản ứng miễn dịch xảy ra nhanh hơn so với kháng nguyên O

Kháng nguyên H của vi khuẩn E coli không có vai trò bám dính, không

có tính độc và cũng không có ý nghĩa trong đáp ứng miễn dịch phòng vệ nên ít

được quan tâm nghiên cứu, nhưng nó có ý nghĩa rất lớn trong xác định giống loài của vi khuẩn (Orskov.F, 1978 [84])

- Kháng nguyên K (Kháng nguyên vỏ bọc - Capsular), còn được gọi là kháng nguyên bề mặt (OMP - Outer membrane protein) hoặc kháng nguyên vỏ bọc (Capsular) Vai trò của kháng nguyên K chưa được thống nhất Có rất nhiều

ý kiến cho rằng, nó không có ý nghĩa về độc lực của vi khuẩn, vì thấy rằng độc

lực của chủng E coli có kháng nguyên K cũng giống độc lực của chủng không

có kháng nguyên K (Orskov.F, 1978 [84]) Tuy nhiên, có ý kiến khác cho rằng, nó

có ý nghĩa về độc lực vì nó tham gia bảo vệ vi khuẩn trước những yếu tố phòng vệ của vật chủ Tuy vậy, phần lớn các ý kiến đều thống nhất kháng nguyên K có hai nhiệm vụ sau:

+ Hỗ trợ trong phản ứng ngưng kết của kháng nguyên O, nên thường ghi

liền công thức serotype của vi khuẩn là Ox:Ky như E coli O139: K88, O149: K88

+ Tạo ra hàng rào bảo vệ cho vi khuẩn chống lại tác động của ngoại cảnh và hiện tượng thực bào, yếu tố phòng vệ của vật chủ

Tóm lại, dựa vào kháng nguyên O, E coli được chia làm nhiều nhóm; căn

cứ vào cấu tạo kháng nguyên O, K, H, E coli lại chia làm nhiều type; mỗi type

đều được ghi thứ tự các yếu tố kháng nguyên O, K, H

- Kháng nguyên F (Kháng nguyên Fimbriae- Kháng nguyên bám dính)

Hầu hết các chủng E coli gây bệnh đều sản sinh ra một hoặc nhiều kháng

nguyên bám dính Các chủng không gây bệnh thì không có kháng nguyên bám dính Kháng nguyên bám dính giúp vi khuẩn bám vào các thụ thể đặc hiệu trên bề mặt tế bào biểu mô ruột và trên lớp màng nhày để xâm nhập và gây bệnh, đồng thời chống lại khả năng đào thải vi khuẩn của nhu động ruột

Một số loại kháng nguyên bám dính của vi khuẩn E coli thuộc nhóm ETEC

(Enterotoxigenic E coli) gây bệnh chủ yếu cho lợn là F4 (K88), F5 (K99), F6 (987P), F18 và F41 (Cater.G.R và cs, 1995) [65]

1.2.2 Đặc tính nuôi cấy, sinh vật, hoá học

- Môi trường thạch thường: Hình thành những khuẩn lạc tròn, ướt, bóng láng không trong suốt, màu tro trắng nhạt, hơi lồi, đường kính từ 2-3mm Nuôi lâu, khuẩn lạc có màu nâu nhạt và mọc rộng ra, có thể quan sát thấy cả những khuẩn lạc dạng R (Rough) và M (Mucous)

- Môi trường nước thịt: Phát triển rất nhanh, tốt, môi trường đục đều có lắng cặn màu tro nhạt ở dưới đáy, đôi khi có màu xám nhạt, canh trùng có mùi phân thối

- Môi trường MacConkey: Khuẩn lạc có màu hồng cánh sen, tròn nhỏ, hơi lồi, không trầy, rìa gọn, không làm chuyển màu môi trường

- Môi trường thạch máu: khuẩn lạc to, ướt, lồi, viền không gọn, màu xám nhạt, một số chủng có khả năng và gây ra hiện tượng tan máu

- Môi trường Simmon citrat: Khuẩn lạc không màu trên nền xanh lục

- Môi trường Endo: Khuẩn lạc màu đỏ

- Trong môi trường EMB: Khuẩn lạc màu tím đen

- Trong môi trường SS: Khuẩn lạc có màu đỏ

1.2.2.2 Đặc tính sinh vật hoá học:

- Phản ứng lên men đường: Vi khuẩn E coli lên men sinh hơi các loại đường

Lactose, Fructose, Glucose, Levulose, Galactose, Xylose, Manitol; lên men không chắc chắn các loại đường Duncitol, Saccarose và Salixin

Hầu hết các chủng vi khuẩn E coli đều lên men đường Lactose nhanh và sinh hơi, đây là đặc điểm quan trọng để dựa vào đó phân biệt vi khuẩn E coli và

Samonella

- Một số phản ứng sinh hoá khác: Phản ứng Indol và MR dương tính, phản ứng H2S, VP, Urea âm tính

1.2.3 Đặc tính gây bệnh của vi khuẩn E coli

1.2.3.1 Cơ chế gây bệnh của vi khuẩn E coli:

Để có thể gây bệnh, trước hết vi khuẩn E coli phải bám dính vào tế bào

nhung mao ruột bằng các yếu tố bám dính như kháng nguyên F Sau đó, nhờ các yếu tố xâm nhập (Invasion), vi khuẩn sẽ xâm nhập vào tế bào biểu mô của thành ruột ở đó, vi khuẩn phát triển, nhân lên, phá huỷ lớp tế bào biểu mô, gây viêm ruột, đồng thời sản sinh độc tố đường ruột Enterotoxin Độc tố đường ruột tác

động vào quá trình trao đổi muối, nước, làm rối loạn chu trình này Nước từ cơ thể tập trung vào lòng ruột làm căng ruột, cùng với khí do lên men ở ruột gây nên một tác dụng cơ học, làm nhu động ruột tăng, đẩy nước và chất chứa ra ngoài, gây nên hiện tượng tiêu chảy Sau khi đD phát triển ở thành ruột, vi khuẩn vào hệ lâm ba, đến hệ tuần hoàn, gây nhiễm trùng máu Trong máu, vi khuẩn chống lại hiện tượng thực bào, gây dung huyết, làm cho cơ thể thiếu máu Từ hệ tuần hoàn,

vi khuẩn đến các tổ chức cơ quan ở đây, vi khuẩn lại phát triển nhân lên lần thứ hai, phá huỷ tế bào tổ chức, gây viêm và sản sinh độc tố gồm Enterotoxin và Verotoxin, phá huỷ tế bào tổ chức, gây tụ huyết và xuất huyết

1.2.3.2 Các yếu tố gây bệnh của vi khuẩn E coli:

Các yếu tố gây bệnh của E coli bao gồm khả năng kháng khuẩn, yếu tố

bám dính, khả năng xâm nhập, yếu tố gây dung huyết và khả năng sản xuất độc

tố Các chủng vi khuẩn E coli không có các yếu tố trên thì không có khả năng

gây bệnh

Dựa vào các yếu tố gây bệnh nói trên, người ta đD phân loại vi khuẩn E

coli thành các loại sau: Enterotoxigenic E coli (ETEC), Enteropathogenic E

coli (EPEC), Adherence Enteropathogenic E coli (AEEC) và Verotoxingenic

E.coli (VTEC) (Lê Văn Tạo, 1997a [46]) Trong đó, các chủng vi khuẩn thuộc nhóm ETEC và VTEC thường gây bệnh tiêu chảy cho lợn con sơ sinh và lợn sau cai sữa (Fairbrother.J.M, 1992 [70])

* Yếu tố kháng khuẩn:

Nhiều chủng vi khuẩn E coli có khả năng sản sinh ra chất kháng khuẩn có

tác dụng ức chế hoặc tiêu diệt các loại vi khuẩn khác, gọi là ColicinV Vì vậy,

yếu tố này cũng được coi là 1 trong các yếu tố độc lực của vi khuẩn E coli gây

bệnh (Smith.H.W và cs, 1967) [88]

* Yếu tố bám dính:

Để gây bệnh, các chủng ETEC phải bám dính lên trên tế bào biểu mô của ruột non Hầu hết các chủng ETEC đều có mang 1 hoặc nhiều các yếu tố bám dính như: F4(K88), F5 (K99), F6(987P), F17, F18, F41, F42 và F165 ở lợn, các chủng

vi khuẩn ETEC gây bệnh tiêu chảy thường mang các yếu tố bám dính sau đây:

- F4 (K88): F4 hay còn gọi là K88 và là một kháng nguyên không chịu

nhiệt Bằng việc sử dụng các kháng huyết thanh đặc hiệu, Orskov và cs (1964) [83]

đD phân biệt được hai loại khác nhau của F4 là F4ab và F4ac Loại thứ 3 được phát

hiện bởi Guinee và Jansen được đặt tên là F4ad (Guinee và cs, 1979 [74]) Sợi F4

giúp cho vi khuẩn bám được vào receptor tương ứng của nó trên tế bào biểu mô của lông nhung ruột non, từ đó vi khuẩn có thể xâm nhập cố định và phát triển được ở

thành ruột non Yếu tố bám dính F4 được mang trong vi khuẩn E coli thuộc nhóm

ETEC, gây bệnh tiêu chảy ở lợn trước và sau cai sữa (Nagy và cs, 1999 [81])

- F5 (K99): F5 trước kia được cho là kháng nguyên bám dính của E.coli

chỉ gây bệnh ở bê, nghé và cừu Tuy nhiên, hiện nay chúng cũng được tìm thấy với

tỷ lệ thấp ở các chủng ETEC phân lập từ lợn tiêu chảy (Links và cs, 1985) [78]

Sự sản sinh F5 phụ thuộc vào nhiều yếu tố của vi khuẩn như: Tốc độ sinh trưởng,

pha sinh trưởng, nhiệt độ và alanine trong môi trường Các gen mD hóa cho sự tổng

hợp F5 nằm trên ADN của plasmid (Isaacson, 1977) [72]

- F6 (987p): Các nhà khoa học cho rằng, fimbriae này đóng vai trò quan

trọng trong việc gây bệnh của ETEC F6 của ETEC ở lợn có thể giúp vi khuẩn

bám vào cả các receptor cấu tạo bởi glycoprotein và glycolipid trên riềm trải của

các tế bào biểu mô ruột (Dean và cs, 1989, 1994 [67] [68]) F6 bám dính ở màng

nhầy để phân phối độc tố đường ruột tối đa đến vật chủ

- F18: F18 là tên đặt cho nhân tố bám dính 8813 Bởi vậy, một loại

fimbriae mới đD được đề nghị công nhận là F18ab và F18ac (Rippinger và cs,

1995 [86]) Một nghiên cứu của Nagy và cs (1996) [80] thấy rằng F18ab và

F18ac khác nhau về mặt sinh học F18ab ít thấy thể hiện ở cả trong điều kiện

thực tế và trong phòng thí nghiệm Chúng thường thấy cùng với việc sản xuất

SLT-2e ở các chủng VTEC, trong khi F18ac thể hiện rất rõ ở cả trong thực tế và

trong phòng thí nghiệm, chúng mang các đặc tính của các chủng ETEC

Một đặc điểm đáng chú ý ở F18ac là chúng không bám vào riềm bàn chải

của lợn sơ sinh trong điều kiện thực tế và trong phòng thí nghiệm (Nagy và cs, 1992

[79]), cũng không tập trung ở lớp màng nhầy của ruột ở lợn con mới sinh (Casey

và cs, 1992 [66]) Điều này ngược với F5 và F6, chúng bám vào các tế bào biểu

mô ruột Khả năng bám này ở lợn cai sữa nhiều hơn so với lợn sơ sinh Lý do xác

đáng để giải thích về việc tăng sự mẫn cảm với bám dính của F18ab và F18ac theo tuổi của lợn vẫn chưa được làm rõ, nhưng có thể là do sự tăng dần các

receptor đặc hiệu ở lông nhung của ruột lợn từ sơ sinh đến 21 ngày tuổi Sự thiếu

hụt các receptor của F18ab và F18ac ở lợn sơ sinh có thểgiải thích cho lý do vì

sao chỉ thấy các chủng VTEC và ETEC ở lợn cai sữa (Nagy và cs, 1999 [81])

* Yếu tố xâm nhập của vi khuẩn E coli: là một khái niệm dùng để chỉ quá

trình chưa được xác định một cách rõ ràng mà nhờ đó vi khuẩn E coli qua được

hàng rào bảo vệ của lớp màng nhầy (mucosa) trên bề mặt niêm mạc để xâm nhập vào tế bào biểu mô (Epithel), đồng thời sinh sản và phát triển trong lớp tế bào này Trong khi đó những vi khuẩn khác không có khả năng xâm nhập, không thể qua

được hàng rào bảo vệ của lớp màng nhầy hoặc khi qua được hàng rào này, sẽ bị giữ lại bởi tế bào đại thực bào của tổ chức hạ niêm mạc (Giannella và cs, 1976 [73])

* Độc tố của vi khuẩn E coli:

Vi khuẩn E coli sản sinh nhiều loại độc tố: Enterotoxin, Verotoxin,

Neurotoxin Mỗi loại độc tố gắn với một thể bệnh mà chúng gây ra

- Nhóm độc tố đường ruột (Enterotoxin): gồm hai loại:

+ Độc tố chịu nhiệt (Heat Stable Toxin - ST): Độc tố này chịu được nhiệt

độ 1000C trong vòng 15 phút Độc tố ST chia thành hai nhóm STa và STb dựa trên

đặc tính sinh học và khả năng hòa tan trong methanol STa kích thích sản sinh ra

cGMP mức cao trong tế bào, ngăn trở hệ thống chuyển Na+ và Cl-, làm giảm khả năng hấp thu chất điện giải và nước ở ruột STa thường thấy ở ETEC gây bệnh ở

lợn < 2 tuần tuổi và ở lợn lớn

STb kích thích vòng nucleotid phân tiết dịch độc lập ở ruột, nhưng phương thức tác dụng của STb vẫn chưa được hiểu rõ STb hoạt động ở ruột non lợn, nhưng không hoạt động ở ruột non chuột, bê và bị vô hoạt bởi Trypsin STb tìm thấy được

ở 75% các chủng vi khuẩn E coli phân lập từ lợn con, 33% phân lập từ lợn lớn

(Fairbrother và cs, 1992 [70]) Vai trò của STb trong tiêu chảy chưa được biết đến, mặc dù ETEC sản sinh STb có thể kích thích gây tiêu chảy ở lợn con trong điều kiện thực nghiệm và STb làm teo lông nhung ruột lợn (Carter và cs, 1995 [65])

Cả STa và STb đều có vai trò quan trọng trong việc gây tiêu chảy do các

chủng E coli gây bệnh ở bê, nghé, dê, cừu, lợn con và trẻ sơ sinh

+ Độc tố không chịu nhiệt (Heat Labile Toxin - LT): Độc tố này bị vô hoạt

ở nhiệt độ 600C trong vòng 15 phút LT cũng có hai nhóm phụ LT1 và LT2, nhưng chỉ có LT1 bị trung hòa bởi Anticholerae toxin LT là một trong những yếu tố

quan trọng gây triệu chứng tiêu chảy (Faibrother và cs, 1992) [70] Cả 2 loại độc

tố ST và LT đều bền vững ở nhiệt độ âm, thậm chí cả ở nhiệt độ âm 200C

- Nhóm độc tố tế bào (Shiga /Verotoxin):

Konowalchuck và cs (1977) [77] đD phát hiện một loại độc tố hoạt động trong môi trường nuôi cấy tế bào Vero (nên chúng được đặt tên là độc tố tế bào

Vero), được sản sinh bởi vi khuẩn E coli gây bệnh tiêu chảy ở người, tiêu chảy và

bệnh phù đầu ở lợn con ảnh hưởng gây bệnh ở tế bào của độc tố Vero rất khác so

với ảnh hưởng của độc tố đường ruột không chịu nhiệt cổ điển ở nhóm vi khuẩn E

coli gây bệnh đường ruột (ETEC) Độc tố Vero (VTs) hay Shiga (SLTs) là thuật ngữ được sử dụng trước đây Gần đây, các nhà khoa học đD đề nghị sử dụng tên

độc tố Shiga (Stx) cho tất cả những độc tố tế bào này Stx sản sinh bởi E coli bao

gồm 2 nhóm: Stx1và Stx2 Độc tố Shiga ở lợn là một loại trong nhóm độc tố Stx2 với một số khác biệt trong đặc tính sinh học Stx1 và Stx2 gây độc cho tế bào Hela Stx2e kém độc hơn, nhưng gây độc mạnh cho tế bào Vero

* Vai trò gây bệnh của các loại kháng nguyên:

Theo ý kiến của nhiều tác giả, mặc dù các vi khuẩn E coli có nhiều loại

kháng nguyên, trong đó, có loại tạo miễn dịch phòng vệ cho vật chủ, có loại không tạo miễn dịch phòng vệ cho vật chủ nhưng đều tham gia vào quá trình gây bệnh bằng cách tạo điều kiện cho vi khuẩn xâm nhập vào tế bào vật chủ và tham gia vào quá trình kháng lại các yếu tố phòng vệ tự nhiên của vật chủ Các kháng nguyên tham gia quá trình trên phải kể đến là kháng nguyên O, kháng nguyên K, kháng nguyên F

* Yếu tố dung huyết (Hly):

Để phát triển trong cơ thể, vi khuẩn E coli cần được cung cấp sắt Hầu hết những chủng E coli gây bệnh thường có khả năng gây dung huyết Để chiếm dụng sắt của vật chủ, vi khuẩn E coli tiết men Heamolyzin phá vỡ hồng cầu, giải

phóng sắt trong nhân HEM

Có 4 kiểu dung huyết của vi khuẩn E coli là: α-haemolysin, β-haemolysin,

γ-haemolysin, ε-haemolysin, nhưng quan trọng nhất là kiểu α-haemolysin và βhaemolysin (Ketyle và cs, 1975 [75])

-1.2.4 Khả năng mẫn cảm với kháng sinh của vi khuẩn E coli

Để trị bệnh đường ruột, người ta sử dụng nhiều loại kháng sinh Kháng sinh còn được trộn vào thức ăn với tỷ lệ thấp để phòng bệnh và kích thích tăng trọng Vì vậy, khả năng kháng kháng sinh của vi khuẩn đường ruột nói chung và

vi khuẩn E coli nói riêng đang ngày một tăng, làm cho hiệu quả điều trị giảm,

thậm chí nhiều loại kháng sinh còn bị vô hiệu hóa hoàn toàn

Sở dĩ khả năng kháng kháng sinh của vi khuẩn nói chung và E coli nói

riêng tăng nhanh, lan rộng vì gen sản sinh yếu tố kháng kháng sinh nằm trong plasmid R (Resistance) Plasmid này có thể di truyền dọc và di truyền ngang cho tất cả quần thể vi khuẩn thích hợp (Falkow, 1975) [71]

Sử dụng phương pháp kháng sinh đồ, Lê Văn Tạo (1993) [44] đD xác định

được khả năng kháng kháng sinh của các chủng E coli phân lập từ bệnh phân trắng lợn con và kết luận vi khuẩn E coli có được khả năng này là do nhận được

bằng di truyền dọc và di truyền ngang qua plasmid Với những ý nghĩa trên, ngày nay việc nghiên cứu khả năng kháng kháng sinh của vi khuẩn không còn đơn

thuần là việc lựa chọn kháng sinh mẫn cảm để điều trị bệnh do E coli gây ra mà

là nghiên cứu một yếu tố gây bệnh của vi khuẩn này

Phạm Khắc Hiếu và cs (1999) [14] đD tìm thấy chủng E coli kháng lại 11

loại kháng sinh, đồng thời chứng minh khả năng di truyền tính kháng thuốc giữa

E coli và Salmonella qua plasmid

Nghiên cứu của Nguyễn Ngọc Nhiên và cs (2000) [27] cho thấy, hầu hết

các chủng vi khuẩn E coli phân lập được từ gia súc tiêu chảy có khả năng kháng

lại với nhiều loại kháng sinh như: Chloramphenicol, Sulfadimethoxine hoặc Tetracycline,

Nghiên cứu tính kháng kháng sinh của 106 chủng E coli phân lập từ lợn

con theo mẹ bị tiêu chảy ở một số tỉnh miền Bắc Việt Nam, Đỗ Ngọc Thuý và cs (2002) [57] đD thu được kết quả: Các chủng có xu hướng kháng mạnh với các loại kháng sinh thông thường vẫn dùng để điều trị bệnh: Amoxicillin (76,42%), Chloramphenicol (79,25%), Trimethroprim/Sulfamethoxazol (80,19%), Streptomycin (88,68%), Tetracyclin (97,17%) Hiện tượng kháng thuốc của vi khuẩn với trên 3 loại kháng sinh là phổ biến (chiếm 90,57%) và kiểu kháng thuốc kháng với các loại kháng sinh: Tetracyclin, Trimethroprim/Sulfamethoxazol, Streptomycin và Chloramphenicol chiếm tỷ lệ cao nhất (76,24%) Có thể dùng Amikacin, Apramycin hay Ceftiofur để điều trị cho lợn con bị tiêu chảy, thay thế cho các loại kháng sinh trước đây vẫn dùng

Bùi Xuân Đồng (2002) [11] đD tiến hành thử kháng sinh đồ với các chủng

E coli phân lập được từ Hải Phòng và cho kết quả mẫn cảm với các loại kháng sinh Chloramphenicol, Norfloxacin, Ampicilin; còn với các chủng tại Tiền Giang thì Bùi Trung Trực (2004) [58] cho rằng chúng vẫn mẫn cảm mạnh với Norfloxacin và Colistin

Khi thử nghiệm phòng và trị bệnh E coli dung huyết cho lợn con ở Thái

Nguyên và Bắc Giang, Nguyễn Thị Kim Lan (2004) [18] đD kết luận: Vi khuẩn

E coli phân lập từ lợn bệnh rất mẫn cảm với kháng sinh Amikacin, kém hơn với Doxycycline, không mẫn cảm với Ampicilin và Cefuroxime

Trương Quang và cs (2006) [40] kiểm tra khả năng mẫn cảm với kháng

sinh của các chủng vi khuẩn E coli gây bệnh tiêu chảy cho bê, nghé đD cho thấy

các loại Neomycin, Norfloxacin và Colistin có tác dụng tốt

Như vậy, có thể thấy, qua thời gian và ở các địa điểm khác nhau, tính

kháng kháng sinh của vi khuẩn E coli gây bệnh cũng khác nhau

1.2.5 Vai trò của vi khuẩn E coli trong hội chứng tiêu chảy

Bệnh tiêu chảy có ở hầu hết các nước trên thế giới cũng như ở Việt Nam, gây thiệt hại đáng kể cho ngành chăn nuôi Trong chăn nuôi lợn, bệnh xảy ra ở mọi lứa tuổi và đD có nhiều công trình nghiên cứu về bệnh Các tác giả trong và

ngoài nước đều nhấn mạnh vai trò của vi khuẩn E coli trong hội chứng tiêu chảy

Theo nhiều nhà nghiên cứu khoảng 20 – 50% lợn con chết trong những ngày

sơ sinh do E coli gây nên, đôi khi tỷ lệ chết tới 10% (Niconxki.V.V, 1986) [28]

Để xác định vai trò của một E coli gây ra một bệnh nào đó, cần kiểm tra

độc lực và các yếu tố gây bệnh mà chủng E coli đó có được Do vậy, kết quả những nghiên cứu về độc lực, yếu tố gây bệnh của E coli chính là đánh giá khả

năng gây bệnh của nó (Lê Văn Tạo và cs, 2003 [48])

Cù Hữu Phú và cs (2004) [36] đD kết luận: vi khuẩn E coli là nguyên nhân chính gây bệnh tiêu chảy ở lợn con theo mẹ; các chủng E coli có thể mang tổ hợp

các yếu tố gây bệnh như: LT + STa + STb + K88 + Hly+ (29.29%); LT + STa + STb + Hly- (8.33%)

Khi nghiên cứu về vai trò gây bệnh của E coli trong hội chứng tiêu chảy ở

lợn 1 – 60 ngày tuổi, tác giả Trương Quang (2005) [39] đD có kết luận: 100%

mẫu phân của lợn bị tiêu chảy phân lập được E coli với số lượng gấp 2,46 – 2,73

lần (ở lợn 1 – 21 ngày tuổi) và 1,88 – 2,1 lần (ở lợn 22 – 60 ngày tuổi) so với lợn

không tiêu chảy Tỷ lệ các chủng E coli phân lập từ lợn bị tiêu chảy có độc lực

mạnh và các yếu tố gây bệnh cao hơn rất nhiều so với ở lợn không bị tiêu chảy

Cụ thể: yếu tố bám dính: 93,33% so với 33,33%; khả năng dung huyết: 53,33%

so với 25,92%; độc tố chịu nhiệt (LT): 90% - 11,11%, cả 2 loại ST + LT: 73,33%

so với 1,4%, độc lực mạnh (giết chết 100% chuột): 90% so với 0%

Tìm hiểu nguyên nhân chủ yếu gây bệnh tiêu chảy lợn con, Hồ Đình Soái

và cs (2005) [41] đD nhận xét: 100% mẫu phân lợn tiêu chảy phân lập được E

coli với số lượng nhiều gấp 2,37 lần (1- 45 ngày tuổi) và gấp 2,31 lần (45 - 60

ngày tuổi) so với lợn bình thường không tiêu chảy Độc lực của vi khuẩn E coli

và Salmonella gây chết chuột từ 50 - 100%, thời gian gây chết 6 -36 giờ Độc tố gây bệnh của vi khuẩn E coli gồm: 60% có độc tố STb, tỷ lệ LT, STa và VT2 là

40%, 20% và 10%, có 4 chủng sinh độc tố EAST1, 2 chủng sản sinh 2 loại độc tố STb và LT, 2 chủng sản sinh 3 loại độc tố STa, STb và LT

1.3 Những nghiên cứu về vi khuẩn Salmonella gây bệnh đường

Y tế thế giới (W.H.O), đến nay, các nhà khoa học đD xác định được hơn 2200

serotype Salmonella khác nhau, trong đó chỉ khoảng 5% serotype có khả năng

gây bệnh, số còn lại là vi khuẩn tự dưỡng hoặc hoại sinh

Vi khuẩn Salmonella thường được đặt tên theo nơi phân lập được như: S

newsport, S dublin , hoặc theo triệu chứng, bệnh tích gây nên: S enteritidis, S

cholerasuis ở Việt Nam, kết quả nghiên cứu bước đầu của Lê Văn Tạo và cs

(1997b) [47] cho thấy, S choleraesuis chiếm 50%, S typhimurium chiếm 6,25%,

S entertidis chiếm 12,5% và 31,25% thuộc các loại serotype khác

1.3.1 Đặc điểm hình thái cấu trúc của vi khuẩn

Salmonella là trực khuẩn hình gậy ngắn, hai đầu tròn, có kích thước khoảng 0,4 – 0,6 x 1 – 3 àm, không hình thành giáp mô và nha bào, có lông và di

động được (trừ S pullorum –gallinarum) Vi khuẩn bắt mầu gram âm

Cấu trúc kháng nguyên của Salmonella rất phức tạp, gồm có: kháng nguyên O,

kháng nguyên K hoặc kháng nguyên OMP (Outer membrane protein) và kháng nguyên H Kháng nguyên H có 2 pha, pha 1 đặc hiệu, pha 2 không đặc hiệu Kháng

nguyên H và O không phụ thuộc vào nhau trong quá trình đáp ứng miễn dịch, hiệu giá ngưng kết kháng thể H thường cao hơn hiệu giá ngưng kết kháng thể O

Những năm gần đây, các nhà khoa học đD phát hiện thêm kháng nguyên

Pili của Salmonella, yếu tố giúp vi khuẩn bám vào thành niêm mạc Kháng nguyên Pili của Salmonella thuộc nhóm CFA/I (Cholerae Factor Adherence) và

có quan hệ với phản ứng kháng nguyên Có tới 80% serotype Salmonella sản sinh

kháng nguyên Pili

1.3.2 Đặc tính nuôi cấy, sinh vật hoá học

1.3.2.1 Đặc tính nuôi cấy:

Salmonella là trực khuẩn vừa hiếu khí, vừa yếm khí, nhiệt độ thích hợp cho

sự phát triển là 37oC, độ pH = 7,2 – 7,6 Vi khuẩn có sức chịu đựng tốt với các

điều kiện khắc nghiệt Chúng có thể phát triển được từ 7 - 45oC; tồn tại được ở trong băng đá và ngay cả khi bị sấy khô qua nhiều tuần, tháng, vài năm ở trạng thái tiềm sinh

Vi khuẩn cũng có thể bị diệt bằng nhiệt độ, ánh sáng mặt trời, các chất sát trùng thông thường như phenol, formol hoặc crezyl…

Trong phòng thí nghiệm, vi khuẩn được nuôi cấy trên các môi trường:

- Trên môi trường nước thịt: làm đục, sinh cặn ở đáy ống nghiệm, có màng mỏng và mùi thối

- Trên môi trường SS (Salmonella – Shigella): do không lên men đường

lactose, khuẩn lạc ở dạng trong hoặc không màu

- Môi trường Endo: khuẩn lạc có màu vàng

- Môi trường thạch EMB: khuẩn lạc có màu đỏ

1.3.2.2 Đặc tính sinh vật hoá học:

Vi khuẩn Salmonella không lên men đường glucose, lactose, phản ứng VP

âm tính, không sản sinh Indol, không thủy phân Ure

1.3.3 Cơ chế gây bệnh

Quá trình gây bệnh ở trong đường tiêu hoá của Salmonella lần đầu tiên

được mô tả bởi một thí nghiệm trên chuột lang vào năm 1967 (Wilcock.B.P& Schwartz.K.J, 1992) [90] Thí nghiệm cho thấy, qua một quá trình sinh sản trên

bề mặt thành ruột, Salmonella sẽ xuyên qua lớp màng và xâm nhập vào bên trong

tế bào biểu mô, đặc biệt ở đoạn hồi tràng Tại đây, nó gây tổn thương các tế bào biểu mô ruột Trong giai đoạn này, vi khuẩn bị thực bào, song các đại thực bào không phá huỷ được vi khuẩn hoàn toàn Kết quả là sau 24 giờ xâm nhập, vi khuẩn đD phát triển trong đại thực bào và mô lympho ruột Đồng thời với sự phát triển nhanh về số lượng vi khuẩn là việc xuất hiện thể bệnh cấp tính, sự tập trung các đại thực bào, phản ứng viêm tạo thành huyết khối, gây rối loạn tuần hoàn cục

bộ vi mạch ở lớp dưới niêm mạc Hậu quả là dẫn tới hoại tử ở niêm mạc ruột tại

điểm bị vi khuẩn tấn công Đặc điểm bệnh tích trên có thể coi là 1 trong những

dấu hiệu đặc trưng bệnh do Salmonella gây ra

Posposchil A và cs (1990) [85] đD tiến hành thí nghiệm cho lợn cai sữa

uống vi khuẩn S typhimurium; vi khuẩn phát triển nhanh chóng trong ruột và lan

tràn nhanh đến các hạch lympho; chỉ cần sau 24 giờ đD có thể phân lập được vi khuẩn ở trong hạch amidan và hạch dưới hàm Tác giả cũng cho rằng: sự xâm nhập của vi khuẩn qua lớp niêm mạc ruột được coi như là một điều kiện tiên quyết cho

bệnh phát triển Với serotype S choleraesuis, số lượng vi khuẩn dường như không

phải là một điều kiện tiên quyết, bởi vì trong thực tế chúng luôn xâm nhập vào lớp niêm mạc ruột nhiều hơn so với serotype khác; vì vậy quá trình sinh bệnh của chúng luôn bắt đầu bằng chứng nhiễm trùng huyết và sau 24 – 72 giờ con vật mới xuất hiện triệu chứng tiêu chảy dữ dội

Như vậy, khả năng gây bệnh của Salmonella cũng giống như với vi khuẩn

E coli đó là khi gặp điều kiện bất lợi, làm giảm sức đề kháng của con vật thì vi khuẩn thường trực sẽ tăng độc tố và gây bệnh

1.3.4 Khả năng mẫn cảm với kháng sinh

Cũng như vi khuẩn E coli, Salmonella cũng kháng với nhiều loại kháng

sinh, mà nguyên nhân là do trong quá trình chăn nuôi, trong điều trị bệnh còn có nhiều thiếu sót về kỹ thuật như: dùng không đúng liều lượng, không đủ thời gian… và khả năng di truyền tính kháng thuốc giữa các vi khuẩn với nhau

Các tác giả Nguyễn Quang Tuyên (1996) [60], Phạm Khắc Hiếu và Bùi

Thị Tho (1999) [14] cho thấy, Salmonella mẫn cảm mạnh với Chloramphenicol,

mẫn cảm trung bình với Neomycin và kháng mạnh với Chlotetracyclin, Penicillin, Ampicillin và Sulphonamide với 100% số chủng nghiên cứu

Nghiên cứu của Cù Hữu Phú và cs (1999) [34] cho rằng: Salmonella mẫn

cảm mạnh với Neomycin và Nitrofurazolidon với 80 – 90% số chủng phân lập

được và kháng mạnh với Penicillin và Ampicillin

Nguyễn Thị Oanh, Phùng Quốc Chướng (2003) [32] cho biết: vi khuẩn

Salmonella mẫn cảm cao với Ciprofloxacin, Ceftrixazone, Trimethoprim/ Sulfamid và Nalidixide acid, rất ít hoặc không mẫn cảm với Ampicilin, Erythromycin, Penicillin

Các chủng Salmonella có độ mẫn cảm cao với Furazolidon (100%),

Chloramphenicol (87,5%), và ít mẫn cảm với Penicillin (25%) và hoàn toàn kháng với Tetracyclin (Đỗ Trung Cứ, Trần Thị Hạnh, Nguyễn Quang Tuyên, 2001) [5]

Như vậy, các loại thuốc như: Furazolidon, Chloramphenicol,

Nitrofurazolidon là thuốc có tính mẫn cảm cao với Salmonella Tuy nhiên, hiện

nay theo quy định của Nhà nước, các loại thuốc này là loại thuốc cấm sử dụng trong phòng và trị bệnh cho vật nuôi Vì vậy, cần có những nghiên cứu tính mẫn

cảm của Salmonella với các loại kháng sinh khác

1.3.5 Vai trò của vi khuẩn Salmonella trong hội chứng tiêu chảy

Bệnh do Salmonella gây ra ở lợn con theo mẹ là rất ít gặp Bởi vì, trong

máu của lợn con còn hàm lượng kháng thể cao do sữa đầu của lợn mẹ cung cấp

và có hoạt động bảo hộ cho đến khi những lợn con cai sữa Lợn sau cai sữa do không còn nguồn cung cấp globulin miễn dịch, nguồn thức ăn và pH đường ruột thay đổi, vì thế con con rất dễ bị nhiễm bệnh (Wilcock.B.P, 1978) [89] Bergeland (1980) (dẫn theo Đào Trọng Đạt và cs, 1996) [10] đD nêu cụ thể: đối với lợn con trong giai đoạn theo mẹ, bệnh rất hiếm khi xảy ra, tỷ lệ mắc bệnh chỉ khoảng 0,1% so với tổng số ca bệnh tiêu chảy do các nguyên nhân khác

Wilcock.B.P, Schwartz.K.J (1992) [90] cho rằng: bệnh truyền nhiễm do

Salmonella gây ra chủ yếu cho lợn con sau cai sữa với các triệu chứng điển hình là nhiễm trùng huyết, nhiễm độc huyết và viêm ruột ỉa chảy Tác giả còn cho biết: vi khuẩn có thể gây bệnh cho lợn nuôi bởi nhiều serotype có trong tự nhiên, nhưng

với bệnh tiêu chảy ở lợn con sau cai sữa thì chỉ phát hiện có 2 serotype là: S

choleraesuis và S typhimurium Trong 2 chủng vi khuẩn Salmonella thường xuyên gây bệnh tiêu chảy cho lợn, S choleraesuis được phát hiện trên 95%, S

typhimurium khoảng 4% và dưới 1% thuộc về những serotype khác (Schwartz.K.J, 1992) [87]

Theo nghiên cứu của Nguyễn Thị Nội và cs (1989a) [30], có tới 82,8% đến

100% số lợn tiêu chảy phân lập được vi khuẩn Salmonella gây bệnh

Kết quả nghiên cứu của Lê Văn Tạo và cs (1993) [44] đD chỉ ra rằng trong số,

50 mẫu bệnh phẩm từ lợn tiêu chảy, đD phân lập được 16 chủng Salmonella sp, trong

đó có 8 chủng thuộc S choleraesuis, 2 chủng S enteritidis và 1 chủng

S.typhimurium.

Nghiên cứu lợn tiêu chảy ở các cơ sở chăn nuôi tập trung của các tỉnh miền Bắc, Cù Hữu Phú và cs (2000) [35], đD cho thấy tỷ lệ phân lập được vi khuẩn

Salmonella gây bệnh tới 80% số mẫu xét nghiệm

Cũng như họ vi khuẩn đường ruột, vi khuẩn Salmonella muốn trở thành

gây bệnh phải hội tụ đủ 3 điều kiện là phải thực hiện được chức năng bám dính vào cơ thể vật chủ, sản sinh độc tố và có khă năng xâm nhập vào lớp tế bào biểu

mô của nhung mao ruột để nhân lên Yếu tố bám dính của Salmonella là fimbriae

thuộc serotyp I (Cholerae Factor Adherence – CFA/I) Độc tố đường ruột của

Salmonella gồm 2 thành phần cơ bản là: độc tố thẩm xuất nhanh (RPF- Rapid Permeability Factor - Độc tố chịu nhiệt) và độc tố thẩm xuất chậm (DPF – Delayed Permeability Factor - Độc tố không chịu nhiệt)

Khi nghiên cứu một số đặc tính sinh hoá và yếu tố gây bệnh của các chủng

Salmonella phân lập được từ bê, nghé bị tiêu chảy, Nguyễn Văn Sửu, Nguyễn Quang Tuyên, Trần Thị Hạnh (2005) [42] đD có kết luận: 14/17 (82,35%) chủng

Salmonella phân lập được có khả năng sinh độc tố thẩm xuất chậm (DPF – Delayed Permeability Factor - Độc tố không chịu nhiệt); 8/17 (47,06%) chủng sản sinh độc tố thẩm xuất nhanh (RPF- Rapid Permeability Factor - Độc tố chịu nhiệt); 5/17 (29,41%) chủng sản sinh cả 2 loại độc tố DPF và RPF Cơ chế gây bệnh của các độc tố là làm rối loạn quá trình trao đổi nước, chất điện giải, gây ra hiện tượng bệnh lý nước từ các cơ quan, tổ chức thẩm xuất vào đường ruột dẫn

đến tiêu chảy

Wilcock.B.P, Schwartz.K.J (1992) [90] cũng cho biết: trong giai đoạn sớm của bệnh, chứng tiêu chảy là kết quả của sự giảm hấp thu Na+ và tăng tiết dịch có

Cl- Vi khuẩn Salmonella cũng sản sinh độc tố đường ruột Enterotoxin, ngoài

việc phá huỷ lớp niêm mặc ruột, độc tố này cũng có tác động gây tiêu chảy

1.4 tình hình dịch bệnh trên đàn lợn của tỉnh phú thọ

1.4.1 Một số đặc điểm tự nhiên ảnh hưởng đến bệnh tiêu chảy

Phú Thọ là tỉnh miền núi, cách Thủ đô Hà Nội 80 km về phía Bắc, tiếp giáp với 6 tỉnh: Tuyên Quang, Yên Bái, Hà Tây, Vĩnh Phúc, Sơn La và Hoà Bình Tỉnh có

địa hình nằm kẹp giữa sông Thao, sông Lô và có một số đặc điểm khí hậu:

- Nhiệt độ: theo số liệu thống kê cho thấy nhiệt độ trung bình năm dao động

từ 23,4 – 23,80C; cao nhất vào tháng 6 dao động từ 28,8 – 29,80C; thấp nhất vào