Nghiên cứu khả năng ức chế Tyrosynase từ phụ phẩm một số loại bơ Việt Nam (Đồ án tốt nghiệp)

Nghiên cứu khả năng ức chế Tyrosynase từ phụ phẩm một số loại bơ Việt Nam (Đồ án tốt nghiệp) Nghiên cứu khả năng ức chế Tyrosynase từ phụ phẩm một số loại bơ Việt Nam (Đồ án tốt nghiệp) Nghiên cứu khả năng ức chế Tyrosynase từ phụ phẩm một số loại bơ Việt Nam (Đồ án tốt nghiệp) Nghiên cứu khả năng ức chế Tyrosynase từ phụ phẩm một số loại bơ Việt Nam (Đồ án tốt nghiệp) Nghiên cứu khả năng ức chế Tyrosynase từ phụ phẩm một số loại bơ Việt Nam (Đồ án tốt nghiệp) Nghiên cứu khả năng ức chế Tyrosynase từ phụ phẩm một số loại bơ Việt Nam (Đồ án tốt nghiệp) Nghiên cứu khả năng ức chế Tyrosynase từ phụ phẩm một số loại bơ Việt Nam (Đồ án tốt nghiệp) Nghiên cứu khả năng ức chế Tyrosynase từ phụ phẩm một số loại bơ Việt Nam (Đồ án tốt nghiệp) Nghiên cứu khả năng ức chế Tyrosynase từ phụ phẩm một số loại bơ Việt Nam (Đồ án tốt nghiệp) Nghiên cứu khả năng ức chế Tyrosynase từ phụ phẩm một số loại bơ Việt Nam (Đồ án tốt nghiệp) Nghiên cứu khả năng ức chế Tyrosynase từ phụ phẩm một số loại bơ Việt Nam (Đồ án tốt nghiệp) Nghiên cứu khả năng ức chế Tyrosynase từ phụ phẩm một số loại bơ Việt Nam (Đồ án tốt nghiệp) Nghiên cứu khả năng ức chế Tyrosynase từ phụ phẩm một số loại bơ Việt Nam (Đồ án tốt nghiệp) Nghiên cứu khả năng ức chế Tyrosynase từ phụ phẩm một số loại bơ Việt Nam (Đồ án tốt nghiệp) Nghiên cứu khả năng ức chế Tyrosynase từ phụ phẩm một số loại bơ Việt Nam (Đồ án tốt nghiệp) Nghiên cứu khả năng ức chế Tyrosynase từ phụ phẩm một số loại bơ Việt Nam (Đồ án tốt nghiệp) Nghiên cứu khả năng ức chế Tyrosynase từ phụ phẩm một số loại bơ Việt Nam (Đồ án tốt nghiệp) Nghiên cứu khả năng ức chế Tyrosynase từ phụ phẩm một số loại bơ Việt Nam (Đồ án tốt nghiệp) Nghiên cứu khả năng ức chế Tyrosynase từ phụ phẩm một số loại bơ Việt Nam (Đồ án tốt nghiệp) Nghiên cứu khả năng ức chế Tyrosynase từ phụ phẩm một số loại bơ Việt Nam (Đồ án tốt nghiệp)

BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO TRƯỜNG ĐẠI HỌC SƯ PHẠM KỸ THUẬT TP HỒ CHÍ MINH  KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP ĐẠI HỌC NGHIÊN CỨU KHẢ NĂNG ỨC CHẾ TYROSYNASE TỪ PHỤ PHẨM MỘT SỐ LOẠI BƠ VIỆT NAM MÃ SỐ KHÓA LUẬN: HC.19.02 SVTH: Nguyễn Minh Tuyền MSSV: 15128076 GVHD: TS Phan Thị Anh Đào Tp Hồ Chí Minh, tháng năm 2019 LỜI CẢM ƠN Lời cảm ơn em xin gửi đến gia đình, thầy cơ, bạn bè giúp đỡ tận tình, quan tâm đóng góp ý kiến q trình thực luận văn tốt nghiệp, tạo nguồn động lực to lớn cho em hoàn thành luận văn tốt nghiệp Em xin chân thành cảm ơn thầy cô Trường Đại học Sư phạm Kỹ thuật TPHCM, đặc biệt thầy khoa Cơng nghệ Hóa học & Thực phẩm, thầy cô truyền kiến thức tảng kiến thức chuyên ngành lẫn nâng cao, cho em kỹ kinh nghiệm thực luận văn Em xin cảm ơn Ks Nguyễn Thị Mỹ Lệ chun viên phịng thí nghiệm mơn Cơng nghệ Kỹ thuật Hóa học, trường Đại học Sư phạm Kỹ thuật TPHCM, cô hướng dẫn tận tình tạo điều kiện tốt cho em sử dụng thiết bị, dụng cụ hóa chất liên quan suốt q trình thực luận văn Em xin cảm ơn quý thầy/cô, anh/chị thuộc Trung tâm Sâm dược liệu TPHCM, Viện Pasteur TPHCM hỗ trợ em trình thực khóa luận Đặc biệt, em xin gửi lời cảm ơn sâu sắc đến cô Ts Phan Thị Anh Đào, giảng viên môn Công nghệ Kỹ thuật Hóa học, trường Đại học Sư phạm Kỹ thuật TPHCM Cơ người đồng hành em tồn khóa luận tốt nghiệp, bảo tận tình quan tâm tạo điều kiện tốt giúp em hồn thành khóa luận tốt nghiệp i LỜI CAM ĐOAN Tơi xin cam đoan tồn nội dung trình bày luận văn tốt nghiệp riêng tơi, tất tài liệu tham khảo trích dẫn đầy đủ xác Tơi xin cam đoan trình thực nghiệm thực quy trình kết theo thực nghiệm TPHCM, ngày tháng Ký tên ii năm 2019 MỤC LỤC LỜI CẢM ƠN i LỜI CAM ĐOAN ii DANH MỤC BẢNG v DANH MỤC HÌNH vi DANH MỤC TỪ VIẾT TẮT vii TÓM TẮT KHÓA LUẬN viii MỞ ĐẦU ix Chương TỔNG QUAN 1.1 Tổng quan tyrosynase vai trị 1.1.1 Tyrosynase 1.1.2 Cơ chế hình thành melanin 1.2 Tổng quan bơ 1.2.1 Phân loại khoa học 1.2.2 Thành phần dinh dưỡng bơ 1.2.3 Thành phần kháng dưỡng bơ 1.2.4 Thành phần hóa học bơ 1.2.5 Hoạt tính sinh học phụ phẩm từ bơ 11 1.2.6 Một số loại bơ Việt Nam 12 1.3 Định hướng nghiên cứu 14 1.3.1 Vấn đề tồn 14 1.3.2 Định hướng nghiên cứu 15 1.3.3 Mục tiêu 15 iii 1.3.4 Nội dung nghiên cứu 15 Chương THỰC NGHIỆM VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 16 2.1 Nguyên liệu 16 2.2 Hóa chất thiết bị 17 2.3 Phương pháp nghiên cứu 18 2.3.1 Sơ đồ nghiên cứu 18 2.3.2 Điều chế cao trích 20 2.3.3 Xác định khả ức chế tyrosynase 21 2.3.4 Khảo sát khả khử Cu2+ 23 2.3.5 Khảo sát sơ thành phần hóa học có mẫu cao 25 2.3.6 Hoạt tính gây độc tế bào 28 2.3.7 Hoạt tính kháng khuẩn 31 Chương KẾT QUẢ VÀ BÀN LUẬN 32 3.1 Điều chế cao trích từ phụ phẩm bơ 32 3.2 Kết hoạt tính ức chế tyrosynase 34 3.3 Khảo sát khả ức chế Cu2+ 37 3.3.1 Khảo sát thể tích CuCl2, BCDS, catechine 37 3.3.2 Kết ức chế Cu2+ mẫu cao 39 3.4 Khảo sát sơ thành phần hóa học 41 3.5 Hoạt tính kháng khuẩn 44 3.6 Hoạt tính gây độc tế bào 45 KẾT LUẬN VÀ ĐỀ NGHỊ 47 TÀI LIỆU THAM KHẢO 48 PHỤ LỤC 58 iv DANH MỤC BẢNG Bảng 1.1 Giá trị dinh dưỡng bơ 100g Bảng 1.2 Thành phần kháng dưỡng có dịch chiết ethanol từ hạt bơ Bảng 1.3 Nồng độ thành phần kháng dưỡng có mẫu cao hạt bơ (mg/100g) Bảng 1.4 Hình ảnh phân loại loại bơ 13 Bảng 2.1 Các mẫu phụ phẩm bơ nghiên cứu 18 Bảng 2.2 Phương pháp định danh thành phần hóa học 26 Bảng 3.1 Kết thu suất mẫu cao 32 Bảng 3.2 Kết phần trăm ức chế tyrosynase 34 Bảng 3.3 Kết khả ức chế acid kojic 37 Bảng 3.4 Kết khảo sát thể tích CuCl2 37 Bảng 3.5 Kết thể tích tối ưu phương pháp ức chế Cu2+ 38 Bảng 3.6 Kết thể khả ức chế Cu2+ mẫu cao trích 39 Bảng 3.7 Tóm tắt kết định danh thành phần hóa học cao N-H 41 Bảng 3.8 Kết kháng khuẩn mẫu cao N-H 44 Bảng 3.9 Phần trăm gây độc tế bào ung thư Hep-G2 mẫu cao N-H mẫu đối chiếu 45 v DANH MỤC HÌNH Hình 1.1 Phản ứng xúc tác tyrosynase Hình 1.2 Cấu trúc tổng thể tyrosynase Hình 1.3 Sơ đồ chế chuyển hóa tyrosynase Hình 1.4 Cơ chế hình thành melanin Hình 1.5 Quả bơ Hình 2.1 Sơ đồ nghiên cứu tổng quát 18 Hình 2.2 Cơ chế chuyển hóa L-DOPA tác dụng tyrosynase 21 Hình 2.3 Sơ đồ quy trình ức chế tyrosynase 22 Hình 2.4 Cơ chế tạo phức đồng chalate giai đoạn 23 Hình 2.5 Cơ chế tạo phức đồng Chalate giai đoạn 24 Hình 2.6 Sơ đồ khảo sát khả tạo phức với Cu2+ 24 Hình 2.7 Sơ đồ quy trình xác định khả gây độc tế bào 29 Hình 2.8 Sơ đồ quy trình xác định khả kháng khuẩn 32 Hình 3.1 Kết khảo sát bước sóng λmax cho khả ức chế Cu2+ 37 vi DANH MỤC TỪ VIẾT TẮT PPO Polyphenol oxidase DHI 5,6-Dihydroxyindole DHICA 5,6-dihydroxy-1H-indole-2-carboxylic acid MOPS 3-morpholinopropane-1-sulfonic acid EtOH Ethanol OD Optical density: mật độ quang DMSO Dimethyl solfoxide MS Mass spectrometry: phổ khối lượng L-DOPA L -3,4-dihydroxyphenylalanine vii TÓM TẮT KHÓA LUẬN Hoạt tính ức chế tyrosynase phụ phẩm số loại bơ Việt Nam thể qua kết phương pháp khảo sát khả ức chế tyrosynase khả khử Cu2+ Từ việc điều chế 21 mẫu cao trích tiến hành thực nghiệm cho thấy tất mẫu cao có khả ức chế tyrosynase Trong đó, với khả khử đồng cao ba nồng độ 0.1 mg/mL, 0.5 mg/mL 1.0 mg/mL với hoạt tính ức chế tyrosynase đạt IC50 7.3 µg/mL mẫu cao hạt bơ nước N-H mẫu cao lụa chọn có hoạt tính mạnh Sau đó, mẫu cao tiến hành khảo sát số thành phần hóa học thể kết dương tính với số thành phần alkaloid, saponin, anthocyanydin, proanthocyanin, tannin Cùng với đó, mẫu cao thể dương tính kháng dịng vi khuần Staphylococcus aureus nồng độ 100 µg/mL có khả ức chế dòng tế bào ung thư gan Hep-G2 với 36.61% nồng độ 100 µg/mL so với mẫu chứng camphtothecin 0.07µg/mL Chính thế, mẫu cao đặc biệt mẫu N-H mở nhiều tiềm ứng dụng việc ngăn ngừa nám da việc sử dụng cho loại mỹ phẩm dược phẩm nghiên cứu sau viii MỞ ĐẦU Trong ẩm thực đa dạng Việt Nam, bơ biết đến loại trái giàu dinh dưỡng thực phẩm có ích cho sức khỏe người Tuy nhiên, đời sống ngày, phần thịt bơ sử dụng nhiều nhất, vỏ hạt bơ xem phụ phẩm bỏ Nhưng nhiều nghiên cứu cho thấy, phần vỏ hạt bơ có hoạt tính sinh học cao, kháng oxy hóa mạnh có nhiều tiềm ứng dụng Từ phát đó, nhóm tác giả Đ.T.B.Duyên Đ.T.Q.Trâm nghiên cứu cho kết khả kháng oxy hóa ức chế tyrosynase từ cao trích hạt bơ cao ứng dụng vào bảo quản tơm thẻ chân trắng Tuy nhiên, hoạt tính sinh học vỏ bơ nào, loại bơ hoạt tính có khác hay khơng, khả ứng dụng cho thực phẩm, cao trích từ loại bơ ứng dụng cho mỹ phẩm hay khơng, câu hỏi cần giải Chính thế, chúng tơi tiến hành nghiên cứu khả ứng dụng vào mỹ phẩm phụ phẩm loại bơ Việt Nam cách khảo sát hoạt tính ức chế tyrosynase chúng Với đề tài : “ Nghiên cứu khả ức chế tyrosynase từ phụ phẩm số loại bơ Việt Nam”, chúng tơi mong muốn phát ngun liệu vừa có khả ức chế tyrosynase, giúp ngăn ngừa nám da, vừa thể hoạt tính kháng khuẩn cao khả khả gây độc tế bào ung thư gan, mở tiềm ứng dụng sản phẩm mỹ phẩm việc bơi ngồi da lẫn việc bổ sung từ viên uống ức chế tế bào ung thư dược phẩm ix activities of Persea americana (avocado) seed extracts," vol 42, no 2, pp 110-113, 2009 [36] J G Figueroa, I Borrás-Linares, J Lozano-Sánchez, and A J F c SeguraCarretero, "Comprehensive identification of bioactive compounds of avocado peel by liquid chromatography coupled to ultra-high-definition accurate-mass Q-TOF," vol 245, pp 707-716, 2018 [37] A López-Cobo, A M Gómez-Caravaca, F Pasini, M F Caboni, A SeguraCarretero, and A J L Fernández-Gutiérrez, "HPLC-DAD-ESI-QTOF-MS and HPLC-FLD-MS as valuable tools for the determination of phenolic and other polar compounds in the edible part and by-products of avocado," vol 73, pp 505-513, 2016 [38] A Jiménez-Arellanes et al., "Antiprotozoal and antimycobacterial activities of Persea americana seeds," vol 13, no 1, p 109, 2013 [39] R Nwaoguikpe, W Braide, C J J o M Ujowundu, and Antimicrobials, "Biochemical composition and antimicrobial activities of the seed extracts of Avocado (Persea americana)," vol 3, no 7, pp 184-190, 2011 [40] A N F Abubakar, S S Achmadi, and I H J A P J o T B Suparto, "Triterpenoid of avocado (Persea americana) seed and its cytotoxic activity toward breast MCF-7 and liver HepG2 cancer cells," vol 7, no 5, pp 397-400, 2017 [41] M Hidalgo, C Sánchez-Moreno, and S J F c de Pascual-Teresa, "Flavonoid– flavonoid interaction and its effect on their antioxidant activity," vol 121, no 3, pp 691-696, 2010 [42] F E J C Günes and E H Sciences, "Medical use of squalene as a natural antioxidant," vol 3, no 4, p 221, 2013 [43] O Adeyemi, S Okpo, and O J F Ogunti, "Analgesic and anti-inflammatory effects of the aqueous extract of leaves of Persea americana Mill (Lauraceae)," vol 73, no 5, pp 375-380, 2002 [44] R R Korać and K M J P r Khambholja, "Potential of herbs in skin protection from ultraviolet radiation," vol 5, no 10, p 164, 2011 52 [45] M Calderón-Oliver et al., "Optimization of the antioxidant and antimicrobial response of the combined effect of nisin and avocado byproducts," vol 65, pp 4652, 2016 [46] C t p t M.-G SME, "Phân tích chuỗi giá trị Bơ Đăk Lăk," Đăk Lăk10/2016 2006 [47] K Maeda and M J J S C C Fukuda, "In vitro effectiveness of several whitening cosmetic components in human melanocytes," vol 42, no 2, pp 361-368, 1991 [48] J Cabanes, S Chazarra, F J J o P GARCIA‐CARMONA, and Pharmacology, "Kojic acid, a cosmetic skin whitening agent, is a slow‐binding inhibitor of catecholase activity of tyrosinase," vol 46, no 12, pp 982-985, 1994 [49] T Pillaiyar, M Manickam, V J J o e i Namasivayam, and m chemistry, "Skin whitening agents: Medicinal chemistry perspective of tyrosinase inhibitors," vol 32, no 1, pp 403-425, 2017 [50] N K H Mai and N T T J T c Đ h T D M Mai, "Hoạt tính ức chế enzym tyrosinase số cấy thuốc Việt Nam hợp chất phân lập từ mít dai," vol 3, no 38, pp 120-123 [51] P B C Lê Văn Minh and N H Dũng, "KHẢO SÁT HOẠT TÍNH ỨC CHẾ TỔNG HỢP HẮC TỐ CỦA CÂY HOA HÒE (Sophora japonica L.) TRÊN DÒNG TẾ BÀO U HẮC TỐ B16F10 ỨNG DỤNG TRONG MỸ PHẨM." [52] Đ L Vũ, T T H Lê, T T Bùi, and T X Bùi, "Phát triển sản phẩm trắng da chống nám từ nguồn nguyên liệu thiên nhiên Việt Nam," 2018 [53] N P Nirmal, S J J o A Benjakul, and F Chemistry, "Melanosis and quality changes of Pacific white shrimp (Litopenaeus vannamei) treated with catechin during iced storage," vol 57, no 9, pp 3578-3586, 2009 [54] J H W a m L Tanzer, "Polyphenolic Substance of Mytilus edulis: Novel Adhesive Containing L-Dopa and Hydroxyproline," Science, vol 212, 1981 American Association for the Advancement of Science [55] L Mira, M Tereza Fernandez, M Santos, R Rocha, M Helena Florêncio, and K R Jennings, "Interactions of Flavonoids with Iron and Copper Ions: A Mechanism for their Antioxidant Activity," Free Radical Research, vol 36, no 11, pp 119953 1208, 2002/01/01 2002 [56] Z Xiao, J Brose, S Schimo, S M Ackland, S La Fontaine, and A Wedd, Unification of the copper(I) binding affinities of the metallo-chaperones Atx1, Atox1, and related proteins: Detection probes and affinity standards 2011, pp 11047-55 [57] D Davis et al., Inhibition of the Human Immunodeficiency Virus-1 Protease and Human Immunodeficiency Virus-1 Replication by Bathocuproine Disulfonic Acid Cu1+ 1995, pp 127-34 [58] M T Fernandez, M L Mira, M H Florencio, and K R J J o I B Jennings, "Iron and copper chelation by flavonoids: an electrospray mass spectrometry study," vol 92, no 2, pp 105-111, 2002 [59] V Francesc, C Codina, J Bastida, M Galobardes, and M Serrano, Alkaloid Screening of Catalonia (Spain) Plants, I 1984 [60] M Faraz, M Kamalinejad, G Naysaneh, and H Reza Vahidipour, Phytochemical Screening of Some Species of Iranian Plants 2003 [61] N P K Phụng, Phương pháp cô lập hợp chất hữu Hồ Chí Minh: Nhà xuất Đại Học Quốc Gia Thành Phố Hồ Chí Minh, 2007 [62] G R Van Atta and J Guggolz, Forage Constituents, Detection of Saponins and Sapogenins on Paper Chromatograms by Liebermann-Burchard Reagent 1958 [63] T T K Tuyền, "Phân tích sơ thành phần hóa học Đinh Lăng (Polyscias fruticosa (L.) Harms) trồng An Giang," Khoa Dược - Điều Dưỡng, Đại học Tây Đô, Cần Thơ, 2017 [64] A Monks et al., "Feasibility of a High-Flux Anticancer Drug Screen Using a Diverse Panel of Cultured Human Tumor Cell Lines," JNCI: Journal of the National Cancer Institute, vol 83, no 11, pp 757-766, 1991 [65] T H Sơn (2018, 16/05) Nhiễm tụ cầu nguy hiểm nào? Available: http://vienyhocungdung.vn/nhiem-tu-cau-nguy-hiem-nhu-the-nao20160714120427791.htm [66] HealthlinkBC (2017, 10/2017) Tụ Cầu Khuẩn Staphylococcus Aureus Kháng Methicillin (MRSA) 54 [67] L Quirós, B García, J Merayo-Lloves, C Martín, I Alcalde, and F Vazquez, "INSIGHTS INTO MICROBE-MICROBE INTERACTIONS IN HUMAN MICROBIAL ECOSYSTEMS: STRATEGIES TO BE COMPETITIVE," 2016, pp 59-69 [68] S Wang, A K Singh, D Senapati, A Neely, H Yu, and P Ray, Rapid Colorimetric Identification and Targeted Photothermal Lysis of Salmonella Bacteria by Using Bioconjugated Oval‐Shaped Gold Nanoparticles 2010, pp 5600-6 [69] A W Bauer, W M M Kirby, J C Sherris, and M Turck, "Antibiotic Susceptibility Testing by a Standardized Single Disk Method," American Journal of Clinical Pathology, vol 45, no 4_ts, pp 493-496, 1966 [70] L Toledo, C J C r i f s Aguirre, and nutrition, "Enzymatic browning in avocado (Persea americana) revisited: History, advances, and future perspectives," vol 57, no 18, pp 3860-3872, 2017 [71] I Kubo and I J P M Kinst-Hori, "2-Hydroxy-4-methoxybenzaldehyde: a potent tyrosinase inhibitor from African medicinal plants," vol 65, no 01, pp 019-022, 1999 [72] D Kim et al., "Flavonoids as mushroom tyrosinase inhibitors: a fluorescence quenching study," vol 54, no 3, pp 935-941, 2006 [73] N L H H Lê Quỳnh Loan, Lê Văn Minh, Phùng Bảo Chi, Nguyễn Hồng Dũng "Khảo sát hoạt tính ức chế tổng hợp hắc tố hoa hÒe (sophora japonica l.) dòng tế bào u hắc tố B16F10 ứng dụng mỹ phẩm " Tạp chí Khoa học Cơng nghệ Thực phẩm, vol 17, 2018, Art no 14-20 [74] N T M H Trần Phạm Tuệ Hưng, Quách Ngơ Diễm Phương, "Nghiên cứu hoạt tính kháng khuẩn, kháng oxi hóa, ức chế tyrosinase cao ethanol chiết xuất từ Huỳnh Anh (Allamanda neriifolia)," Science & Technology Development, vol 17, 2014, Art no T3- 2014 [75] C Okunji et al., "Preparative isolation and identification of tyrosinase inhibitors from the seeds of Garcinia kola by high-speed counter-current chromatography," (in eng), Journal of chromatography A, vol 1151, no 1-2, pp 45-50, 2007/06// 2007 55 [76] Y.-A J J o O Jang and A Science, "Anti-inflammatory and whitening effects of ginseng complex as a cosmetic material," vol 35, no 2, pp 325-335, 2018 [77] S Idris, G Ndukwe, C J B J o P Gimba, and A Sciences, "Preliminary phytochemical screening and antimicrobial activity of seed extracts of Persea americana (avocado pear)," vol 2, no 1, pp 173-176, 2009 [78] A Rinayanti, M Radji, A Mun’im, and F J I J P T P Suyatna, "Screening angiotensin converting enzyme (ACE) inhibitor activity of antihypertensive medicinal plants from Indonesia," vol 4, pp 527-32, 2013 [79] N Duy Nhứt, B Minh Lý, N Mạnh Cường, and T J T p c H a H c Văn Sung, "Fucoidan từ Rong Nâu Sargassum Swartzii: phương pháp tách, hoạt tính gây độc tế bào ung thư nghiên cứu cấu trúc," vol 46, no 1, pp 52-56, 2008 [80] T H Dương et al., "Coumarin acridon alkaloid từ rễ Xáo tam phân (Paramignya trimera)," vol 32, no 4, 2016 [81] T A Vien, N T H Van, T T N Hang, N A Tuan, and P Q J T C S H Long, "Antifungal, antibacterial and cytotoxic activities of some Ardisia species from Vietnam," vol 38, no 1, pp 75-80, 2016 [82] A Yosie, M Effendy, T Sifzizul, M J I J o P S Habsah, and Research, "Antibacterial, radical-scavenging activities and cytotoxicity properties of Phaleria macrocarpa (scheff.) Boerl Leaves in hepg2 cell lines," vol 2, no 7, p 1693, 2011 [83] N Mekonnen, P Houghton, J J P R A I J D t P Timbrell, and T E o N P Derivatives, "The toxicity of extracts of plant parts of Moringa stenopetala in HEPG2 cells in vitro," vol 19, no 10, pp 870-875, 2005 [84] N Razali, S M Junit, A Ariffin, N S F Ramli, A A J B c Aziz, and a medicine, "Polyphenols from the extract and fraction of T indica seeds protected HepG2 cells against oxidative stress," vol 15, no 1, p 438, 2015 56 57 PHỤ LỤC Phụ lục 1: Kết phần trăm ức chế tyrosynase Nồng độ (µg/mL) Control= 0.263 Control = 0.152 100 50 25 10 Hạt sáp 0.12 0.122 0.134 0.13 0.132 0.13 0.163 0.169 0.158 0.171 0.174 0.173 0.19 0.196 0.192 Sáp ngâm 0.115 0.129 0.133 0.114 0.108 0.12 0.127 0.173 0.146 0.171 0.17 0.174 0.22 0.227 0.225 Mỡ ngâm 0.126 0.11 0.106 0.134 0.112 0.119 0.146 0.144 0.143 0.159 0.151 0.142 0.152 0.148 0.167 Hạt mỡ 0.107 0.105 0.102 0.102 0.104 0.095 0.093 0.111 0.108 0.121 0.119 0.117 0.147 0.139 0.141 Lụa booth 0.115 0.125 0.118 0.146 0.145 0.142 0.128 0.126 0.137 0.153 0.157 0.154 0.169 0.179 0.177 Vỏ booth 0.103 0.101 0.104 0.165 0.148 0.158 0.175 0.169 0.166 0.216 0.209 0.214 0.232 0.235 0.246 HH hạt 0.12 0.116 0.111 0.144 0.115 0.121 0.153 0.161 0.149 0.172 0.159 0.169 0.167 0.152 0.157 HH hạt ngâm 0.118 0.113 0.125 0.143 0.112 0.15 0.167 0.155 0.146 0.152 0.161 0.157 0.161 0.168 0.158 034 ngâm 0.187 0.165 0.18 0.132 0.151 0.143 0.155 0.132 0.131 0.174 0.152 0.155 0.211 0.189 0.218 Lụa 034 0.148 0.149 0.158 0.155 0.161 0.161 0.216 0.222 0.216 0.198 0.206 0.203 0.183 0.193 0.188 Vỏ 034 0.18 0.187 0.191 0.143 0.159 0.148 0.233 0.231 0.234 0.263 0.261 0.256 0.26 0.262 0.262 Lụa sáp 0.042 0.04 0.031 0.042 0.047 0.05 0.072 0.071 0.071 0.131 0.129 0.13 0.099 0.092 0.096 Vỏ sáp 0.052 0.051 0.055 0.072 0.071 0.071 0.067 0.069 0.071 0.092 0.102 0.107 0.149 0.139 0.138 Lụa mỡ 0.046 0.048 0.051 0.052 0.049 0.053 0.065 0.068 0.066 0.081 0.08 0.083 0.098 0.103 0.104 Vỏ mỡ 0.055 0.058 0.061 0.063 0.064 0.067 0.081 0.079 0.085 0.098 0.104 0.102 0.114 0.118 0.121 Hạt booth 0.022 0.023 0.024 0.031 0.029 0.033 0.066 0.061 0.067 0.079 0.079 0.069 0.093 0.091 0.084 Booth ngâm 0.026 0.028 0.021 0.042 0.048 0.051 0.067 0.061 0.061 0.071 0.07 0.079 0.087 0.095 0.093 Hạt 034 0.067 0.062 0.063 0.073 0.075 0.078 0.089 0.085 0.084 0.095 0.097 0.101 0.112 0.123 0.115 HH Vỏ 0.042 0.046 0.047 0.062 0.061 0.063 0.089 0.084 0.082 0.101 0.106 0.107 0.111 0.117 0.121 HH Hạt + Lụa 0.021 0.022 0.024 0.041 0.049 0.043 0.073 0.082 0.079 0.103 0.101 0.094 0.107 0.105 0.105 HH HVL 0.039 0.041 0.041 0.076 0.082 0.083 0.092 0.087 0.09 0.104 0.106 0.106 0.12 0.119 0.118 58 Phụ lục 2: Kết khả ức chế Acid Kojic ( Phụ lục 2) Nồng độ (µg/mL) Control = 0.152 Acid Kojic 100 50 25 10 0.015 0.027 0.027 0.038 0.042 0.015 0.031 0.025 0.039 0.043 0.016 0.029 0.030 0.038 0.045 Phụ lục : Kết khảo sát thể tích CuCl2 300 V 0.047 A TB 400 0.053 0.05 500 0.048 0.041 0.0445 600 0.085 0.09 0.041 0.0875 800 700 0.066 0.117 0.0535 0.102 0.1095 0.069 900 0.068 0.062 1000 0.069 0.066 0.064 0.0685 0.0655 0.065 800 900 1000 Phụ lục 4: Kết khảo sát thể tích BCDS V A TB 300 0.034 400 0.017 0.0255 0.032 0.019 0.0255 500 0.062 0.059 0.0605 600 0.041 700 0.034 0.0375 59 0.025 0.031 0.028 0.05 0.047 0.0485 0.032 0.046 0.033 0.045 0.039 0.039 Phụ lục 5: Kết khảo sát thể tích Catechine V 30 A 0.046 0.045 TB 40 50 0.102 0.051 0.0455 60 70 0.103 0.078 0.064 0.0765 0.0905 0.06 0.092 0.062 90 80 0.079 0.092 0.0855 0.109 100 0.118 0.079 0.071 0.0985 0.1005 0.0755 Phụ lục 6: Kết ức chế Cu2+ mẫu cao trích STT Mẫu 0.1 mg/mL 0.5 mg/mL 1.0 mg/mL S-VL 0.168 0.171 0.176 0.373 0.375 0.37 0.7 0.697 0.703 S-V 0.168 0.165 0.163 0.453 0.452 0.475 0.868 0.901 0.889 S-H 0.171 0.164 0.186 0.523 0.526 0.609 0.879 0.888 0.875 S-HN 0.214 0.264 0.264 0.631 0.627 0.669 1.068 1.071 1.071 N-VL 0.259 0.245 0.25 0.477 0.486 0.457 0.906 0.903 0.896 N-V 0.123 0.204 0.187 0.311 0.317 0.311 0.42 0.426 0.427 N-H 0.418 0.433 0.436 1.036 1.089 0.997 2.51 2.494 2.37 N-HN 0.261 0.197 0.229 0.873 0.881 0.932 1.717 1.678 1.723 B-VL 0.096 0.122 0.098 0.254 0.245 0.267 0.451 0.463 0.457 19 B-V 0.359 0.402 0.371 1.15 1.153 0.99 1.81 1.605 1.603 11 B-H 0.246 0.250 0.269 0.794 0.77 0.78 1.687 1.687 1.712 12 B-HN 0.211 0.196 0.198 0.65 0.65 0.671 1.195 1.036 1.077 13 O-VL 0.157 0.171 0.169 0.438 0.428 0.496 0.728 0.683 0.629 60 0.08 14 O-V 0.148 0.180 0.176 0.364 0.394 0.388 0.636 0.612 0.744 15 O-H 0.151 0.137 0.142 0.38 0.376 0.378 0.621 0.608 0.519 16 O-HN 0.125 0.127 0.21 0.291 0.295 0.304 0.564 0.557 0.574 17 HH-HL 0.199 0.198 0.204 0.534 0.542 0.517 0.909 0.912 0.927 18 HH-HVL 0.156 0.176 0.163 0.49 0.476 0.491 0.822 0.854 0.832 19 HH-V 0.149 0.171 0.165 0.532 0.472 0.551 0.858 0.888 0.905 20 HH-H 0.152 0.136 0.143 0.468 0.483 0.477 0.769 0.741 0.762 21 HH-HN 0.128 0.143 0.125 0.434 0.406 0.422 0.76 0.744 0.763 61 Phụ lục 7: Kết kháng khuẩn mẫu cao N-H Vi sinh vật thử nghiệm Đường kính vịng vơ khuẩn (mm) Staphylococcus aureus 08 06 06 06 06 Pseudomonas aeruginosa 06 06 06 06 06 100.00 50.00 25.00 12.50 6.25 Salmonella typhi 06 06 06 06 06 Bacillus cereus 06 06 06 06 06 1000 500 250 100 50 Nồng độ (µg/mL) Nồng độ (µg/mL) Ghi chú: 6mm: khơng có dấu hiệu kháng khuẩn Phụ lục 8: Phần trăm gây độc tế bào ung thư Hep-G2 mẫu cao N-H mẫu đối chiếu OD ΔOD OD ΔOD %I TB SEM OD ΔOD %I TB SEM Chứng 0.155 0.178 0.225 0.183 0.1605 0.199 Mẫu 100 µg/mL 0.096 0.14 0.141 0.115 0.111 0.122 30.84 38.69 36.61 2.92 Camptothecin 0.07µg/mL 0.084 0.088 0.104 0.108 0.077 0.099 52.02 50.25 51.34 0.55 62 0.247 0.196 0.2135 0.132 0.133 0.1275 40.28 0.105 0.109 0.103 51.77 Phụ lục: Hình ảnh tế bào quan sát kính hiển vi mẫu chứng (a), mẫu thử (b) mẫu đối chiếu (c) sau 48 (a) (b) (c) 63 64 65 S K L 0 ... Việt Nam cách khảo sát hoạt tính ức chế tyrosynase chúng Với đề tài : “ Nghiên cứu khả ức chế tyrosynase từ phụ phẩm số loại bơ Việt Nam”, mong muốn phát nguyên liệu vừa có khả ức chế tyrosynase, ... nguồn từ Lâm Đồng xem giống bơ nội địa Một số hình ảnh phân loại loại bơ nghiên cứu bảng 1.4 Bảng 1.4 Hình ảnh phân loại loại bơ 13 Bơ sáp Bơ nước Bơ booth Bơ 034 1.3 Định hướng nghiên cứu 1.3.1... số loại bơ Việt Nam 1.3.3 Mục tiêu Đánh giá khả ức chế tyrosynase cao trích từ phụ phẩm ( vỏ, vỏ lụa, hạt, hạt ngâm ) bốn loại bơ Việt Nam ( bơ sáp, bơ nước, bơ booth, bơ 034) Từ việc khảo sát