Nghiên cứu khả năng ức chế tyrosynase từ phụ phẩm một số loại bơ việt nam

BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO TRƯỜNG ĐẠI HỌC SƯ PHẠM KỸ THUẬT THÀNH PHỐ HỒ CHÍ MINH ĐỒ ÁN TỐT NGHIỆP NGÀNH CƠNG NGHỆ KỸ THUẬT HĨA HỌC NGHIÊN CỨU KHẢ NĂNG ỨC CHẾ TYROSYNASE TỪ PHỤ PHẨM MỘT SỐ LOẠI BƠ VIỆT NAM GVHD: Phan Thị Anh Đào SVTH: Nguyễn Minh Tuyền MSSV: 15128076 SKL005981 Tp Hồ Chí Minh, tháng 7/2019 BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO TRƯỜNG ĐẠI HỌC SƯ PHẠM KỸ THUẬT TP HỒ CHÍ MINH  KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP ĐẠI HỌC NGHIÊN CỨU KHẢ NĂNG ỨC CHẾ TYROSYNASE TỪ PHỤ PHẨM MỘT SỐ LOẠI BƠ VIỆT NAM MÃ SỐ KHÓA LUẬN: HC.19.02 SVTH: Nguyễn Minh Tuyền MSSV: 15128076 GVHD: TS Phan Thị Anh Đào Tp Hồ Chí Minh, tháng năm 2019 TRƯỜNG ĐẠI HỌC SƯ PHẠM KỸ THUẬT THÀNH PHỐ HỒ CHÍ MINH KHOA CƠNG NGHỆ HĨA HỌC VÀ THỰC PHẨM BỘ MƠN CƠNG NGHỆ HĨA HỌC NHIỆM VỤ KHĨA LUẬN TỐT NGHIỆP MSSV: 15128076 Họ tên sinh viên: Nguyễn Minh Tuyền Ngành: Cơng nghệ Kỹ thuật Hóa học Chun ngành: Hóa hữu Tên khóa luận: Nghiên cứu khả ức chế tyrosynase từ phụ phẩm số loại bơ Việt Nam Nhiệm vụ khóa luận: - Tổng quan nguyên liệu nghiên cứu, tyrosynase - Điều chế cao trích 21 loại từ phụ phẩm bơ Việt Nam phương pháp ngâm dầm với dung mơi ethanol:H2O (7:3) - 2+ Sàng lọc hoạy tính ức chế tyrosynase khả khử Cu 21 mẫu cao Lựa chọn mẫu cao có hoạt tính tốt để khảo sát sơ thành phần hóa học, hoạt tính kháng khuẩn khả ức chế tế bào ung thư - Xử lí số liệu, đánh giá kết đưa đề xuất cho nghiên cứu sau Ngày giao nhiệm vụ khóa luận: 01/03/2019 Ngày hồn thành khóa luận: 20/07/2019 Họ tên người hướng dẫn: TS Phan Thị Anh Đào Nội dung hướng dẫn: Tồn khóa luận Nội dung u cầu khóa luận tốt nghiệp thơng qua Trưởng Bộ mơn Cơng nghệ Hóa học thán năm 2019 g NGƯỜI HƯỚNG DẪN Tp.HCM, ngày TRƯỞNG BỘ MÔN LỜI CẢM ƠN Lời cảm ơn em xin gửi đến gia đình, thầy cơ, bạn bè giúp đỡ tận tình, quan tâm đóng góp ý kiến trình thực luận văn tốt nghiệp, tạo nguồn động lực to lớn cho em hoàn thành luận văn tốt nghiệp Em xin chân thành cảm ơn thầy cô Trường Đại học Sư phạm Kỹ thuật TPHCM, đặc biệt thầy cô khoa Công nghệ Hóa học & Thực phẩm, thầy truyền kiến thức tảng kiến thức chuyên ngành lẫn nâng cao, cho em kỹ kinh nghiệm thực luận văn Em xin cảm ơn cô Ks Nguyễn Thị Mỹ Lệ chun viên phịng thí nghiệm mơn Cơng nghệ Kỹ thuật Hóa học, trường Đại học Sư phạm Kỹ thuật TPHCM, hướng dẫn tận tình tạo điều kiện tốt cho em sử dụng thiết bị, dụng cụ hóa chất liên quan suốt trình thực luận văn Em xin cảm ơn quý thầy/cô, anh/chị thuộc Trung tâm Sâm dược liệu TPHCM, Viện Pasteur TPHCM hỗ trợ em q trình thực khóa luận Đặc biệt, em xin gửi lời cảm ơn sâu sắc đến cô Ts Phan Thị Anh Đào, giảng viên môn Công nghệ Kỹ thuật Hóa học, trường Đại học Sư phạm Kỹ thuật TPHCM Cô người đồng hành em tồn khóa luận tốt nghiệp, bảo tận tình quan tâm tạo điều kiện tốt giúp em hồn thành khóa luận tốt nghiệp i LỜI CAM ĐOAN Tơi xin cam đoan tồn nội dung trình bày luận văn tốt nghiệp riêng tôi, tất tài liệu tham khảo trích dẫn đầy đủ xác Tơi xin cam đoan trình thực nghiệm thực quy trình kết theo thực nghiệm TPHCM, ngày ii 1208, 2002/01/01 2002 [56] Z Xiao, J Brose, S Schimo, S M Ackland, S La Fontaine, and A Wedd, Unification of the copper(I) binding affinities of the metallo-chaperones Atx1, Atox1, and related proteins: Detection probes and affinity standards 2011, pp 11047-55 [57] D Davis et al., Inhibition of the Human Immunodeficiency Virus-1 Protease and Human Immunodeficiency Virus-1 Replication by Bathocuproine Disulfonic Acid Cu1+ 1995, pp 127-34 [58] M T Fernandez, M L Mira, M H Florencio, and K R J J o I B Jennings, "Iron and copper chelation by flavonoids: an electrospray mass spectrometry study," vol 92, no 2, pp 105-111, 2002 [59] V Francesc, C Codina, J Bastida, M Galobardes, and M Serrano, Alkaloid Screening of Catalonia (Spain) Plants, I 1984 [60] M Faraz, M Kamalinejad, G Naysaneh, and H Reza Vahidipour, Phytochemical Screening of Some Species of Iranian Plants 2003 [61] N P K Phụng, Phương pháp cô lập hợp chất hữu Hồ Chí Minh: Nhà xuất Đại Học Quốc Gia Thành Phố Hồ Chí Minh, 2007 [62] G R Van Atta and J Guggolz, Forage Constituents, Detection of Saponins and Sapogenins on Paper Chromatograms by Liebermann-Burchard Reagent 1958 [63] T T K Tuyền, "Phân tích sơ thành phần hóa học Đinh Lăng (Polyscias fruticosa (L.) Harms) trồng An Giang," Khoa Dược - Điều Dưỡng, Đại học Tây Đô, Cần Thơ, 2017 [64] A Monks et al., "Feasibility of a High-Flux Anticancer Drug Screen Using a Diverse Panel of Cultured Human Tumor Cell Lines," JNCI: Journal of the National Cancer Institute, vol 83, no 11, pp 757-766, 1991 [65] T H Sơn (2018, 16/05) Nhiễm tụ cầu nguy hiểm nào? Available: http://vienyhocungdung.vn/nhiem-tu-cau-nguy-hiem-nhu-the-nao20160714120427791.htm [66] HealthlinkBC (2017, 10/2017) Tụ Cầu Khuẩn Staphylococcus Aureus Kháng Methicillin (MRSA) 54 [67] L Quirós, B García, J Merayo-Lloves, C Martín, I Alcalde, and F Vazquez, "INSIGHTS INTO MICROBE-MICROBE INTERACTIONS IN HUMAN MICROBIAL ECOSYSTEMS: STRATEGIES TO BE COMPETITIVE," 2016, pp 59-69 [68] S Wang, A K Singh, D Senapati, A Neely, H Yu, and P Ray, Rapid Colorimetric Identification and Targeted Photothermal Lysis of Salmonella Bacteria by Using Bioconjugated Oval‐Shaped Gold Nanoparticles 2010, pp 5600-6 [69] A W Bauer, W M M Kirby, J C Sherris, and M Turck, "Antibiotic Susceptibility Testing by a Standardized Single Disk Method," American Journal of Clinical Pathology, vol 45, no 4_ts, pp 493-496, 1966 [70] L Toledo, C J C r i f s Aguirre, and nutrition, "Enzymatic browning in avocado (Persea americana) revisited: History, advances, and future perspectives," vol 57, no 18, pp 3860-3872, 2017 [71] I Kubo and I J P M Kinst-Hori, "2-Hydroxy-4-methoxybenzaldehyde: a potent tyrosinase inhibitor from African medicinal plants," vol 65, no 01, pp 019-022, 1999 [72] D Kim et al., "Flavonoids as mushroom tyrosinase inhibitors: a fluorescence quenching study," vol 54, no 3, pp 935-941, 2006 [73] N L H H Lê Quỳnh Loan, Lê Văn Minh, Phùng Bảo Chi, Nguyễn Hoàng Dũng "Khảo sát hoạt tính ức chế tổng hợp hắc tố hoa hỊe (sophora japonica l.) dịng tế bào u hắc tố B16F10 ứng dụng mỹ phẩm " Tạp chí Khoa học Cơng nghệ Thực phẩm, vol 17, 2018, Art no 14-20 [74] N T M H Trần Phạm Tuệ Hưng, Quách Ngô Diễm Phương, "Nghiên cứu hoạt tính kháng khuẩn, kháng oxi hóa, ức chế tyrosinase cao ethanol chiết xuất từ Huỳnh Anh (Allamanda neriifolia)," Science & Technology Development, vol 17, 2014, Art no T3- 2014 [75] C Okunji et al., "Preparative isolation and identification of tyrosinase inhibitors from the seeds of Garcinia kola by high-speed counter-current chromatography," (in eng), Journal of chromatography A, vol 1151, no 1-2, pp 45-50, 2007/06// 2007 55 [76] Y.-A J J o O Jang and A Science, "Anti-inflammatory and whitening effects of ginseng complex as a cosmetic material," vol 35, no 2, pp 325-335, 2018 [77] S Idris, G Ndukwe, C J B J o P Gimba, and A Sciences, "Preliminary phytochemical screening and antimicrobial activity of seed extracts of Persea americana (avocado pear)," vol 2, no 1, pp 173-176, 2009 [78] A Rinayanti, M Radji, A Mun’im, and F J I J P T P Suyatna, "Screening angiotensin converting enzyme (ACE) inhibitor activity of antihypertensive medicinal plants from Indonesia," vol 4, pp 527-32, 2013 [79] N Duy Nhứt, B Minh Lý, N Mạnh Cường, and T J T p c H a H c Văn Sung, "Fucoidan từ Rong Nâu Sargassum Swartzii: phương pháp tách, hoạt tính gây độc tế bào ung thư nghiên cứu cấu trúc," vol 46, no 1, pp 52-56, 2008 [80] T H Dương et al., "Coumarin acridon alkaloid từ rễ Xáo tam phân (Paramignya trimera)," vol 32, no 4, 2016 [81] T A Vien, N T H Van, T T N Hang, N A Tuan, and P Q J T C S H Long, "Antifungal, antibacterial and cytotoxic activities of some Ardisia species from Vietnam," vol 38, no 1, pp 75-80, 2016 [82] A Yosie, M Effendy, T Sifzizul, M J I J o P S Habsah, and Research, "Antibacterial, radical-scavenging activities and cytotoxicity properties of Phaleria macrocarpa (scheff.) Boerl Leaves in hepg2 cell lines," vol 2, no 7, p 1693, 2011 [83] N Mekonnen, P Houghton, J J P R A I J D t P Timbrell, and T E o N P Derivatives, "The toxicity of extracts of plant parts of Moringa stenopetala in HEPG2 cells in vitro," vol 19, no 10, pp 870-875, 2005 [84] N Razali, S M Junit, A Ariffin, N S F Ramli, A A J B c Aziz, and a medicine, "Polyphenols from the extract and fraction of T indica seeds protected HepG2 cells against oxidative stress," vol 15, no 1, p 438, 2015 56 57 PHỤ LỤC Phụ lục 1: Kết phần trăm ức chế tyrosynase Nồng độ (µg/mL) Hạt sáp Sáp ngâm Mỡ ngâm Hạt mỡ Lụa booth Control= Vỏ booth 0.263 HH hạt HH hạt ngâm 034 ngâm Lụa 034 Vỏ 034 Lụa sáp Vỏ sáp Lụa mỡ Vỏ mỡ Control = 0.152 Hạt booth Booth ngâm Hạt 034 HH Vỏ HH Hạt + Lụa HH HVL 58 Phụ lục 2: Kết khả ức chế Acid Kojic ( Phụ lục 2) Control = Acid Phụ lục : Kết khảo sát thể tích CuCl2 V 300 A 0.047 TB 0.053 0.048 0.05 Phụ lục 4: Kết khảo sát thể tích BCDS V A TB 300 0.034 0.017 0.0255 0.032 59 Phụ lục 5: Kết khảo sát thể tích Catechine V 30 A 0.046 0.045 TB 0.0455 Phụ lục 6: Kết ức chế Cu STT 2+ mẫu cao trích Mẫu S-VL S-V S-H S-HN N-VL N-V N-H N-HN B-VL 19 B-V 11 B-H 12 B-HN 13 O-VL 14 O-V 15 O-H 16 O-HN 17 HH-HL 18 HH-HVL 19 HH-V 20 HH-H 21 HH-HN 61 Phụ lục 7: Kết kháng khuẩn mẫu cao N-H Vi sinh vật thử nghiệm Staphylococcus aureus Pseudomonas aeruginosa Nồng độ (µg/mL) Salmonella typhi Bacillus cereus Nồng độ (µg/mL) Ghi chú: 6mm: khơng có dấu hiệu kháng khuẩn Phụ lục 8: Phần trăm gây độc tế bào ung thư Hep-G2 mẫu cao N-H mẫu đối chiếu Chứng OD ΔOD OD ΔOD %I TB SEM C OD ΔOD %I TB SEM 62 Phụ lục: Hình ảnh tế bào quan sát kính hiển vi mẫu chứng (a), mẫu thử (b) mẫu đối chiếu (c) sau 48 (a) (b) (c) 63 64 65 ... Nghiên cứu khả ức chế tyrosynase từ phụ phẩm số loại bơ Việt Nam Nhiệm vụ khóa luận: - Tổng quan nguyên liệu nghiên cứu, tyrosynase - Điều chế cao trích 21 loại từ phụ phẩm bơ Việt Nam phương... cách khảo sát hoạt tính ức chế tyrosynase chúng Với đề tài : “ Nghiên cứu khả ức chế tyrosynase từ phụ phẩm số loại bơ Việt Nam? ??, mong muốn phát nguyên liệu vừa có khả ức chế tyrosynase, giúp ngăn... số loại bơ Việt Nam 1.3.3 Mục tiêu Đánh giá khả ức chế tyrosynase cao trích từ phụ phẩm ( vỏ, vỏ lụa, hạt, hạt ngâm ) bốn loại bơ Việt Nam ( bơ sáp, bơ nước, bơ booth, bơ 034) Từ việc khảo sát