D. Phương pháp nghiên cứu tác dụng chống viêm
4.Thử nghiệm gây dịch rỉ màng phổi trên chuột cống trắng già
Dùng chuột cống trắng già 180 – 260 g. Cho mỗi chuột uống 5 ml nước bằng ống thông vào dạ dày. Sau đó để chuột nằm ngửa, cạo lông ở bên sườn phải, ngay dưới chân trước. Dùng một bình hút ẩm, lót bông ở đáy, tẩm ether để gây mê chuột. Đồng thời chuẩn bị một cốc vại đáy lót bông tẩm ether để tiếp tục gây mê khi chuột hơi tỉnh trở lại. Chuẩn bị tinh dầu thông.
Sau khi cho chuột uống nước một giờ, tiến hành gây dịch rỉ màng phổi chuột như sau: cho chuột vào trong bình có ether để gây mê, khi chuột đã mê, lấy ra, đặt nằm nghiêng. Dùng kéo nhỏ đầu nhọn, rạch một nhát dài 1 cm ở chỗ đã cạo lông ở da và lớp cơ, để thấy rõ xương sườn. Tiêm 0,15 ml tinh dầu thông trong màng phổi vào khoảng giữa hai xương sườn, dùng kim tiêm dài 1,5 cm, loại kim to. Để bơm tiêm theo chiều thẳng đứng khi bơm tinh dầu thông. Đặt một kẹp nối liền hai mép của vết rạch.
Sau 2 giờ rưỡi kể từ khi tiêm tinh dầu thông trong màng phổi, giết chuột bằng cách cho ngửi cloroform trong bình kín. Sau đó để chuột nằm ngửa, mổ từ bụng lên, rạch hai
vết dọc hai bên trên cơ hoành. Dùng cặp phẫu tích kẹp vào xương ức và nâng lên cao. Dùng ống nhỏ giọt hút hết dịch rỉ ở giữa hai màng phổi. Khi hết, dựng nửa người chuột lên để dốc dịch rỉ xuống rồi hút lần nữa cho thật hết. Cho dịch rỉ vào ống nghiệm có chia độ, đo lượng dịch rỉ với mỗi chuột.
Trong trường hợp cần thiết, có thể định lượng histamin và serotonin trong dịch rỉ. Cho một giọt heparin vào ống nghiệm trước khi cho dịch rỉ vào ống. Ống nghiệm trong trường hợp này được ngâm trong nước đá cục.