D. Phương pháp nghiên cứu tác dụng chống viêm
3.Các phương pháp nghiên cứu trê nu hạt thực nghiệm
3.1. Thử nghiệm trên u hạt thực nghiệm gây bằng amian
Thí nghiệm được tiến hành trên chuột cống trắng. Một mẩu sợi amian đường kính mặt cắt khoảng 2mm, có trọng lượng 30 ± 1 mg được vê tròn và sấy tiệt khuẩn trong 2 giờ ở nhiệt độ 1600C trong tủ sấy. Chuột được gây mê bằng ether. Cạo sạch lông vùng lưng phía trên, dùng kéo phẫu thuật mắt bấm một lỗ chếch sang bên, luồn kéo vào hướng lên đầu, mở rộng 2 mũi kéo để tách kỹ da lưng ra khỏi cơ, rồi cấy dưới da, vào nơi đã bóc tách, viên sợi amian. Đặt kẹp hoặc khâu bằng chỉ để nối liền chỗ mổ ở lưng.
Thuốc được cho uống hoặc tiêm dưới da mỗi buổi sáng trong 5 ngày liên tục, lần đầu cho thuốc ngay sau khi cấy viên sợi amian. Chuột đối chứng được cho nước muối sinh lý với cùng thể tích. Chiều ngày thứ 5 kể từ ngày mổ (ngày mổ: ngày 1), giết chuột bằng cloroform, bóc tách u hạt và cân tươi ngay từng u hạt, khi cân, để trong một miếng giấy không hút ẩm. Tính trọng lượng thực sự của u hạt bằng cách trừ trọng lượng viên sợi amian (30 mg)
Khi mổ chuột, dùng dụng cụ đã được tiệt khuẩn bằng cách luộc trong nước đun sôi. Sau đó ngâm trong một cốc có chân đựng cồn 900 trong đó cho một lượng thuốc kháng sinh. Mỗi lần dùng xong lại đặt ngâm dụng cụ vào đó.
Tác dụng ức chế sự tạo u hạt được biểu thị bằng tỷ lệ % giảm trọng lượng trung bình các u hạt ở lô thử thuốc so với trọng lượng này ở lô đối chứng.
Lưu ý khi tiệt khuẩn viên sợi amian, gói nó trong miếng giấy không hút ẩm.
3.2. Thử nghiệm trên áp xe gây bằng tinh dầu thông
Việc tiêm tinh dầu thông cho chuột cống trắng dưới da gây nên một áp xe vô khuẩn. Áp xe được định hình rõ sau trung bình 8 ngày phát triển, khi đó có thể bóc tách lấy áp xe và cân. Trọng lượng áp xe cho phép đánh giá tầm quan trọng của phản ứng viêm.
Phương pháp này dễ áp dụng với điều kiện quan tâm thực hiện đúng một số quy định. Lượng tinh dầu thông tiêm dưới da không được quá 0,5 ml, nếu tiêm thể tích lớn hơn có thể gây hoại tử rộng ở da chung quanh chỗ tiêm. Cần chú ý nơi tiêm, nơi tiêm thích hợp nhất ở chuột cống trắng là vùng gian vai, ở khoảng chỏm của xương bả vai, ở vùng này, mô liên kết dưới da dày đặc hơn và được lót bởi một lớp đáng kể tế bào mỡ ngăn cản sự lan tỏa của chất kích ứng. Cuối cùng, cần phải tiêm tinh dầu tuyệt đối vô khuẩn.