D. Phương pháp nghiên cứu tác dụng chống viêm
1.Các phương pháp nghiên cứu trên phù thực nghiệm
1.1. Thử nghiệm trên phù chân chuột gây bằng kaolin
Dùng chuột cống trắng. Trước khi thí nghiệm, cho chuột uống nước 0,5 ml cho 100g thể trọng. Gây phù bàn chân chuột bằng cách tiêm dưới da ở bề mặt gan bàn chân sau chuột 0,1 ml dịch treo chứa 1g kaolin trong 10 ml dung dịch có 0,2% gôm adragan, được pha chế ngay trước khi tiêm, vì nếu để lâu, kaolin sẽ lắng xuống.
Đo thể tích bàn chân sau tới khớp cổ chân bằng một dụng cụ đo thể tích nước và 5 giờ sau khi tiêm kaolin (vào lúc phù chân chuột gây bằng kaolin ở mức độ cao nhất). Mức độ tăng thể tích chân chuột biểu thị mức độ viêm cấp và được tính theo công thức:
X % = (V5 - V0/V0) x 100
Trong đó: X % là tỷ lệ % tăng thể tích bàn chân chuột, V0 là thể tích bàn chân trước khi tiêm kaolin, V5 là thể tích bàn chân 5 giờ sau khi tiêm kaolin.
Thuốc thử nghiệm, nếu cho uống thì cho chuột uống 1 giờ trước khi tiêm kaolin, nếu tiêm thuốc thì tiêm 30 phút trước khi tiêm kaolin. Chuột đối chứng được cho dung dịch NaCl đẳng trương. Tác dụng ức chế phù được biểu thị bằng tỷ lệ % giảm mức độ tăng thể tích bàn chân của lô chuột thử thuốc so với mức độ tăng của lô đối chứng và được tính theo công thức:
Y % = MC - MT/MC x 100
Trong đó: Y % là tỷ lệ % giảm mức độ phù bàn chân chuột, MC là tỷ lệ % tăng thể tích bàn chân chuột lô đối chứng, và MT là tỷ lệ % tăng thể tích bàn chân chuột lô thử thuốc.
1.2. Thử nghiệm trên phù chân chuột gây bằng carragenin
Trong thử nghiệm này, gây phù bàn chân sau của chuột bằng cách tiêm dưới da ở bề mặt gan bàn chân sau của chuột 0,1 ml dịch treo 0,8 % carragenin, pha trong nước cất hay dung dịch NaCl đẳng trương. Cách pha dịch treo: cho carragenin vào một cối nhỏ, cho dần nước vào và nghiền bằng chầy cho phân tán đều. Để nửa giờ cho phồng lên rồi hãy dùng. Chỉ pha trước khi dùng, vì nếu để lâu carragenin sẽ lắng xuống.
Trong quá trình viêm gây bởi carragenin, mức độ viêm tối đa ở trong khoảng thời gian 3 - 4 giờ. Nên để đánh giá mức độ viêm, do thể tích bàn chân tới khớp cổ chân trước và 3 giờ sau khi tiêm carragenin. Trừ một số đặc điểm nêu trên, thử nghiệm trên phù chân chuột gây bằng carragenin được tiến hành tương tự như phù chân chuột gây bằng kaolin.
Carragenin (viscarin) là chất sulfopolygalactosid, chiết xuất từ Chondrus crispus, có tác dụng gây viêm.