Phương pháp

Một phần của tài liệu xây dựng quy trình sản xuất thử nghiệm lâm sàng màng sinh học từ cellulose vi khuẩn trị tổn thương mất da (Trang 27)

Phương pháp thử nghiệm tính kháng khuẩn của tinh dầu tràm trà Úc

Vi khun th nghim: sử dụng các chủng vi khuẩn thường hay gây nhiễm các vết bỏng, vết thương mất da như Pseudomonas aeruginosa, Staphylococcus aureus, Streptococcus hemolyticus, và chủng MRSA phân lập từ vết thương.

Vi khuẩn được phân lập trên mơi trường thích hợp 24 giờ (mơi trường thử nghiệm kháng sinh tiêu chuẩn 2 đối với thử nghiệm Staphylococcus aureus, Streptococcus hemolyticus và mơi trường thạch Pseudomonas đối với thử nghiệm Pseudomonas aeruginosa). Lấy 3 – 5 khĩm vi khuẩn cấy vào mơi trường canh thang dinh dưỡng cho thử nghiệm kháng sinh tiêu chuẩn 2, ủ ở 35 oC trong 6 giờ. Sử dụng vi khuẩn này pha một huyền trọc vi khuẩn cĩ mật độ vi khuẩn vào khoảng 1 x 106 – 2 x106 CFU/ ml.

Mơi trường thử nghiệm: mơi trường thạch Pseudomonas [4], mơi trường thạch dinh dưỡng cho thử nghiệm kháng sinh tiêu chuẩn No2.

Xác định MIC bằng phương pháp pha lỗng trong mơi trường rắn: tạo những bản thạch cĩ chứa chất thử nghiệm với nồng độ tăng dần. Chấm 1 µl vi khuẩn thử nghiệm với nồng độ 106 CFU / ml lên các bản thạch. Sau khi ấp ở 37 ºC trong 24 giờ, quan sát sự tăng trưởng của vi khuẩn bằng mắt thường. Nồng độ MIC là nồng độ thấp nhất ngăn cản sự tăng trưởng của vi khuẩn quan sát được bằng mắt thường.

d. Chỉ tiêu theo dõi

Tính kháng khuẩn của tinh dầu tràm trên các vi khuẩn thường gây nhiễm vết thương.

e. Sản phẩm nội dung cần đạt

Kết quả thử nghiệm tính kháng khuẩn của tinh dầu tràm trà Úc trên các vi khuẩn thử nghiệm.

Một phần của tài liệu xây dựng quy trình sản xuất thử nghiệm lâm sàng màng sinh học từ cellulose vi khuẩn trị tổn thương mất da (Trang 27)