- Montanide
3.5.1. Mức ñộ ñáp ứng miễn dịch theo thời gian
Sau khi lựa chọn ñược chất bổ trợ thích hợp ñể sản xuất văc xin nhũ dầu, chúng tôi tiến hành bố trí các lô gà thí nghiệm ñể khảo sát khả năng kích thích gây ñáp ứng miễn dịch chống bệnh tụ huyết trùng trên gà, so sánh với văc xin keo phèn ñã và ñang ñược sản xuất và lưu hành.
Theo ñó, chúng tôi bố trí 4 lô gà thí nghiệm ñồng nhất về giống, ñộ tuổi và trọng lượng:
Lô thứ nhất, gà ñược tiêm văc xin tụ huyết trùng nhũ dầu với chất bổ trợ Motanide ISA70M VG;
Lô thứ hai, gà ñược tiêm văc xin tụ huyết trùng keo phèn ñể so sánh;
Lô thứ ba, gà ñược tiên văc xin tụ huyết trùng nhũ dầu với chất bổ trợ Motanide ISA760 VG;
Lô thứ tư, gà không ñược tiêm văc xin tụ huyết trùng làm ñối chứng.
Tại các lô, văc xin ñược tiêm dưới da cổ, liều tiêm 0,5ml/con. Sau khi tiêm văc xin gà ñược ñịnh kỳ lấy máu, chắt huyết thanh.
ðể so sánh ñáp ứng miễn dịch, xác ñịnh ñặc tính sinh miễn dịch của kháng nguyên Tụ huyết trùng trong bổ trợ nhũ dầu mới, chúng tôi tiến hành kiểm tra hiệu giá kháng thể
bằng phản ứng IHA, sử dụng cùng kháng nguyên gốc và tính toán chỉ số miễn dịch nhóm tại các thời ñiểm ñược xác ñịnh trước (21 ngày, 28 ngày, 35 ngày, 60 ngày, 90 ngày, 120 ngày và 150 ngày).
Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sỹ khoa học Nông nghiệp ……… 51 Bảng 3.10. Chỉ số miễn dịch của gà ñối với văc xin Montanide ISA 70M VG Keo phèn Al(OH)3 Gel Montanide ISA 760VG ðối chứng (không tiêm) Thời gian (ngày) Số gà K.tra Chỉ số M. dịch Số gà K.tra Chỉ số M. dịch Số gà K.tra Chỉ số M. dịch Số gà K.tra Chỉ số M. dịch 21 ngày 20 7,25 10 10,40 20 8,15 10 1,70 28 ngày 20 9,75 10 11,20 20 9,45 10 1,20 35 ngày 20 12,35 10 11,40 20 11,15 10 1,30 60 ngày 20 12,80 10 11,90 20 12,70 10 2,00 90 ngày 20 12,20 10 10,30 20 12,00 10 1,60 120 ngày 20 12,35 10 8,90 20 12,20 10 1,60 150 ngày 20 12,85 10 6,40 20 12,40 10 1,20 Trung bình 20 11,36 10 10,07 20 11,15 10 1,51
Qua bảng 3.10 chúng tôi nhận thấy: Tại thời ñiểm 21 ngày sau khi ñược tiêm văc xin, tất cả các lô gà thí nghiệm ñều ñược xác ñịnh có kháng thể kháng
P.multocida trong huyết thanh. Tuy nhiên, lô gà ñược tiêm văc xin bổ trợ keo phèn có chỉ số miễn dịch cao nhất ñạt 10,40. Hai lô gà ñược tiêm văc xin nhũ dầu cho chỉ số miễn dịch thấp hơn. Lô ñối chứng không ñược tiêm văc xin chỉ có 4/10 mẫu dương tính với phản ứng IHA với chỉ số miễn dịch thấp (1,70). ðiều ñó cho thấy, gà ñược tiêm văc xin nhũ dầu có ñáp ứng miễn dịch chậm hơn văc xin keo phèn.
Tại thời ñiểm 28 ngày, chỉ số miễn dịch nhóm tại các lô gà thí nghiệm tiếp tục tăng lên. Lô có chỉ số miễn dịch cao nhất vẫn là lô sử dụng văc xin keo phèn (11,20), hai lô sử
Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sỹ khoa học Nông nghiệp ……… 52 dụng văc xin nhũ dầu cho chỉ số miến dịch thấp hơn (9,75 và 9,45). Lô ñối chứng chỉ số
miễn dịch ở mức 1,20. Kết quả này một lần nữa cho thấy ñáp ứng miễn dịch tại các lô gà tiêm văc xin nhũ dầu ở thời ñiểm 28 ngày có thể còn chưa ñầy ñủ.
ðến thời ñiểm 35 ngày, chỉ số miễn dịch xác ñịnh ñược ở cả 3 lô gà thí nghiệm ñều
ñạt ngưỡng caọ ðặc biệt, tại 2 lô gà sử dụng văc xin nhũ dầu chỉ số miễn dịch tăng lên rõ rệt (12,35 và 11,15). Trong khi ñó, lô sử dụng văc xin keo kèn có chỉ số miễn dịch ít biến
ñộng so với chỉ số miễn dịch xác ñịnh ñược tại thời ñiểm 28 ngàỵ Có thể thấy, ñáp ứng miễn dịch ñối với văc xin tại 3 lô gà thí nghiệm tại thời ñiểm này là tương ñối ñồng ñều và ñạt ngưỡng caọ
Khảo sát tại thời ñiểm 2 tháng sau khi tiêm văc xin chúng tôi ghi nhận ñược: Chỉ số
miễn dịch tại cả 3 lô gà thí nghiệm ñều ñạt 11,90 – 12,80, duy trì hàm lượng kháng thể
khá cao so với ñợt khảo sát trước ñó. ðiều ñó cho thấy, các loại văc xin ñều gây ñược ñáp
ứng miễn dịch tốt ñối với gà tính ñến thời ñiểm 60 ngày sau khi tiêm. ðặc biệt, tại 2 lô gà sử dụng văc xin nhũ dầu, chỉ số miễn dịch tại các nhóm này tiếp tục tăng lên trong khi lô dùng văc xin keo phèn không có sự khác biệt rõ rệt so với thời ñiểm khảo sát trước ñó.
Tiếp tục khảo sát chỉ số miễn dịch theo nhóm tại các lô gà thí nghiệm tại thời ñiểm 3 tháng sau khi tiêm văc xin chúng tôi nhận thấy lô gà sử dụng văc xin keo phèn chỉ số
miễn dịch bắt ñầu giảm ñi, ñạt 10,30 ñiểm, trong khi 2 lô gà sử dụng văc xin nhũ dầu có chỉ số miễn dịch duy trì trên 12,00 ñiểm. ðiều ñó theo nhận ñịnh của chúng tôi, có thể do
ñáp ứng miễn dịch của gà ñối với văc xin keo phèn ñã bị hạn chếñi nhiềụ Trong khi ñáp
ứng miễn dịch ñối với văc xin nhũ dầu vẫn ñược duy trì và ổn ñịnh, kháng nguyên tiếp tục ñược giải phóng, kích thích cơ thể sản sinh kháng thể kháng vi khuẩn tụ huyết trùng.
ðể khẳng ñịnh chắc chắn cho nhận ñịnh trên, chúng tôi tiếp tục lấy mẫu huyết thanh làm phản ứng xác ñịnh chỉ số miễn dịch của các lô gà tại thời ñiểm 4 tháng và 5 tháng sau tiêm. Kết quả thu ñược ñúng như nhận ñịnh của chúng tôi, chỉ số miễn dịch của lô gà
ñược tiêm văc xin keo phèn giảm ñi rõ rệt còn 8,90 tại thời ñiểm 120 ngày và 6,40 tại thời
ñiểm 150 ngàỵ Trong khi ñó, kết quả kiểm tra chỉ số miễn dịch của 2 lô sử dụng vắc xin nhũ dầu cho thấy: chỉ số miễn dịch trung bình của nhóm ñạt trên 12,40 sau 5 tháng tiêm văc xin.
Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sỹ khoa học Nông nghiệp ……… 53 Kết quả theo dõi ñáp ứng miễn dịch tại các thời ñiểm khác nhau sau khi tiêm vắc xin
ñược chúng tôi minh họa chi tiết qua biểu ñồ tại hình 3.03 như sau:
Hình 3.03. Biểu ñồ biến ñộng chỉ số miễn dịch nhóm ở các lô gà tiêm văc xin
Từ kết quả phân tích trên ñây chúng tôi nhận ñịnh văc xin nhũ dầu cho ñáp ứng miễn dịch chậm hơn văc xin keo phèn. Cụ thể là phải sau 35 ngày hiệu giá kháng thể mới
ổn ñịnh ở mức cao trong khi văc xin keo phèn chỉ sau 21-28 ngàỵ Tuy nhiên, văc xin nhũ
dầu cho ñáp ứng miễn dịch ổn ñịnh và bền vững hơn văc xin keo phèn, ñáp ứng miễn dịch của gia cầm ñối với văc xin keo phèn chỉ hiệu quả tới 90 ngày sau khi tiêm, sau ñó giảm dần . Trong khi ñó, ñáp ứng miễn dịch với văc xin nhũ dầu có hiệu quả tới trên 5 tháng sau khi gia cầm ñược tiêm văc xin vẫn có ñáp ứng miễn dịch tốt, hiệu giá kháng thể ñược duy trì ở ngưỡng caọ ðiều này có ñược theo nhận ñịnh của chúng tôi có thể do cơ
chế hình thành hạt nhũ bao bọc yếu tố kháng nguyên. Kháng nguyên ở văc xin nhũ dầu khi tiêm, sẽñược giải phóng từ từñể tiếp xúc với hệ thống miễn dịch của cơ thể. ðồng thời, văc xin ñược giữ lại trong thời gian dài tại vị trí tiêm mà không bị cơ thể hấp thụ, nên thời gian duy trì khả năng miễn dịch ở văc xin nhũ dầu ñược cải thiện rõ rệt.