- Montanide
3.5.1. Mức ñộ ñáp ứng miễn dịch theo thời gian
Sau khi lựa chọn được chất bổ trợ thích hợp ñể sản xuất văc xin nhũ dầu, chúng tôi tiến hành bố trí các lơ gà thí nghiệm để khảo sát khả năng kích thích gây đáp ứng miễn dịch chống bệnh tụ huyết trùng trên gà, so sánh với văc xin keo phèn ñã và ñang ñược sản xuất và lưu hành.
Theo đó, chúng tơi bố trí 4 lơ gà thí nghiệm đồng nhất về giống, độ tuổi và trọng
lượng:
Lơ thứ nhất, gà được tiêm văc xin tụ huyết trùng nhũ dầu với chất bổ trợ Motanide ISA70M VG;
Lơ thứ hai, gà được tiêm văc xin tụ huyết trùng keo phèn ñể so sánh;
Lơ thứ ba, gà được tiên văc xin tụ huyết trùng nhũ dầu với chất bổ trợ Motanide
ISA760 VG;
Lô thứ tư, gà khơng được tiêm văc xin tụ huyết trùng làm đối chứng.
Tại các lơ, văc xin ñược tiêm dưới da cổ, liều tiêm 0,5ml/con. Sau khi tiêm văc xin gà ñược ñịnh kỳ lấy máu, chắt huyết thanh.
ðể so sánh ñáp ứng miễn dịch, xác ñịnh ñặc tính sinh miễn dịch của kháng nguyên
Tụ huyết trùng trong bổ trợ nhũ dầu mới, chúng tôi tiến hành kiểm tra hiệu giá kháng thể bằng phản ứng IHA, sử dụng cùng kháng nguyên gốc và tính tốn chỉ số miễn dịch nhóm tại các thời điểm ñược xác ñịnh trước (21 ngày, 28 ngày, 35 ngày, 60 ngày, 90 ngày, 120 ngày và 150 ngày).
Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sỹ khoa học Nông nghiệp ……………………… 51
Bảng 3.10. Chỉ số miễn dịch của gà ñối với văc xin Montanide ISA 70M VG Keo phèn Al(OH)3 Gel Montanide ISA 760VG ðối chứng (không tiêm) Thời gian (ngày) Số gà K.tra Chỉ số M. dịch Số gà K.tra Chỉ số M. dịch Số gà K.tra Chỉ số M. dịch Số gà K.tra Chỉ số M. dịch 21 ngày 20 7,25 10 10,40 20 8,15 10 1,70 28 ngày 20 9,75 10 11,20 20 9,45 10 1,20 35 ngày 20 12,35 10 11,40 20 11,15 10 1,30 60 ngày 20 12,80 10 11,90 20 12,70 10 2,00 90 ngày 20 12,20 10 10,30 20 12,00 10 1,60 120 ngày 20 12,35 10 8,90 20 12,20 10 1,60 150 ngày 20 12,85 10 6,40 20 12,40 10 1,20 Trung bình 20 11,36 10 10,07 20 11,15 10 1,51
Qua bảng 3.10 chúng tôi nhận thấy: Tại thời ñiểm 21 ngày sau khi ñược tiêm văc xin, tất cả các lô gà thí nghiệm đều được xác định có kháng thể kháng
P.multocida trong huyết thanh. Tuy nhiên, lơ gà được tiêm văc xin bổ trợ keo
phèn có chỉ số miễn dịch cao nhất ñạt 10,40. Hai lơ gà được tiêm văc xin nhũ dầu cho chỉ số miễn dịch thấp hơn. Lô ñối chứng khơng được tiêm văc xin chỉ có
4/10 mẫu dương tính với phản ứng IHA với chỉ số miễn dịch thấp (1,70). ðiều đó cho thấy, gà được tiêm văc xin nhũ dầu có đáp ứng miễn dịch chậm hơn văc xin keo phèn.
Tại thời ñiểm 28 ngày, chỉ số miễn dịch nhóm tại các lơ gà thí nghiệm tiếp tục tăng lên. Lơ có chỉ số miễn dịch cao nhất vẫn là lô sử dụng văc xin keo phèn (11,20), hai lô sử
Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sỹ khoa học Nông nghiệp ……………………… 52 dụng văc xin nhũ dầu cho chỉ số miến dịch thấp hơn (9,75 và 9,45). Lơ đối chứng chỉ số miễn dịch ở mức 1,20. Kết quả này một lần nữa cho thấy ñáp ứng miễn dịch tại các lô gà tiêm văc xin nhũ dầu ở thời điểm 28 ngày có thể cịn chưa đầy đủ.
ðến thời ñiểm 35 ngày, chỉ số miễn dịch xác ñịnh ñược ở cả 3 lơ gà thí nghiệm ñều ñạt ngưỡng caọ ðặc biệt, tại 2 lô gà sử dụng văc xin nhũ dầu chỉ số miễn dịch tăng lên rõ
rệt (12,35 và 11,15). Trong khi đó, lơ sử dụng văc xin keo kèn có chỉ số miễn dịch ít biến
ñộng so với chỉ số miễn dịch xác ñịnh ñược tại thời ñiểm 28 ngàỵ Có thể thấy, ñáp ứng
miễn dịch ñối với văc xin tại 3 lơ gà thí nghiệm tại thời điểm này là tương ñối ñồng ñều và ñạt ngưỡng caọ
Khảo sát tại thời ñiểm 2 tháng sau khi tiêm văc xin chúng tơi ghi nhận được: Chỉ số miễn dịch tại cả 3 lơ gà thí nghiệm đều đạt 11,90 – 12,80, duy trì hàm lượng kháng thể khá cao so với ñợt khảo sát trước đó. ðiều đó cho thấy, các loại văc xin ñều gây ñược ñáp
ứng miễn dịch tốt đối với gà tính đến thời điểm 60 ngày sau khi tiêm. ðặc biệt, tại 2 lô gà
sử dụng văc xin nhũ dầu, chỉ số miễn dịch tại các nhóm này tiếp tục tăng lên trong khi lơ
dùng văc xin keo phèn khơng có sự khác biệt rõ rệt so với thời điểm khảo sát trước đó. Tiếp tục khảo sát chỉ số miễn dịch theo nhóm tại các lơ gà thí nghiệm tại thời điểm 3 tháng sau khi tiêm văc xin chúng tôi nhận thấy lô gà sử dụng văc xin keo phèn chỉ số miễn dịch bắt ñầu giảm ñi, ñạt 10,30 ñiểm, trong khi 2 lô gà sử dụng văc xin nhũ dầu có chỉ số miễn dịch duy trì trên 12,00 điểm. ðiều đó theo nhận định của chúng tơi, có thể do
ñáp ứng miễn dịch của gà ñối với văc xin keo phèn ñã bị hạn chế ñi nhiềụ Trong khi ñáp ứng miễn dịch ñối với văc xin nhũ dầu vẫn được duy trì và ổn định, kháng ngun tiếp tục được giải phóng, kích thích cơ thể sản sinh kháng thể kháng vi khuẩn tụ huyết trùng.
ðể khẳng ñịnh chắc chắn cho nhận ñịnh trên, chúng tôi tiếp tục lấy mẫu huyết thanh làm phản ứng xác định chỉ số miễn dịch của các lơ gà tại thời ñiểm 4 tháng và 5 tháng sau tiêm. Kết quả thu ñược ñúng như nhận ñịnh của chúng tơi, chỉ số miễn dịch của lơ gà
được tiêm văc xin keo phèn giảm đi rõ rệt cịn 8,90 tại thời ñiểm 120 ngày và 6,40 tại thời ñiểm 150 ngàỵ Trong khi đó, kết quả kiểm tra chỉ số miễn dịch của 2 lô sử dụng vắc xin
nhũ dầu cho thấy: chỉ số miễn dịch trung bình của nhóm đạt trên 12,40 sau 5 tháng tiêm văc xin.
Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sỹ khoa học Nông nghiệp ……………………… 53 Kết quả theo dõi ñáp ứng miễn dịch tại các thời ñiểm khác nhau sau khi tiêm vắc xin ñược chúng tơi minh họa chi tiết qua biểu đồ tại hình 3.03 như sau:
Hình 3.03. Biểu đồ biến động chỉ số miễn dịch nhóm ở các lơ gà tiêm văc xin
Từ kết quả phân tích trên đây chúng tơi nhận định văc xin nhũ dầu cho đáp ứng
miễn dịch chậm hơn văc xin keo phèn. Cụ thể là phải sau 35 ngày hiệu giá kháng thể mới ổn ñịnh ở mức cao trong khi văc xin keo phèn chỉ sau 21-28 ngàỵ Tuy nhiên, văc xin nhũ
dầu cho ñáp ứng miễn dịch ổn ñịnh và bền vững hơn văc xin keo phèn, ñáp ứng miễn dịch của gia cầm ñối với văc xin keo phèn chỉ hiệu quả tới 90 ngày sau khi tiêm, sau đó
giảm dần . Trong khi đó, đáp ứng miễn dịch với văc xin nhũ dầu có hiệu quả tới trên 5 tháng sau khi gia cầm ñược tiêm văc xin vẫn có đáp ứng miễn dịch tốt, hiệu giá kháng thể được duy trì ở ngưỡng caọ ðiều này có ñược theo nhận ñịnh của chúng tơi có thể do cơ
chế hình thành hạt nhũ bao bọc yếu tố kháng nguyên. Kháng nguyên ở văc xin nhũ dầu khi tiêm, sẽ được giải phóng từ từ để tiếp xúc với hệ thống miễn dịch của cơ thể. ðồng
thời, văc xin ñược giữ lại trong thời gian dài tại vị trí tiêm mà khơng bị cơ thể hấp thụ, nên thời gian duy trì khả năng miễn dịch ở văc xin nhũ dầu ñược cải thiện rõ rệt.