- Montanide
3.5.2. Kết quả giám sát ñộ dài miễn dịch
để có nhận định chắnh xác nhất về ựộ dài miễn dịch mà văc xin nhũ dầu tạo ra trên ựối tượng tiêm phịng. Chúng tơi tiến hành lấy mẫu máu trên các lơ gà thắ nghiệm tại các
thời ựiểm khác nhau, kiểm tra hiệu giá kháng thể trong huyết thanh, xác ựịnh tỷ lệ bảo hộ thông qua hiệu giá ngưng kết gián tiếp hồng cầu bằng phản ứng IHẠ
Trường đại học Nông nghiệp Hà Nội Ờ Luận văn thạc sỹ khoa học Nông nghiệp ẦẦẦẦẦẦẦẦẦ 54 Bằng việc kiểm tra hiệu giá kháng thể gây ngưng kết hồng cầu của các mẫu huyết thanh chắt từ máu gà ựược bảo hộ. Chúng tôi nhận thấy: những mẫu huyết thanh có hiệu giá IHA ≥ 1/16 thì có khả năng bảo hộ ựối với vi khuẩn tụ huyết trùng gia cầm cường ựộc (P.multocida N41) tới liều gây nhiễm 10LD50. Chắnh vì vậy, chúng tơi ựã xác ựịnh tỷ lệ bảo hộ tại các thời ựiểm khác nhau thơng qua tỷ lệ mẫu có hiệu giá IHA ≥ 1/16 là cơ sở
ựánh giá ựộ dài miễn dịch mà văc xin tạo ra trên ựối tượng tiêm phịng. Kết quả ựược trình bày tại bảng 3.11.
Bảng 3.11. độ dài miễn dịch của văc xin tụ huyết trùng nhũ dầu Montanide
ISA 70M VG Al(OH)3 Gel Keo phèn Montanide ISA 760 Thời gian Số gà K.tra Số mẫu [IHA≥1/16] Tỷ lệ (%) Số gà K.tra Số mẫu [IHA≥1/16] Tỷ lệ (%) Số gà K.tra Số mẫu [IHA≥1/16] Tỷ lệ (%) 28 ngày 20 12 60 10 8 80 20 10 50 35 ngày 20 17 85 10 9 90 20 16 80 2 tháng 20 18 90 10 8 80 20 17 85 3 tháng 20 17 85 10 7 70 20 18 90 4 tháng 20 18 90 10 5 50 20 18 90 5 tháng 20 19 95 10 3 30 20 18 90 6 tháng 20 17 85 10 3 30 20 17 85 9 tháng 20 15 75 - - - 20 15 75 Kết quả theo dõi của chúng tôi cho thấy: Từ 35 ngày sau khi gà ựược tiêm
văc xin, tỷ lệ bảo hộ tại 2 lơ tiêm văc xin nhũ dầu ln duy trì 80-90% tới thời
ựiểm kiểm tra 6 tháng sau khi tiêm văc xin. Trong khi ựó, lơ sử dụng văc xin keo
Trường đại học Nông nghiệp Hà Nội Ờ Luận văn thạc sỹ khoa học Nông nghiệp ẦẦẦẦẦẦẦẦẦ 55 văc xin tỷ lệ mẫu có hiệu giá IHA ≥ 1/16 chỉ còn ựạt 70%. Như vậy, thời gian
bảo hộ ở các lô gà sử dụng vắc xin nhũ dầu ựã ựược cải thiện rõ rệt so với lô sử dụng văc xin keo phèn.
đợt khảo sát cuối cùng của chúng tôi tiến hành tại thời ựiểm 9 tháng sau khi tiêm văc
xin ựối với 2 lô gà sử dụng văc xin nhũ dầu cho thấy: Tỷ lệ mẫu huyết thanh cho hiệu giá
IHA ≥ 1/16 giảm xuống cịn 75% với cả 2 lơ văc xin. Tuy nhiên, theo nhận ựịnh của
chúng tôi tỷ lệ bảo hộ ựạt ựược như vậy vẫn là tương ựối tốt và chưa phải là thời ựiểm
thắch hợp ựể tiêm văc xin nhắc lại lần thứ haị
Tổng hợp quá trình giám sát tỷ lệ bảo hộ ựối với P.multocida N41 của các lô gà ựược tiêm văc xin tụ huyết trùng với chất bổ trợ khác nhau theo thời gian ựược chúng tôi thể hiện qua biểu ựồ tại hình 3.04 như sau:
Hình 3.04. Biểu ựồ biến ựộng tỷ lệ bảo hộ theo thời gian
Kết quả khảo sát trên ựây của chúng tôi một lần nữa khẳng ựịnh văc xin tụ huyết
trùng gia cầm với chất bổ trợ nhũ dầu cho hiệu quả ựáp ứng miễn dịch cao và bền vững, thể hiện nhiều ưu ựiểm vượt trội hơn so với văc xin keo phèn. đặc biệt, văc xin nhũ dầu
ựã cải thiện ựáng kể thời gian bảo hộ hay ựộ dài miễn dịch vốn là ựiểm hạn chế của văc
Trường đại học Nông nghiệp Hà Nội Ờ Luận văn thạc sỹ khoa học Nông nghiệp ẦẦẦẦẦẦẦẦẦ 56
4. KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ
1. Kết luận
Từ các kết quả thu ựược trên ựây, trong phạm vi ựề tài có thể rút ra những kết luận sau:
1. Giống gốc P.multocida N41 bảo quản tại ựơn vị là ựạt tiêu chuẩn giám ựịnh dùng trong sản xuất vắc xin
2. đã tối ưu hóa được ựiều kiện ni cấy P.multocida N41, trong ựó:
Thành phần mơi trường phối hợp theo công thức III với nguyên liệu do hãng
Himedia Laboratories (Ấn độ) cung cấp cho kết quả sinh khối cao nhất.
điều kiên lên men: Hàm lượng oxy hòa tan (DO) tối ưu là 80% lên men trong 7 giờ
(Hai ựiều kiện tối ưu này cho phép lên men sinh khối ựạt 30,5 tỷ CFU/ml canh
khuẩn, một chỉ tiêu có ý nghĩa rất quan trọng trong nâng cao chất lượng và hiệu quả kinh tế)
3. đã lựa chọn ựược 2 loại nhũ dầu Montanide ISA 70M VG và Montanide ISA 760 VG phù hợp với mục đắch chế tạo văc xin tụ huyết trùng gia cầm, cụ thể: ổn ựịnh ựặc tắnh sinh miễn dịch cao và kéo dài
4. Các lô vắc xin ựược sản xuất với hai loại nhũ dầu ựã lựa chọn ựảm bảo an toàn tuyệt ựối, hiệu lực bảo hộ cao xác ựịnh bằng phương pháp thử thách cường ựộc
5. Vắc xin sản xuất có độ dài miễn dịch vượt trội so với vắc xin keo phèn hiện ựang ựược sản xuất và lưu hành.
2. Kiến nghị
Trong phạm vi có hạn của ựề tài, kết quả ựã ựạt ựược cần tiếp tục nghiên cứu và hồn chỉnh hơn:
1. Nâng quy mơ sản xuất vắc xin THT gia cầm phù hợp với ựiều kiện của ựơn vị. Lặp lại quy trình sản xuất ựể ựánh giá tắnh ổn ựịnh của giải pháp công nghệ ở quy mô sản xuất.
2. Cho phép thử nghiệm vắc xin tại thực ựịa để hồn chỉnh quy trình đánh giá cho việc cơng nhận giải pháp công nghệ thay thế.
Trường đại học Nông nghiệp Hà Nội Ờ Luận văn thạc sỹ khoa học Nông nghiệp ẦẦẦẦẦẦẦẦẦ 57