2. PHƯƠNG PHÁP THỬ
3.2.4. Xõy dựng tiờu chuẩn cơ sở cao đặc sõm Ngọc Linh sinh khố
3.2.4.1. Kết quả phõn tớch cỏc chỉ tiờu chất lượng của SNL sinh khối
* Tớnh chất: Khối mềm, màu nõu đen đồng nhất, khụng mốc, mựi thơm đặc biệt, vị mặn, hơi đắng nhẹ.
* Độ ẩm: Cõn chớnh xỏc 10 g mẫu thử, tiến hành thử theo DĐVN III, phụ lục 9.6. Tiến hành phõn tớch 6 mẫu (n = 6) thu được kết quả về độ ẩm trung bỡnh 19 ± 1%.
* Tro toàn phần: Lấy 2 g chế phẩm, tiến hành theo phương phỏp trong DĐVN III, phụ lục 7.6 (nung ở 5000C). Kết quả về tỷ lệ tro toàn phần: 1,50 ± 0,41%.
* Cắn khụng tan: Tiến hành như phương phỏp đó nờu ở mục 2.2.14, kết quả cho thấy hàm lượng cắn khụng tan: 0,15 ± 0,02% (n = 6).
* Định tớnh:
- Sõm Ngọc Linh sinh khối:
Tiến hành theo phương phỏp sắc ký lớp mỏng đó nờu cho kết quả ở hỡnh 3.10.
a b
Hỡnh 3.10. Sắc ký đồ của mẫu SNL tự nhiờn (b) và cao đặc SNL sinh khối (a)
Trờn sắc ký đồ cho thấy: cỏc vết xuất hiện trờn sắc ký đồ mẫu SNL tự nhiờn cũng thấy xuất hiện trờn SNL sinh khối với cỏc giỏ trị Rf tương tự nhau.
116 - Ginsenosid Rg1, Rb1 và Rd:
Tiến hành theo phương phỏp sắc ký lỏng hiệu năng cao đó nờu cho kết quả như sau (hỡnh 3.11).
Hỡnh 3.11. Sắc ký đồ HPLC của cỏc ginsenosid chuẩn (a) và cao đặc SNL sinh khối (b)
Trờn sắc ký đồ HPLC cho thấy: trong mẫu thử cao đặc SNL sinh khối cú cỏc pớc trựng thời gian lưu với cỏc pớc của ginsenosid Rg1, Rb1 và Rd trong mẫu chuẩn. Điều này chứng tỏ trong cao đặc SNL sinh khối cú cỏc hoạt chất ginsenosid Rg1, Rb1 và Rd.
* Định lượng:
Kết quả định lượng cỏc ginsenosid Rb1, Rg1 và Rd trong mẫu cao đặc sõm sinh khối được trỡnh bày ở bảng 3.37.
Bảng 3.37. Hàm lượng Rb1, Rg1 và Rd trong mẫu sõm sinh khối
Mẫu Rg1 (%) Rb1 (%) Rd (%) Tổng (%) 1 1,84 2,49 1,14 5,47 2 1,83 2,42 1,16 5,41 3 1,87 2,45 1,19 5,51 4 1,81 2,51 1,17 5,49 5 1,79 2,41 1,18 5,38 6 1,82 2,48 1,17 5,47 X ± SD 1,83 ± 0,03 2,46 ± 0,04 1,17 ± 0,02 5,46 ± 0,05 a b
117
Hàm lượng tổng 3 ginsenosid trong SNL sinh khối là 5,46 ± 0,05 g/100 g cao đặc SNL sinh khối tớnh theo cao khụ tuyệt đối, trong đú hàm lượng cỏc ginsenosid: Rg1 = 1,83 ± 0,03; Rb1 = 2,46 ± 0,04; Rd = 1,17 ± 0,02. Hàm lượng cỏc ginsenosid Rg1; Rb1; Rd trong mẫu cao đặc SNL sinh khối cao hơn nguyờn liệu SNL sinh khối khoảng 5 lần. Như vậy, nhờ quy trỡnh điều chế cao đặc SNL sinh khối mà hàm lượng hoạt chất trong chế phẩm cao đặc đó tăng được 5 lần, điều này giỳp bào chế cỏc dạng thuốc cú hàm lượng hoạt chất cao.
* Độ nhiễm khuẩn:
Tiến hành thử độ nhiễm khuẩn của 6 mẫu theo phương phỏp đó nờu, kết quả được trỡnh bày ở bảng 3.38.
Bảng 3.38. Kết quảđo độ nhiễm khuẩn của cao đặc sõm SNL sinh khối
Tổng số vi sinh vật/1g chế phẩm Mẫu Vi khuẩn hiếu khớ Entero- bacteria Nấm mục (số KL/lm) Vi khuõn gõy bệnh 1 220 154 18 Khụng cú 2 234 120 20 Khụng cú 3 268 135 16 Khụng cú 4 224 168 22 Khụng cú 5 215 147 15 Khụng cú 6 279 146 21 Khụng cú X ± SD 240 ± 27 145 ± 16 19 ± 3 Khụng cú Từ bảng 3.38, ta thấy, cỏc mẫu thử độ nhiễm khuẩn đều đạt yờu cầu của Dược điển.
Từ cỏc kết quả phõn tớch ở trờn chỳng tụi đưa ra tiờu chuẩn cơ sở của cao đặc SNL sinh khối và TCCS này đó được thẩm định tại Viện Kiểm nghiệm thuốc Trung ương.
Cao SNL sinh khối là dạng bỏn thành phẩm, được điều chế từ SNL sinh khối (Panax vietnamesis Ha et Grushv, họ Nhõn sõm Araliace), theo phương phỏp thớch hợp để cú hoạt chất ổn định.
1. YấU CẦU KỸ THUẬT 1.1. Cụng thức điều chế cho 100 g cao: