CHƢƠNG 2 : VẬT LIỆU VÀ PHƢƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU
2.2. PHƢƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU
2.2.1. Cách tiếp cận các nội dung nghiên cứu đề tài
Nghiên cứu chiết tách và cấu trúc của polysaccharide nĩi chung và của pectin nĩi riêng là hƣớng nghiên cứu tƣơng đối khĩ trên thế giới và cịn mới ở Việt Nam, chỉ đƣợc quan tâm nghiên cứu khoảng hơn thập kỷ trở lại đây. Do vậy, hƣớng tiếp cận sẽ là thƣờng xuyên cập nhật các kết quả nghiên cứu mới trên thế giới, kế thừa các kết quả nghiên cứu của các chuyên gia trong nƣớc và nƣớc ngồi về nghiên cứu polysaccharide biển nĩi chung và của pectin nĩi
riêng. Sử dụng các phƣơng pháp nghiên cứu hiện đại ứng dụng phù hợp vào điều kiện khoa học kỹ thuật thực tiễn ở nƣớc ta để tiến hành triển khai cĩ hiệu quả các nội dung nghiên cứu của đề tài.
Sơ đồ các nội dung nghiên cứu của đề tài đƣợc trình bày (Hình 2.2). Cỏ biển sau khi thu hoạch đƣợc tiến hành xử lý sơ bộ (ngâm trong ethanol 98 độ, phơi khơ). Mẫu cỏ biển sau khi xử lý đƣợc tiến hành tách chiết pectin bằng dung dịch amonium oxalate (theo các phƣơng pháp nghiên cứu trƣớc đây). Tiếp theo, các chỉ tiêu chất lƣợng và thành phần pectin đƣợc xác định bao gồm: thành phần hĩa học của pectin: hàm lƣợng tổng carbohydrate; hàm lƣợng sulfate; hàm lƣợng acid uronic; các chỉ số đặc trƣng: trọng lƣợng tƣơng đƣơng, chỉ số methoxyl (MI), mức độ ester hĩa (DE), hàm lƣợng acid anhydro uronic tổng (AUA), tính chất lƣu biến gel (độ nhớt) và đặc điểm cấu trúc của pectin: thành phần đƣờng đơn và phổ IR từ cỏ biển lá dừa Enhalus acoroides.
Hình 2.2: Sơ đồ khối về nội dung nghiên cứu của đề tài Cỏ biển (Enhalus Cỏ biển (Enhalus acoroides) Xử lý – loại bỏ chất màu Phơi khơ Cắt nhỏ
Chiết trong Amonium oxalate Hợp chất pectin 1. Xác định hàm lƣợng tổng carbohydrate 2. Xác định hàm lƣợng sulfate 3. Xác định hàm lƣợng acid uronic 4. Xác định trọng lƣợng tƣơng đƣơng 5. Xác định chỉ số methoxyl (MI) và hàm
lƣợng acid anhydro uronic tổng (AUA) 6. Xác định mức độ ester hĩa (DE)
7. Đánh giá tính chất lƣu biến gel 8. Xác định thành phần đƣờng đơn 9. Phân tích đặc điểm cấu trúc của pectin