Phần 4 Kết quả và thảo luận
4.3.1. Đặc điểm hệ sợi của 5 chủng nấm C.militaris trong giai đoạn tạo hệ sợi
Sợi nấm phát triển mạnh xâm lấn khối nguyên liệu theo chiều từ ngoài vào trong, từ trên xuống dưới và lan dần xuống đáy hộp. Nhìn tổng thể, trong giai đoạn sinh sản vơ tính này hệ sợi xâm chiếm hết khối nguyên liệu trong hộp để tạo hệ sinh khối lớn chuẩn bị chuyển sang giai đoạn sinh sản hữu tính hình thành quả thể và tạo ra các bào tử hữu tính.
4.3.1.1. Thời gian sinh trưởng, phát triển hệ sợi
Sau khi nuôi giống trong môi trường dịch thể được 5 ngày (tuổi giống 120 giờ) tiến hành cấy giống vào môi trường nuôi trồng theo tỷ lệ 10ml/hộp, giống được cấy đều trên bề mặt cơ chất, sau đó đem ươm sợi trong điều kiện tối hoàn toàn và theo dõi các chỉ tiêu về thời gian sinh trưởng, phát triển của hệ sợi nấm.
Bảng 4.11. Thời gian phát triển hệ sợi nấm của 5 chủng C. militaris trên môi trường nuôi trồng qua các giai đoạn
ĐVT: ngày
Chủng nấm
Thời gian sau cấy giống cho đến khi hệ sợi Bắt đầu bung sợi Phát triển 1/3 cơ chất Phát triển 1/2 cơ chất Phát triển 2/3 cơ chất Phát triển kín cơ chất ĐT1 2 7 10 13 15 ĐT2 2 6 10 12 14 ĐT3 2 6 8 10 12 ĐT4 2 5 8 10 13 ĐT5 2 8 11 15 17
Cũng giống như trong giai đoạn ươm sợi của thí nghiệm trên mơi trường nhân giống cấp 1, thời kỳ này chịu ảnh hưởng của nhiều yếu tố: yếu tố chủng giống, điều kiện ươm, đảm bảo nhiệt độ thích hợp 200C – 240C, trong điều kiện
khơng có ánh sáng, đảm bảo độ xốp mơi trường thích hợp để sợi nấm có thể phát triển xâm lấm vào bên trong khối cơ chất nuôi trồng.
Kết quả cho thấy, sợi nấm của 5 chủng C. militaris bắt đầu bung sợi sau 2 ngày cấy giống, kết quả này phù hợp với kết quả thu được khi theo dõi sinh trưởng, phát triển sợi nấm trong môi trường nhân giống cấp 1 của thí nghiệm 1 của nghiên cứu này thể hiện trong Bảng 4.11.
Sau khi sợi nấm bung sợi sẽ bám vào cơ chất, lấy dinh dưỡng và tiếp tục hình thành nên các tế bào sợi nấm mới, kéo dài và phát triển theo các hướng để phủ kín dần khối cơ chất. Để hệ sợi phát triển được 1/3 cơ chất chủng ĐT3 mất 5 ngày cịn các chủng khác thì muộn hơn trong đó muộn nhất là chủng ĐT5. Các giai đoạn sau đó hệ sợi tiếp tục phát triển cho đến khi kín tồn bộ cơ chất. Phát triển kín bề mặt cơ chất rất quan trọng, chỉ tiêu này đánh giá sự sinh trưởng, phát triển của hệ sơi trên mơi trường ni cấy, sự thích nghi của chủng trong điều kiện nhân giống và nuôi trồng nhân tạo, cũng như đánh giá các điều kiện ni trồng sao cho phù hợp với chủng đó, kết quả cho thấy 12 ngày là thời gian phát triển tồn bộ cơ chất ni trồng của chủng ĐT3, và muộn nhất là chủng ĐT5 với thời gian để hệ sợi kín tồn bộ cơ chất là 17 ngày sau khi cấy giống. Các chủng cịn lại có thời gian để hệ sợi kín cơ chất là 13, 14, 15 ngày sau cấy.
4.3.1.2. Mật độ hệ sợi
Bảng 4.12. Mật độ hệ sợi 5 chủng nấm C. militaris trên môi trường nuôi trồng qua các giai đoạn
ĐVT: ngày
Chủng nấm
Thời gian sau cấy giống đến khi hệ sợi Bắt đầu bung sợi Phát triển 1/3 cơ chất Phát triển 1/2 cơ chất Phát triển 2/3 cơ chất Kín tồn bộ cơ chất ĐT1 1 2 3 3 4 ĐT2 1 2 3 4 4 ĐT3 1 2 3 4 5 ĐT4 1 2 3 4 5 ĐT5 1 2 2 3 4
Ghi chú: Độ dày hệ sợi (theo thang điểm):
+ Hệ sợi rất mỏng: 1 + Hệ sợi mỏng: 2 + Hệ sợi trung bình: 3
Kết quả Bảng 4.12 cho thấy mật độ sợi và đặc điểm hình thái sợi của 5 chủng C. militaris khi nuôi trồng trên môi trường tổng hợp khơng có sự khác
nhau nhiều, sợi có màu trắng đồng nhất, bề mặt sợi bơng mịn có sự liên kết chặt chẽ, và mật độ sợi cao phát triển kín bề mặt cơ chất khi ươm trong điều kiện tối và chuyển dần sang mầu vàng cam đặc trưng cho giống khi được chiếu sáng trong giai đoạn tạo sắc tố.
Tuy nhiên, thì thời gian hệ sợi phát triển kín, phủ kín bề mặt cơ chất khác nhau. Trong thời gian 1 ngày đầu sau khi cấy giống chưa có sự biểu hiện rõ, lúc này các khuẩn lạc cầu chưa bung sợi nên mặt độ sợi lúc này rất mỏng. Nhưng sang ngày thứ 2 thì thấy sợi nấm mới nẩy mầm trắng và các giai đoạn để hệ sợi phát triển 1/2 cơ chất, 2/3 cơ chất bắt đầu xuất hiện rõ các đám sợi nấm trên bề mặt nguyên liệu, sau đó liên kết lại với nhau làm cho mật độ hệ sợi tăng lên. Cùng với đó sợi nấm tiếp tục phát triển kéo dài và xâm lấn sâu vào cơ chất để bao phủ kín tồn bộ mơi trường ni trồng phía trên bề mặt và cả dưới đáy hộp, lúc này mật độ hệ sợi đạt tối đa: Rất dày với 2 chủng ĐT3, ĐT4 3 chủng còn lại ĐT1, ĐT2, ĐT5 đạt mật độ sợi dày.
4.3.1.3. Tỷ lệ nhiễm bệnh của 5 chủng nấm C. militaris trong giai đoạn tạo hệ sợi Thời gian để hệ sợi nấm phủ kín bề mặt cơ chất phụ thuộc nhiều yếu tố: Do ảnh hưởng của giống, tỷ lệ giống cấy vào môi trường cơ chất ni trồng, kích thước khuẩn lạc cầu, nồng độ giống có trong dung dịch nhân giống khi kết thúc giai đoạn nuôi giống trung gian dạng dung dịch, do kỹ thuật cấy, môi trường cấy giống… Do môi trường nuôi trồng đông trùng hạ thảo là môi trường giàu dinh dưỡng và độ ẩm cao là nguy cơ cao cho nấm bệnh và vi khuẩn xâm nhập trong quá trình cấy giống, quá trình ươm sợi, ảnh hưởng đến tỷ lệ nhiễm bệnh trong quá trình ươm sợi.
Nếu hệ sợi phủ kín cơ chất nhanh sẽ hạn chế được bị nhiễm nấm mốc hay nhiễm khuẩn, Kết quả bảng 4.14 cho thấy tỷ lệ nhiễm bệnh của chủng ĐT3 là thấp nhất với tỷ lệ nhiễm nấm bệnh là 4,4%. Chủng ĐT4 có tỷ lệ bị nhiễm bệnh do vi khuẩn, nấm bệnh xâm nhập cao nhất là 8,9%. Hai chủng ĐT1, ĐT5 có tỷ lệ nhiễm bệnh như nhau là 7,8% và chủng ĐT2 bị nhiễm 5,5%.
Ngồi bị nhiễm bệnh ra thì cịn có những hộp có hệ sợi khơng đạt u cầu đó là hệ sợi phát triển kém, bề mặt sợi không đều, mật độ sợi thấp… Kết quả từ Bảng 4.14 cho thấy chủng ĐT3, ĐT5 khơng có hệ sợi khơng đạt u cầu, ĐT1 có tỷ lệ hệ sợi không đạt cao nhất là 5,5%.
Bảng 4.13. Một số chỉ tiêu đánh giá chất lượng hệ sợi của 5 chủng C. militaris trong thời kỳ ươm sợi
Chủng nấm Tỷ lệ nhiễm bệnh (%) Tỷ lệ hệ sợi không đạt (%) Tỷ lệ hệ sợi không chuyển màu (%) Đánh giá mức độ chuyển màu của hệ sợi ĐT1 7,8 5,5 16,7 Không đều ĐT2 5,5 3,3 8,9 Không đều ĐT3 4,4 0 1,1 Tập trung ĐT4 8,9 2,2 6,7 Tập trung ĐT5 7,8 0 0 Tập trung