Hình A: quan sát dưới ánh sáng UV 366 nm trước khi phun thuốc thử; Hình B: quan sát dưới ánh sáng UV 366 nm sau khi phun thuốc thử: 1, Dung dịch chuẩn Hydroxysafflor yellow A; 2, Mẫu chuẩn của Viện
dược liệu; 3, mẫu HH1; 4, mẫu HH2.
Hình C: quan sát dưới ánh sáng UV 366 nm, sau khi phun thuốc thử :1, Dung dịch chuẩn Kaempferol; 2,
Mẫu chuẩn của viện dược liệu; 3, mẫu HH1; 4, mẫu HH2.
4.1.4.2. Độ ẩm và tro toàn phần dược liệu hồng hoa
Quá trình kiểm tra độ ẩm và hàm lượng tro toàn phần của các mẫu dược liệu được tiến hành theo phương pháp được quy định trong chuyên luận hồng hoa
được so sánh với tiêu chuẩn đưa ra trong DĐVN IV (không quá 13,00 % đối với độ ẩm và không quá 15,00 % đối với chỉ tiêu hàm lượng tro toàn phần) và được trình bày trong Bảng 4.10.
Bảng 4.10. Kết quả phân tích độ ẩm và tro toàn phần của các mẫu dược liệu hồng hoa
Kí hiệu mẫu Độ ẩm Tro toàn phần Hàm lượng (%) Kết luận (so với DĐVN IV) (không quá 13,00 %) Hàm lượng (%)
Kết luận (so với DĐVN IV) (không
quá 15,00 %) HH1 12,05 ± 0,05 Đạt 13,89 ± 0,07 Đạt HH2 13,00 ± 0,05 Đạt 12,11 ± 0,05 Đạt
Từ kết quả trên, rút ra kết luận cả 2 mẫu dược liệu HH1, HH2 đều đạt tiêu chuẩn Dược điển Việt Nam IV (2009) về các chỉ tiêu độ ẩm và tro toàn phần. Độ ẩm của HH1 và HH2 lần lượt là 12,05% và 13,00 %, so với tiêu chuẩn của DĐVN IV (không quá 13,00%) thì thấy cả 2 mẫu này đều đạt. Xét ở chỉ tiêu hàm lượng tro toàn phần thì hàm lượng HH1 đạt 13,89 % cao hơn so với mức 12,11% ở HH2, nhưng so với tiêu chuẩn không quá 15% ở DĐVN IV thì cả 2 mẫu vẫn đạt tiêu chuẩn đề ra.
4.1.4.3. Định lượng Hydroxysafflor yellow A (HSFA) và Kaempferol
Hàm lượng HSFA có trong mẫu dược liệu được xác định bằng phương pháp HPLC theo Dược điển Trung Quốc (2010). Đại diện hình ảnh sắc ký đồ bằng phân tích HPLC của mẫu HH1 và HH2 như Hình 4.15.
Điều kiện phân tích cho thấy tín hiệu phân tích rõ ràng, pic của HSFA cân đối, sắc nhọn và tách tốt trên nền mẫu dược liệu. Vì vậy, phương pháp phân tích lựa chọn phù hợp để phân tích định lượng HSFA trong các mẫu dược liệu.
Tiếp theo, chúng tôi tiến hành xây dựng đường chuẩn biểu diễn sự phụ thuộc giữa nồng độ HSFA và giá trị diện tích pic. Quá trình phân tích được thực hiện với mẫu chất HSFA chuẩn (độ tinh khiết 97,0 %). Các mẫu phân tích trước khi tiêm vào hệ thống đều được lọc qua màng cellulose aetat 0,45 μm. Mỗi thí nghiệm được làm lặp lại 3 lần. Kết quả được biểu diễn trên Hình 4.16.