Phần 3 Nội dung và phương pháp nghiên cứu
3.5. Phương pháp nghiên cứu
3.5.3. Xác định tổn thương bệnh lý đường ruột ở bò viêm ruột
Chúng tôi mổ khám bị bệnh để kiểm tra bệnh tích ở đường tiêu hố, phát hiện những biến đổi đại thể. Sau đó lấy một số đoạn ruột có bệnh tích đặc trưng, ngâm trong dung dịch formol 10% (1 phần mẫu, 10 phần formol) để tiến hành làm tiêu bản vi thể.
3.5.1. Phương pháp làm tiêu bản vi thể
Chúng tôi sử dụng phương pháp làm tiêu bản vi thể tẩm đúc bằng paraffin theo Robert (1969) và Burn (1974), cắt dán mảnh bằng Microtom. Mỗi lợn bệnh chúng tôi tiến hành lấy mẫu ở mỗi cơ quan hai miếng bệnh phẩm rồi đúc thành một block. Mỗi block chúng tôi tiến hành cắt, nhuộm tiêu bản rồi chọn ra bốn tiêu bản đẹp, sau đó tiến hành soi dưới kính hiển vi để đọc kết quả bệnh tích vi thể.
Phương pháp bao gồm các bước sau:
1. Chuẩn bị dụng cụ và hoá chất: lọ chứa Formol 10%, dao, kéo, panh kẹp, cốc đựng hố chất, phiến kính, máy đúc block, khn đúc, tủ ấm 370C, máy cắt mảnh microtom, nước ấm 48 - 520C, Xylen, Paraffin, thuốc nhuộm Haematoxilin, Eosin…
2. Lấy bệnh phẩm: bệnh phẩm là lách, hạch màng treo ruột, ruột, dạ dày, thận, tim, gan, phổi.
3. Cố định bệnh phẩm: ngâm miếng tổ chức vào dung dịch Formol 10% (chú ý thể tích formol phải gấp 10 lần bệnh phẩm và bệnh phẩm phải ngập trong Formol).
4. Vùi bệnh phẩm bao gồm các bước sau:
5. Rửa Formol:lấy tổ chức ra khỏi bình Formol 10%, cắt thành các miếng có chiều dài, rộng khoảng 4- 5mm cho vào khuôn đúc bằng nhựa. Đem rửa dưới vòi nước chảy nhẹ trong 24h để rửa sạch Formol.
6. Chạy mẫu:đưa mẫu vào hệ thống máy chuyển đúc mẫu tự động trong 18 tiếng. Lấy mẫu ra và tiến hành đúc block.