2.4. THỰC NGHIỆM
2.4.6. Đƣa ra điều kiện thủy phân tối ƣu cho dịch chiết sau thủy phân
thủy phân [54]
Sau quá trình thủy phân, tiến hành lọc dịch thủy phân: xác định hàm lƣợng carbohydrat tổng và tính hiệu suất thủy phân theo công thức:
Trọng lƣợng phân tử trung bình của oligo carrageeenan trong dịch sau thủy phân đƣợc xác định bằng phƣơng pháp sắc ký thẩm thấu gel (GPC).
2.4.6. Đƣa ra điều kiện thủy phân tối ƣu cho dịch chiết sau thủyphân phân
Sử dụng phần mềm Design Expert (DE 10.0.8) để thiết lập bài toán tối ƣu dựa trên phƣơng trình hồi quy xác định bằng phƣơng pháp quy hoạch thực nghiệm; là hàm mô tả sự phụ thuộc của hàm lƣợng carbohydrat tổng vào các nhân tố điều kiện thủy phân nhƣ nồng độ axit, thời gian và nhiệt độ thủy phân.
Sau bƣớc sàng lọc ban đầu, thí nghiệm theo phƣơng pháp RSM-CCD đƣợc thực hiện để tối ƣu hóa giá trị các yếu tố đang đƣợc nghiên cứu. Đây là phƣơng pháp quy hoạch thực nghiệm nhiều yếu tố dựa trên cơ sở mô hình hình hóa toán học. Nguyên tắc cơ bản của phƣơng pháp đáp ứng bề mặt (RSM) là làm thực nghiệm tại một số điểm của các yếu tố để mô tả kết quả bằng một phƣơng trình hồi quy dạng đa thức bậc 2. Phƣơng trình đó giúp vẽ trên hệ trục tọa độ một đồ thị dạng mặt – gọi là bề mặt đáp ứng, điểm tối ƣu là điểm cực trị của đồ thị đó.
2.4.7. Khảo sát khả năng kích thích sinh trƣởng của dịch oligo carrageenan trên cây ngô.
Dịch oligo carrageenan sau khi thu đƣợc từ quá trình thủy phân carrageenan ở các điều kiện tối ƣu, đƣợc xác định trọng lƣợng phân tử trung
bình và đặc trƣng cấu trúc hóa học; sau đó đƣợc sử dụng làm phân bón lá và phun trên cây ngô ở các nồng độ carbohydrat khác nhau, quá trình thực nghiệm đƣợc trình bày ở Phụ lục 3.