1.4. CÁC PHƢƠNG PHÁP PHÂN TÍCH
1.4.4.3. Phương pháp phổ khối lượng (MS)
Phổ khối là kỹ thuật phân tích dựa trên việc xác định số khối của các phân tử hoặc các mảnh phân tử mang điện tích. Nó là một trong những phƣơng pháp quan trọng trong phân tích cấu trúc của các polysacarit. Việc ứng dụng các phƣơng pháp phân tích khối phổ hiện đại trong phân tích cấu trúc của hợp chất carbohydrate phức tạp đã dẫn đến những tiến bộ nhanh chóng trong lĩnh vực khoa học sự sống suốt hai thập kỷ qua của thế kỷ 21. Các kỹ thuật ion hóa truyền thống nhƣ: ion hóa bằng va chạm điện tử, ion hóa hóa học,… là những kỹ thuật ion hóa chỉ sử dụng đƣợc cho các hợp chất dễ bay hơi. Các kỹ thuật ion hóa mới nhƣ: bắn phá nguyên tử nhanh (fast atom bombardment-FAB), ion hóa phun mù điện tử (electrospray ionizationESI) và gần đây là kỹ thuật ion hóa phản hập thụ laser đƣợc hỗ trợ bởi chất nền (matrix-assisted laser desorption ionization-MALDI) đã đƣợc phát triển để ứng dụng phân tích cấu trúc của các hợp chất không bay hơi nhƣ các oligosacarit, các hợp chất polysacarit trọng lƣợng phân tử nhỏ, protein, glycoprotein và các glycolipid. Các kỹ thuật ion hóa mới có khả năng ứng dụng phân tích đƣợc nhiều hợp chất hơn với độ nhạy và độ chính xác khối cao hơn các kỹ thuật ion hóa truyền thống. Hiện nay, cấu trúc của nhiều hợp chất polymer sinh học phức tạp đã đƣợc phân tích thành công nhờ ứng dụng các kỹ thuật phân tích khối phổ hiện đại này
Đặc trưng tính chất của oligo carrageenan có thể được xác định bằng nhiều phương pháp khác nhau, tuy nhiên với mục tiêu của đề tài là ứng dụng sản phẩm thủy phân oligo carrageenan dùng làm phân bón lá cho cây trồng, vì vậy xác định trọng lượng phân tử trung bình và xác định đặc trưng cấu trúc carrageenan được xem là lựa chọn giới hạn thích hợp đối với nội dung nghiên cứu của luận văn.
Qua quá trình thực nghiệm, tác giả nhận thấy dịch oligo sau thủy phân có độ nhớt rất thấp (tương đương với độ nhớt của nước ở nhiệt độ thường) nên rất khó để áp dụng phương pháp đo độ nhớt để xác định trọng lượng phân tử trung bình. Vì vậy phương pháp sắc ký thẩm thấu gel (GPC) được lựa chọn làm phương pháp để xác định trọng lượng phân tử trung bình của oligo carrageenan.
Bên cạnh đó, một trong những ưu điểm quan trọng nhất của phương pháp phổ hồng ngoại vượt hơn những phương pháp phân tích cấu trúc khác (nhiễu xạ tia X, cộng hưởng từ điện tử...) là phương pháp này cung cấp thông tin về cấu trúc phân tử nhanh, không đòi hỏi các phương pháp tính toán phức tạp. Vì vậy, trong khuôn khổ đề tài luận văn với đối tượng nghiên cứu là carrageenan từ rong sụn Kappaphycus alvarezii đã được nghiên cứu rộng rãi, phương pháp phổ hồng ngoại được xem là phương pháp thích hợp và được sử dụng để xác định cấu trúc đặc trưng của carageenan.
CHƢƠNG 2. ĐỐI TƢỢNG VÀ PHƢƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU
2.1. ĐỐI TƢỢNG NGHIÊN CỨU
Đối tƣợng nghiên cứu là rong sụn Kappaphycus alvarezii (Doty) Doty, nuôi trồng và khai thác tại huyện Ninh Hải tỉnh Ninh Thuận vào tháng 6 năm 2018.