1. Tạo ADN tõi tổ hợp.
* K/n :KT tạo ADN tõi tổ hợp lă KT gắn gen cần chuyển văo thể truyền
* Cõch tiến hănh:
GV:Cõch tiến hănh ?
GV:Vĩc tơ chuyển gen lă gỡ ?thường dựng những
loại năo?
GV:Nớu sự giống vă khõc nhau giữa sơ đồ cấy gen
bằng Plasmit v ălamđa ?
HS: - Giống đều cú 3 khđu
- Khõc: + Plasmit đầu dớnh so le trớn 2 mạch đơn của phđn tử ADN
+ Lamđa cú đầu dớnh bằng vă gen lạ gắn
trực tiếp văo VLDT của vi rỳt.
GV: Phđn biệt 2 phương phõp ?
GV:Khi thực hiện bước 2 cú vụ số TB VK, 1số
ADN tõi tổ hợp xđm nhập văo, 1 số k cú .Vậy lăm cõch năo để tõch được TB cú ADN tõi tổ hợp với TB k cú ? VD ?
GV: Thănh tựu ?
GV: SV chuyển gen lă gỡ?
GV:Việc cấy 1 gen của loăi khõc văo VSV đờ phõ
vỡ ranh giới loăi SH nhưng cú lợi cho con người như thế năo ?
HS: Tạo chủng VSV sx cõc SP mong muốn của con người nhanh, dễ sx, đặc hiệu ,quy mụ cụng nghiệp
GV:Trỡnh băy về tạo chủng VK E.coli sx insunin
chữa bệnh cho người ?
GV: Thănh tựu ?
GV: Thănh TB TV cú gỡ khõc với TB VK ?
GV: Những tớnh trạng năo của TV đờ được chuyển
gen ?
GV:Thănh tựu chớnh của việc tạo că chua chuyển
gen lă gỡ ? ý nghĩa ?
GV:Chuyển gen cần thiết văo vật nuụi ,cú thể thực
hiện bằng cõch năo ?
ADN plasmit ra khõi tế bào vi khuỈn.
- Cắt ADN của tế bào cho, AND plasmit tại những điểm xác định nhớ Enzim cắt giới hạn restrictaza - Chộn 2 loại ADN để bắt cặp bổ sung
- Thớm enzim nối ligaza tạo liớn kết phụtphođieste => tạo ADN tõi tổ hợp.
* Vĩc tơ chuyển gen lă phđn tử ADN cú k/n tự nhđn đụi tồn tại độc lập trong tế băo vă mang được gen cần chuyển.
- Plasmit cú ADN dạng vũng, mạch kĩp, nằm trong tế bào chất của vi khuỈn.
- Thực khuẩn thể lamđa ( VR lđy nhiễm khuẩn)
2. Chuyển ADN tõi tổ hợp văo tế băo nhận.
- Phương phõp biến nạp : Dựng muối canxi clorua hoặc xung điện cao õp lăm giờn măng sinh chất của tế băo để ADN tõi tổ hợp dễ dăng đi qua.
- Phương phõp tải nạp: VR lđy nhiễm khuẩn chủ động xđm nhập văo tế băo VK
3. Tõch dũng tế băo chứa ADN tõi tổ hợp.
- Dựa văo dấu chuẩn hoặc cõc gen đõnh dấu ở thể truyền .
VD: gen đõnh dấu cú thể lă gen khõng khõng sinh