Xác ựịnh các ựiều kiện ảnh hưởng ựến sự hình thành ựường COS theo phương pháp quy hoạch thực nghiệm

Một phần của tài liệu Luận văn thu nhận enzyme chitosanase từ chủng xạ khuẩn streptomyces griceus (NN2) và ứng dụng để sản xuất đường chitosanoligosaccha (Trang 87 - 93)

4. KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN

4.3.2. Xác ựịnh các ựiều kiện ảnh hưởng ựến sự hình thành ựường COS theo phương pháp quy hoạch thực nghiệm

theo phương pháp quy hoạch thực nghiệm

Sau khi tiến hành thắ nghiệm ảnh hưởng của ựơn yếu tố ựến sự hình thành COS ta ựã tìm ựược ựiều kiện tối thắch của từng yếu tố như: nhiệt ựộ, pH và tỷ lệ enzyme cơ chất (E/S). Chúng tôi tiếp tục ựi nghiên cứu ảnh hưởng tổ hợp của ba yếu tố lên sự hình thành ựường COS theo phương pháp quy hoạch thực nghiệm nhằm tìm ra ựiều kiện tối ưu cho quá trình này (các bước tiến hành ựược trình bày ở phần 3.3.3.3). Chúng tôi thu ựược kết quả sau (bảng 4.5).

Trường đại học Nông nghiệp Hà Nội Ờ Luận văn thạc sĩ nông nghiệp ... 78

Bảng 4.5 Ma trận qui hoạch thực nghiệm Doehlert theo phương pháp qui hoạch trực giao bậc 2, ba yếu tố và kết quả

STT X1 (pH) X2 (Nhiệt ựộ) X3 (Tỷ lệ enzyme/cơ chất) RS(mg/ml) 1 7.5 60.0 0.12 3.0831 2 5.5 60.0 0.12 2.7210 3 7.0 70.0 0.12 3.0744 4 6.0 50.0 0.12 2.8947 5 7.0 50.0 0.12 3.0291 6 6.0 70.0 0.12 2.9562 7 7.0 63.3 0.16 3.1630 8 6.0 56.7 0.08 2.4446 9 7.0 56.7 0.08 2.7106 10 6.5 66.7 0.08 2.5359 11 6.0 63.3 0.16 3.1225 12 6.5 53.3 0.16 3.1292 13 6.5 60.0 0.12 3.3703

Trường đại học Nông nghiệp Hà Nội Ờ Luận văn thạc sĩ nông nghiệp ... 79

Bảng 4.6 Hệ số trong phương trình hồi qui và mức ý nghĩa Hệ số phương trình

hồi qui

Giá trị của hệ

số hồi qui độ tin cậy

b0 3.3702 < 0.01 *** b1 0.1604 < 0.01 *** b2 0.0189 < 0.01 *** b3 0.3520 < 0.01 *** b11 -0.4681 < 0.01 *** b22 -0.3528 < 0.01 *** b33 -0.5739 < 0.01 *** b12 -0.0096 < 0.01 *** b13 -0.1346 < 0.01 *** b23 0.0796 < 0.01 ***

( *** mức ý nghĩa 0.01, ** mức ý nghĩa 0.05, * mức ý nghĩa 0.1)

Qua bảng 4.6 ựộ tin cậy của hệ số hồi qui có ựộ tin cậy cao (<0.01) nên các hệ số trong phương trình ựều có ý nghĩa.

Vậy phương trình hồi quy có dạng là:

Y = 3.3702 + 0.1604 *X1 + 0.0189*X2 0.3520*X3 - 0.4681* (X1*X1) - 0.3528* (X2*X2) - 0.5739* (X3*X3) - 0.0096* (X1*X2) - 0.1346* (X1* X3) +

Trường đại học Nông nghiệp Hà Nội Ờ Luận văn thạc sĩ nông nghiệp ... 80

đồ thị 4.7 (a) đồ thị biểu diễn mối quan hệ của X2 (nhiệt ựộ), X3 (Tỷ lệ enzyme/cơ chất) và X1 (pH) là tâm

Qua ựồ thị 4.7(a) ta thấy ựược sự tương tác giữa nhiệt ựộ và tỷ lệ enzyme/cơ chất ảnh hưởng ựến khả năng hình thành ựường COS. Lấy ựiều kiện pH làm tâm với pH = 6, ta thấy trên ựồ thị của không gian ba chiều thì vùng mầu ựỏ biểu thị vùng tối ưu sản sinh ra lượng ựường lớn nhất. Nhìn vào ựồ thị mặt phẳng ta thấy rằng vùng tối ưu mà lượng ựường sinh ra là cao nhất với X2 nằm trong khoảng 550C ựến 63,50C; X3 nằm trong khoảng 0,12 ựến 0,15 và X1 = 6,5.

Trường đại học Nông nghiệp Hà Nội Ờ Luận văn thạc sĩ nông nghiệp ... 81

đồ thị 4.7 (b) đồ thị biểu diễn mối quan hệ của X1 (pH), X3 (Tỷ lệ enzyme/cơ chất) và X2 (nhiệt ựộ) là tâm

Qua ựồ thị 4.7 (b) biểu diễn mối quan hệ giữa pH và tỷ lệ enzyme/cơ chất ảnh hưởng ựến khả năng hình thành ựường COS. Ta lấy ựiều kiện nhiệt ựộ làm tâm tức là lấy giá trị nhiệt ựộ 600C. Ta thấy trên ựồ thị của không gian ba chiều thì vùng mầu ựỏ biểu thị vùng tối ưu ở ựó hàm lượng ựường sinh ra là cao nhất. Nhìn vào ựồ thị mặt phẳng ta thấy rằng vùng tối ưu mà lượng ựường tạo ra là cao nhất với X2 nằm trong khoảng 6,3 ựến 6,7; X3 nằm trong khoảng 0,12 ựến 0,16 và X1 600C.

Trường đại học Nông nghiệp Hà Nội Ờ Luận văn thạc sĩ nông nghiệp ... 82

đồ thị 4.7 (c) đồ thị biểu diễn mối quan hệ của X1 (pH), X2 (nhiệt ựộ) và X3 (tỷ lệ enzyme/cơ chất) là tâm

Nhìn vào ựồ thị 4.7 (c) ta thấy rằng khi lấy tỷ lệ enzyme/cơ chất làm tâm (tỷ lệ enzyme/cơ chất là 0.12) thì ta thấy sự tương tác giữa hai yếu tố là nhiệt ựộ và pH ảnh hưởng nhiều ựến sự hình thành COS. Trên ựồ thị ta thấy vùng mầu ựỏ là vùng tối ưu sinh ra lượng ựường là cao nhất. Qua ựồ thị 4.7(c)

ta thấy hàm lượng ựường ựạt cao nhất khi X1 (nhiệt ựộ) nằm trong khoảng 550C ựến 650C, X2 (pH) nằm trong khoảng 5,8 ựến 6,9 và X3 (tỷ lệ enzyme/cơ chất) là 0,12.

Trường đại học Nông nghiệp Hà Nội Ờ Luận văn thạc sĩ nông nghiệp ... 83

Qua ựồ thị 4.7 (a), (b), (c) ta thấy hàm lượng ựường COS ựạt cao nhất khi X1 (pH) nằm trong khoảng từ pH = 6,2ựến 6,7; X2 (nhiệt ựộ, 0C) từ 540C ựến 650C; X3 (tỷ lệ enzyme/cơ chất) từ 0,12 ựến 0,16.

Qua bảng 4.5 thì hàm lượng ựường COS ựạt cao nhất là: 3,3703 (mg/ml) ở ựiều kiện môi trường: pH = 6,5; T0 = 600C; tỷ lệ enzyme/cơ chất = 0,12.

Trên cơ sở ựó, chúng tôi chọn X1, X2, X3 lần lượt là pH = 6,5; T0 = 600C; tỷ lệ enzyme/cơ chất = 0,12 là ựiều kiện tối ưu ựể có thể thu nhận ựược hàm lượng ựường COS tốt nhất. Kết quả này cũng phù hợp với các kết quả ựã công bố của với một số nghiên cứu trước [9], [12], 14], [38], [40].

Một phần của tài liệu Luận văn thu nhận enzyme chitosanase từ chủng xạ khuẩn streptomyces griceus (NN2) và ứng dụng để sản xuất đường chitosanoligosaccha (Trang 87 - 93)

Tải bản đầy đủ (PDF)

(120 trang)