4. KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN
4.1. Kết quả hoạt hóa và ựịnh tắnh khả năng sinh enzyme chitosanase của xạ khuẩn Streptomyces griceus (chủng NN2)
xạ khuẩn Streptomyces griceus (chủng NN2)
để kiểm tra khả năng sống sót của chủng NN2 sau quá trình bảo quản chúng tôi tiến hành cấy chủng trên môi trường nuôi cấy truyền xạ khuẩn (hình 4.1)
Hình 4.1 đặc ựiểm khuẩn lạc xạ khuẩn NN2
Ta thấy rằng khuẩn lạc phát triển rất mạnh, hình thái khuẩn lạc của chủng NN2 (hình 4.1) là: khuẩn lạc khô, có màu xám tro.
Sau khi kiểm tra ựộ sống sót và sự phát triển của chủng xạ khuẩn NN2 chúng tôi tiến hành cấy chấm ựiểm trên môi trường thử hoạt tắnh ựể thử hoạt tắnh sơ bộ. Sau thời gian nuôi cấy 3 ngày, xác ựịnh mẫu có hoạt tắnh bằng cách ựổ một lớp mỏng dung dịch Lugol lên bề mặt ựĩa thạch. Vì chitosanase là enzyme ựặc hiệu ựối với cơ chất chitosan nên những vi sinh vật có khả năng sinh chitosanase ngoại bào sẽ tiết enzyme ra ngoài môi trường ựể phân giải cơ chất chitosan tạo nên vòng phân giải trên môi trường. Enzyme có hoạt tắnh càng cao thì vòng phân giải càng to, rộng và sáng.
Trường đại học Nông nghiệp Hà Nội Ờ Luận văn thạc sĩ nông nghiệp ... 58
Hình 4.2 Vòng phân giải cơ chất của chitosanase sản sinh từ mẫu NN2 (phương pháp cấy chấm ựiểm)
Sau khi xác ựịnh hoạt tắnh sơ bộ của chủng xạ khuẩn chúng tôi tiến hành hoạt hoá, nuôi cấy xạ khuẩn Streptomyces griceus (chủng NN2), ly tâm dịch nuôi cấy ựể loại bỏ kết tủa, thu dịch nuôi cấy có chứa enzyme thô và thử hoạt tắnh bằng phương pháp ựục lỗ thạch ựã ựược mô tả trong phần phương pháp nghiên cứu.
Hình 4.3 Vòng phân giải cơ chất của chitosanase sản sinh từ mẫu NN2 (phương pháp ựục lỗ thạch)
Trường đại học Nông nghiệp Hà Nội Ờ Luận văn thạc sĩ nông nghiệp ... 59
Nhìn vào hình 4.3 ta thấy rằng enzyme chitosanase sản sinh từ xạ khuẩn Streptomyces griceus (chủng NN2) có vòng phân giải rất rộng, to và sáng, hiệu số ựường kắnh vòng phân giải của enzyme chitosanase ựo ựược là 2.8 cm. Vì vậy enzyme có hoạt tắnh khá cao phù hợp những yêu cầu của quá trình nghiên cứu sau này.
đặc ựiểm hình thái tế bào
Hình 4.4 đặc ựiểm hình thái tế bào xạ khuẩn NN2
Tế bào xạ khuẩn NN2 (hình 4.4) ta thấy ựó là những tế bào sợi có ựốt cong ngắn, hình chân chim. Cơ quan sinh bào tử xoắn hình răng lược.