G. Ảnh điện di sản phẩm PCR với chỉ thị SAE19 H Ảnh điện di sản phẩm PCR với chỉ thị KB
4.4.4. Tạo nguồn vật liệu mang gen kháng bệnh gỉ sắt
Với mục tiêu là tạo đƣợc nguồn vật liệu, sau khi sàng lọc đƣợc dòng mang gen kháng gỉ sắt bằng thí nghiệm lây nhiễm nhân tạo chúng tôi đã tiến hành lai giữa mẫu giống kháng bệnh DLO22 với các mẫu giống có tiềm năng năng suất là CV05, CV07 và CV22 trong vụ Xuân 2015. Hạt lai F1 của 3 tổ hợp lai trên đƣợc gieo trồng trong chậu trong nhà lƣới trong vụ Xuân Hè muộn 2015. Hạt lai F2 thu đƣợc tiếp tục đƣợc gieo trong vụ Đông 2015. Ở thế hệ F2 tiến hành loại bỏ những cây xấu, thu hạt những cây tốt để phát triển quần thể F3 trong vụ Xuân 2016.
Đánh giá khả năng kháng bệnh gỉ sắt của các dòng đậu cô ve mới lai tạo bằng lây nhiễm nhân tạo
Chúng tôi tiến hành đánh giá khả năng kháng bệnh gỉ sắt của 3 quần thể F3 bằng lây nhiễm nhân tạo, mỗi quần thể đánh giá 30 cá thể. Kết quả lây nhiễm nhân tạo các cá thể F3 của 3 tổ hợp lai đã chọn lọc ra đƣợc 11 cá thể không bị nhiễm bệnh (kháng). Từ 11 cá thể này chúng tôi tiếp tục phát triển thành 11 quần
Kiểm tra gen kháng của các dòng đậu cô ve mới
Vụ Đông 2016, từ 11 dòng F4 chúng đã chọn lọc ra 28 cá thể sinh trƣởng phát triển tốt và lấy mẫu lá đem đi tách chiết ADN để kiểm tra sự có mặt của gen kháng Ur-11 (gen kháng với chủng gỉ sắt thu thập) bằng chỉ thị phân tử SAE19.
Kết quả điện di sản phẩm PCR đƣợc trình bày trong bảng 4.37.
Bảng 4.37. Kết quả chạy PCR kiểm tra gen kháng Ur-11
ở các dòng đậu cô ve thế hệ F4
STT Dòng F4 Nguồn gốc Ur-11 STT Dòng F4 Nguồn gốc Ur-11
1 BR13/8/10 DLO22 x CV05