67
4.1.2 Kết quả định danh Vibrio spp. bằng phản ứng sinh hóa
Kết quả kiểm tra đặc tính sinh hoá của các loài thuộc Vibrio spp. được thể hiện qua Bảng 4.2:
Bảng 4.2: Kết quả thử sinh hoá các loài thuộc Vibrio spp.
TT
Test SH
Vibrio spp.
V.cholerae V.paraheamolyticus V.vulnificus V.fluvialis V.alginolyticus
1 K. lạc Vàng Xanh Vàng Xanh Vàng 2 Oxidase (+) (+) (+) (+) (+) 3 TSI (+) Glucose (+) (+) (+) Lactose (-) (-) (+) (-) (-) Sucrose + (-) (-) (+) (+) 4 LDC (+) (+) (+) (-) (+) 5 Di động (+) (+) (+) (+) (+) 6 ONPG (+) (+) (+) (+) 7 Indole (+) (-) (-) (-) (+) 8 Urease (-) (+) (-) (-) (-) 9 PAD (-) (-) (-) (-) 10 Citrate (-) (-) (-) (-) (+) 11 VP (-) (-) (-) (-) (+) 12 NaCl 0% (+) 2% (+) (+) (+) (+) (+) 6% (+) (+) (+) (+) 8% (+) (+) 10% (+)/(-)
Quan sát đặc tính sinh hóa, nhận thấy một số Vibrio spp. có thể
phân biệt bởi các phản ứng sinh hóa, hầu hết đều tạo sản phẩm oxidase, catalase, lên men đường glucose, lactose, sucrose và không sinh hơi; V. cholerae, V. paraheamolyticus, V. fluvialis và V. alginolyticus đều không lên men đường lactose, riêng V. cholerae và V. alginolyticus có khả năng ôxy hóa tryptophan của vi khuẩn thành những sản phẩm biến dưỡng có gốc indole gồm indole, sketole tạo nên một phức chất có màu đỏ (Trần Linh Thước, 2009).
Tất cả các loài như V. cholerae, V. vulnificus, V. fluvialis và V. alginolyticus đều âm tính với urê, riêng V. parahaemolyticus có phản ứng dương tính với urê, đây là phản ứng có giá trị kiểm tra đối với các chủng có khả năng gây bệnh (Kaysner et al., 1994). Vibrio spp. phát triển ở nồng
68
độ muối thích hợp: 0-2%, 2-6%, 2-8% và từ 2-10%, tỉ lệ dương tính phù hợp với các phản ứng sinh hoá của 5 loài bằng máy định danh tự động từ 90 – 98% (Phụ lục 1) .
Ngoài ra thử nghiệm β-galactosidase giúp tìm vi khuẩn chỉ lên men lactose khi có sự tổng hợp trong tế bào của hai enzyme là β-galactosidase có vai trò xúc tác sự thủy phân lactose và permease do vận chuyển lactose vào bên trong tế bào. Một số vi khuẩn không có gen mã hóa enzyme β- galactosidase nên không thể lên men lactose. Hoạt tính của enzyme này có thể được xác định dựa vào một cơ chất tổng hợp là o-nitrophenyl-D- galactopyranoside (ONPG). Sự thủy phân của cơ chất đường này bởi β- galactosidase sẽ phóng thích o-nitrophenol có màu vàng (Trần Linh Thước, 2009).