- Kiểm tra E. coli
+ Phương pháp định tính dùng các chất sau: Canh thang lục sáng mật bò lactoza 2 %, nước pepton, thạch Endo, thạch Simono Citratex để kiểm tra định tính E. coli trong sản phẩm.
+ Nuôi cấy: Nhỏ vài giọt mẫu vào 1 ống canh thang lục sáng mật bò lactoza
2%. Để ủ ẩm ở nhiệt độ 44 0C ± 0.5 0C trong thời gian 24 h, đọc kết quả sơ bộ, căn cứ ở sự lên men đường lactoza (sinh hơi hoặc không sinh hơi), nhuộm gram. Cấy chuyền sang một ống nước pepton rồi để tủ ấm ở 44 0C ± 0.5 0C trong 24 h. Cuối cùng, cấy sang một ống thạch Endo và một ống thạch Simono, để tủ ấm 44 0C ± 0.50C trong 24 h.
+ Đọc kết quả: dựa theo Test Mac Kenzie thì khi có mặt của E. coli:
SVTH: Nguyễn Quốc Nghĩa Trang 130
Đồ án tốt nghiệp 131 GVHD: Th.s.Trần Thế Truyền TS. Nguyễn Thị Trúc Loan
Canh thang lục sáng mật bò Lactoza 2%: (+), khuẩn gram: âm (-), indol: (+), thạch Endo: trên các vết cấy có khuẩn lạc màu đỏ có ánh kim, thạch Simono (-): màu xanh lục.
- Kiểm tra Clostridium Botulinum
+ Thực hiện: Đồng nhất và pha loãng mẫu theo dãy. Xử lý mẫu ở 80 0C trong 15 – 20 phút. Cấy 1 ml dung dịch mẫu vào đĩa peptri hoặc ống nghiệm, đổ 10 – 15 ml môi trường ISA ở 45 0C vào, lắc đều. Khi lớp thứ nhất đông đặc, đổ tiếp lớp ISA thứ hai. Ủ trong bình kín ở 37 0C trong 24 – 48 h. Đếm tất cả khuẩn lạc màu đen có đường kính 0.5 mm.
+ Tính kết quả: hàm lượng Clostridium Botulinumđược tính theo công thức:
A = (N x R) x ()
Với : A: hàm lượng Clostridium Botulinumcó trong sản phẩm (CFU/ml). N: tổng số khuẩn lạc đếm được.
R: tỉ lệ xác xuất.
ni: số đĩa hoặc ống nghiệm có số khuẩn lạc được chọn. v: thể tích cấy tương ứng vào mỗi ống nghiệm (ml). fi: độ pha loãng tương ứng ở mỗi ống nghiệm (%).
CHƯƠNG 9