- EMEM 5%FCS PBS
3.7.2 Kết quả kiểm tra tắnh ổn ựịnh của kháng nguyên và kháng thể băng phương pháp ELISA.
phương pháp ELISA.
Từ 20ml kháng nguyên dương và âm tự chế ựược chia nhỏ ra ống cryotubeTM1,5ml, mỗi ống chứa là 0,5ml chế phẩm, bảo quản ở tủ -800C. 200ml kháng huyết thanh ựã chia nhỏ bảo quản ở tủ -200C. để kiểm tra tắnh ổn ựịnh kháng nguyên và kháng huyết thanh, chúng tôi sử dụng 20 mẫu huyết thanh cố ựịnh cho các lần kiểm tra, mẫu ựược bảo quản trong tủ -200C, phản ứng ựược thực hiện ở thời gian khác nhau nhưng cùng ựiều kiện của phương pháp ELISA, môi trường và dung dịch ựệm. Kết quả ựược ựánh giá bằng giá trị S/P của các lần kiểm tra thể hiện ở bảng 3.9.
Bảng 3.9. Sự tắnh ổn ựịnh của KN, KT 07196 trong 6 tháng bảo quản KH mẫu Sau khi chế 1 tháng 3 tháng 6 tháng
đC (+) 6,657 Pos 0,648 Pos 0,632 Pos 0,609 Pos
TT
đC (-) 0,090 Neg 0,081 Neg 0,083 Neg 0,077 Neg 1 TB 43 3,244 Pos 2,938 Pos 2,994 Pos 1,951 Pos 2 TB 14 2,678 Pos 2,425 Pos 2,472 Pos 1,614 Pos 3 TB 13 2,471 Pos 2,238 Pos 2,281 Pos 1,484 Pos 4 TB 2 2,461 Pos 2,229 Pos 2,272 Pos 1,483 Pos 5 TB 42 2,766 Pos 2,505 Pos 2,553 Pos 1,661 Pos 6 TB 6 2,757 Pos 2,497 Pos 2,545 Pos 1,651 Pos 7 TB 1 1,918 Pos 1,737 Pos 1,770 Pos 1,150 Pos
Trường đại học Nông nghiệp Hà Nội Ờ Luận văn thạc sĩ khoa học nông nghiệp ẦẦẦẦẦẦẦẦ 67
8 TB 19 1,797 Pos 1,627 Pos 1,659 Pos 1,089 Pos 9 TB 51 0,705 Pos 0,639 Pos 0,651 Pos 0,421 Pos 10 TB 50 1,139 Pos 1,031 Pos 1,051 Pos 0,685 Pos 11 TB 61 0,738 Pos 0668 Pos 0,681 Pos 0,448 Pos 12 TB 40 0,206 Neg 0,187 Neg 0,190 Neg 0,129 Neg 13 TB 20 1,057 Pos 0,958 Pos 0,976 Pos 0,630 Pos 14 TB 5 1,103 Pos 0,999 Pos 1,018 Pos 0,662 Pos 15 TB 7 0,923 Pos 0,865 Pos 0,852 Pos 0,554 Pos 16 TB 85 1,395 Pos 1,432 Pos 1,288 Pos 0,845 Pos 17 TB 64 0,305 Neg 0,238 Neg 0,282 Neg 0,186 Neg 18 TB 65 0,459 Pos 0,438 Pos 0,424 Pos 0,387 Neg 19 TB 83 1,381 Pos 1,444 Pos 1,275 Pos 0,831 Pos 20 TB 52 0,496 Pos 0,471 Pos 0,431 Pos 0,409 Pos
Tổng số (+) 18/20 (+) 18/20 (+) 18/20 (+) 17/20
Ghi chú: Pos = Dương tắnh Neg = Âm tắnh
Từ kết quả phân tắch ở bảng 3.9 nhận thấy kháng nguyên và kháng thể bảo quản theo dõi trong 6 tháng trên 20 mẫu huyết thanh ựã biết có kết quả tốt không có sự biến ựộng về giá trị S/P của các phản ứng trong thời gian nghiên cứu. trong 3 tháng theo dõi tỉ lệ mẫu dương ổn ựịnh là 18/20 mẫu ựến tháng thứ 6 số mẫu dương là 17/20 mẫu tức là khả năng chẩn ựoán mẫu dương là 17 mẫu giảm một mẫu trong vòng 6 tháng bảo quản. Như vậy kháng nguyên và kháng thể tự chế ựể chẩn ựoán kháng thể trong huyết thanh bệnh PRRS có ựộ nhạy và ựộ ựặc hiệu tốt, ổn ựịnh trong thời gian 3->6 tháng sau khi chế khi ựảm bảo về ựiều kiện bảo quản.