- EMEM 5%FCS PBS
3.7.1 Tắnh tinh khiết của kháng nguyên và kháng thể sau khi chế
- Các mẫu ựược kiểm tra sự lây nhiễm vi khuẩn, nấm và pestivirus. để xét nghiệm vi khuẩn, sử dụng 20 chai T75, mỗi chai chứa 25ml môi trường casein ựậu nành ựã ựược tiêu hóa, ựược cấy vào:
+ 0,2 ml kháng nguyên từ 5 mẫu kháng nguyên dương dùng cho phản ứng IPMA.
+ 0,2 ml kháng nguyên từ 5 mẫu kháng nguyên dương dùng cho phản ứng ELISA.
+ 0,2 ml kháng nguyên từ 5 mẫu kháng nguyên âm dùng cho phản ứng ELISA.
+ 0,2 ml kháng huyết thanh từ 5 mẫu huyết thanh ựã chế dùng cho phản ứng huyết thanh học.
20 chai nuôi cấy này chúng tôi nuôi trong tủ ấm 370C trong 14 ngày theo dõi sự phát triển của khuẩn lạc.
Trường đại học Nông nghiệp Hà Nội Ờ Luận văn thạc sĩ khoa học nông nghiệp ẦẦẦẦẦẦẦẦ 65
để xét nghiệm về nấm sử dụng 20 bình, mỗi bình chứa 40 ml môi trường casein ựâu nành ựã ựược tiêu hóa, ựược cấy kháng nguyên và kháng thể chế ựược giống sơ ựồ kiểm tra vi trùng. Tất cả bình này ựược ủ ở 20-250C trong 14 ngày và ựược quan sát phát hiện phát triển của nấm.
đối với 2 thắ nghiệm kiểm tra vô trùng này chúng tôi thực hiện quan sát bằng kắnh hiển vi ựảo ngược, quan sát sự xuất hiện những triệu chứng bất thường, cũng như hình thái khuẩn lạc, nấm phát triển trong các chai nuôi cấy.
Theo kết quả quan sát hàng ngày trong 14 ngày chúng tôi không thấy sự bất thường xuất hiện trong chai nuôi cấy cũng như các hình thái khuẩn lạc của vi trùng, nấm mốc.
Cũng theo kết quả theo dõi hàng ngày nhận thấy màu môi trường trông chai nuôi cấy cũng ắt có sự biến ựổi chứng tỏ PH của môi trường nuôi cấy là ổn ựịnh.
Kết quả sau 14 ngày theo dõi thu ựược ở bảng 3.8.
Bảng 3.8. Sự tinh khiết của sản phẩm sau 14 ngày theo dõi nuôi cấy Kiểm tra Vi trùng Kiểm tra Nấm Mẫu kiểm tra
Số chai kiểm tra Khuẩn lạc mọc Số bình kiểm tra Nấm mọc Kháng nguyên IPMA 5 0 5 0
Kháng nguyên âm tắnh ELISA 5 0 5 0
Kháng nguyên dương tắnh ELISA 5 0 5 0
Trường đại học Nông nghiệp Hà Nội Ờ Luận văn thạc sĩ khoa học nông nghiệp ẦẦẦẦẦẦẦẦ 66
Theo kết quả bảng 3.8 cho thấy sau 14 ngày nuôi cấy ựộ tinh khiết của sản phẩm là tốt qua kiểm tra trên môi trường nuôi cấy không có hiện tượng mọc của khuẩn lạc, nấm, PH ổn ựịnh. Do ựó chúng tôi kết luận kháng nguyên và kháng thể chế ựược có ựộ tinh khiết cao.