- EMEM 5%FCS PBS
3.4Theo dõi sự hình thành kháng huyết thanh bằng phản ứng ELISA
Khi ựã có vi rút PRRS 108.2TCID50/1ml, chúng tôi tiến hành tối miễn dịch cho 3 lợn 4 tuần tuổi không có kháng thể PRRS. Sau 3 tuần tối miễn dịch khi lợn bằng vacxin PRRS JXA1 Trung Quốc khi kiểm tra ựã có ựáp ứng miễn dịch cơ sở, công vi rút PRRS 07196 liều công là 105TCID50/1ml, mỗi lợn công 1ml. Theo dõi lợn công sau 4 tuần trong thời gian theo dõi hàng tuần lấy máu, kiểm tra bằng phản ứng ELISA sử dụng kháng nguyên tự chế pha loãng 1/200 và kắt Herdchek 3X tiến hành song song và thực hiện lặp lại 3 lần, kết quả trung bình ựược thể hiện bằng giá trị S/P ở bảng 5.
Trường đại học Nông nghiệp Hà Nội Ờ Luận văn thạc sĩ khoa học nông nghiệp ẦẦẦẦẦẦẦẦ 56
Theo kết quả kiểm tra lâm sàng và kết quả thực tế kiểm tra bằng kháng nguyên tự chế và kháng nguyên Herdcheck 3X qua phản ứng ELISA cho thấy hàm lượng kháng thể tăng cao theo từng tuần sau công. đánh giá hàm lượng kháng thể chúng tôi dựa vào giá trị S/P của phản ứng, khi giá trị S/P của 2 loại kháng nguyên >= 0,4 ựược kết luận là dương tắnh (Theo ựánh giá của kắt Herdcheck 3X). Ở kết quả này chúng tôi thấy trước khi tối miễn dịch huyết thanh là âm tắnh với kháng thể PRRS, sau khi tối miễn dịch 3 tuần hàm lượng kháng thể tăng lên thể hiện bằng kết quả S/P kháng nguyên 07196 là 0,460 và KN Herdcheck 3X là 0,409. Khi công vi rút 07196 trên 3 lợn ựó sau 3 tuần kiểm tra liên tiếp thì thấy ở tuần thứ 3 giá trị S/P của kháng nguyên tự chế là 3,692 và Herdcheck 3X là 3,318 chúng tôi cũng theo dõi tiếp sang tuần thứ 4 kết quả kháng thể trong huyết thanh ựã ổn ựịnh, ắt tăng và dừng thắ nghiệm, thu hoạch huyết thanh trên 3 lợn ở cuối tuần thứ 4 sau công. Kết quả công cường ựộc ựược ựánh giá bằng giá trị S/P ựược thể hiện ở hình 3.9
Các giai ựoạn hình thành Kháng thể Kháng nguyên tự chế 01976 (S/P) Kháng nguyên Herdcheck 3X (S/P)
Trước khi tối miến dịch 0,291 0,333
Trước khi công vi rút sau 3 tuần tối MD 0,460 0,409
Sau khi công VR 07196 - 1 tuần 1,465 1,250
Sau khi công VR 07196 - 2 tuần 2,765 2,230
Sau khi công VR 07196 - 3 tuần 3,692 3,318
Trường đại học Nông nghiệp Hà Nội Ờ Luận văn thạc sĩ khoa học nông nghiệp ẦẦẦẦẦẦẦẦ 57
Hình 3.9. Biểu ựồ hàm lượng kháng thể tăng theo các tuần sau khi công
Ghi chú: A : Trước khi tối miến dịch
B : Trước khi công vi rút sau 3 tuần tối MD C : Sau khi công VR 07196 - 1 tuần
D : Sau khi công VR 07196 - 2 tuần E : Sau khi công VR 07196 - 3 tuần F : Sau khi công VR 07196 - 4 tuần