... táitổ hợp, DNAtáitổhợpđưavàotếbào (vi khuẩn, tếbàođộngvậtthực vật) đểgenlạhoạtđộngQuátrìnhgọibiếnnạp 2.5.1 Hoá biếnnạpĐểbiếnnạpDNAtáitổhợpvàovikhuẩn dùng tếbàovi ... enzyme DNA polymerase I lấp chỗ trống ligase hàn dính DNAlạ với vector tạo nên DNAtáitổhợp Với phương pháp gắn DNAlạvào vector chuyển gen 2.5 BiếnnạpDNAtáitổhợpvàotếbào Sau tạoDNAtái ... thẳng DNAvàotếbào (thường hợp tử) hình chụp (hình 2.6) 15 Hình 2.6: Tiêm DNAlạvàotếbào trứng (hợp tử) chuột 2.5.4 Phương pháp bắn DNAvàotếbào Ở tếbàothựcvật có vách tếbào dày cấu tạo...
... phương trình số ẩn số Khi đòi hỏi thủ thuật tốn học tơt xử lý Do đó, trường hợp này, phương pháp M đem lại hiệu cao Ví dụ 2: [tự ra] Cho 500ml dd X chứa muối NaA NaB với A B halogen (nhóm VIIA ... hợp muối cation anion; xác định % số lượng đồngvị ngun tố; % thể tích khí hỗn hợp I.1.2.1 Vận dụng giải tốn liên quan đến hỗn hợp kim loại hỗn hợp muối Ví dụ 1: [tự ra] Hồ tan hết 7,6g hỗn hợp ... áp dụng để giải tốn trộn lẫn chất với nhau, đồng thể: lỏng - lỏng, khí - khí, rắn - rắn dị thể lỏng - rắn, lỏng - khí, hỗn hợp cuối phải đồng thể Phương pháp có ý nghĩa thựctế trường hợp pha...
... S.Cohen tạo phân tử DNAtáitổhợp gồm vector plasmid nhỏ pSC101 E coli DNA ''ngoại lai'' plasmid khác Chính kiện đặt móng mở triển vọng to lớn cho kỹ thuật DNAtáitổhợp sau Hình Hai phân tử DNA ... giới hạn EcoRI tạo đầu dính bổ sung nhau, cách khâu nối thành phân tử DNAtáitổhợp in vitro nhờ xử lý với DNA ligase Phương pháp nối trực tiếp tổng hợp đầu bổ sung Đối với đoạn DNAtạo cách xử ... chẳnghạn, vi c nối đoạn DNA có đầu tạothực theo hai cách sau: Nối trực tiếp DNA ligase phage T4 tổng hợp thêm đầu dính vào đầu 3' số nucleotide bổ sung cách sử dụng enzyme end-transferase, sau đoạn DNA...
... phẩm để công bố Ví dụ 1: Sau học xong “Hoán vị, chỉnh hợp, tổhợp giáo vi n cho học sinh thực dự án “Một số dạng toán tổhợp áp dụng hai quy tắc đếm, hoán vị, chỉnh hợp, tổhợp chương trình ... hút tham gia vàohoạtđộng học tập giáo vi n tổ chức đạo, thông qua đó, tự lực khám phá, tìm tòi kiến thức không thụ động trông chờ vàovi c truyền thụ giáo vi n Người học hoạt động, trực tiếp ... đối tượng hoạtđộng "dạy", đồng thời chủ thể hoạtđộng "học" - hút vàohoạtđộng học tập giáo vi n tổ chức đạo, thông qua tự lực khám phá điều chưa rõ thụ động tiếp thu tri thức giáo vi n đặt...
... đến E giảm hầu nh không giảm dừng lại chọn số hệ luyện phù hợpQuátrình luyện đợc thực nhiều lần để tránh rơi vào cực tiểu địa phơng mặt lỗi hay gọi bị rơi vào bẫy Nh vậy, lý thuyết MTKNT tìm ... + y j b jk j =1 Hình Quátrình lan truyền tiến - Một trình từ đầu vào, qua lớp ẩn đến kết xuất trình lan truyền tiến (feed-forward) mạng (Hình 2) Quátrình tơng tự nh trình nhận, xử lý thông ... vấn đề làm cho MTKNT không tìm đến đợc điểm trũng mặt lỗi Vi c học MTKNT hoàn toàn độc lập với ngời, ngời không tác động đến hoạtđộng nhng vi c chọn số nút, số lớp ẩn, số hệ nhiều lại làm cho...
... vọng biến toàn nội dung học thành chuỗi hoạtđộng khám phá Số lƣợng hoạtđộng mức độ tƣ đòi hỏi hoạtđộng tiết học phải phù hợp với trình độ học sinh để có đủ thời lƣợng cho học sinh thựchoạtđộng ... thựchoạtđộng lại có n cách thựchoạtđộng Vậy cộng vi c đƣợc thực theo m.n cách khác GV: Các phiếu khác tƣơng tự Dự kiến tiến trình DH: * Hoạtđộng Làm vi c theo nhóm - Mục đích: Tạo tiền đề xuất ... dụng PPDH khám phá vào DH quy tắc cộng nhân xác suất a) Quy tắc cộng xác suất Hoạtđộng GV Hoạtđộng HS - HoạtđộngBiến cố hợpHoạtđộng 1.1 Hình thành khái niệm GV: Cho hai tập hợp A, B định -...
... tử gọitổhợp chập k n phần tử A (gọi tắt tổhợp chập k A) b, Số tổhợp Số tổhợp chập k tập hợp có n phần tử ( k n ) n! k Cn k !(n k )! II, Một số dạng toán tổhợp thƣờng gặp chƣơng trình ... phẩm để công bố Ví dụ 1: Sau học xong “Hoán vị, chỉnh hợp, tổhợp giáo vi n cho học sinh thực dự án “Một số dạng toán tổhợp áp dụng hai quy tắc đếm, hoán vị, chỉnh hợp, tổhợp chương trình ... cực; đem lại hiệu 14 giáo dục cao trình đào tạobiến thành trình tự đào tạo, trình giáo dục biến thành trình tự giáo dục Thựctế cho thấy học sinh học cách thụ động, nhồi nhét kiến thức, thói quen...
... HRV-C giúp c nh báovi c mi n Trung Vi t Nam r t c n nhi m vi rút Rhino đư c s quan tâm c a ngành Y t V m t d ch t h c, nghiên c u c m u nh cho th y rõ s khác gi a t l nhi m vi rút Rhino nhóm ... trình nghiên c u c a tác gi Mardis cs, 2007 , vi rút Rhino có trình t di truy n r t đa d ng u lý gi i t l nhi m vi rút Rhino thư ng cao b nh nhân vi m đư ng hô h p [9] K T LU N Bài nghiên c u ... i đa d ng trình t nucleotit tương ng v i nhi u ki u huy t khác S bi n đ i đa d ng có th nguyên nhân n cho Rhino tác nhân hàng đ u c a ca nhi m vi rút hô h p mi n Trung Vi t Nam Y HỌC THỰC HÀNH...
... thể biếnnạp PHẦN TỔNG QUAN TÀI LYỆU 2.1 Hiện tƣợng biếnnạpvikhuẩn 2.1.1 Hiện tƣợng biếnnạpBiếnnạp tƣợng tiếp nhận DNA từ bên vàotếbàovikhuẩn Hiện tƣợng biếnnạp đƣợc chứng minh lần vi ... thành công biếnnạp plasmid táitổhợpvàotếbàovikhuẩn E.coly phƣơng pháp Calcium chloride Sambrook cộng (1989), đƣa phƣơng pháp chuẩn bị tếbào E.coly khả nạp, biếnnạp plasmid vàotếbào theo ... plasmid,kiểm tra Sơ đồ 3.2 Quy trìnhbiếnnạp plasmid vàotếbàovikhuẩn 26 3.3.2 Quy trìnhbiếnnạp đoạn DNAvàovikhuẩn E.coly DH5α kiểm tra + CaCl2 Vikhuẩn Ecoly DH5α Khả nạp Plasmid Bluescript...
... Ngoài ra, Protease hoạtđộng yếu tố phát triển tếbào ác tính tếbào bình thường tǎng phân chia tế bào, sinh tổng hợp ADN [2] So với Protease độngvậtthực vật, Protease vi sinh vật có đặc điểm ... nguồn thu nhận để sản xuất enzyme Nhưng chủ yếu ba nguồn chính: Động vật, thựcvậtvi sinh vật - Protease phân bố thực vật, động vật, vi sinh vật Tuy nhiên nguồn enzyme vi sinh vật phong phú nhất, ... sánh trình tự gen với với trình tự gen mã hóa protein enzyme loài chi Bacillus có trình tự gen công bố genbank - Xác định trình tự genbảo thủ - Từ trình tự genebank thiết kế mồi để tổng hợp đoạn...
... khuẩn /tế bàovật chủ Sau tạo vector táitổhợp mang gen ngoại lai, vi c biếnnạpvàotếbàovật chủ Trong trường hợptếbàovật chủ thường sử dụng vikhuẩn E coli để khuếch đại lượng lớn DNA plasmid ... dùng đểtạodòng đoạn DNA in vitro 5’-PO4 Trong thực tế, đoạn DNA gắn với đểtạo phân tử DNAtáitổhợp thường đoạn ngẫu nhiên DNA hệ gen, mà thay vào đoạn DNA mang gen từ sinh vật eukaryote vi ... bàovikhuẩn nhận plasmid gen ngoại lai chèn vào - Tếbàovikhuẩn nhận plasmid táitổhợpVì vậy, vi c xác định dòngvikhuẩn chứa plasmid táitổhợp phải nhiều công sức Có ba phương thứcđể xác...
... trùng Nấm men Vikhuẩn Nấm men Vikhuẩn gene Khả Nấm men đường hóa ThựcvậtTếbào côn ĐộngvậtTếbào chuyển Vikhuẩn trùng chuyển độnggenvật gene ThựcvậtTếbào côn ĐộngvậtTếbào giúp protein ... protein táitổhợp Tiêu Tên hệ thống biểu chí Tốc độ biểu ĐộngvậtThựcvậtTếbàoTếbào côn chuyển gen chuyển gene độngvật trùng Giá ĐộngvậtThựcvậtTếbào côn chuyển gen chuyển trùng Nấm men Vi ... PROTEIN TÁITỔHỢP Ở TẾBÀOĐỘNGVẬT CÓ VÚ Một số gene độngvật cần chuyển cần biểu tếbàođộngvật có vú Đểthực điều vector thoi tồn cho phép di chuyển gene chuyển từ vikhuẩn tới tếbàođộng vật...
... cắt lấy đoạn gen Bước 3: Cắt gen thể truyền phage T4 Bước 4: Nối gen kháng nguyên vàogen thể truyền Bước 5: Chuyển gentáitổhợpvào thể truyền Bước 6: Nuôi cấy thể truyền vikhuẩn e.Coli Bước ... xoay (là vùng chức tỳ tạng, nơi tiêu huỷ vậtlạvikhuẩn xâm nhập vào thể) Khi tác nhân gây bệnh xâm nhập nhiều gây tình trạng tải đến lúc tếbào chức thoái hoá Quátrình hoại tử tỳ tạng trình ... sát thấy tếbào tách rời nhau, nhân tếbào co lại vỡ vụn, cuối tếbào bị tiêu hủy Khi cá bệnh nặng, tổn thương lan rộng làm gan không chức khử độc lọc máu, làm chất độc tích tụ thể kết hợp với...
... thuật chuyển genvi sinh vật, quá trình quan là dung nạp đoạn DNA cần chuyển vào tế bào vi sinh vật Vê nguyên tắc, làm lỗ thủng màng tế bào vi khuẩn đểđưa đoạn DNA vào tế bào Thường ... tế bào nhận Sự liên kiết DNA vào tế bào nhận Sự liên kết DNAlạ với đoạn DNA tương đồng nhiễm sắc thể tế Sự nhân lên nhiễm sắc thể DNAbiếnnạp Muốn thựcbiếnnạp cần có điệu kiện: (1) ... luận 12 Vi c phát tán ngang DNA tái tổhợp thừ thức ăn vào thể động vật không phát Xác suất chuyển và tổhợp một cách có chức DNA từ thực phẩm tiêu hóa các tế bào hệ vi sinh vật...
... polynucleotide Tếbào khả biến (competent cell) Các tếbàovikhuẩn có khả tiếp nhận DNA ngoại lai trìnhbiếnnạp Công nghệ DNAtáitổhợp 198 Thể biếnnạp (transformant) Tếbào sinh vật nhận gen sinh vật ... hai tếbàovikhuẩn với nhau) DNA plasmid, chí DNA hệ genvi khuẩn, thông qua ống protein để chuyển từ tếbàovikhuẩn “cho” sang tếbàovikhuẩn “nhận” Các plasmid, vi c chuyển giao DNA riêng ... nhiều phần hệ gentếbàovikhuẩnvật chủ đến tếbàovikhuẩn “nhận” khác Do vậy, chúng gọi nhân tố giới tính (sex factor) vikhuẩnvật chủ, có vai trò quan trọng bảo tồn di truyền vikhuẩn theo...
... sợi DNA thứ nhất, sau dùng sợi làm khuôn mẫu để tổng hợp sợi DNA thứ hai (tương tự giai đoạn thứ thứ hai trình tổng hợp cDNA-xem chương 6) Giai đoạn thứ hai Dùng DNA sợi đôi làm khuôn mẫu đểthực ... ứng biến đổi RNA hệ gen thành sợi DNA thứ phải nhờ đến enzyme phiên mã ngược (reverse transcriptase) giai đoạn gọi phiên mã ngược (RT), sau trình tổng hợp sợi DNA thứ hai lại nhờ enzyme khác DNA ... số virus có hệ gen RNA (retrovirus) nên muốn khuếch đại đoạn gen người ta phải dùng kỹ thuật RTPCR Một số nghiên cứu khác mRNA cần đến RT-PCR đểbiến đổi sợi RNA thành DNA cho trìnhtạodòng để...
... tube vi ly tâm Cho đệm rửa vào cột rửa cột vài lần cách ly tâm nhanh Thay tube vi ly tâm mới, cho đệm hòa tan DNAvào cột ly tâm để dung ly (elution) DNA khỏi màng vào tube Dung dịch DNA thu được ... nghệ DNAtáitổhợp 31 0,5 mL (còn gọi spin column) Cột cho vào tube vi ly tâm loại 1,5 mL ly tâm tốc độ cao 10.000-15.000 rpm 10-15 phút DNA liên kết với màng dung dịch đệm qua lớp thủy tinh vào ... nhanh trở lại để chuyển DNA từ gel vào dung dịch glycerol (quá trình điện di kiểm soát UV) Dung dịch glycerol -DNA sau chiết pipette Hoặc sau điện di, khe nhỏ cắt gel phía trước băng DNA quan tâm...
... khuyết đoạn hoạt tính 2.3 Biếnnạp vector táitổhợpvàovikhuẩn /tế bàovật chủ Sau tạo vector táitổhợp mang gen ngoại lai, vi c biếnnạpvàotếbàovật chủ Trong trường hợptếbàovật chủ thường ... bị biếnnạp đắt tiền Công nghệ DNAtáitổhợp 83 2.3.2 Hóa biếnnạp Đây phương thức kinh điển đểbiếnnạpDNA plasmid vàotếbào E coli Các tếbào ủ dung dịch CaCl2 để trở thành tếbào khả biến ... nghệ DNAtáitổhợp 82 sử dụng vikhuẩn E coli để khuếch đại lượng lớn DNA plasmid táitổhợp dùng cho phân tích sau Hai phương pháp dùng đểbiếnnạp vector táitổhợpvào E coli điện biến nạp...
... điện biếnnạpđểbiếnnạp plasmid táitổhợpvàotếbào chủ nhận Lúc đầu máy biếnnạp sử dụng đểbiếnnạpvàotếbàođộngvật sau tếbàothựcvật Hiệu biếnnạp xung điện cao đoạn DNAbiếnnạp ... ligase đểtạoDNAtáitổhợp hoàn chỉnh Bước 6: BiếnnạpDNAtáitổhợpvàotếbào chủ ( ví dụ vikhuẩn E.coli nhân dòng Bước 7: Chọn lọc tạodòngtếbào chủ (vi khuẩn) mang DNAtáitổhợp theo ... với tạo plasmid táitổhợp IV.2 Tách dòngDNAtáitổhợp Sau plasmid táitổ hợp, vector táitổhợptạo thành, bước biếnnạp chúng vàotếbào chưa mang plasmid chứa gen lạ, ví dụ biếnnạp vào...