Luận văn đánh giá mức độ đảm bảo an toàn vệ sinh thực phẩm về một số chỉ tiêu vi sinh vật của tôm sú (penaeus monodon) nuôi tại hải phòng

luận văn

B GIÁO D C VÀ ðÀO T O TRƯ NG ð I H C NÔNG NGHI P HÀ N I - - TRƯƠNG TH THÀNH VINH ðÁNH GIÁ M C ð ð M B O AN TOÀN V SINH TH C PH M V M T S CH TIÊU VI SINH V T C A TÔM SÚ (PENAEUS MONODON) NUÔI T I H I PHỊNG LU N VĂN TH C SĨ NƠNG NGHI P Chuyên ngành: nuôi tr ng th y s n Mã s : 60.62.70 Ngư i hư ng d n khoa h c: TS Bùi Quang T HÀ N I - 2009 Trư ng ð i h c Nông nghi p Hà N i – Lu n văn th c s khoa h c nông nghi p……… i L I CAM ðOAN Tơi xin cam đoan cơng trình nghiên c u tơi tr c ti p th c hi n v i s giúp ñ c a giáo viên hư ng d n v i anh ch cán b thu c phịng thí nghi m - Phòng Sinh h c th c nghi m - Vi n Nghiên c u Nuôi tr ng th y s n I Các s li u k t qu nghiên c u đư c trình bày trung th c, thơng tin trích d n lu n văn ñ u ñã ñư c ch rõ ngu n g c Tác gi Trương Th Thành Vinh Trư ng ð i h c Nông nghi p Hà N i – Lu n văn th c s khoa h c nông nghi p……… i L I C M ƠN Trong q trình th c hi n đ tài, tơi nh n đư c s quan tâm, ch b o, hư ng d n t n tình c a th y giáo, anh ch trư c, b n bè s ñ ng viên khích l c a gia đình đ tơi có th hồn thành lu n văn L i đ u tiên, tơi xin bày t lịng bi t ơn chân thành sâu s c t i th y giáo T.S Bùi Quang T t n tình hư ng d n, ch b o, t o m i ñi u ki n giúp tơi hồn thành lu n văn Qua đây, tơi xin c m ơn t i cán b Phòng Sinh h c th c nghi m - Vi n nghiên c u Nuôi Tr ng Th y s n I cán b thu c ñ tài KC-07.11/06-10 ñã t o m i ñi u ki n t t nh t ñ th c hi n đ tài Tơi xin bày t lịng kính tr ng bi t ơn chân thành t i th y cô giáo Vi n ðào t o Sau ð i h c - Trư ng ð i h c Nông nghi p Hà N i, Phịng H p tác Qu c t đào t o - Vi n nghiên c u Nuôi Tr ng Th y s n I Tôi xin bày t lịng bi t ơn sâu s c đ n Ban giám hi u Trư ng ð i h c Vinh, Ban ch nhi m Khoa Nơng Lâm Ngư t o u ki n giúp tơi hồn thành t t nhi m v công tác, h c t p nghiên c u khoa h c th i gian qua Cu i cùng, xin c m ơn t t c b n bè, b n ñ ng nghi p nh ng ngư i góp ý chân thành giúp đ , đ ng viên tơi su t th i gian tơi hồn thành lu n văn Trư ng ð i h c Nông nghi p Hà N i – Lu n văn th c s khoa h c nông nghi p……… ii M CL C L I CAM ðOAN i L I C M ƠN ii M C L C iii DANH M C CÁC CH T T VÀ KÍ HI U v DANH M C B NG, HÌNH vii ð T V N ð Chương T NG QUAN TÀI LI U .3 1.1 Ng ñ c th c ph m vi sinh v t 1.2 Vi khu n gây m t ATVSTP s n ph m th y s n 1.2.1 E coli Fecal coliform .6 1.2.2 Vi khu n Vibrio .9 1.2.3 Vi khu n Salmonella 13 1.2.4 Vi khu n Staphylococcus 15 1.3 Tôm sú (Penaeus monodon), m i nguy nh hư ng ñ n ch t lư ng 16 1.3.1 H vi sinh v t tôm 16 1.3.2 M t s ch tiêu vi sinh v t đ m b o ATVSTP tơm ni 18 1.4 Mơ hình ni tơm thâm canh ña c p 20 Chương N I DUNG, V T LI U VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN C U 23 2.1 N i dung nghiên c u 23 2.2 V t li u, ñ a ñi m th i gian nghiên c u 23 2.2.1 V t li u nghiên c u 23 2.2.2 ð a ñi m nghiên c u .23 2.2.3 Th i gian nghiên c u 23 2.3 Phương pháp thu b o qu n m u 23 2.4 Phương pháp phân tích m u 24 2.4.1 Phương pháp MPN (Most Probable Number technique) .24 Trư ng ð i h c Nông nghi p Hà N i – Lu n văn th c s khoa h c nông nghi p……… iii 2.4.2 Phương pháp ñ m khu n l c (phương pháp ñ m ñĩa) 27 2.5 Giám ñ nh m t s đ c tính sinh hóa c a ch ng vi khu n 30 2.5.1 Ch n l c khu n l c ñ kh ng ñ nh chu n b d ch c y tinh t 30 2.5.2 Các phép th nh n d ng gi ñ nh 30 2.5.3 Kh ng ñ nh sinh hóa 30 2.6 Phương pháp x lý, phân tích s li u 34 Chương K T QU NGHIÊN C U VÀ TH O LU N 35 3.1 K t qu đ nh lư ng lồi vi khu n tôm sú thương ph m 35 3.1.1 K t qu ñ nh lư ng m t ñ vi khu n hi u khí t ng s 35 3.1.2 K t qu ñ nh lư ng Fecal coliform 37 3.1.3 K t qu ñ nh lư ng E.coli .39 3.1.4 K t qu ñ nh lư ng Vibrio spp 41 3.1.5 K t qu ñ nh lư ng Salmonella spp Staphylococcus spp .44 3.2 Giám đ nh đ c tính sinh hóa c a ch ng vi khu n 46 Chương K T LU N VÀ KI N NGH 52 4.1 K t lu n 52 4.2 Ki n ngh 52 TÀI LI U THAM KH O 53 A TÀI LI U TI NG VI T 53 B.TÀI LI U TI NG ANH 56 C TÀI LI U T INTERNET 58 PH L C 59 I PHÂN TÍCH ANOVA SO SÁNH M T ð VI KHU N MƠ HÌNH NI 59 II M T S HÌNH NH MINH H A CHO ð TÀI 62 Trư ng ð i h c Nông nghi p Hà N i – Lu n văn th c s khoa h c nông nghi p……… iv DANH M C CÁC CH T T VÀ KÍ HI U ADH Arginine DiHydrolase AMY Amygdalin ARA Arabinose ATVSTP An toàn v sinh th c ph m CFU Colony Forming Unit CIT Citrate utilization EU European Liên minh Châu Âu FDA Food And Drug Administration C c Qu n lý Th c ph m ðơn v khu n l c Dư c ph m M GEL Gelatinase GLU Glucose HACCP Hazard Analysis and Critical Control Phân tích m i nguy Point IND Indole INO Inositol ISO Internation Standard Organization ki m soát t i h n T ch c Tiêu chu n qu c t LSD Least Significance difference KIA Kligler Iron Agar KL Khu n l c LDC Lysine DeCarboxylase MAN Mannitol Max L n nh t MEL Melibiose MPN Most Probable Number Phương pháp phân tích vi sinh v t theo s có xác Trư ng ð i h c Nông nghi p Hà N i – Lu n văn th c s khoa h c nông nghi p……… v su t l n nh t Nu Nutrient Agar NTTS Nuôi tr ng th y s n ONPG OrthoNitroPhenyl Galactopyranosidase RHA Rhamnose SAC Saccharose SD Standard Deviation SOR Sorbitol TCVN Tiêu chu n Vi t Nam TCBS Thiosulphate Citrate Bilesalt Sucrose TDA Tryptophane DeAminase TSI Triple Sugar Iron Agar URE Urease VK Vi khu n VKHKTS Vi khu n hi u khí t ng s VP Voges Proskauer WHO World Health Organization ð l ch chu n T ch c Y t Th gi i Trư ng ð i h c Nông nghi p Hà N i – Lu n văn th c s khoa h c nơng nghi p……… vi DANH M C B NG, HÌNH DANH M C B NG B ng 1 M t s ch tiêu vi sinh v t ñ m b o ATVSTP th gi i 18 B ng Các ch tiêu v sinh an toàn th c ph m cho nguyên li u thu s n 19 B ng Ch tiêu ñ i v i TS nh p kh u ñ ch bi n trư c tiêu th n i ñ a 19 B ng K t qu ñ nh lư ng VKHKTS tôm thương ph m 35 B ng K t qu ñ nh lư ng Fecal coliform tôm thương ph m .37 B ng 3 K t qu ñ nh lư ng E coli tôm thương ph m 39 B ng K t qu đ nh lư ng Vibrio tơm thương ph m 43 B ng K t qu ñ nh lư ng Salmonella Staphylococcus tôm 44 B ng ð c tính sinh hóa c a lồi Vibrio phân l p đư c 48 DANH M C HÌNH Hình 1.1 Vi khu n E.coli Hình 2.Vi khu n Vibrio cholerae 11 Hình Vi khu n Salmonella 13 Hình Vi khu n Staphylococcus aureus .15 Hình Sơ đ ngu n lây nhi m m i nguy ATVSTP vào th y s n ni .17 Hình Các mơ hình ni tơm sú đa c p (đa chu kỳ - đa ao) .21 Hình Sơ đ pha lỗng m u c y m u vào lo i môi trư ng .27 Hình 2 Các bư c ti n hành ñ nh lư ng vi khu n 28 Hình M t đ vi khu n hi u khí t ng s trung bình mơ hình ni 36 Hình M t đ Fecal coliform trung bình mơ hình ni 38 Hình 3 M t đ E.coli trung bình tơm mơ hình ni 40 Hình M t đ Vibrio spp trung bình mơ hình ni 42 Hình M t đ Staphylococcus spp tơm thương ph m 45 Hình M t s đ c tính sinh hóa ñi n hình c a E.coli 46 Hình M t s đ c tính sinh hóa c a Staphylococcus spp 47 Hình Hình nh ph n ng sinh hóa theo kít API c a lồi Vibrio 50 Trư ng ð i h c Nông nghi p Hà N i – Lu n văn th c s khoa h c nông nghi p……… vii ð TV Nð Th y h i s n ñã ñang chi m lĩnh v th quan tr ng th trư ng th c ph m b i giá tr dinh dư ng cao, hàm lư ng cholesterol th p, giàu protein, vitamin khoáng ch t Tuy nhiên, th y h i s n n ch a nhi u r i ro liên quan ñ n v n ñ an toàn v sinh th c ph m (ATVSTP), gây ng đ c, có th d n đ n t vong cho ngư i T i M , hàng năm có 3,3 đ n 12,3 tri u ngư i ng đ c 3.900 trư ng h p t vong tác nhân gây b nh b t ngu n t h i s n b nh ph nư c ñang phát tri n, tác nhân vi sinh v t gây bi n Vibrio cholerae, Campylobacter, E coli, Brucella, Salmonella ñã n 1,5 t ngư i b tiêu ch y tri u tr em ch t ch ng b nh hàng năm [54] Vi t Nam, theo ñi u tra c a t ch c Y t th gi i (WHO), m i năm có tri u trư ng h p nhi m ñ c, gây thi t h i 200 tri u USD (kho ng 3.400 t đ ng) Trong đó, vi sinh v t tác nhân ch y u v i t l 42,2% [51] Chính v y, v n đ ATVSTP ñang ñư c ñ t lên hàng ñ u nhi u qu c gia, tr thành rào c n quan tr ng c a m t hàng xu t kh u mu n ñ t chân lên th trư ng l n M , EU Tôm sú (Penaeus monodon) m t nh ng th c ph m ñư c ngư i tiêu dùng ñ c bi t ưa chu ng, ñã ñang ñ i tư ng nuôi ch l c c a nhi u qu c gia có Vi t Nam Tuy nhiên, q trình ni, tơm sú có th b nhi m m t s lồi vi khu n gây m t ATVSTP t môi trư ng t nhiên, môi trư ng nuôi, vi c lưu gi , ch bi n ñ n b o qu n cung ng khơng thích h p ð c bi t lo i vi khu n Vibrio cholerae, Salmonella, Shigella, E coli…đ u có th gây ng ñ c d n ñ n t vong [54] Vì v y, v n đ ATVSTP h t s c c n thi t, gi i pháp ñư c th c hi n t khâu nuôi tr ng r t quan tr ng Vi c nghiên c u xây d ng mơ hình ni v a đ m b o ATVSTP, v a cho su t cao ñang Trư ng ð i h c Nông nghi p Hà N i – Lu n văn th c s khoa h c nông nghi p……… m c tiêu c a ngư i ni tơm Mơ hình ni tơm sú thâm canh ña c p ñư c ñ xu t b i Bùi Quang T c ng s năm 2007 đư c minh ch ng có hi u qu v su t nhiên thi u nh ng nghiên c u liên quan ñ n v n đ ATVSTP tơm thương ph m t mơ hình ni Nh m đánh giá m c đ ñ m b o ATVSTP c a tôm sú nuôi thâm canh mơ hình ni c a hình th c ña c p ðư c s h tr c a đ tài KC 07 - 11, Phịng Sinh h c th c nghi m - Vi n nghiên c u NTTS I, chúng tơi ti n hành đ tài: ðánh giá m c ñ ñ m b o an toàn v sinh th c ph m v m t s ch tiêu vi sinh v t c a tơm sú (Penaeus monodon) ni t i H i Phịng * M c tiêu ñ tài: ðánh giá m c ñ nhi m m t s vi sinh v t nh hư ng đ n an tồn v sinh th c ph m tôm sú thương ph m nuôi thâm canh theo hình th c đa c p t i H i Phòng Trư ng ð i h c Nông nghi p Hà N i – Lu n văn th c s khoa h c nông nghi p……… B ng ð c tính sinh hóa c a lồi Vibrio phân l p đư c ð c m sinh Các lồi phân l p đư c hóa Lồi Lồi Lồi Màu KL/TCBS Xanh Xanh Vàng Nhu m Gram - - - Hình d ng VK Tr c khu n Tr c khu n Tr c khu n OF +/+ +/+ +/+ ONPG + + - ADH - - - LDC + + + ODC + + + CIT + - - H2S + - - URE + - - TDA - - - IND d + + VP - - - GEL + + + GLU + + + MAN + + + INO - - - SOR - - - RHA - - - SAC - - + MEL - - - AMY + + + ARA - - - Trư ng ð i h c Nông nghi p Hà N i – Lu n văn th c s khoa h c nông nghi p……… 48 Sinh trư ng = = = nư c pepton v i: - = = 0% NaCl + - - 2% NaCl + + + 6% NaCl - + + 8% NaCl - + + 10% NaCl _ _ _ Tên vi khu n V mimicus V vulnificus V alginolyticus + : > 90% ch ng ph n ng dương, - : < 90% ch ng ph n ng âm, d : 50% ch ng ph n ng dương K t qu th ph n ng sinh hóa b ng kít API 20E chúng tơi nh n th y có 85,71% ph n ng sinh hóa c a ch ng gi ng v i V mimicus, 85,71% ph n ng sinh hóa c a ch ng gi ng v i V vulnificus 90,47% ph n ng c a ch ng gi ng v i V alginolyticus mà Buller, 2004 ñã phân l p Như v y, d a vào hình thái c a khu n l c, hình thái vi khu n nhu m Gram v i k t qu th ph n ng sinh hố b ng kít API 20E có th k t lu n ch ng vi khu n vi khu n có tên V mimicus, ch ng V alginolyticus, ch ng V alginolyticus Khu n l c c a V.mimicus, V vulnificus V alginolyticus phát tri n môi trư ng TCBS ñ u tròn ñ u, b t màu h ng nhu m Gram, hình d ng tr c khu n Tuy nhiên, V.mimicus, V.vulnificus có màu xanh, khơng có kh nămg s d ng ñư ng saccarose, ñư ng kính t - mm, h u h t ph n ng sinh hóa gi ng nhau, ngo i tr ph n ng CIT, H2S URE v i V.mimicus dương tính cịn V vulnificus âm tính Gi a V.alginolyticus V.vulnificus có nhi u ph n ñ ng, ch khác ng tương OPNG SAR, đ c m có kh lên men ñư ng saccarose mà khu n l c c a V alginolyticus có màu vàng, khác v i V.mimicus, V vulnificus Trư ng ð i h c Nông nghi p Hà N i – Lu n văn th c s khoa h c nông nghi p……… 49 Kh sinh trư ng c a loài vi khu n mơi trư ng pepton v i n ng đ mu i khác khác V i V.mimicus có kh phát tri n mơi trư ng có đ m n th p, th m chí b ng 0, b sung 6% NaCl lồi khơng phát tri n đư c ð i v i V.vulnificus kh thích nghi v i mơi trư ng có đ m n cao hơn, 0%, chúng khơng phát tri n ñư c, 2% 6% chúng phát tri n t t lên đ n 8% khơng có kh phát tri n Riêng V alginolyticus có kh phát tri n t t môi trư ng có đ m n cao, lên đ n 8% Kit API th ph n ng sinh hóa c a V.minicus OF Kit API th ph n ng sinh hóa c a V.alginolyticus OF Kit API th ph n ng sinh hóa c a V.vulnificus OF Hình Hình nh ph n ng sinh hóa theo kít API c a loài Vibrio N u xét v phương di n gây b nh cho ngư i s d ng th c ph m có lồi vi khu n m c đ nh hư ng khơng ñáng k , v y, th gi i Vi t Nam chưa ñ m t tiêu chu n v gi i h n Trư ng ð i h c Nông nghi p Hà N i – Lu n văn th c s khoa h c nông nghi p……… 50 cho phép c a chúng th c ph m tiêu dùng Tuy nhiên, s có m t c a chúng đ i tư ng ni có th s ngun nhân gây b nh cho tôm n u y u t môi trư ng ao nuôi không thu n l i Theo ð Th Hòa, 2006 cho r ng giai ño n tôm gi ng, tôm kh e m t ñ vi khu n 3008 khu n l c/cá th , tôm b nh nhi m 14450 khu n l c/cá th V.vulnificus, V.alginolyticus, V.spelendidus ñư c xem nhóm vi khu n gây b nh h i tôm sú thương ph m [34] Trư ng ð i h c Nông nghi p Hà N i – Lu n văn th c s khoa h c nông nghi p……… 51 Chương K T LU N VÀ KI N NGH 4.1 K t lu n - Tơm thương ph m thu t mơ hình nuôi c p, c p c p t i th i ñi m nghiên c u ñ u ñ t yêu c u v ATVSTP theo tiêu chu n th gi i Vi t Nam v ch tiêu: Salmonella, Vibrio parahaemolyticus, Vibrio chorela, Fecal Coliform, E.coli Riêng ch tiêu E coli tôm thương ph m mơ hình ni c p khơng đ t tiêu chu n ATVSTP - M t ñ c a vi khu n hi u khí t ng s , Fecal coliform, Vibrio spp mơ hình l n nh t có s sai khác có ý nghĩa th ng kê v i mơ hình c p c p (p < 0,05) gi a mơ hình c p c p khơng có s sai khác có ý nghĩa th ng kê v i p > 0,05 - M t ñ E coli, Staphylococcus spp mơ hình ni c p, c p c p khơng có s sai khác v i m c ý nghĩa p > 0,05 4.2 Ki n ngh - C n ti n hành thu m u đ nh kì phân tích xem tơm nuôi v nuôi ti p theo năm, v sau y u t vi sinh v t có đư c trì n đ nh n m gi i h n cho phép hay không, góp ph n đánh giá tính hi u qu lâu dài c a hình th c luân chuy n ao - Ti n hành song song thu m u tôm m u nư c, m u bùn ñáy ao ñ phân tích s tương quan c a y u t vi sinh v t gi a y u t ñ u vào v i t l m u nhi m tơm thương ph m, t có gi i pháp ki m sốt Trư ng ð i h c Nông nghi p Hà N i – Lu n văn th c s khoa h c nông nghi p……… 52 TÀI LI U THAM KH O A TÀI LI U TI NG VI T B Nơng Nghi p PTNT (2008), Quy t đ nh 2670/BNN-QLCL, Công b danh m c ch tiêu ch ñ nh ki m tra ñ i v i lô hàng th y s n B Th y s n (FDA NAFIQACEN), (2002), K t qu ph i h p nghiên c u ngu n lây nhi m vi sinh v t đ m ni B Th y s n - D án Seaquip (2004), S tay ki m nghi m vi sinh th c ph m th y s n (Nhóm biên d ch: Lê ðình Hùng, Nguy n ð c Hùng, Huỳnh Lê Tâm), Nhà xu t b n Nông Nghi p, tr 157 - 211 B Y T (1998), Quy t ñ nh 867/1998/Qð-BYT - Danh m c tiêu chu n v sinh ñ i v i lương th c, th c ph m Vũ ð t, ðoàn Th Băng Tâm (1995), ð c tính sinh hóa c a ch ng Salmonella phân l p ñư c bê, nghé tiêu ch y, K t qu khoa h c chăn nuôi thú y 1991 - 1995 Nguy n Th Hi n, Phan Th Kim, Trương Th Hòa, Lê Th Lan Chi (2009), Giáo trình vi sinh v t nhi m t p lương th c, th c ph m, ð i h c Bách Khoa Hà N i Cù H u Phú, Nguy n Ng c Nhiên, Vũ Bình Minh, ð Ng c Thúy (2000), K t qu phân l p E.coli Salmonella spp, xác ñ nh m t s đ c tính sinh hóa c a ch ng phân l p ñư c bi n pháp phòng tr , K t qu KHKT thú y 1996 2000 Lê T Phúc (2005), K t qu nuôi tôm chân tr ng (Litopenaeus vannamei) theo mơ hình b c thang (đa chu kỳ đa ao) t i t p đồn H ng Hưng (Evergreen Group), Tr m Giang, Qu ng Châu, Trung Qu c Nguy n Vĩnh Phư c (1978), Vi sinh v t thú y t p 2, Nhà xu t b n ðH Trung h c chuyên nghi p Hà N i Trư ng ð i h c Nông nghi p Hà N i – Lu n văn th c s khoa h c nông nghi p……… 53 10 Nguy n Xuân Nam (2004), Bư c ñ u ñánh giá nh hư ng c a m t s m i nguy đ n ch t lư ng an tồn v sinh th c ph m c a tôm sú nuôi thâm canh vùng ven bi n B c Liêu, Lu n văn th c s khoa h c th y s n, ð i h c Nông Lâm Tp H Chí Minh 11 Nguy n Kh Ng (2000), Xác đ nh y u t gây b nh c a E.coli b nh phù ñ u l n ñ ng b ng sông C u Long, ch vacxin phịng b nh, Lu n án ti n s nơng nghi p, Vi n thú y 12 ð Th Hòa (1994), Nghiên c u m t s b nh ch y u tôm sú nuôi khu v c Nam Trung B , Lu n án ti n s khoa h c Nơng Nghi p 13 ðồn Qu c Khánh (2008), Kh o sát m c đ nhi m m t s vi sinh v t gây ng ñ c th c ph m nư c ao cá rô phi nuôi t i H i Dương, Lu n văn th c s nông nghi p, ð i h c Nông Nghi p I Hà N i 14 Lê Minh Sơn (2003), Nghiên c u m t s vi khu n gây ô nhi m th t l n vùng h u ng n sông H ng, Lu n án ti n sĩ Nông Nghi p, ð i h c Nông Nghi p I Hà N i 15 Bùi Quang T CTV (2006), Nghiên c u gi i pháp k thu t nuôi tôm sú, cá ba sa cá tra ñ m b o an toàn v sinh th c ph m, Báo cáo k t qu nghiên c u ñ tài c p Nhà nư c, năm 2003 - 2005, mã s KC - 06 - 20.NN 16 Bùi Quang T CTV (2008), Nghiên c u công ngh h th ng thi t b nuôi tôm sú thâm canh theo h th ng ni đa chu kỳ - đa ao, Thuy t minh đ tài khoa h c cơng ngh c p Nhà Nư c, Mã s KC - 07.11 / 06 - 10 17 Nguy n Như Thanh, Nguy n Bá Hiên, Tr n Lan Hương (2001), Giáo trình vi sinh v t thú y, NXB Nông Nghi p Hà N i, tr 58 - 63 18 Ph m Xuân Th y (2004), Xây d ng mơ hình ni tơm sú thâm canh t i Khánh Hòa, Lu n văn ti n s khoa h c nông nghi p, Trư ng ð i h c Th y s n Nha Trang Trư ng ð i h c Nông nghi p Hà N i – Lu n văn th c s khoa h c nông nghi p……… 54 19 T Kh c Thư ng (1996), Mơ hình ni tơm sú đ t hi u qu cao Nam Trung B , Lu n văn ti n sĩ khoa h c nông nghi p, Trư ng ð i h c Th y s n Nha Trang 20 Nguy n Như Ti p (2006), Xây d ng ñánh giá tiêu chu n ch t lư ng dư lư ng ch t ñ c ñ m b o an toàn v sinh th c ph m nuôi tr ng th y s n, Báo cáo k t qu nghiên c u ñ tài c p Nhà nư c, năm 2003 - 2005, mã s KC - 06 - 20.NN 21 TCVN 4829 (2005), Vi sinh v t th c ph m th c ăn chăn nuôi Phương pháp phát hi n Salmonella spp ñĩa th ch, T ng c c ño lư ng ch t lư ng 22 TCVN 4830 (2005), Vi sinh v t th c ph m th c ăn chăn nuôi, Phương pháp ñ nh lư ng Staphylococci có ph n ng dương tính coagulase (Staphylococcus aureus lồi khác) đĩa th ch, T ng c c ño lư ng ch t lư ng 23 TCVN 4884 (2005), S n ph m th c ph m - Phương pháp xác ñ nh t ng s vi khu n hi u khí, T ng c c ño lư ng ch t lư ng 24 TCVN 6507 (2005), Vi sinh v t th c ph m th c ăn chăn nuôi Chu n b m u th , dung d ch huy n phù ban ñ u dung d ch pha lỗng th p phân đ ki m tra vi sinh v t, T ng c c ño lư ng ch t lư ng 25 TCVN 6404 (2007), Vi sinh v t th c ph m th c ăn chăn nuôi Nguyên t c chung v ki m tra vi sinh v t, T ng c c ño lư ng ch t lư ng 26 TCVN 6846 (2007), Vi sinh v t th c ph m th c ăn chăn nuôi Phương pháp phát hi n ñ nh lư ng Escherichia Coli gi ñ nh - K thu t đ m s có xác su t l n nh t, T ng c c ño lư ng ch t lư ng 27 TCVN 5287 (2008), Th y s n đơng l nh - Phương pháp xác ñ nh vi sinh v t, T ng c c ño lư ng ch t lư ng Trư ng ð i h c Nông nghi p Hà N i – Lu n văn th c s khoa h c nông nghi p……… 55 28 TCVN 7905 (2008), Vi sinh v t th c ph m th c ăn chăn nuôi Phương pháp phát hi n Vibrio spp có kh gây b nh đư ng ru t, T ng c c ño lư ng ch t lư ng B.TÀI LI U TI NG ANH 29 Anders Dalsgaard (1997), The occurrence of human pathogenic Vibrio spp and Salmonella in aquaculture, A paper presented at the Joint FAO/WHO Study Group for Food Safety for the Products of Aquaculture, 2226 July 1997 30 Andrews LS, Park DL, Chen Y-P (2000), Low temperature pasteurization to reduce the risk of vibrio infections from raw shell-stock oysters, Food Additives and Contaminants; 19: 787-791 31 Andrews LS, DeBlanc S, Veal CD, Park DL (2003), Response of Vibrio parahaemolyticus O3:K6 to a hot water/cold shock pasteurization process, Food Additives and Contaminants; 20: 331-334 32 Austin, B and D.Austin (1987), Gram - positive cocci, Bacterial fish pathogens: Disease in Farmed and Wild Fish, Ellis horwood limited, New York, pp 99-107 33 DePaola A, Kaysner CA, Bowers J, Cook DW (2000), Environmental investigations of Vibrio parahaemolyticus in oysters after outbreaks in Washington, Texas and New York (1997 and 1998), Applied and Environmental Microbiology; 66: 4649 - 4654 34 Desmarchelier PM (2003), Pathogenic vibrios, Foodborne microorganisms of public health significance Sixth Edition Australian Institute of Food Science and Technology (NSW Branch) Food Microbiology Group: New South Wales, Australia, p 333 - 358 35 Faibrother J.M (1982), Escherichia coli infection, Disease of swine seventh edition Wolfe Publishing Ltd - Australian, p 489 - 497 Trư ng ð i h c Nông nghi p Hà N i – Lu n văn th c s khoa h c nông nghi p……… 56 36 Frerichs, G.N & Millar (1993), Manual for the isolation and identification of fish bacterial pathogens, Pisces Press Stirling, p 58 37 Fish Inspection and Quality Control Division, Department of Fisheries, Thailand, Microbiological Reference Criteria for Fishery products, Revision 2, August 2004 38 Jack M Wetstone, Gravil D Treece, Graig L Browdy and Alvin D Stockes (2002), Opportunities and Constraints in marine shrimp farming, Southern Regional Aquaculture Center Publication No 2600 39 Jaw-Kai Wang and Junghans Leiman (2000), Optimizing multi-stage shrimp production systems, Aquacultural Engineering Volume 22, Issue 4, July 2000, Pages 243 - 254 40 Kraa E (1995), Surveillance and epidemiology of foodborne illness in NSW, Australia, Food Australia, p 418 - 423 41 Kaufman GE, Bej AK, Bowers J, DePaola A (2003), Oyster - to - oyster variability in levels of Vibrio parahaemolyticus, Journal of Food Protection, p 125 - 129 42 Ministry of Health, Labour and Welfare, Japan (2000), Statistics of Food Poisoning Japan in 2000 43 Official journal of the European Communities (2001), Aquatic Animal Health Research institute, Health Management in Shrimp Ponds 44.Oliver, J D., and Kaper, J.B (1997), Vibrio Species, In M P Doyle, L R Beuchat, and T J Montville, eds Food Microbiology: Fundamentals and Frontiers, p228 - 264 Washington, D.C., ASM 45 Rob Lake, Andrew Hudson, Peter Cressey (2003), Vibrio parahaemolyticus in seafood, Prepared as part of a New Zealand Food Safety Authority contract for scientific services Trư ng ð i h c Nông nghi p Hà N i – Lu n văn th c s khoa h c nông nghi p……… 57 46 Run Yu, Ping Sun Leung (2005), Optimal harvesting strategies for a multi-cycle and multipond shrimp operation, A practical network model Mathenatics and computers in Simulation 68 (2005) 339 - 354 47 Russell DG, Parnell WR, Wilson NC et al (1999), NZ Food: NZ People Key results of the 1997 national Nutrition Survey, Wellington: Ministry of Health 48 Twedt, R M (1989), Vibrio parahaemolyticus, Foodborne bacterial Pathogens, p543 - 568 49 Vanderzant C, Nickelson R (1972), Survival of Vibrio parahaemolyticus in shrimp tissue under various environmental conditions, Applied Microbiology, p 23 : 34 - 37 50 Vasudevan P, Marek P, Daigle S, Hoagland T, Venkitanarayanan KS (2002), Effect of chilling on survival of Vibrio parahaemolyticus on fish fillets, Journal of Food Safety; 22 : 209 - 217 C TÀI LI U T INTERNET 51 Lê Doãn Diên (2006), Vai trò c a phòng th nghi m Vi t Nam ñ i v i v n ñ ch t lư ng v sinh an toàn th c ph m, H i Khoa h c công ngh Lương th c, Th c ph m Vi t Nam (VAFoST), www.vinalab.org 52 Nguy n Th Liên H nh, Huỳnh H ng Quang (2007), Tiêu ch y nhi m khu n vi khu n ñư ng ru t, Vi n s t rét KST Quy Nhơn, www.impeqn.org.vn 53 ð Minh (2006), Báo đ ng đ an tồn v sinh th c ph m, www.vietbao.vn 54 Nguy n H u To n (2009), M t trái c a h i s n, www.tintuconline.com.vn 55 Food and Environmental Hygiene Department, The goverment of the Hong Kong special Administrative Region, Vibrio species in seafood, www./www.fehd.gov.hk Trư ng ð i h c Nông nghi p Hà N i – Lu n văn th c s khoa h c nông nghi p……… 58 PH L C I PHÂN TÍCH ANOVA SO SÁNH M T ð VI KHU N MƠ HÌNH NI Phân tích ANOVA so sánh m t đ vi khu n hi u khí t ng s Anova: Single Factor SUMMARY Groups Count Sum Average Mơ hình c p 15 180500 12033,33333 Mơ hình c p 15 70000 4666,666667 Mơ hình c p 15 50500 3366,666667 ANOVA Source of Variation SS df MS Between Groups 655344444,4 327672222,2 Within Groups 943800000 42 22471428,57 K t lu n: Ch p nh Total 1599144444 44 LSD 3493,2 Groups Average Mô hình c p 3366,667 Mơ hình c p 4666,667 Mơ hình c p 12033,33 3366,67 1300 8666,67 Variance 52945238,1 9845238,095 4623809,524 F P-value 1,55181E05 14,58172635 F crit 3,219942 n H1: Có s khác gi a nhóm 4666,667 12033,3 7366,667 Phân tích ANOVA so sánh m t ñ Fecal Coliform Anova: Single Factor Groups Sum Mơ hình c p 5433 Mơ hình c p 2742 Mơ hình c p 2603,6 ANOVA Source of Variation SS Between Groups 339247,5538 Within Groups 1301932,229 Average Variance 362,2 66521,2 182,8 9167,03 173,5733 17307 Df MS F P-value 169623,8 5,47202 0,007728 42 30998,39 F crit 3,219942 K t lu n: Ch p nh n H1: Có s khác gi a nhóm Total 1641179,783 44 LSD 129,7411227 Groups Average Mơ hình c p 173,5733333 173,5733333 182,8 362,2 Trư ng ð i h c Nông nghi p Hà N i – Lu n văn th c s khoa h c nông nghi p……… 59 Mô hình c p Mơ hình c p 182,8 362,2 9,226666667 188,6266667 179,4 Phân tích ANOVA so sánh m t ñ E.coli Anova: Single Factor Groups Count Sum Average Variance Mơ hình c p 15 2223 148,2 16778,6 Mơ hình c p 15 1169 77,93333333 4969,781 Mơ hình c p 15 1325,2 88,34666667 2152,803 ANOVA Source of Variation SS Df MS F P-value F crit Between Groups 43141,31733 21570,65867 2,70748 0,078345 3,219942 Within 42 7967,061206 Groups 334616,5707 Total 377757,888 44 K t lu n: Khơng có s sai khác gi a mơ hình Phân tích ANOVA so sánh m t đ Vibrio spp Anova: Single Factor SUMMARY Groups Mơ hình c p Mơ hình c p Mơ hình c p ANOVA Source of Variation Between Groups Within Groups Count 15 15 15 SS 35046013,33 67453706,67 Sum 37840 10320 9230 df Average Variance 2522,666667 4285821 688 392517,1 615,3333333 139783,8 MS F 17523006,67 42 1606040,635 10,91069 P-value F crit 0,000153 3,219942 K t lu n: Ch p nh n H1: Có s sai khác gi a mơ hình Total 102499720 44 LSD 933,8698892 Groups Average Mơ hình c p 615,3333333 615,3333333 Mơ hình c p 688 72,66666667 Mơ hình c p 2522,666667 1907,333333 668 2522,667 1834,6667 Trư ng ð i h c Nông nghi p Hà N i – Lu n văn th c s khoa h c nơng nghi p……… 60 Phân tích ANOVA so sánh m t ñ Staphylococcus spp Anova: Single Factor SUMMARY Groups Count Mơ hình c p 15 Mơ hình c p 15 Mơ hình c p 15 Sum 817 550 475 Average 54,46667 36,66667 31,66667 Variance 1599,267 823,8095 352,381 ANOVA Source of Variation Between Groups Within Groups Total SS 4308,4 38856,4 43164,8 df MS F P-value 2154,2 2,328481 0,109898 42 925,1524 44 F crit 3,219942 K t lu n: Khơng có s sai khác gi a mơ hình Trư ng ð i h c Nông nghi p Hà N i – Lu n văn th c s khoa h c nông nghi p……… 61 II M T S HÌNH NH MINH H A CHO ð TÀI Vibrio spp phát tri n TCBS sau 24h VK hi u khí t ng sơ Nu+ sau 24h E coli phát tri n Macconkey sau 24h Staphylococcus phát tri n Chapmen sau 24h nh nhu m Gram V minicus nh nhu m Gram V.vulnificus nh nhu m Gram c a V alginolyticus Trư ng ð i h c Nông nghi p Hà N i – Lu n văn th c s khoa h c nông nghi p……… 62 ... m b o an toàn v sinh th c ph m v m t s ch tiêu vi sinh v t c a tôm sú (Penaeus monodon) nuôi t i H i Phịng * M c tiêu đ tài: ðánh giá m c ñ nhi m m t s vi sinh v t nh hư ng đ n an tồn v sinh th... nghi p……… vi DANH M C B NG, HÌNH DANH M C B NG B ng 1 M t s ch tiêu vi sinh v t ñ m b o ATVSTP th gi i 18 B ng Các ch tiêu v sinh an toàn th c ph m cho nguyên li u thu s n 19 B ng Ch tiêu ñ i... nhiên ch tiêu vi sinh r t quan tr ng khơng ch ch m m c đ t n t i loài vi sinh v t gây b nh cho thu s n ni mà cịn ch tiêu gián ti p liên quan ñ n kh xu t hi n cao c a Vibrio cholera Vibrio parahaemoliticus