Chẩn đoán đột biến di truyền đơn gen giai đoạn phôi tiền làm tổ (PGT-M) trong loại trừ gen bệnh thalassemia: Báo cáo loạt ca

Thiếu máu tán huyết di truyền (thalassemia) là một bệnh lý huyết học đơn gen. Bệnh nhân cần được điều trị suốt đời và có thể tử vong nếu không tuân thủ điều trị Tại Việt Nam, ước tính hiện nay có khoảng 20.000 người bị thalassemia thể nặng, mỗi năm có thêm khoảng 10 triệu người mang gen bệnh và hàng năm, có thêm trên 2.000 trẻ bị bệnh thalassemia chào đời.

BÁO CÁO TRƯỜNG HỢP ĐẶNG QUANG VINH, NGUYỄN MINH TUẤN, LƯU THỊ MINH TÂM, PHẠM THIẾU QUÂN, TRẦN TÚ CẦM, HUỲNH GIA BẢO, HỒ MẠNH TƯỜNG CHẨN ĐOÁN ĐỘT BIẾN DI TRUYỀN ĐƠN GEN GIAI ĐOẠN PHÔI TIỀN LÀM TỔ (PGT-M) TRONG LOẠI TRỪ GEN BỆNH THALASSEMIA: BÁO CÁO LOẠT CA Đặng Quang Vinh(1,2), Nguyễn Minh Tuấn(3), Lưu Thị Minh Tâm(1), Phạm Thiếu Quân(2), Trần Tú Cầm(1), Huỳnh Gia Bảo(1), Hồ Mạnh Tường(1,2) (1)(2) HOPE Research Center, Bệnh viện Mỹ Đức, (3) Bệnh viện Nhi Đồng Tập 17, số 01 Tháng 09-2019 Từ khóa: Thalaasemia, PGT-M, thụ tinh ống nghiệm Keywords: Thalassemia, PGT-M, in vitro fertilization 90 Tác giả liên hệ (Corresponding author): Đặng Quang Vinh, email: bsvinh.dq@myduchospital.vn Ngày nhận (received): 10/07/2019 Ngày phản biện đánh giá báo (revised): 15/08/2019 Ngày báo chấp nhận đăng (accepted): 01/09/2019 Tóm tắt Đặt vấn đề: Thiếu máu tán huyết di truyền (thalassemia) bệnh lý huyết học đơn gen Bệnh nhân cần điều trị suốt đời tử vong khơng tn thủ điều trị Tại Việt Nam, ước tính có khoảng 20.000 người bị thalassemia thể nặng, năm có thêm khoảng 10 triệu người mang gen bệnh hàng năm, có thêm 2.000 trẻ bị bệnh thalassemia chào đời Kỹ thuật chẩn đoán đột biến di truyền đơn gen giai đoạn phôi tiền làm tổ (Preimplantation Genetic Testing for Monogenic disorders - PGT-M) đời, cho phép cặp vợ chồng sau có phơi từ thụ tinh ống nghiệm (TTTON), lựa chọn phơi khơng có đột biến gen gây bệnh để chuyển vào buồng tử cung người vợ giúp sinh khơng mang bệnh Mục tiêu: Đánh giá hiệu chuyển phôi sau PGT-M bệnh nhân vô sinh mang gen bệnh thalassemia Phương pháp: Đây báo cáo loạt ca, thực thời gian từ tháng 02/2017 đến tháng 05/2018 Đơn vị Hỗ trợ sinh sản Mỹ Đức (IVFMD), bệnh viện Mỹ Đức Đối tượng bệnh nhân cặp vợ chồng có định làm TTTON q trình sàng lọc cho thấy hai có mang gen bệnh Phơi ngày 5, hình thành sau TTTON, tiến hành sinh thiết để lấy khoảng tế bào ni Các tế bào gửi phân tích di truyền cơng nghệ giải trình tự hệ (Next Generation Sequencing – NGS) qua hai giai đoạn, (1) xác định tình trạng lệch bội (2) chẩn đốn bất thường đơn gen phôi không lệch bội Phôi đông lạnh sau sinh thiết phôi không mang gen bệnh hay dạng dị hợp tử sử dụng để chuyển vào buồng tử cung người vợ Yếu tố đánh giá kết tỷ lệ sinh sống sau chu kỳ chuyển phôi Kết quả: Trong thời gian nghiên cứu, có 17 cặp bệnh nhân thỏa tiêu chuẩn nhận loại Số nỗn chọc hút trung bình 16,7 ± 8,5, với số phơi ngày trung bình 6,8 ± 4,6 Trong số 79 phơi sinh thiết, có 50 (63,3%) phôi không bị lệch bội Trong 50 phôi này, tỷ lệ phôi không Abstract PREIMPLANTATION GENETIC TESTING FOR MONOGENIC DISORDERS (PGT-M) IN INFERTILE COUPLES WHO ARE CARRIERS FOR THALASSEMIA TẠP CHÍ PHỤ SẢN - 17(01), 14(01), 90 XX-XX, - 96,2016 2019 mang gen đột biến hay dạng dị hợp tử 36% 56% Hiện có trường hợp sinh sống ghi nhận trường hợp có thai tuổi thai 33 4/7 tuần Kết luận: PGT-M áp dụng thường quy cặp vợ chồng có mang gen gây bệnh thalassemia nhằm giúp sinh từ phôi không mang gen bệnh, hạn chế gánh nặng kinh tế, tâm lý cho gia đình xã hội Từ khóa: Thalaasemia, PGT-M, thụ tinh ống nghiệm Đặt vấn đề thể thường nên có người khơng có biểu bệnh lý mang gen bệnh thể dạng dị hợp tử Báo cáo năm 2008 Tổ chức Y tế Thế giới (WHO) cho thấy ước tính có khoảng 5,2% dân số giới mang gen Tập 17, số 01 Tháng 09-2019 Thiếu máu tán huyết di truyền (thalassemia) bệnh lý di truyền, liên quan đến rối loạn tổng hợp hemoglobin, dẫn đến thiếu hụt hay vắng mặt chuỗi globin (12) Vì liên quan đến gen lặn nằm nhiễm sắc Tập 14, số 04 Tháng 05-2016 Background: Thalassemia is an inherited disorder, resulting in a long-life treatment and may lead to death if left untreated It has been reported that more than 10 million Vietnamese people are carriers, resulted in more than 2.000 neonates affected by the disease born each year Preimplantation Genetic Testing for Monogenic disorders (PGT-M) aims to characterize the genetic status of embryos resulting from in vitro fertilization (IVF) cycles Embryos identified as unaffected for the thalassemia can be transferred to the uterus Objectives: To evaluate the effectiveness of transferring embryos after PGT-M in infertile couples who are carriers for thalassemia Methods: This case-series study was conducted at My Duc IVF clinic (IVFMD), My Duc Hospital, Ho Chi Minh City, Viet Nam Infertile couples undergoing IVF treatment, diagnosed as carriers for thalassemia, were included Embryo biopsy was performed on day after egg retrieval Biopsied cells were first screened for aneuploidy Only euploidy samples were then undergone PGT-M Next generation sequencing (NGS) was used in both steps Biopsied embryos were then frozen Only unaffected embryos were then transferred Primary outcome was live birth after the first embryo transfer Results: Between February 2017 and May 2018, there were 17 infertile couples included in this trial The wife’s mean age was 33.4 ± 5.9, with infertility duration of 4.3 ± 4.0 years Mean number of oocytes retrieved was 16.7 ± 8.5 and mean number of day-5 embryos was 6.8 ± 4.6 Out of 79 biopised embryos, 50 (63.3%) were euploid Among these eupolid embryos, the rate of unaffected and heterozygous embryos were 36% and 56%, respectively Currently, there are live birth reported and case at her 33 4/7 gestational age Conclusion: PGT-M could be used for couples who are carriers for thalassemia to reduce the burdens of economy on patients, family and on society Keywords: Thalassemia, PGT-M, in vitro fertilization 91 Tập 17, số 01 Tháng 09-2019 BÁO CÁO TRƯỜNG HỢP ĐẶNG QUANG VINH, NGUYỄN MINH TUẤN, LƯU THỊ MINH TÂM, PHẠM THIẾU QUÂN, TRẦN TÚ CẦM, HUỲNH GIA BẢO, HỒ MẠNH TƯỜNG 92 bệnh khoảng 1% dân số có nguy mắc bệnh thalassemia (13) Việt Nam, nằm khu vực Đông Nam Á, nên thuộc vùng dịch tễ bệnh lý Tỷ lệ người Việt Nam mang gen bệnh thay đổi tùy theo nghiên cứu, khác biệt quần thể nghiên cứu nơi tiến hành, bệnh viện hay cộng đồng (7) Tuy nhiên, báo cáo năm 2019 Viện Huyết học Truyền máu Trung ương cho thấy nay, ước tính có 12 triệu người Việt Nam mang gen bệnh, đó, số năm trước khoảng triệu người (1) Điều cần lưu ý trẻ sinh từ cặp vợ chồng mang gen gây bệnh dạng dị hợp tử có nguy khoảng 25% mắc bệnh thalassemia (12) Đây bệnh lý gây ảnh hưởng nghiêm trọng đến chất lượng sống phát triển lâu dài trẻ, để lại nhiều gánh nặng cho gia đình xã hội Quản lý bệnh thalassemia bao gồm việc phòng ngừa trường hợp bệnh mới, điều trị quản lý lâu dài bệnh nhân có Tuy nhiên, cải thiện kết điều trị quản lý lâu dài địi hỏi nhiều nguồn lực Ngồi ra, tầm sốt tồn quẩn thể việc khó khả thi Do đó, chương trình kiểm sốt thường tiến hành mức độ dự phòng cấp II, nghĩa tầm soát chẩn đoán trước sinh, từ đó, khống chế tỷ lệ mắc thơng qua giảm số ca mắc bệnh (5) Tuy nhiên, chiến lược dự phòng thường dẫn đến việc chấm dứt thai kỳ thai nhi chẩn đoán xác định Điều để lại số sang chấn tâm lý, ảnh hưởng đến tương lai sản khoa người phụ nữ gây số tranh cãi mặt tôn giáo Các vấn đề nêu khắc phục kỹ thuật chẩn đoán đột biến di truyền đơn gen giai đoạn phôi tiền làm tổ (PGT-M) Về chất, kỹ thuật phát triển từ năm đầu thập niên 1990 (2) Trong đó, phơi tạo thành từ thụ tinh ống nghiệm (TTTON) sinh thiết lấy vài tế bào để gửi làm chẩn đoán di truyền bệnh lý biết trước Những phôi không chứa gen đột biến kiểm tra sử dụng để chuyển vào buồng tử cung (BTC) người vợ Kết trẻ sinh không bị mắc bệnh hay chí khơng chứa gen bệnh kiểm tra Báo cáo Liên đồn Vơ sinh Thế giới vào năm 2016 cho thấy ước tính có khoảng 25.000 chu kỳ PGT-M thực hiện, tăng cao so với báo cáo năm 2013 (4) Tại Đơn vị Hỗ trợ sinh sản Mỹ Đức (IVFMD), bệnh viện Mỹ Đức, triển khai kỹ thuật PGT-M từ năm 2016 Bài nghiên cứu nhằm mục đích đánh giá hiệu bước đầu ứng dụng kỹ thuật PGT-M loại trừ bệnh thalassemia cặp vợ chồng có định làm TTTON có mang gen bệnh Đối tượng phương pháp nghiên cứu Đây báo cáo loạt ca, thực thời gian từ tháng 02 năm 2017 đến tháng 05 năm 2018 Đơn vị Hỗ trợ sinh sản Mỹ Đức (IVFMD), bệnh viện Mỹ Đức, thành phố Hồ Chí Minh Đối tượng nghiên cứu cặp vợ chồng muộn có (1) định điều trị kỹ thuật TTTON, (2) trình sàng lọc cho thấy hai vợ chồng mang gen bệnh (3) đồng ý thực kỹ thuật PGT-M Tất cặp vợ chồng có định TTTON sàng lọc thường quy nguy bệnh thalassemia thông qua huyết đồ Nếu có nghi ngờ, hai vợ chồng xác định phương pháp giải trình tự gen đồng thời tạo đoạn mồi labo di truyền Nếu kết phân tích di truyền cho thấy hai vợ chồng mang gen bệnh, cặp vợ chồng tư vấn nguy lợi ích kỹ thuật Nếu đồng ý tham gia, hai vợ chồng mời ký đồng thuận bắt đầu trình điều trị Vào ngày hay ngày chu kỳ kinh, người vợ kích thích buồng trứng (KTBT) với phác đồ ngắn (phác đồ GnRH đối vận), sử dụng FSH tái tổ hợp Khi có nang nỗn với kích thước 17 mm trở lên, 6.500 IU hCG hay 0,2 mg GnRH đồng vận sử dụng để khởi động trưởng thành noãn Chọc hút noãn tiến hành thời điểm 36 sau Nỗn sau chọc hút thụ tinh với tinh trùng kỹ thuật tiêm tinh trùng vào bào tương nỗn Phơi nuôi môi trường đơn bước đến ngày (sau chọc hút nỗn), giai đoạn phơi nang Vào ngày sau chọc hút, khoảng tế bào nuôi (trophectoderm cell – TE) phôi lấy Giá trị 33,4 ± 5,9 20,7 ± 2,4 4,3 ± 4,0 4,1 ± 3,6 (11,1) 16 (88,9) (27,8) (38,9) (5,5) (27,8) (44,4) 10 (55,6) AMH: Anti Mullerian Hormone Số liệu trình bày dạng số trung bình ± ĐLC hay số tuyệt đối (%) Bảng Kết thụ tinh ống nghiệm Kết Số noãn chọc hút trung bình Số nỗn ICSI Tỷ lệ thụ tinh Số phơi nang trung bình Số phơi nang loại + Giá trị 16,7 ± 8,5 14,1 ± 8,5 87,5 6,8 ± 4,6 2,9 ± 2,1 Số liệu trình bày dạng số trung bình ± ĐLC hay số tuyệt đối (%) Bảng Kết phân tích nhiễm sắc thể Kết di truyền Nguyên bội Lệch bội Thể khảm Bất thường cấu trúc Giá trị (n = 79 phôi) 50 (63,3) 20 (25,3) (3,8) (7,6) Số liệu trình bày dạng số tuyệt đối (%) Tập 17, số 01 Tháng 09-2019 Trong thời gian từ tháng 02/2017 đến 05/2018, có 18 cặp vợ chồng thỏa tiêu chuẩn đồng ý tham gia nghiên cứu Đặc điểm bệnh nhân trình bày Bảng Người vợ trường hợp thuộc nhóm tiên lượng tốt, tuổi < 35 tuổi có dự trữ buồng trứng bình thường Có tất 79 phơi ngày (phôi nang) tạo thành, với số phôi nang trung bình 6,8 ± 4,6 phơi, tỷ lệ tạo phơi nang 53,1% Các kết TTTON trình bày Bảng Tất phôi nang tiến hành sinh thiết Tỷ lệ phơi có NST nguyên bội 63,3% (bảng 3) Ba bệnh nhân có 100% phơi có NST lệch bội nên khơng tiến hành phân tích gen bệnh khơng chuyển phơi Trong số 50 phơi có NST nguyên bội (của 15 bệnh nhân lại), kết phân tích di Bảng Đặc điểm bệnh nhân Đặc điểm Tuổi vợ trung bình (năm) Chỉ số khối thể (BMI, kg/m2) Thời gian vô sinh trung bình (năm) Nồng độ AMH (ng/ml) Loại vơ sinh Ngun phát Thứ phát Chỉ định TTTON Ống dẫn trứng Bất thường tinh trùng Giảm dự trữ buồng trứng Khác Loại thalassemia Alpha Beta Tập 14, số 04 Tháng 05-2016 Kết truyền cho thấy có 18 (36%) phơi khơng mang gen bệnh 28 (56%) phôi mang gen bệnh dạng dị hợp tử (Biểu đồ 1) Kết chuyển phơi trữ trình bày Bảng Trong số 15 bệnh nhân quay lại chuyển phôi lần đầu tiên, có trường hợp thai diễn tiến (đến 12 tuần) có trường hợp có kết sinh Một trường hợp lại tuổi thai 33 4/7 tuần thời điểm viết Các kết cục sản khoa trường hợp sinh trình bày Bảng Trong số trường hợp thất bại với chu kỳ chuyển phơi đầu tiên, có bệnh nhân cịn phơi trữ TẠP CHÍ PHỤ SẢN - 17(01), 14(01), 90 XX-XX, - 96,2016 2019 kỹ thuật sinh thiết, sử dụng hệ thống laser Phôi sau sinh thiết đông lạnh lưu trữ riêng biệt phôi Các tế bào nuôi chuyển qua labo di truyền Tại đây, chúng tầm sốt lệch bội NST sau đó, mẫu có NST nguyên bội tiến hành xác định diện gen bệnh cơng nghệ giải trình tự hệ (NGS) Trong chu kỳ kinh tiếp theo, bệnh nhân chuẩn bị niêm mạc tử cung để chuyển phôi trữ nội tiết ngoại sinh (estradiol valerate kết hợp micronized progesterone) Vào ngày chuyển phôi, phôi không chứa gen bệnh rã đông chuyển vào buồng tử cung hướng dẫn siêu âm Hai tuần sau chuyển phôi, bệnh nhân thử thai Nếu kết dương tính, bệnh nhân hẹn siêu âm sau tuần Hỗ trợ hoàng thể trì đến tuần thứ thai kỳ Sau đó, thai phụ theo dõi thường quy phòng khám Sản, bệnh viện Mỹ Đức sinh Kết cục nghiên cứu tỷ lệ sinh sống sau chu kỳ chuyển phôi Các kết cục phụ bao gồm tỷ lệ phôi lệch bội, tỷ lệ phôi không mang gen bệnh, tỷ lệ phôi mang gen bệnh thể dị hợp tử, tỷ lệ beta hCG dương tính, tỷ lệ thai lâm sàng, tỷ lệ đa thai, tỷ lệ làm tổ, tỷ lệ sảy thai, tỷ lệ thai dị tật bẩm sinh 93 BÁO CÁO TRƯỜNG HỢP ĐẶNG QUANG VINH, NGUYỄN MINH TUẤN, LƯU THỊ MINH TÂM, PHẠM THIẾU QUÂN, TRẦN TÚ CẦM, HUỲNH GIA BẢO, HỒ MẠNH TƯỜNG Biểu đồ Kết phân tích gen bệnh (n = 50 phơi ngun bội) Không mang gen bệnh 36 Mang gen bệnh dạng dị hợp tử Mang gen bệnh đồng hợp tử 56 Bảng Kết chuyển Biểu đồ phơi Kếttrữquả phân tích gen bệnh (n = 50 phôi nguyên bội) Số phôi chuyển Bảng 4.Tỷ Kết chuyển phôi trữ lệ thaiquả lâm sàng (60) Tỷ lệ đa thai Số phôi chuyển Tỷ lệ làm tổ (60) Tỷ lệ thai lâm sàng (60) thai diễn tiến (53,3) Tỷ lệ Tỷ đalệthai lệ sinh (46,7) Tỷ lệ Tỷ làm tổ sống* (60) Tỷ lệ *thai diễn trường hợptiến mang thai tuần thứ 33 4/7 thai8kỳ(53,3) Tỷ lệ sinh sống* (46,7) * trường hợp mang thai tuần thứ 33 4/7 thai kỳ Bảng Kết cục sản khoa Bảng Kết Bệnh cục sảnTuổi khoa thai STT STT 6 7 Phương Giới tính nhân sinh pháp sinh Tuổi Phương L.T.H.Y., 38 5/7 thai Mổ lấy thai pháp Trai 1989 tuần sinh B.T.P.H., 38 0/7 sinh Sinh ngả Gái 1988 L.T.H.Y.,tuần 38 âm 5/7đạo Mổ lấy 1989 37 6/7 tuần thai N.T.M.T., lấy thai SinhGáingả B.T.P.H.,tuần 38Mổ0/7 1988 1988 âm đạo P.T.H., 38 5/7 tuần lấy thai MổTrailấy N.T.M.T., 37Mổ6/7 19811988 tuần tuần thai T.T.M., P.T.H.,37 6/7 38Sinh 5/7ngả MổGáilấy 19891981 tuần tuần âm đạo thai N.V.T.L., T.T.M.,36 4/7 37 6/7 Sinh ngả Mổ lấy thai âmGáiđạo 19951989 tuần tuần N.V.T.L., 36 Mổ lấy Đ.T.T., 38 6/7 4/7 Mổ lấy thai thai Gái 19871995 tuần tuần Bệnh nhân Đ.T.T., 1987 38 6/7 tuần Tập 17, số 01 Tháng 09-2019 Bàn luận 94 Mổ lấy thai Cân nặng Apgar Bất thường ghi nhận Giới tính 3300g Cân 8/9nặng - 3000g 8/9 - 2800g Gái 7/93000g - 8/9 3200g Gái 8/92800g - 7/9 Trai 2900g 8/93200g - 8/9 2900g 8/9 Trai Gái 2700g Gái 3000g Gái 3300g 8/9 2700g 8/9 3000g - Apgar 8/9 8/9 8/9 Thalassemia bệnh lý di truyền theo NST lặn để lại nhiều hậu nghiêm trọng Đây bệnh lý đơn gen phổ biến giới, đặc biệt lưu hành với tần suất cao khu vực Đông Nam Á, Địa Trung Hải Thalassemia Tổ chức Y tế giới xác định vấn đề sức khỏe nghiêm trọng khuyến cáo nước thuộc khu vực Đông Nam Á nên chọn vấn đề ưu tiên sức khỏe di truyền người (13) Tại Việt Nam, kết bước đầu khảo sát tình trạng mang gen bệnh thalassemia tồn quốc năm 2017, cho thấy có khoảng 12 triệu người mang gen bệnh Hiện nay, có 20.000 người bị thalassemia cần phải điều trị đời năm có thêm khoảng 8.000 trẻ em sinh bị bệnh thalassemia, có khoảng 2.000 trẻ bị bệnh mức độ nặng khoảng 800 trẻ đời phù thai Chi phí điều trị trung bình cho bệnh nhân thể nặng từ sinh tới 30 tuổi hết khoảng tỷ đồng Số liệu ước tính năm, ngân sách y tế cần chi 2.000 tỷ đồng tất bệnh nhân điều trị trì mức tối thiểu (1) Do đó, cơng tác dự phịng quản lý bệnh thalassemia quan tâm năm gần Các chiến lược dự phòng quốc gia đa số tập trung vào dự phòng cấp II, nghĩa thai phụ có thai tiến hành đánh giá nguy hai vợ chồng qua huyết đồ Nếu thai nhi thuộc dạng nguy cao tiến hành chẩn đốn trước sinh chấm dứt thai kỳ trẻ xác định mắc bệnh Bất thalassemia Từ đó, khống chế tỷ lệ thường ghithông qua giảm số ca mắc bệnh Trong mắc nhận một- nghiên cứu 44.439 thai phụ đến khám thai tầm soát xét nghiệm huyết đồ Từ Dũ, tỷ lệ thalassemia xác định 1,7% (7) -Một điểm cần lưu ý nghiên cứu này, có đến 95% cặp vợ chồng thuộc dân tộc Kinh Trong đó, khảo sát đối tượng phụ nữ Cơ Tu độ tuổi sinh sản Huế, cho thấy có đến- 56,1% người mang gen bệnh (8) Như vậy, với -chiến lược dự phòng nay, triển khai cách hiệu đồng bộ, số trường hợp phải chấm dứt thai kỳ tuổi thai 16 – 17 tuần không nhỏ, với nhiều nguy tiềm ẩn trước mắt lâu dài Sự phát triển TTTON cơng nghệ phân tích di truyền, mà gần giải trình tự hệ góp phần thúc đẩy kỹ thuật chẩn đốn di truyền phơi tiền làm tổ, gọi tắt PGT (Preimplantation Genetic Testing), đó, có chẩn đốn đột biến di truyền đơn gen, PGT-M Được báo cáo lần vào năm 1990 (2), đến kỹ thuật PGT nói chung PGT-M nói riêng trở nên phần thiếu trung tâm TTTON Với PGT-M, trở ngại với chương trình dự phịng cấp II cho bệnh lý thalassemia giải chất, tâm thần vận động trẻ đến tuổi nhóm, PGT-M, TTTON đơn trẻ sinh từ chu kỳ tự nhiên cho thấy tỷ lệ dị tật bẩm sinh, phát triển thể chất thần kinh nhóm tương đương Riêng nhóm trẻ TTTON đơn bắt đầu ngồi sớm so với nhóm cịn lại (3) Một vấn đề kỹ thuật cần lưu ý áp dụng PGT-M nguy khơng có phơi chuyển Sự tiến kỹ thuật chẩn đốn di truyền ngày cho phép kết hợp tầm soát lệch bội (PGT-A) chẩn đoán bệnh lý di truyền đơn gen (PGT-M) mẫu sinh thiết Điều làm tăng hiệu chu kỳ chuyển phôi (9) Tuy nhiên, việc kết hợp dẫn đến nguy bệnh nhân phơi bình thường để chuyển Trong số 15 bệnh nhân báo cáo này, có đến trường hợp khơng có phơi bình thường để chuyển sau phân tích di truyền Đây vấn đề cần tư vấn, giải thích rõ ràng, thấu đáo cho bệnh nhân, bối cảnh chi phí cho chu kỳ TTTON có kết hợp PGT-M tốn Việt Nam, bệnh nhân trả hoàn toàn Ngoài ra, vấn đề xử lý phôi không sử dụng cần bàn luận có đồng thuận gia đình từ trước điều trị TẠP CHÍ PHỤ SẢN - 17(01), 14(01), 90 XX-XX, - 96,2016 2019 Kết luận Chẩn đoán di truyền đột biến đơn gen giai đoạn phôi tiền làm tổ kỹ thuật tiềm năng, áp dụng việc loại trừ triệt để nguy bệnh lý thalassemia cặp vợ chồng mang gen bệnh, trước thai nhi hình thành Do đó, góp phần giảm bớt gánh nặng tinh thần, thể chất sang chấn sản khoa liên quan đến việc phải chấm dứt thai kỳ Tuy nhiên, trước tiến hành, cần có tư vấn đầy đủ, rõ ràng nguy lợi ích kỹ thuật cho bệnh nhân Các liệu cho thấy kỹ thuật an toàn, nhiên, cần nhiều chứng nữa, với thời gian đánh giá theo dõi kéo dài Tập 17, số 01 Tháng 09-2019 Tập 14, số 04 Tháng 05-2016 cách triệt để, phôi tạo sau TTTON không chứa gen bệnh hay dạng dị hợp tử sử dụng để chuyển vào BTC Tại Việt Nam, báo cáo ứng dụng PGT-M bệnh lý thalassemia ghi nhận vào năm 2016 Trong số trường hợp bố mẹ có gen thalassemia điều trị TTTON kết hợp PGT-M, tác giả ghi nhận có trường hợp sinh bé (6) Tuy nhiên, triển khai PGT-M, số vấn đề kỹ thuật cần lưu ý Trong nay, công nghệ giải trình tự gen hệ giúp nâng cao tính xác kết phân tích rút ngắn thời gian phân tích, cơng việc nuôi phôi đến ngày sinh thiết phôi đóng vai trị quan trọng Ngày có nhiều chứng ủng hộ cho việc sinh thiết phôi vào giai đoạn ngày 5, thay ngày trước (9,10) Tuy nhiên, việc sinh thiết phôi vào giai đoạn ngày địi hỏi trung tâm TTTON phải có quy trình ni cấy phơi hiệu ổn định để đảm bảo có phơi phát triển vào ngày Hiện nay, tỷ lệ phát triển thành phôi nang IVFMD khoảng 50% Ngồi ra, sinh thiết ngày 5, nên phôi sau sinh thiết cần đơng lạnh thời gian chờ kết phân tích di truyền Do đó, chương trình trữ lạnh-rã đơng phải ổn định để không ảnh hưởng đến khả làm tổ phơi sau rã đơng Ngồi ra, tính an toàn kỹ thuật cần quan tâm, bên cạnh ưu điểm có khả loại trừ bệnh thalassemia cho trẻ hay chí, góp phần loại trừ gen bệnh lưu hành cộng đồng Một điều may mắn liệu bước đầu chưa ghi nhận tác động có hại kỹ thuật trẻ chào đời Trong nghiên cứu 88.010 trẻ sinh từ TTTON đơn trẻ sinh từ PGT-M Anh, số liệu cho thấy nguy (đã hiệu chỉnh với yếu tố gây nhiễu) sinh non nhẹ cân nhóm PGT-M thấp so với nhóm TTTON đơn thuần, aOR 0,66 KTC 95% 0,45-0,98 aOR 0,58 KTC 95% 0,38-0,88 (11) Một báo cáo gần so sánh phát triển thể 95 Tập 17, số 01 Tháng 09-2019 BÁO CÁO TRƯỜNG HỢP ĐẶNG QUANG VINH, NGUYỄN MINH TUẤN, LƯU THỊ MINH TÂM, PHẠM THIẾU QUÂN, TRẦN TÚ CẦM, HUỲNH GIA BẢO, HỒ MẠNH TƯỜNG 96 Tài liệu tham khảo Bạch Quốc Khánh (2019) Kiểm soát thalassemia Việt Nam: trạng – giải pháp Hội nghị khoa học toàn quốc thalassemia lần III, Viện Truyền máu huyết học trung ương, Hà Nội, 24-25/4/2019 Handyside AH, Kontogianni EH, Hardy K and Winston RML (1990) Pregnancies from biopsied human preimplantation embryos sexed by Y-specific DNA amplification Nature 344:768-770 Heijligers M, Peeters A, van Montfoort A et al (2019) Growth, health, and motor development of 5-year-old children born after preimplantation genetic diagnosis Fertil Steril 111:1151-1158 International Federation of Fertility Societies (2016) IFFS Surveillance 2016 Global Reproductive Health 1:e1 Joint SOGC-CCMG Clinical Practice Guideline (2008) Carrier Screening for Thalassemia and Hemoglobinopathies in Canada J Obstet Gynaecol Can 30:950–959 Ngô Trường Giang (2016) Kết ứng dụng quy trình chẩn đốn bệnh di truyền trước chuyển phôi bệnh Thalassemia Học viện Quân y Báo cáo Hội nghị Hội nghị khoa học toàn quốc Thalassemia lần II, Hịa Bình 25-26/11/2016 Nguyễn Khắc Hân Hoan (2013) Nghiên cứu tầm soát chẩn đoán trước sinh bệnh alpha beta thalassemia, Luận án tiến sỹ y học, Đại học Y Dược Tp Hồ Chí Minh, Tp Hồ Chí Minh Nguyen NT, Sanchaisuriya K, Sanchaisuriya P, et al (2017) Thalassemia and hemoglobinopathies in an ethnic minority group in Central Vietnam: implications to health burden and relationship between two ethnic minority groups J Community Genet 8:221–228 Practice Committee of the American Society for Reproductive Medicine and the Society for Assisted Reproductive Technology (2018) The use of Preimplantation Genetic Testing for aneuploidy (PGT-A): a committee opinion Fertil Steril 109:429-36 10 Scott RT, Upham KM, Forman EJ, Zhao T and Treff NR (2013) Cleavage-stage biopsy significantly impairs human embryonic implantation potential while blastocyst biopsy does not: a randomized and paired clinical trial Fertil Steril 100:624-30 11 Sunkara SK, Antonisamy B, Selliah HY and Kamas MS (2017) Pre-term birth and low birth weight following preimplantation genetic diagnosis: analysis of 88 010 singleton live births following PGD and IVF cycles Hum Reprod 32:432-438 12 Weatherall DJ, Clegg JB (2001) Inherited hemoglobin disorders: an increasing global health problem Bulletin World Health Organ 79:704–712 13 World Health Organization (2008) Worldwide prevalence of anaemia 1993–2005: WHO global database on anaemia, http://www who.int/vmnis/anaemia/prevalence/en  ... 2019 Kết luận Chẩn đoán di truyền đột biến đơn gen giai đoạn phôi tiền làm tổ kỹ thuật tiềm năng, áp dụng việc loại trừ triệt để nguy bệnh lý thalassemia cặp vợ chồng mang gen bệnh, trước thai... tích di truyền, mà gần giải trình tự hệ góp phần thúc đẩy kỹ thuật chẩn đốn di truyền phơi tiền làm tổ, gọi tắt PGT (Preimplantation Genetic Testing), đó, có chẩn đốn đột biến di truyền đơn gen, ... vấn đề nêu khắc phục kỹ thuật chẩn đoán đột biến di truyền đơn gen giai đoạn phôi tiền làm tổ (PGT-M) Về chất, kỹ thuật phát triển từ năm đầu thập niên 1990 (2) Trong đó, phơi tạo thành từ thụ