Nghiên cứu này thực hiện nhằm hai mục tiêu: Nhận xét tình trạng bất thường trên 23 cặp nhiễm sắc thể của phôi ngày 3 trong thụ tinh trong ống nghiệm, đánh giá kết quả của chu kì thụ tinh trong ống nghiệm có thực hiện sàng lọc di truyền tiền làm tổ.
TẠP CHÍ PHỤ SẢN - 15(03), 31 - 36, 2017 NHẬN XÉT KẾT QUẢ SÀNG LỌC DI TRUYỀN TIỀN LÀM TỔ TẠI KHOA HỖ TRỢ SINH SẢN BỆNH VIỆN PHỤ SẢN HÀ NỘI Nguyễn Duy Ánh, Phạm Thúy Nga, Nguyễn Thu Huyền, Nguyễn Thị Linh Bệnh viện Phụ Sản Hà Nội Đặt vấn đề Tập 15, số 03 Tháng 09-2017 Tác giả liên hệ (Corresponding author): Nguyễn Duy Ánh, email: bsanhbnhn@yahoo.com Ngày nhận (received): 10/7/2017 Ngày phản biện đánh giá báo (revised): 15/8/2017 Ngày báo chấp nhận đăng (accepted): 31/8/2017 Việc lựa chọn phôi dựa tiêu chuẩn hình thái như: kích thước, số lượng phôi bào tỷ lệ mảnh vụn bào tương phôi… không phản ánh đầy đủ chất lượng thực phôi Phần lớn trường hợp phôi không làm tổ bị sẩy thai sớm phôi bị bất thường nhiễm sắc thể Kỹ thuật sàng lọc di truyền tiền làm tổ (Preimlantition genetic screening – PGS) đời bước tiến quan trọng giúp sàng lọc bất thường phôi giai đoạn sớm trước làm tổ nhằm phát phơi bất thường (ngun nhân gây thất bại làm tổ hay sảy thai nhiều lần sau chuyển phôi), chọn phơi bình thường có tiềm làm tổ cao để chuyển vào buồng tử cung cho bệnh nhân nhằm cải thiện tỷ lệ có thai PGS thường đề xuất cho trường hợp TTTON tiên lượng như: phụ nữ lớn tuổi, tiền sẩy thai liên tiếp nhiều lần (trên lần), thất bại làm tổ nhiều lần (trên lần) Như chu kì PGD/PGS gồm giai đoạn: kích thích buồng trứng làm TTON, sinh thiết phôi, xét nghiệm di truyền chuyển phôi Trong nghiên cứu này, thực sinh thiết phôi vào sáng ngày thứ sau thụ tinh (giai đoạn 66-68h sau ICSI) để làm xét nghiệm di truyền (24h) lựa chọn phôi chuyển vào buồng tử cung vào ngày [6] Ở thời điểm sinh thiết phôi ngày sau thụ tinh, liên kết phơi bào bắt đầu chặt chẽ gặp khó khăn q trình sinh thiết Ngồi ra, khả tự tái xếp lại cấu trúc phôi ngày tượng khảm (mosaicism) xảy gây ảnh hưởng đến kết xét nghiệm di truyền [2] Kỹ thuật giải trình tự gen hệ áp dụng rộng rãi châu Âu Mỹ để phân tích nhiễm sắc thể phơi Kỹ thuật không phát bất thường số lượng nhiễm sắc thể mà giúp phát đột biến có độ lớn >20Mb [3], [4] Nghiên cứu thực nhằm hai mục tiêu: Nhận xét tình trạng bất thường 23 cặp nhiễm sắc thể phôi ngày thụ tinh ống nghiệm 31 SẢN KHOA – SƠ SINH NGUYỄN DUY ÁNH, PHẠM THÚY NGA, NGUYỄN THU HUYỀN, NGUYỄN THỊ LINH Đánh giá kết chu kì thụ tinh ống nghiệm có thực sàng lọc di truyền tiền làm tổ Đối tượng phương pháp nghiên cứu 2.1 Đối tượng nghiên cứu 2.1.1 Tiêu chuẩn chọn Đối tượng nghiên cứu bệnh nhân tham gia làm PGS khoa Hỗ trợ sinh sản, bệnh viện Phụ sản Hà Nội thỏa mãn tiêu chuẩn sau: • Có yếu tố lâm sàng sau: lớn tuổi, tiền sử sẩy thai (2 lần trở lên), thất bại làm tổ nhiều lần (từ lần trở lên) • Phơi ngày có từ tế bào trở lên, tỷ lệ mảnh vỡ bào tương 25% • Tinh trùng có khả di động 2.1.2 Tiêu chuẩn loại trừ • Bệnh nhân khơng có phơi đủ tiêu chuẩn • Bệnh nhân chuyển phơi trữ lạnh • Bệnh nhân có tinh trùng bất động tinh trùng phẫu thuật 2.2 Phương pháp nghiên cứu 2.2.1 Thiết kế nghiên cứu: Nghiên cứu mô tả hồi cứu 2.2.2 Cỡ mẫu Toàn bệnh nhân tham gia PGS khoa Hỗ trợ sinh sản, Bệnh viện Phụ sản Hà Nội đủ tiêu chuẩn nghiên cứu thời gian từ 01/11/2015 đến 31/11/2016 2.2.3 Kỹ thuật thu thập số liệu Số liệu thu thập từ nguồn: phiếu thu thập số liệu, thông tin từ hồ sơ bệnh án thông tin bệnh nhân cung cấp (trực tiếp qua điện thoại) 2.2.4 Quy trình thực 2.4 Đạo đức nghiên cứu: Đối tượng nghiên cứu tự nguyện tham gia sau cung cấp đầy đủ thông tin cần thiết nghiên cứu Nghiên cứu không gây ảnh hưởng đến kết điều trị bệnh nhân Các thông tin cá nhân bệnh nhân cung cấp đảm bảo bí mật Kết 3.1 Đặc điểm đối tượng nghiên cứu Tổng cộng có 122 bệnh nhân đủ điều kiện tham gia vào nghiên cứu với đặc điểm chung sau: Nhận xét: Đối tượng bệnh nhân chủ yếu chúng tơi nhóm bệnh nhân lớn tuổi (trung bình 34,31), vô sinh II (chiếm 78,7%) nhiều năm (thoời gian ô sinh trung bình 3,5 năm) Hầu hết phơi sinh thiết xét nghiệm di truyền phơi “có tiềm năng” theo tiêu chuẩn đánh giá hình thái (57,2% phơi tốt 29,8% phơi trung bình), có 13% phơi có hình thái xấu 3.2 Kết đánh giá di truyền phôi ngày 3.2.1 Kết giải trình tự gen 24 NST 577 phơi ngày Tập 15, số 03 Tháng 09-2017 Hình 3.1: Kết xét nghiệm di truyền 577 phôi ngày 32 2.3 Xử lý số liệu: Xử lý số liệu phần mềm SPSS phương pháp thống kê Nhận xét: Trong số 577 phôi sinh thiết, có 41 trường hợp khơng nhân ADN kết nhiễu (chiếm 7,1%), 182/577 trường hợp không phát bất thường 24 nhiễm sắc thể (chiếm 3.3 Kết chu kỳ IVF có sàng lọc di truyền 3.3.1 Theo dõi phát triển phôi sau sinh thiết TẠP CHÍ PHỤ SẢN - 15(03), 31 - 36, 2017 31,5%) 354/577 trường hợp (61,4%) phát có bất thường 24 nhiễm sắc thể Hình 3.2: Kết phân loại nhóm phơi bất thường NST Nhận xét: Trong 354 phơi có phát bất thường 24 nhiễm sắc thể, phần lớn phôi bị bất thường số lượng NST (284/354 chiếm 80,2%), có 10,7% phôi bất thường cấu trúc NST (38/354) 9% phôi (32/354) mang loại bất thường 3.2.2 Phân bố bất thường cặp NST Nhận xét: Trong 122 bệnh nhân tham gia chu kì PGS, có 86 bệnh nhân có chuyển phơi chu kì phơi tươi Số phơi chuyển trung bình từ 1-2 phơi Trong tổng số 86 trường hợp chuyển phơi này, có ghi nhận 46/86 trường hợp có thai Tỷ lệ có thai chung đạt 53,5% Đánh giá riêng tỷ lệ có thai nhóm số lượng phơi chuyển thấy tỷ lệ có thai tăng (có ý nghĩa thống kê p=0,011) chuyển nhiều phôi tương ứng 35,1%, 69,2% 60% chuyển phôi, phôi phôi Bàn luận 4.1 Bàn luận tỷ lệ bất thường NST Tỷ lệ bất thường NST nghiên cứu 61,4%, tỷ lệ phơi mang bất thường lệch bội (bao gồm phôi bất thường số lượng Tập 15, số 03 Tháng 09-2017 Nhận xét: Khảo sát 536 phơi có kết xét nghiệm di truyền (loại 41 phôi không nhân ADN), ta thấy: Tỷ lệ bất thường NST (bao gồm bất thường số lượng NST, bất thường cấu trúc NST bất thường hai) cặp NST khác nhau, dao động từ 9,9% - 17,4% Tần xuất bất thường hay gặp NST XY (17,4%), NST 21 (17%), NST (16,8%), NST 15 (16,3%) NST (16,2%) Tần suất bất thường gặp NST 17 (9,9%), NST 19 (10,3%) NST 11 (11%), NST 12 (12,2%) Tỷ lệ bất thường số lượng NST cao cặp 21 (16,8%), XY (16,6%), 15 (15,9%), NST NST (15.5%) Tỷ lệ bất thường số lượng NST thấp cặp số 17 (9,9%), 11 19 (10,3%), NST 20 (11,2%) NST 12 (11,6%) Tỷ lệ bất thường cấu trúc NST cao NST (2,2%), NST (1,7%), NST (1,5%) NST (1,3%) Tỷ lệ bất thường cấu trúc NST thấp NST 17, NST 18, NST 19, NST 20, NST 22 (0%) Nhận xét: Theo dõi phát triển 577 phôi sau sinh thiết, nhận thấy 86% phơi tiếp tục phát triển, 51,1% phơi phát triển đến giai đoạn phôi nén (tức phôi phát triển tốc độ), có 14% phơi ngừng phát triển vào ngày Phơi có hình thái tốt trung bình vào ngày có tỷ lệ phơi phát triển tiếp phôi nén vào ngày cao có ý nghĩa thống kê so với nhóm phơi có hình thái xấu (p=0.000) 3.3.2 Tỷ lệ có thai chu kỳ IVF có sàng lọc di truyền 33 Tập 15, số 03 Tháng 09-2017 SẢN KHOA – SƠ SINH NGUYỄN DUY ÁNH, PHẠM THÚY NGA, NGUYỄN THU HUYỀN, NGUYỄN THỊ LINH 34 phôi mang hai loại bất thường) 54,7% Tỷ lệ bất thường NST lệch bội nghiên cứu khác biệt nhiều so với nghiên cứu khác Sự khác tỷ lệ nghiên cứu nhiều nguyên nhân: • Đối tượng bệnh nhân: Tỷ lệ bất thường lệch bội nghiên cứu thấp nghiên cứu Al-Asma cs (2012), Rubio cs (2013) Đối tượng nghiên cứu chủ yếu nhóm bệnh nhân vơ sinh II, lớn tuổi Nghiên cứu Al-Asma cs (2012), Rubio cs (2013) chủ yếu nhóm đối tượng bệnh nhân thất bại làm tổ liên tiếp nhiều lần sảy thai liên tiếp Theo Munne, nhóm đối tượng phơi có khả bị lệch bội NST cao buồng trứng có xu hướng bị già hóa, dẫn đến giảm số lượng chất lượng noãn trưởng thành Trong nhóm đối tượng lớn tuổi, nguy tạo phôi lệch bội NST chủ yếu tăng khả bất thường phân ly NST dẫn đến hình thành nỗn bất thường lệch bội • Phương pháp xét nghiệm di truyền: nghiên cứu sử dụng kĩ thuật giải trình tự gen hệ (NGS) có khả phát bất thường số lượng NST bất thường cấu trúc thêm/ đoạn > 20Mb Trong hầu hết nghiên cứu nay, kỹ thuật NGS chủ yếu dùng để xét nghiệm di truyền phôi nang Các nghiên cứu Al-Asma cs (2012), Rubio cs (2013) sử dụng kĩ thuật FISH đánh giá vài cặp NST; nghiên cứu Rubio cs (2013) Phan T Khánh Vy (2015) sử dụng kỹ thuật CGH xác định bất thường cấu trúc NST • Ngun nhân theo chúng tơi việc lựa chọn phôi trước sinh thiết Nhiều nghiên cứu liên quan hình thái phơi với tỷ lệ bất thường di truyền đưa khuyến cáo hình thái phơi có tỷ lệ bất thường di truyền cao (Magli cs, 2001; Finn, 2010) Vì lý chi phí kĩ thuật giải trình tự gen hệ tương đối cao nên thực tế lựa phôi sinh thiết, chọn phơi có tỷ lệ phân mảnh bào tương 25%, khơng chọn phơi có kích thước phơi bào q lệch phơi có phơi bào to bao quanh phơi bào nhỏ Những phơi xấu cịn lại bệnh nhân, tiếp tục nuôi đến ngày 5, phôi phát triển đến giai đoạn phôi nang tiến hành sinh thiết tế bào nuôi Đây phương án tốt giúp bệnh nhân giảm bớt chi phí cần trả Vì vậy, nghiên cứu chúng tơi hầu hết nhận phơi có hình thái tốt trung bình, có 13% phơi hình thái xấu 4.2 Bàn luận phân bố bất thường NST Điểm nghiên cứu nghiên cứu Việt Nam đề cập đến tỷ lệ bất thường cấu trúc NST phân bố bất thường cấu trúc NST cặp NST Tuy nhiên, tỷ lệ phôi bất thường cấu trúc NST tương đối thấp so với bất thường số lượng NST Điều giải thích ngun nhân: • Nguyên nhân thứ chế tự sửa chữa phôi Những bất thường cấu trúc nhỏ xảy q trình phát triển phơi sửa chữa trở lại bình thường Những bất thường cấu trúc lớn (thêm, đoạn lớn) bất thường số lượng NST có khả tự sửa chữa Điều thấy rõ ràng 73% phơi bất thường cấu trúc có khả tự sửa chữa phát triển tiếp thành phơi nén, tỷ lệ nhóm phơi bất thường số lượng NST 41,2% Bởi vậy, thời điểm sinh thiết xét nghiệm vào D3, khả phát bất thường lớn, chưa kịp sửa chữa cao • Nguyên nhân thứ hai tượng thể khảm phôi ngày 3, tức phơi có hay vài phơi bào có NST khác Trong q trình phân chia phôi (nguyên phân), hai nhiễm sắc tử chị em không phân ly hồn tồn tạo phơi bào có thừa NST phôi bào thiếu NST Việc sinh thiết phôi bào từ phôi ngày để xét nghiệm di truyền dễ đến kết bất thường NST Sinh thiết phôi bào đề xuất để làm hạn chế tượng thể khảm phôi Tuy nhiên, theo nhiều nghiên cứu, sinh thiết phôi bào làm giảm tỷ lệ phát triển thành phôi nang, giảm tỷ lệ làm tổ phôi Hơn nữa, việc sinh thiết phôi bào ngẫu nhiên mà thường sinh thiết phôi bào cạnh nên khả cao lấy phôi bào thừa NST phôi bào thiếu NST dẫn đến kết xét nghiệm di truyền bình thường Cơ chế tự sửa chữa phôi tượng thể khảm ngày hai hạn chế lớn việc lựa chọn thời điểm sinh thiết phôi ngày Với điều kiện trang thiết bị nhân lực vào thời điểm cuối năm 2015, khoa Hỗ trợ sinh sản triển khai nên dựa vào kết xét nghiệm tỷ lệ bệnh nhân có phơi chuyển tương đối thấp Vì thế, việc lựa chọn phơi chuyển chúng tơi cịn phụ thuộc vào yếu tố khác chẳng hạn chất lượng phôi ngày 4, số lượng phơi chuyển được, mong muốn bệnh nhân Thông thường, chuyển 1-2 phôi Ưu tiên chuyển phơi bình thường phát triển đến phơi nén Sau phơi bình thường có phát triển tiếp phơi bất thường nhẹ (bất thường cấu trúc NST) phát triển đến phôi nén Những trường hợp chuyển phôi chủ yếu bệnh nhân có phơi chuyển mà phôi phát triển tiếp so với thời điểm sau sinh thiết chưa đến giai đoạn phôi nén Trong tổng sô 122 bệnh nhân tham gia vào chu kì PGS, có 86 bệnh nhân tham gia chuyển phơi Tỷ lệ có thai chung đạt 53,5% (46/86) Tỷ lệ có thai tăng (p=0,011) chuyển nhiều phôi (tương ứng 35,1%, 69,2% 60% chuyển phôi, phôi phôi) Xem xét tỷ lệ có thai nhóm tuổi bệnh nhân, chúng tơi nhận thấy, tỷ lệ có thai cao nhóm tuổi 35-40 40 tuổi (73,1% 87,5%) thấp nhóm tuổi 30 (35,3%) Khác biệt có ý nghĩa thống kê (p=0,006) Kết lý giải sau: nghiên cứu chúng tôi, phần lớn bệnh nhân nhóm lớn tuổi, VSII nhiều năm (tức có con/ có thai trước đó) Vấn đề bệnh nhân có lẽ bất thường nỗn gây nên tỷ lệ phơi bất thường lớn, dẫn đến vô sinh Nhiều nghiên cứu thấy rẳng phụ nữ lớn tuổi có nguy tạo nỗn mang bất thường thoi vô sắc cao, đặc biệt phụ nữ 40 tuổi tỷ lệ noãn bất thường thu khoảng 70% Vậy nên, kỹ thuật PGS giúp xác định phôi bất thường di truyền, chọn phơi bình thường có tiềm để chuyển vào buồng tử cung, nhờ mà cải thiện trực tiếp tỷ lệ có thai TẠP CHÍ PHỤ SẢN - 15(03), 31 - 36, 2017 Kết luận • Trong số 577 phơi sinh thiết, có 41 trường hợp không nhân ADN kết nhiễu (chiếm 7,1%), 182/577 trường hợp không phát bất thường 24 NST (chiếm 31,5%) 354/190 trường hợp (61,4%) phát có bất thường 24 NST Tập 15, số 03 Tháng 09-2017 sinh thiết phơi ngày Chính thế, lựa chọn phơi chuyển, ngồi dựa vào kết xét nghiệm, chúng tơi cịn cân nhắc đến khả phát triển tiếp phôi Đôi phôi mang bất thường nhẹ phát triển tiếp cân nhắc để chuyển phôi Một số trường hợp phôi bất thường phôi không nhân ADN mà phát triển đến giai đoạn phôi nang, tư vấn bệnh nhân đông lại sinh thiết lại phương pháp sinh thiết phôi nang Trong tồn chu kì PGS, chúng tơi có trao đổi với bệnh nhân lợi hạn chế phương pháp nhận đồng ý bệnh nhân trước sinh thiết, chuyển phôi vào buồng tử cung đông phôi Hiện chúng tơi dần hồn thiện kỹ thuật sinh thiết phơi nang để cải tiến tốt quy trình PGS Trong nghiên cứu chúng tơi, tỷ lệ bất thường lớn NST XY, 21, 2, 15 NST Tỷ lệ bất thường thấp NST 17, 19, 11, 12 Tỷ lệ bất thường số lượng cao cặp 21, XY, 15, NST Tỷ lệ bất thường số lượng thấp cặp số 17, 11 19, 20 NST 12 Tỷ lệ bất thường cấu trúc cao NST 1, 3, Tỷ lệ bất thường cấu trúc thấp NST 17, 18, 19, 20, 22 (0%) Nghiên cứu tương tự với số kết khác xác định bất thường nhiều xảy NST XY, 15 21; bất thường xảy NST Tuy nhiên, khác với Gutierrez cs (2012), nghiên cứu nhận thấy bất thường NST gặp nhiều bất thường thêm NST Theo nghiên cứu, bất thường liên quan đến nhiễm sắc thể 16 22 nguyên nhân phổ biến sẩy thai ba tháng Các bất thường liên quan đến nhiễm sắc thể 8, 9, 15, 17 nguyên nhân gặp trường hợp sẩy thai ba tháng Những bất thường không tư vấn chuyển phơi Cơ thể có khả dung nạp bất thường thừa tốt bất thường thiếu nên bất thường thêm NST trisomy 13, 18, 21, XXY có khả phát triển thành thai nhi bị dị tật Phôi mang nhiều bất thường (đặc biệt bất thường NST) thường bị đào thải dẫn đến phôi làm tổ 4.3 Bàn luận kết chu kì TTON có sàng lọc di truyền tiền làm tổ Chính tỷ lệ phôi ngày bất thường NST cao 35 SẢN KHOA – SƠ SINH NGUYỄN DUY ÁNH, PHẠM THÚY NGA, NGUYỄN THU HUYỀN, NGUYỄN THỊ LINH • Trong 354 phơi có phát bất thường 24 NST, phần lớn phôi bị bất thường số lượng nhiễm sắc thể (284/354 chiếm 80,2%), có 10,7% phơi bất thường cấu trúc NST (38/354) 9% phôi (32/354) mang loại bất thường • Khảo sát 354 phơi có phát bất thường 24 NST, tỷ lệ bất thường NST, bất thường số lượng NST, bất thường cấu trúc NST cặp khác nhau: o Tỷ lệ bất thường lớn NST XY, 21, 2, 15 NST Tỷ lệ bất thường thấp NST 17, 19, 11, 12 o Tỷ lệ bất thường số lượng cao cặp 21, XY, 15, NST Tỷ lệ bất thường số lượng thấp cặp 17, 11, 19, 20 12 o Tỷ lệ bất thường cấu trúc cao NST 1, 3, Tỷ lệ bất thường cấu trúc thấp NST 17, 18, 19, 20, 22 • Tỷ lệ phơi phát triển tiếp sau sinh thiết đạt Tài liệu tham khảo Tập 15, số 03 Tháng 09-2017 Alpha Scientists in Reproductive Medicine and ESHRE Special Interest Group of Em¬bryology, 2011 The Istanbul consensus workshop on embryo assessment: preceed¬ings of an expert meeting Hum Reprod 26, 1270-1283 D.D Daphnis, E Fragouli1, K Economou, S Jerkovic, I.L Craft, J.D.A Delhanty and J.C Harper Analysis of the evolution of chromosome abnormalities in human embryos from Day to using CGH and FISH MHRBasic Science of Reproductive Medicine Vol.14, No.2 pp 117–125, 2008 Francesco Fiorentino, Sara Bono, Anil Biricik (2014) Application of next-generation sequencing technology for comprehensive aneuploidy screening of blastocysts in clinical preimplantation genetic screening cycles Human Reproduction, Vol.29, No.12 pp 2802–2813, 2014 Haiyan Zheng, Hua Jin, Lian Liu Application of next-generation sequencing for 24-chromosome aneuploidy screening of human preimplantation embryos Molecular Cytogenetics (2015) G Harton, P Braude, A Lashwood, A Schmutzler, J TraegerSynodinos, L.Wilton, and J.C Harper ESHRE PGD consortium best practice guidelines for organization of a PGD centre for PGD/PGS Human Reproduction, Vol.00, No.0 pp 1–11, 2010 G.L Harton, M.C Magli, K Lundin, M Montag, J Lemmen, and J.C Harper ESHRE PGD Consortium/Embryology Special Interest Group—best practice guidelines for polar body and embryo biopsy for preimplantation genetic diagnosis/screening (PGD/PGS) Human 36 86% cho thấy kỹ thuật sinh thiết ảnh hưởng đến phát triển phơi Phơi có hình thái tốt trung bình có tỷ lệ phơi phát triển tiếp cao có ý nghĩa thống kê so với nhóm phơi có hình thái xấu • Trong tổng sơ 122 bệnh nhân tham gia vào chu kì PGS, có 86 bệnh nhân tham gia chuyển phơi Số phơi chuyển trung bình từ 1-2 phơi Tỷ lệ có thai chung đạt 53,5% (46/86) Kiến nghị • Kết nghiên cứu cho thấy, kĩ thuật sàng lọc di truyền tiền làm tổ hứa hẹn phương pháp hiệu giai đoạn sớm giúp cặp vợ chồng muộn tăng tỷ lệ có thai hội sinh đứa trẻ khỏe mạnh • Cần có nghiên cứu so sánh sâu hơn, số lượng mẫu lớn để đánh giá toàn diện hiệu kĩ thuật sàng lọc di truyền tiền làm tổ Reproduction, Vol.0, No.0 pp 1–6, 2010 Hội sản khoa sinh đẻ có kế hoạch Việt Nam (VINAGOFPA), Chi hội y học sinh sản Việt Nam (VSRM) Đồng thuận đánh giá hình thái nỗn, phơi Hỗ trợ sinh sản Malmgren H., Sahlen S., Inzunza J., Aho M., Single cell CGH analysis reveals a high degree of mosaicism in human embryos from patients with balanced structural chromosome aberrations Mol Hum Reprod, (2002) (5):502-510 Nguyễn Viết Tiến Nguyễn Thị Minh (2014) Bước đầu đánh giá kết chẩn đoán di truyền tiền làm tổ bệnh viện phụ sản trung ương Tạp chí phụ sản, 12, 173-175 10 Norbert Gleicher, Vitaly A Kushnir and David H Barad Preimplantation genetic screening (PGS) still in search of a clinical application: a systematic review Reproductive Biology and Endocrinology 2014, 12:22 11 Phan thị Khánh Vy (2015) Nghiên cứu số yếu tố liên quan với lệch bội nhiễm sắc thể phôi người trước làm tổ Luân án Tiến sỹ, Đại học Y Hà Nội 12 Rubio C, Rodrigo L, Mir P et al (2013) Use of array comparative genomic hybridization (array-CGH) for embryo assessment: clinical results Fertility and Sterility, 99, 1044-1048 13 The ESHRE Special Interest Group Reproductive Genetics The current status of PGD and PGS Pre-congress course 12, Munich, Germany 29 June 2014 ... cứu bệnh nhân tham gia làm PGS khoa Hỗ trợ sinh sản, bệnh viện Phụ sản Hà Nội thỏa mãn tiêu chuẩn sau: • Có yếu tố lâm sàng sau: lớn tuổi, tiền sử sẩy thai (2 lần trở lên), thất bại làm tổ nhiều... Reprod, (2002) (5):50 2-5 10 Nguyễn Viết Tiến Nguyễn Thị Minh (2014) Bước đầu đánh giá kết chẩn đoán di truyền tiền làm tổ bệnh viện phụ sản trung ương Tạp chí phụ sản, 12, 17 3-1 75 10 Norbert Gleicher,... Thiết kế nghiên cứu: Nghiên cứu mơ tả hồi cứu 2.2.2 Cỡ mẫu Tồn bệnh nhân tham gia PGS khoa Hỗ trợ sinh sản, Bệnh viện Phụ sản Hà Nội đủ tiêu chuẩn nghiên cứu thời gian từ 01/11/2015 đến 31/11/2016