Tóm tắt Luận án tiến sĩ Y học: Hiệu quả sát khuẩn ống tủy bằng natri hypoclorit, calcium hydroxide và định loại vi khuẩn trong điều trị viêm quanh cuống răng mạn tính

Mục đích nghiên cứu của luận án nhằm Mô tả đặc điểm lâm sàng, X-quang của bệnh viêm quanh cuống mạn tính ở răng 1 chân. Xác định loại vi khuẩn có trong ống tủy và hiệu quả sát khuẩn ống tủy của natri hypoclorit và calcium hydroxide. Đánh giá hiệu quả điều trị nội nha răng 1 chân viêm quanh cuống mạn.

1 CƠNG TRÌNH ĐƯỢC HỒN THÀNH TẠI TRƯỜNG ĐẠI HỌC Y HÀ NỘI BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO BỘ Y TẾ TRƯỜNG ĐẠI HỌC Y HÀ NỘI Người hướng dẫn khoa học: TS Nguyễn Mạnh Hà PGS TS Nguyễn Vũ Trung Phản biện :…………………………………… TRẦN THỊ AN HUY HIỆU QUẢ SÁT KHUẨN ỐNG TỦY BẰNG NATRI HYPOCLORIT, CALCIUM HYDROXIDE VÀ ĐỊNH LOẠI VI KHUẨN TRONG ĐIỀU TRỊ VIÊM QUANH CUỐNG RĂNG MẠN TÍNH Chuyên ngành: Răng Hàm Mặt Phản biện 2: …………………………………… Phản biện 3: …………………………………… Luận án bảo vệ trước Hội đồng chấm luận án cấp Trường Trường Đại học Y Hà Nội Mã số: 62720601 Vào hồi: TÓM TẮT LUẬN ÁN TIẾN SĨ Y HỌC ngày tháng năm 201 CÓ THỂ TÌM HIỂU LUẬN ÁN TẠI: - Thư viện Quốc gia - Thư viện Trường Đại học Y Hà Nội HÀ NỘI - 2018 ĐẶT VẤN ĐỀ Mô tả đặc điểm lâm sàng, X-quang bệnh viêm quanh cuống mạn tính chân Xác định loại vi khuẩn có ống tủy hiệu sát khuẩn ống tủy natri hypoclorit calcium hydroxide Đánh giá hiệu điều trị nội nha chân viêm quanh cuống mạn NHỮNG ĐÓNG GÓP MỚI CỦA LUẬN ÁN Đề tài gồm hai nghiên cứu: nghiên cứu vi sinh nghiên cứu lâm sàng Trong nghiên cứu vi sinh, đề tài tìm lồi vi khuẩn có ống tủy viêm quanh cuống mạn tìm lồi vi khuẩn chiếm tỷ lệ cao sở để lựa chọn dung dịch bơm rửa thuốc sát khuẩn Đồng thời, đề tài đưa chứng kết vi sinh sau tạo hình bơm rửa ống tủy natri hypoclorit sau đặt calcium hydroxide ống tủy tuần điều trị viêm quanh cuống mạn giúp nhà lâm sàng có kinh nghiệm điều trị viêm quanh cuống mạn Nghiên cứu khẳng định tính khoa học cấp thiết đề tài Nghiên cứu thử nghiệm lâm sàng không đối chứng, thời gian theo dõi dài, kết phân tích tỉ mỉ Nghiên cứu đóng góp cho thêm cho chuyên nghành đặc điểm lâm sàng, Xquang kết điều trị thành công viêm quanh cuống mạn phương pháp nội nha không phẫu thuật Đề tài cung cấp thêm cơng cụ hữu ích cho bác sĩ hàm mặt trình điều trị nghiên cứu Bố cục luận án gồm: đặt vấn đề (2 trang), tổng quan (34 trang); đối tượng phương pháp nghiên cứu (18 trang); kết nghiên cứu (36 trang); bàn luận (28 trang); 130 tài liệu tham khảo Bệnh viêm quanh cuống mạn tính bệnh thường gặp Hiện nay, tỷ lệ viêm quanh cuống mạn tính cịn cao tới 22,8% viêm tủy khơng điều trị nhiều trường hợp chữa tủy chuyển sang viêm quanh cuống mạn tính sau thời gian Vậy, nguyên nhân thất bại điều trị tủy phải ống tủy chưa làm Trên lâm sàng, thấy ống tủy để bước vào giai đoạn trám bít ống tủy vi khuẩn học ống tủy hay chưa phải xác định có mặt vi khuẩn ống tủy Ngày nay, có tiến khoa học, vấn đề điều trị bảo tồn viêm quanh cuống mạn tính phương pháp nội nha áp dụng rộng rãi Tuy nhiên, để đạt kết tốt điều trị cần loại bỏ yếu tố vi khuẩn để đạt lành thương tối ưu Bystrom Sundqvit nghiên cứu đánh giá hiệu trình bơm rửa tạo hình ống tủy cho thấy, vi khuẩn giảm từ 100 đến 1000 lần Chúng ta khơng thể loại bỏ hồn tồn vi khuẩn độc tố vi khuẩn phương pháp bơm rửa tạo hình ống tủy có chỗ dụng cụ đưa tới Vi khuẩn ống tủy cịn sót lại sau q trình tạo hình ống tủy tiếp tục phát triển lần hẹn Đặt thuốc ống tủy có tác dụng diệt vi khuẩn cịn sót lại sau q trình tạo hình bơm rửa Trên thực nghiệm, Kalchinov cho thấy thuốc sát khuẩn có ưu tác dụng diệt số loại vi khuẩn khác Calcium hydroxide chất đặt ống tủy nha sỹ tin dùng Song, khơng có loại lý tưởng có ý kiến trái chiều việc sử dụng chúng Việc xác định loài vi khuẩn ống tủy lựa chọn sử dụng thuốc sát khuẩn phù hợp cho bệnh lý vấn đề cần đặt Trên giới nước có cơng trình nghiên cứu vi khuẩn bệnh viêm tủy hoại tử, mô vùng quanh cuống, chưa có nghiên cứu ứng dụng vi khuẩn học thuốc sát khuẩn đặt vào buồng tủy cho bệnh viêm quanh cuống mạn Với mong muốn nghiên cứu vi khuẩn ống tủy để tìm thuốc sát khuẩn hữu hiệu, mang lại kết tốt cho điều trị viêm quanh cuống mạn, nghiên cứu đề tài: “Hiệu sát khuẩn ống tủy natri hypoclorit, calcium hydroxide định loại vi khuẩn điều trị viêm quanh cuống mạn tính” với mục tiêu sau: Chương TỔNG QUAN 1.1 Cấu trúc giải phẫu hệ thống ống tủy vùng cuống Đề tài đề cập đến hệ thống ống tủy lỗ cuống Khi điều trị tủy cần sửa soạn đến đoạn thắt chóp (apical foramen) từ điểm trở khơng thể hàn kín 1.2 Bệnh viêm quanh cuống mạn tính 1.2.1 Khái niệm viêm quanh cuống mạn tính (VQCMT) * Viêm quanh cuống * Viêm quanh cuống mạn tính Viêm quanh cuống mạn tính thuật ngữ q trình viêm nhiễm mạn tính vùng quanh cuống Muller cộng chứng minh phản ứng viêm vùng quanh cuống liên quan trực tiếp tới vi khuẩn ống tủy Dưới tác động vi khuẩn đáp ứng miễn dịch thể chống lại tác nhân vi khuẩn, kết phản ứng viêm phá hủy tổ chức vùng quanh cuống tạo nang u hạt vùng cuống 1.2.2 Nguyên nhân viêm quanh cuống mạn tính Do viêm tủy, sang chấn khớp cắn, bị chấn thương, nang xương hàm, yếu tố hóa học kích thích chỗ, hàn ống tủy cuống 1.2.3 Triệu chứng lâm sàng viêm quanh cuống mạn tính Răng đổi màu, miệng hơi, sưng đau, có lỗ rị, lung lay Ngồi cịn thấy có lỗ sâu, núm phụ, mịn răng, lõm hình chêm, nứt gãy… Làm nghiệm pháp thử tủy thường cho kết âm tính 1.2.4 Đặc điểm X-quang viêm quanh cuống mạn tính Biểu X-quang viêm quanh cuống mạn tính (VQCMT) vùng thấu quang chân 1.3.Vi khuẩn gây bệnh ống tủy mô vùng cuống 1.3.1 Hệ vi khuẩn gây bệnh bệnh lý tủy Vi khuẩn vào tủy qua nhiều đường Môi trường ống tủy yếm khí, nên có vi khuẩn kỵ khí tồn phát triển Vi khuẩn ống tủy đa dạng hình thái Sự phát triển vi khuẩn phụ thuộc vào loài vi khuẩn khác cung cấp chất dinh dưỡng cho chúng Nếu hoạt động vi khuẩn không hạn chế loại bỏ trình viêm ngày nặng, gây phá hủy tổ chức liên kết quanh vùng cuống Vi khuẩn Gram (-) có mặt hầu hết trường hợp viêm tủy nguyên phát Chúng thường bị loại bỏ trình điều trị nội nha Một số vi khuẩn Gram (+) kháng lại trình bơm rửa đặt thuốc Gần đây, với kỹ thuật PCR phát số lồi vi khuẩn khó điều trị ống tủy viêm tủy điều trị không thành công 1.3.2.Hệ vi khuẩn gây bệnh bệnh lý viêm quanh cuống Màng sinh học vi khuẩn (Biofilm) thành lập vùng chóp phần 1/3 chóp ống tủy để bảo vệ cho vi khuẩn trước điều kiện bất lợi từ môi trường Trong thể viêm quanh cuống khác tỷ lệ, số lượng vi khuẩn, lồi vi khuẩn có khác vi khuẩn tồn ống tủy phụ thuộc vào thời gian vi khuẩn cư trú, tương tác loài vi khuẩn Cuối cịn số lồi sống Răng VQCMT điều trị tủy thất bại có số lượng vi khuẩn từ 10 đến 102 vi khuẩn, số loài vi khuẩn khác so với chưa điều trị tủy có VQCMT Trường hợp vi khuẩn Gram (+) chiếm tỷ lệ cao 85% Số lượng vi khuẩn tăng ống tủy VQCMT có triệu chứng tổn thương cuống lớn Có 12 đến 18 lồi ống tủy có lỗ dị viêm quanh cuống mạn tính có triệu chứng Ở ống tủy trám bít có viêm quanh cuống mạn vi khuẩn kỵ khí tùy tiện vi khuẩn kỵ khí tuyệt đối chiếm tỷ lệ cao hơn, vi khuẩn ống tủy vi khuẩn khó điều trị Các nghiên cứu tìm số loài vi khuẩn ống tủy viêm quanh cuống mạn tính 1.3.3 Đặc điểm số vi khuẩn gây bệnh hay gặp ống tủy bệnh viêm quanh cuống Streptococcus,Veillonella, Actinomyces, Fusobacterium 1.4 Các phương pháp chẩn đốn vi sinh học + Kỹ thuật ni cấy, phân lập, Kỹ thuật soi tươi nhuộm soi, Kỹ thuậtmiễn dịch, Kỹ thuật sử dụng kính hiển vi huỳnh quang điện tử Kỹ thuật sử dụng công nghệ sinh học PCR kỹ thuật sinh học phân tử, áp dụng ngày nhiều việc phát có mặt số loài vi khuẩn gây bệnh miệng Dựa vào nhân lên đoạn DNA đích đặc hiệu Bằng việc giải trình tự đoạn nucleotide sau so sánh trình tự với trình tự sẵn có ngân hàng gen tìm vi khuẩn Kỹ thuật nhanh đơn giản cho kết dương tính mẫu có lượng vi khuẩn nhỏ 1.5 Các dung dịch bơm rửa thuốc sát khuẩn ống tủy 1.5.1 Các dung dịch bơm rửa ống tủy 1.5.1.1.Nước muối sinh lý (natri clorid) Nước muối sinh lý khơng độc, sử dụng rửa ống tủy để loại bỏ hóa chất bơm rửa cịn sót lại ống tủy 1.5.1.2.Peroxyt hydro (H2O2: Hydrogen peroxide) Khả diệt khuẩn cuả Peroxyt hydro không đáng kể 1.5.1.3.Chlorhexidine Chlorhexidine không chọn lựa chất bơm rửa điều trị nội nha chuẩn mực khơng hịa tan mô tủy hoại tử, không diệt nhiều chủng vi khuẩn NaOCl, tác dụng màng sinh học vi khuẩn yếu, giá thành đắt 1.5.1.4.Hợp chất Iốt Có đặc tính phổ kháng khuẩn rộng, độc tính không sử dụng chất bơm rửa rộng rãi có khả làm đổi màu răng, khơng hịa tan mơ hoại tử 1.5.1.5.Một số dung dịch bơm rửa Nước bơm rửa Ơ zơn, dung dịch Ruddle chưa nghiên cứu nhiều hiệu 1.5.1.6 Natri hypoclorit (NaOCl) Natri hypochloride dung dịch bơm rửa sử dụng tương đối rộng rãi điều trị tủy Một số nghiên cứu cho thấy, ống tủy (OT) trám calcium hydroxide (ít 20 phút) làm gia tăng khả hòa tan NaOCl Dung dịch NaOCl dung dịch có hiệu màng sinh học vi khuẩn NaOCl diệt vi khuẩn thường gây viêm quanh cuống Natri hypoclorit có tác dụng diệt Lactobacillus acidophilus, Peptostreptococcus micros, Prevotella intermedia, Streptococcus sanguis cao CHX NaOCL tác dụng nấm Candida albican mạnh Chlorhexidine Sử dụng dung dịch 2% CHX sau bơm rửa NaOCl có hiệu dùng NaOCL bơm rửa (Siqueira & Sen 2004, Waltimo et al 2004) Dung dịch NaOCl có khả sát khuẩn, hịa tan mơ tủy hoại tử, mang lại kết tốt điều trị, giá thành không đắt Cho đến NaOCl xem chất bơm rửa tốt điều trị nội nha 1.5.2 Vai trò thuốc sát khuẩn ống tủy điều trị nội nha Việc sát khuẩn ống tủy thuốc cần thiết để diệt vi khuẩn cịn sót lại sau tạo hình bơm rửa 1.5.2.1.Formaldehyt 1.5.2.2.Phenol dẫn xuất phenol 1.5.2.3.Chlorhexidine 1.5.2.4.Calcium hydroxide (Ca(OH)2) Là thuốc sử dụng rộng rãi đặt ống tủy lần hẹn, có khả kháng khuẩn, tác dụng giảm viêm, làm khô, tương hợp sinh học Hiện calcium hydroxide coi tiêu chuẩn vàng thuốc đặt ống tủy Calcium hydroxide có khả diệt vi khuẩn Enterococus khơng mạnh Thời gian cần thiết để calcium hydroxide làm vô khuẩn ống tủy chưa biết Những nghiên cứu lâm sàng cho kết khác chí ngược Việc kết hợp calcium hydroxide IKI 2% làm tăng hiệu kháng khuẩn Calcium hydroxide tăng hiệu kháng khuẩn vi khuẩn E faecalis dùng kết hợp với chlorhexidine 1.5.2.5 Thuốc kháng sinh 1.6 Các phương pháp điều trị nội nha viêm quanh cuống mạn tính 1.6.1 Phương pháp điều trị nội nha kết hợp phẫu thuật cắt cuống Trước đây, phương pháp điều trị nội nha kết hợp với phẫu thuật cắt cuống áp dụng cho hầu hết trường hợp viêm quanh cuống mạn tính Nhưng có nhược điểm gây lo lắng trước phẫu thuật đau đớn hậu phẫu cho người bệnh Ngày phương pháp áp dụng cho điều trị viêm quanh cuống mạn có tổn thương vùng chóp nang thực sự, trường hợp VQCMT điều trị phương pháp nội nha không phẫu thuật bị thất bại, bệnh nhân khơng có điều kiện để đến theo dõi theo lịch hẹn 1.6.2 Phương pháp điều trị nội nha khơng phẫu thuật viêm quanh cuống mạn tính Quan điểm điều trị VQCMT điều trị nội nha không phẫu thuật với việc làm ống tủy, băng thuốc tạm thời calcium hydroxide lần hẹn, trám kín khít ống tủy theo chiều không gian theo dõi Viêc làm hệ thống ống tủy hàn kín khít chiều khơng gian mang lại lành thương vùng quanh cuống hạn chế phẫu thuật Sau hàn ống tủy cần phục hồi lại thân để đảm bảo buồng tủy ống tủy kín khít tránh tái nhiễm 1.7 Một số nghiên cứu nước điều trị viêm quanh cuống mạn tính phương pháp nội nha không phẫu thuật Thành công điều trị VQCMT phương pháp nội nha không phẫu thuật đề cập qua nghiên cứu Tuomas cộng năm 2005, Sathorn cộng (2005), Nguyễn Mạnh Hà (2005), Bùi Thanh Tùng (2010), Thái Văn Nguyên cộng (2014), Gitanjali Swain (2015), Asunción Mendoza-Mendoza (2015) Chương ĐỐI TƯỢNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 2.1 Đối tượng nghiên cứu Những bệnh nhân có viêm quanh cuống mạn chẩn đoán dựa lâm sàng X-quang điều trị trung tâm kỹ thuật cao Viện đào tạo Răng Hàm Mặt, Khoa Răng Hàm Mặt Bệnh viện Đại học Y Hà Nội Khoa Răng Hàm Mặt Bệnh viện Đại học Y Hải Phòng 2.1.1 Tiêu chuẩn lựa chọn Bệnh nhân có chân chẩn đốn viêm quanh cuống mạn, có tổn thương vùng cuống X-quang với đường kính nhỏ 10 mm hợp tác trình điều trị 2.1.2 Tiêu chuẩn loại trừ Những viêm quanh cuống mạn bị nứt dọc vỡ lớn ½ thân có chân dị dạng, ống tủy canxi hóa Răng viêm quanh cuống mạn có nội tiêu ngoại tiêu, chưa đóng chóp có viêm quanh nặng 2.2 Địa điểm thời gian nghiên cứu 2.2.1 Địa điểm nghiên cứu 2.2.1.1 Nghiên cứu lâm sàng Tất bệnh nhân khám, chẩn đoán, lấy mẫu xét nghiệm Viện đào tạo Răng Hàm Mặt khoa Răng Hàm Mặt Bệnh viện Đại học Y Hải Phòng Bệnh viện Đại học Y Hà Nội 2.2.1.1 Nghiên cứu vi khuẩn Tất mẫu xét nghiệm tiến hành Khoa xét nghiệm Bệnh viện Bệnh Nhiệt đới Trung ương 2.2.2 Thời gian nghiên cứu Từ tháng 12 năm 2013- tháng 12 năm 2016 2.3 Phương pháp nghiên cứu 2.3.1 Thiết kế nghiên cứu: Nghiên cứu can thiệp lâm sàng khơng đối chứng Đánh giá hiệu theo mơ hình trước – sau 2.3.2 Mẫu nghiên cứu *Cỡ mẫu: n [ Z (1 / ) p (1  p)  Z1  [ p1 (1  p1 )  p2 (1  p2 ) ]2 ( p1  p2 ) Trong đó: n = Cỡ mẫu nghiên cứu cho trước, sau nghiên cứu 10 Z (1   / ) = Hệ số tin cậy (95%), Z (1  ) = Lực mẫu (90%) p1 = Tỷ lệ có nang u hạt ≤1 cm X- quang trước điều trị (100%) p2 = Tỷ lệ có nang u hạt ≤1 cm X- quang thành công sau điều trị (70%)(kết nghiên cứu Molven) p = (p1 + p2 ) /2 Cỡ mẫu tối thiểu tính n = 47 Thực tế nghiên cứu 51 * Chọn mẫu: Bệnh nhân đáp ứng đủ tiêu chuẩn lựa chọn chọn đủ số lượng nghiên cứu Trường hợp chung nang tính n=1 2.4 Qui trình tiến hành nghiên cứu 2.4.1 Kỹ thuật phương tiện thu thập thông tin 2.4.1.1 Kỹ thuật thu thập thông tin Phỏng vấn bệnh nhân (Họ tên, tuổi, giới, lý vào viện, tiền sử), khám để xác định vị trí răng, tìm triệu chứng lâm sàng nguyên nhân có VQCMT Bệnh nhân chụp phim cận chóp máy X-quang kỹ thuật số Từ X-quang thu thập hình thái, kích thước, ranh giới tổn thương X-quang Các phim đo đạc kích thước tổn thương vùng cuống thước trượt điện tử với sai số 0,001 mm để lựa chọn đối tượng phù hợp nghiên cứu Xét nghiệm: Sử dụng phương pháp ni cấy kỵ khí, định danh vi khuẩn kỹ thuật PCR giải trình tự gen 2.4.1.2 Phương tiện thu thập thông tin Gồm phương tiện vật liệu dùng cho nghiên cứu lâm sàng, Xquang, nghiên cứu vi khuẩn 2.4.2 Tiến hành nghiên cứu lâm sàng lấy bệnh phẩm Trước tiến hành điều trị, bệnh nhân lấy cao sẽ, làm lỗ sâu (nếu có) *Các bước tiến hành: Bước 1: Cơ lập vị trí điều trị đam cao su, sát trùng Mở vào buồng tủy ống tủy Thăm dị ống tủy trâm K Dùng giấy vơ trùng có cỡ tương ứng kích cỡ ống tủy với độ thuôn 2% đưa vào buồng tủy ống tủy Sau lấy đưa vào eppendorf vơ trùng Chuyển eppenford có chứa bấc bệnh phẩm đến khoa xét nghiệm vòng Mẫu vận chuyển môi trường nhiệt độ độ C (xét nghiệm lần 11 1) Bước 2: Tạo hình ống tủy máy X-Smart Protaper máy theo phương pháp bước xuống, xác định chiều dài làm việc máy định vị chóp Xquang Trong trình tạo hình làm ống tủy sử dụng Glyde, bơm rửa ống tủy NaOCL (parcan 3%) Thấm khô ống tủy côn giấy Dùng giấy Protaper vơ trùng có kích cỡ tương ứng với kích cỡ file tạo hình sau đưa vào ống tủy hết chiều dài làm việc, để 60 giây Sau lấy giấy đưa vào eppendorf vơ trùng Chuyển eppendorf có chứa bấc bệnh phẩm đến khoa xét nghiệm vòng Mẫu vận chuyển môi trường nhiệt độ độ C (xét nghiệm lần 2) Bước 3: Đưa paste Calcium hydroxide vào hết chiều dài ống tủy Sau trám tạm hẹn bệnh nhân quay lại sau ngày Bước 4: Cô lập răng, tháo bỏ chất hàn tạm Ca(OH)2 Đặt giấy Protaper vơ trùng có cỡ với côn giấy bước vào ống tủy hết chiều dài làm việc thời gian 60 giây Lấy côn giấy đưa vào eppendorf vô trùng Chuyển eppendorf có chứa bấc bệnh phẩm đến khoa xét nghiệm vịng Mẫu vận chuyển mơi trường nhiệt độ độ C (xét nghiệm lần 3) Bước 5: Bơm rửa ống tủy, hàn kín gutta percha theo phương pháp hàn đơn côn khi: Răng không triệu chứng lâm sàng, miệng lỗ dò liền, ống tủy khô, chất trám tạm không bong Sau hàn ống tủy chụp phim chỗ để đánh giá hàn ống tủy kín khít Sau hàn vĩnh viễn Bước 6: Chụp X-quang sau hàn tháng, sau năm 2.4.3 Nghiên cứu vi khuẩn học Mỗi làm xét nghiệm lần: lần 1, lần 2, lần 2.4.3.1 Qui trình kỹ thuật *Bệnh phẩm: lấy côn giấy vô trùng đưa vào buồng tủy ống tủy, sau lấy đưa vào eppendorf 1,8 ml vơ trùng Chuyển eppendorf có chứa bấc bệnh phẩm đến Khoa Xét nghiệm, Bệnh viện Bệnh Nhiệt đới Trung ương vòng Bệnh phẩm vận chuyển môi trường chuyên dụng cho vi khuẩn kỵ khí 2.4.3.2 Kỹ thuật tiến hành * Ni cấy, phân lập, đánh giá số lượng vi khuẩn bệnh phẩm Cấy mẫu bệnh phẩm: môi trường thạch máu socola kỵ khí Tồn bước thực tủ cấy kỵ khí Khi có vi 12 khuẩn mọc, đánh giá tính chất khuẩn lạc (hình thể, màu sắc, tan máu ) Đếm số lượng loại khuẩn lạc để tính số lượng vi khuẩn Chọn khuẩn lạc đại diện cho loại (trên môi trường BA socola kị khí) cấy chuyển sang mơi trường BA socola kỵ khí khác Sau nhuộm Gram để quan sát hình dạng vi khuẩn qua kính hiển vi; chụp ảnh hình thể vi khuẩn Tiến hành tăng sinh loại khuẩn lạc 2.4.3.3.Định danh vi khuẩn kỹ thuật PCR giải trình tự gen Các bước: Tách chiết ADN vi khuẩn, làm PCR nhân dòng gen 16S rRN, điện di sản phẩm PCR, đo nồng độ ADN sản phẩm PCR, giải trình tự gen Kết giải trình tự gen thu từ máy ABI 3130 phân tích phần mềm ATGC 7.2 đối chiếu với trình tự chuẩn ngân hàng liệu gen NBCI để xác định vi khuẩn 2.4.3.4 Tiêu chí đánh giá kết vi khuẩn học Có hay không vi khuẩn bệnh phẩm lấy từ ống tủy lần1, lần 2, lần Số lượng vi khuẩn tính CFU/ml (số lượng vi khuẩn /ml bệnh phẩm) Xác định lồi vi khuẩn 2.4.4 Tiêu chí đánh giá kết điều trị 2.4.4.1 Đánh giá sau hàn tuần lâm sàng Kết Lâm sàng Không đau, khơng sưng nề, lỗ rị liền, lợi bình thường Thành công Ăn nhai Nghi ngờ Đau không rõ ràng, khơng sưng nề, khơng có lỗ rị tái phát Có triệu chứng sau: Đau, Sưng nề, lỗ rị Thất bại tái phát, khơng ăn nhai 2.4.4.2 Đánh giá sau hàn tháng Kết Lâm sàng X quang Thành Không đau, không sưng nề, không Tổn thương chóp hết cơng có lỗ rị.Răng Ăn nhai thu nhỏ X-quang Nghi Đau không rõ ràng, khơng sưng nề, Tổn thương chóp khơng ngờ khơng có lỗ rị tái phát thay đổi Có triệu chứng Tổn thương chóp to Thất bại sau: Đau, Sưng nề, lỗ rị tái phát Khơng ăn nhai 13 14 2.4.4.3 Đánh giá sau hàn 12 tháng Kết Lâm sàng X quang Thành công Không đau, khơng sưng nề, Tổn thương chóp hết thu khơng có lỗ rị Ăn nhai nhỏ tháng X-quang Nghi ngờ Đau không rõ ràng, không sưng Tổn thương chóp khơng thay nề, khơng có lỗ rị tái phát đổi Có triệu Tổn thương chóp to chứng sau: Đau , Sưng nề , lỗ rị tái phát Khơng ăn nhai 2.4.6 Biện pháp khắc phục sai số Dùng thống loại bệnh án Nghiên cứu sinh trực tiếp thu thập thơng tin chun gia xét nghiệm Đo kích thước tổn thương vùng cuống Xquang đo lần, lấy kết trung bình Tiêu chí đánh giá lâm sàng, xét nghiệm quy định rõ ràng 2.5 Xử lý số liệu Xử lý số liệu phần mềm SPSS 20.0 Số liệu phân tích trình bày dạng tần số, tỷ lệ phần trăm, tính trung bình độ lệch chuẩn Phân tích sử dụng Chi-square tests, Fisher'sexact test, Ttests ghép cặp 2.6 Đạo đức nghiên cứu Đề tài Hội đồng nghiên cứu khoa học Trường Đại học Y Hà Nội thơng qua Tiến hành nghiên cứu đảm bảo tính y đức Thất bại Chương KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU Nghiên cứu 51 chân VQCMT 40 bệnh nhân 3.1 Đặc điểm lâm sàng, X-quang bệnh viêm quanh cuống mạn tính chân 3.1.1 Đặc điểm bệnh nhân mẫu nghiên cứu Bệnh nhân nữ chiếm 55,0%, bệnh nhân nam chiếm 45%, p>0,05 Nhóm tuổi 20-45 chiếm tỷ lệ cao 65,0% Khơng có khác biệt nhóm tuổi nam nữ với p >0,05 3.1.2 Triệu chứng lâm sàng viêm quanh cuống mạn tính Bảng 3.3.Triệu chứng lâm sàng đến khám Giới Nam Nữ Tổng Đặc điểm lâm sàng n % n % n % Đau 18 85,7 20 66,7 38 74,5 Sưng lợi 11 52,4 18 60,0 29 56,9 Răng đổi màu 23,3 28,6 13 25,5 Lỗ rò 42,9 26,7 17 33,3 Sâu 14,3 23,3 10 19,6 Vỡ 33,3 10,0 10 19,6 Núm phụ 4,8 23,3 15,7 Lung lay 19,0 20,0 10 19,6 p >0,05 >0,05 >0,05 >0,05 >0,05 >0,05 >0,05 >0,05 Nhận xét: Bệnh nhân có đau chiếm tỷ lệ cao 74,5%, sưng lợi, lỗ rò đổi màu chiếm tỷ lệ 56,9%, 33,3%, 25,5% Triệu chứng khác chiếm tỷ lệ thấp Khơng có khác biệt có ý nghĩa thống kê dấu hiệu lâm sàng nam nữ với (p >0,05) 3.1.3 Đặc điểm tổn thương vùng cuống Xquang Biểu đồ 3.3 Phân bố tổn thương vùng cuống Xquang theo ranh giới Nhận xét: Ranh giới tổn thương vùng cuống không rõ 94,1% Bảng 3.6 Phân bố hình thể tổn thương vùng cuống theo có lỗ rị Răng có lỗ rị Có Khơng Tổng Tổn thương vùng cuống n % n % n % Hình trịn 5,9 8,8 7,8 Hình bầu dục 41,2 14 41,2 21 41,2 Hình liềm 47,0 15 44,1 23 45,1 Hình dạng khác 5,9 5,9 5,9 17 100,0 34 100,0 51 100,0 Tổng >0,05 p 15 16 Nhận xét: Tổn thương vùng cuống hình liềm chiếm tỷ lệ cao (45,1%) Sự khác biệt hình thể tổn thương vùng cuống có lỗ rị khơng có lỗ dị khơng có ý nghĩa thống kê với p>0,05 3.2 Xác định loại vi khuẩn có ống tủy hiệu sát khuẩn ống tủy natri hypoclorit calxium hydroxide 3.2.1 Đặc điểm vi khuẩn ống tủy mơi trường ni cấy Kết ni cấy kỵ khí, làm PCR giải trình tự gen 51 bệnh phẩm ống tủy VQCMT xác định 45 lồi vi khuẩn, có tới lồi thuộc chi Streptococcus, lồi Bacillus, cịn lại lồi khác Streptococcus sanguinis chiếm tỷ lệ cao 49,1% Răng điều trị tủy thất bại có VQCMT số lồi vi khuẩn nhiều so với VQCMT chưa điều trị tủy Enterococcus faecalis chiếm tỷ lệ 40% điều trị tủy thất bại Có 45 loài vi khuẩn xếp theo chi theo biểu đồ 3.4 Bảng 3.14: Phân bố số chi vi khuẩn ống tủy có sưng đau khơng sưng đau Răng sưng đau Có Khơng Tổng Chi vi khuẩn n % n % n % Streptococcus 31 77,5 22,5 40 100,0 Bacillus 77,7 22, 100,0 Haemophylus 87,5 12, 100,0 Actinomyces 100,0 0, 100,0 Neisseria 75,0 25,0 12 100,0 Veillonella 55,5 44,5 100,0 Staphylococus 75,0 25,0 100,0 Biểu đồ 3.4: Tỷ lệ chi vi khuẩn phát 51 viêm quanh cuống mạn Nhận xét: Tổng số 25 chi VK phát ống tủy VQCMT Có chi vi khuẩn kỵ khí bắt buộc, có chi vi khuẩn hiếu Bacillus, Pseudomonas lại chi vi khuẩn kỵ khí tùy tiện Streptococcus chiếm tỷ lệ cao (78,4%) Nhận xét: Cả chi vi khuẩn có mặt có sưng đau Actinomyces phát răng, có sưng đau chiếm 100% Các chi khác xuất có sưng đau với tỷ lệ cao từ 55,5% đến 87,5% 3.2.2 Số lượng vi khuẩn ống tủy viêm quanh cuống mạn Răng VQCMT chưa điều trị tủy có nhiều chi vi khuẩn ống tủy VQCMT điều trị tủy 3.2.3 Hiệu sát khuẩn ống tủy natri hypoclorit calcium hydroxide Biểu đồ 3.5: Sự thay đổi số lượng, số loài vi khuẩn sau tạo hình bơm rửa ống tủy so với trước điều trị Nhận xét: Có 69% số có số vi khuẩn ống tủy giảm số lượng số lồi, 14% số có giảm số lượng vi khuẩn ống tủy 17% số tăng số loài vi khuẩn so với trước điều trị 17 18 Biểu đồ 3.6: Sự thay đổi số lượng, số loài vi khuẩn sau đặt Ca(OH)2 so với sau tạo hình bơm rửa OT Nhận xét: Sau đặt calxium hydroxide ống tủy, có 57% số có số vi khuẩn ống tủy giảm số lượng số loài vi khuẩn, 8% số có giảm số lượng vi khuẩn ống tủy, 4% số tăng số lượng vi khuẩn 31% số tăng số lượng số loài vi khuẩn so với sau tạo hình ống tủy 3.4 Đánh giá kết điều trị lâm sàng X-quang viêm quanh cuống mạn 3.4.1 Đánh giá kết điều trị viêm quanh cuống mạn sau tuần Bảng 3.24: Kết điều trị viêm quanh cuống mạn sau tuần Răng VQCMT Đã điều trị tủy Chưa điều trị tủy Tổng Kết n % n % n % Thành công 100,0 44 95,6 49 96,1 Nghi ngờ 0,0 0,0 0,0 Thất bại 0,0 4,4 3,9 Tổng 100,0 100,0 51 100,0 >0,05 p Nhận xét: Tỷ lệ điều trị thành công sau tuần 96,1% Kết điều trị nhóm VQCMT điều trị tủy chưa điều trị tủy khơng có ý nghĩa thống kê với p>0,05 3.4.2 Đánh giá kết điều trị viêm quanh cuống mạn sau tháng Biểu đồ 3.7: Sự thay đổi số lượng, số loài vi khuẩn sau đặt calcium hydroxide so với trước điều trị Nhận xét: So với ban đầu chưa điều trị tủy sau đặt Ca(OH)2 có 29,41% số âm tính với vi khuẩn, 13,72% số có giảm số lượng vi khuẩn, 37,25% có số vi khuẩn ống tủy giảm số lượng số lồi, 19,62% số có tăng số lồi vi khuẩn Có 15 sau lần đặt Ca(OH)2 âm tính với vi khuẩn Tương ứng 24 lồi vi khuẩn bị âm tính: lồi thuộc chi Streptococcus, loài thuộc chi Neisseria, loài thuộc chi Staphylococcus, loài thuộc chi Bacillus, loài thuộc chi Haemophilus, cịn lại lồi:Acinetobacter schindleri, Fusobacterium nucleatum, Corynebacterium falsenii, Klebsiella pneumoniae, Veillonella parvula, Enterobacter cloacae, Enterococcus faecalis Prevotella buccae Streptococcus sanguinis có tỷ lệ âm tính cao 40,0% Sau tháng, có 47 tái khám, kết điều trị theo bảng 3.25 Bảng 3.25: Kết điều trị sau tháng viêm quanh cuống mạn chưa điều trị tủy điều trị tủy RăngVQCMT Đã điều trị tủy Chưa điều trị tủy Tổng Kết n % n % n % Thành công 50,0 41 95,3 43 91,5 Nghi ngờ 50,0 4,7 8,5 Thất bại 0,0 0,0 0,0 Tổng 100,0 43 100,0 47 100,0