Nghiên cứu một số đặc tính của virus gây bệnh marek ở gà nuôi công nghiệp tại phía bắc việt nam

ĐẠI HỌC THÁI NGUYÊN TRƯỜNG ĐẠI HỌC NÔNG LÂM HÀ VĂN QUYẾT NGHIÊN CỨU MỘT SỐ ĐẶC TÍNH CỦA VIRUS GÂY BỆNH MAREK Ở GÀ NI CƠNG NGHIỆP TẠI PHÍA BẮC VIỆT NAM VÀ GIẢI PHÁP NÂNG CAO HIỆU LỰC VẮC XIN PHÒNG BỆNH LUẬN ÁN TIẾN SĨ THÚ Y THÁI NGUYÊN - 2017 ĐẠI HỌC THÁI NGUYÊN TRƯỜNG ĐẠI HỌC NÔNG LÂM HÀ VĂN QUYẾT NGHIÊN CỨU MỘT SỐ ĐẶC TÍNH CỦA VIRUS GÂY BỆNH MAREK Ở GÀ NI CƠNG NGHIỆP TẠI PHÍA BẮC VIỆT NAM VÀ GIẢI PHÁP NÂNG CAO HIỆU LỰC VẮC XIN PHÒNG BỆNH Ngành: Ký sinh trùng Vi sinh vật học thú y Mã số: 9.64.01.04 LUẬN ÁN TIẾN SĨ THÚ Y Người hướng dẫn khoa học: GS.TS Nguyễn Quang Tuyên PGS.TS Phạm Công Hoạt THÁI NGUYÊN - 2017 i LỜI CAM ĐOAN Tơi xin cam đoan cơng trình nghiên cứu riêng Các số liệu, kết luận án trung thực nguyên gốc, không trùng lặp với kết công bố Tôi xin cam đoan giúp đỡ cho việc hoàn thành luận án cảm ơn, thơng tin trích dẫn luận án rõ nguồn gốc Tác giả luận án Hà Văn Quyết ii LỜI CẢM ƠN Để hoàn thành luận án này, nhận nhiều quan tâm giúp đỡ thầy, cô, bạn đồng nghiệp, quan cơng tác đặc biệt gia đình Tôi xin trân trọng cảm ơn: Khoa Chăn nuôi - Thú y, trường Đại học Nông lâm - Đại học Thái Nguyên; Khoa Công nghệ sinh học, Viện Đại học mở Hà Nội tạo điều kiện tốt cho tơi suốt q trình học tập, nghiên cứu thực đề tài Hoàn thành luận án khoa học này, ngồi cố gắng thân, tơi ln nhận giúp đỡ tận tình, đầy trách nhiệm hết lịng khoa học thầy giáo: GS.TS Nguyễn Quang Tuyên, PGS.TS Phạm Công Hoạt, PGS.TS Nguyễn Viết Không PGS.TS Phạm Thị Tâm Tôi xin trân thành cảm ơn: giúp đỡ, tạo điều kiện cho thời gian học tập, nghiên cứu Huyện ủy, Hội đồng nhân dân, Ủy ban nhân dân huyện Lập Thạch, tỉnh Vĩnh Phúc; giúp đỡ nhiệt tình Chi cục Thú y tỉnh Vĩnh Phúc, Phú Thọ, Bắc Giang, Hà Nội khoa Công nghệ sinh học - Viện Đại học mở Hà Nội tạo điều kiện, giúp đỡ tơi q trình thí nghiệm thực luận án Nhân dịp này, xin bày tỏ lòng biết ơn sâu sắc tới: thầy, cô, bạn đồng nghiệp đặc biệt gia đình ln giúp đỡ, động viên, hỗ trợ suốt thời gian qua Thái Nguyên, tháng 12 năm 2017 Tác giả luận án Hà Văn Quyết iii MỤC LỤC LỜI CAM ĐOAN i LỜI CẢM ƠN .ii MỤC LỤC iii DANH MỤC CÁC TỪ VIẾT TẮT vi DANH MỤC CÁC BẢNG BIỂU .vii DANH MỤC CÁC HÌNH ix MỞ ĐẦU 1 Tính cấp thiết đề tài Mục tiêu đề tài Ý nghĩa khoa học thực tiễn đề tài 3.1 Ý nghĩa khoa học đề tài 3.2 Ý nghĩa thực tiễn đề tài Những đóng góp đề tài Chương TỔNG QUAN TÀI LIỆU 1.1 Tình hình lưu hành bệnh Marek nước giới 1.1.1 Tình hình lưu hành bệnh Marek Việt Nam 1.1.2 Tình hình lưu hành bệnh Marek giới 1.2 Cơ sở khoa học đề tài 1.2.1 Đặc tính sinh học virus gây bệnh Marek 1.2.2 Triệu chứng lâm sàng bệnh Marek 14 1.2.3 Bệnh tích bệnh Marek 15 1.2.4 Chẩn đoán bệnh Marek 18 1.2.5 Dịch tễ học bệnh Marek 19 1.2.6 Miễn dịch chống lại MDV 22 1.2.7 Vắc xin với việc kiểm sốt phịng ngừa bệnh Marek 26 1.2.8 Các giải pháp phòng trị bệnh Marek 27 Chương NỘI DUNG, ĐỐI TƯỢNG, NGUYÊN LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 30 2.1 Nội dung nghiên cứu 30 2.1.1 Phân lập virus gây bệnh Marek gà nuôi cơng nghiệp số tỉnh phía Bắc Việt Nam 30 iv 2.1.2 Nghiên cứu xác định độc lực gây bệnh thực nghiệm virus Marek phân lập giống lứa tuổi gà 30 2.1.3 Nghiên cứu đặc điểm bệnh lý đặc trưng virus Marek phân lập gà thí nghiệm 30 2.1.4 Nghiên cứu thử nghiệm phối hợp chất bổ trợ với vắc xin để tăng cường hiệu miễn dịch vắc xin phòng bệnh Marek 30 2.2 Đối tượng, nguyên liệu nghiên cứu 30 2.2.1 Đối tượng nghiên cứu 30 2.2.2 Nguyên liệu 30 2.2.3 Hóa chất, sinh phẩm môi trường nuôi cấy 31 2.3 Địa điểm thời gian nghiên cứu 33 2.3.1 Địa điểm nghiên cứu 33 2.3.2 Thời gian nghiên cứu 33 2.4 Phương pháp nghiên cứu 33 2.4.1 Phương pháp thu thập xử lý mẫu 33 2.4.2 Phương pháp phân lập MDV nhuộm Plaque 33 2.4.3 Phương pháp hóa mơ 35 2.4.4 Phương pháp xác định độc lực virus phôi trứng gà 35 2.4.5 Phương pháp PCR xác định trình tự gen Meq 36 2.4.6 Phương pháp Real-Time PCR định lượng số copy genome virus MDV 37 2.4.7 Bố trí thí nghiệm xác định khả gây bệnh MDV giống gà lứa tuổi gà 38 2.4.8 Bố trí thí nghiệm đánh giá ảnh hưởng chất tăng cường miễn dịch đến hiệu vắc xin HVT/Rispens 39 2.5 Phương pháp xử lý số liệu 40 Chương KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 41 3.1 Kết phân lập virus Marek 41 3.1.1 Kết mổ khám gà nghi mắc bệnh Marek số địa phương 41 3.1.2 Phân lập virus Marek 43 3.1.3 Đặc tính gene virus Marek chủng MDV 6.13 44 3.2 Khả gây bệnh chủng MDV phân lập 46 3.2.1 Khả gây bệnh MDV 6.13 giống gà thí nghiệm 46 v 3.2.2 Khả gây bệnh MDV phân lập giống gà thí nghiệm độ tuổi khác 51 3.2.3 Nghiên cứu thải virus từ gà thí nghiệm gây nhiễm virus gây bệnh MDV 58 3.3 Biểu bệnh tích gà thí nghiệm chủng MDV phân lập gây nên 60 3.3.1 Biểu tổn thương đại thể tổ chức gà thí nghiệm 60 3.3.2 Biểu tổn thương vi thể tổ chức gà thí nghiệm 66 3.3.3 Kết xác định khả gây bệnh phôi gà MDV phân lập 68 3.3.4 Kết xác định khả gây bệnh trên môi trường tế bào xơ phôi vịt lớp MDV phân lập 69 3.4 Kết nghiên cứu ảnh hưởng chất tăng cường miễn dịch đến hiệu bảo hộ vắc xin phòng bệnh Marek 70 3.4.1 Kết nghiên cứu ảnh hưởng yếu tố tăng cường miễn dịch hình thành đáp ứng miễn dịch gà thí nghiệm với vắc xin phịng bệnh Marek 73 3.4.2 Kết nghiên cứu ảnh hưởng yếu tố tăng cường miễn dịch đến hình thành khối u tổ chức gà thí nghiệm cơng cường độc 92 3.4.3 Tỷ lệ giảm số copy gen Meq quan có chức miễn dịch gà thí nghiệm cơng cường độc sau sử dụng vắc xin chất tăng cường miễn dịch 93 KẾT LUẬN VÀ ĐỀ NGHỊ 103 Kết luận 103 Kiến nghị 104 TÀI LIỆU THAM KHẢO 105 PHỤ LỤC 118 MỘT SỐ HÌNH ẢNH TRONG PHỊNG THÍ NGHIỆM 118 vi DANH MỤC CÁC TỪ VIẾT TẮT ADC Antibody Dependent Cellmediated ADN Acide Deoxyribo Nucleotic APC Antigen Presenting Cell CAM Chorioat Antoid Membran CEF Chicken Embryo Fibroblast CKC Chicken Kidney Cell CMGF Chicken Myelomonocytic Growth Factor CPE Cytopathogenic Effect CPG-ODN Cytosine Phosphate Guanosine-Olygo Deoxy Nucleotide 10 Poly I:C Chuỗi mạch ARN đôi Polyriboinosinic Polyribocytidylic 11 DEF Duck Embryo Fibroblast 12 DHBV Duck Hepatitis B Virus 13 ELISA Enzyme Linked Immuno Sorbent Assay 14 GDP Gross Domestic Product 15 HVT Herpesvirus of Turkey 16 IFN Interferon 17 IL Interleukin 18 MDV Marek Disease Virus 19 MHC Major Histocompatibility Complex 20 NKC Nature Killer Cell 21 PCR Polymerase Chain Reaction 22 PFU Plaque Forming Unit 23 RIF Resistance Inducing Factor 24 TLR Toll Like Receptor vii DANH MỤC CÁC BẢNG BIỂU Bảng 1.1 Tình hình dịch bệnh Marek tỉnh phía Nam năm 2007 Bảng 3.1 Kết mổ khám gà nghi mắc bệnh Marek số địa phương 41 Bảng 3.2 Tương đồng gene Meq virus MDV 6.13 với MDV giới 45 Bảng 3.3 Gene Meq MDV 6.13 MDV cường độc giới chủng vắc xin 46 Bảng 3.4 Mức độ gây bệnh chủng MDV phân lập giống gà thí nghiệm 47 Bảng 3.5 Triệu chứng lâm sàng bệnh Marek qua tháng theo dõi 49 Bảng 3.6 Mức độ gây bệnh chủng MDV phân lập giống gà độ tuổi 54 Bảng 3.7 Số lượng copy gen Meq bình quân cá thể gà thải ngày (log10) 59 Bảng 3.8 Biểu bệnh tích MDV gây cho gà thí nghiệm 61 Bảng 3.9 Tần suất xuất tổn thương vi thể tổ chức gà thí nghiệm 66 Bảng 3.10 Biểu bệnh tích MDV phơi gà 11 ngày tuổi 69 Bảng 3.11 Biểu bệnh tích MDV 6.13 trên mơi trường tế bào xơ phôi vịt 70 Bảng 3.12 Ảnh hưởng yếu tố tăng cường miễn dịch đến hiệu bảo hộ vắc xin phòng bệnh Marek 71 Bảng 3.13 Ảnh hưởng yếu tố tăng cường miễn dịch đến hình thành kháng thể bảo hộ vắc xin phòng bệnh Marek 75 Bảng 3.14 Ảnh hưởng yếu tố tăng cường miễn dịch đến tổng hợp  - IFN 78 Bảng 3.15 Ảnh hưởng yếu tố tăng cường miễn dịch đến tổng hợp β - IFN 80 Bảng 3.16 Ảnh hưởng yếu tố tăng cường miễn dịch đến tổng hợp α-IFN 83 Bảng 3.17 Ảnh hưởng yếu tố tăng cường miễn dịch đến tổng hợp IL-4 86 Bảng 3.18 Ảnh hưởng yếu tố tăng cường miễn dịch đến tổng hợp IL-12p40 87 viii Bảng 3.19 Ảnh hưởng yếu tố tăng cường miễn dịch đến tổng hợp IL-10 90 Bảng 3.20 Ảnh hưởng yếu tố tăng cường miễn dịch đến hình thành khối u gà sau công cường độc (Tỷ lệ % gà có khối u) 92 Bảng 3.21 Mức độ giảm số copy gen Meq lách gà thí nghiệm cơng cường độc sau sử dụng vắc xin chất tăng cường miễn dịch 94 Bảng 3.22 Mức độ giảm copy gen Meq túi Fabricius gà thí nghiệm cơng cường độc sau sử dụng vắc xin chất tăng cường miễn dịch 97 Bảng 3.23 Mức độ giảm số copy gen Meq tuyến ức gà thí nghiệm cơng cường độc sau sử dụng vắc xin chất tăng cường miễn dịch 100 108 34 Bumstead N., Sillibourne J., Rennie M., Ross N & Davison F (1997), Quantification of Marek’s disease virus in chicken lymphocytes using the polymerase chain reaction with fluorescence detection Jour Virol Methods, 65, 75 - 81 35 Burgess S.C and Davison T.F (2002), Identification of the neoplastically transformed cells in Marek’s disease herpesvirus-induced lymphomas: recognition by the monoclonal antibody AV37, Journal of Virology, 76: 7.276 - 7.292 36 Buscaglia C., Calnek B.W & Schat K.A (1988), Effect of immunocompetence on the establishment and maintenance of latency with Marek's disease herpesvirus, Journal of General Virology, 69: 1.067 - 1.077 37 Buza J.J and Burgess S.C (2007), Modeling the proteome of a Marek’s disease transformed cell line: a natural animal model for CD30 overexpressing lymphomas, Proteomics, 7: 1.316 - 1.326 38 Calnek B W (1986), Marek’s disease-a model for herpesvirus oncology, Critical Reviews in Microbiology, 12: 293 - 320 39 Calnek B.W., Hitchner S.B & Adldinger H.K (1970), Lyophilization of cell free Marek’s disease herpesvirus and a herpesvirus from turkeys Appl Microbiol., 20: 723 - 726 40 Calnek, B.W (2001), Pathogenesis of Marek’s Disease virus infection Current Topics in microbiology and immunology, 255, pag 25 - 55 Berlin, Heidel berg, New York: Springer - Verlag 41 Cantello J.L., Anderson A.S and Morgan R.W (1994), Identification of latency associated transcripts that map antisense to the ICP4 homolog gene of Marek’s disease virus Journal of Virology, 68: 6.280 - 6.290 42 Cantello J.L., Parcells M.S., Anderson A.S and Morgan R.W (1997), Marek’s disease virus latency - associated transcripts belong to a family of spliced RNAs that are antisense to the ICP4 homolog gene Journal of Virology, 71: 1.353 - 1.361 43 Cebrian J., Kaschka Dierich C., Berthelot N & Sheldrick P (1982), Inverted repeat nucleotide sequences in the genomes of Marek disease virus and the herpesvirus of the turkey Proceedings of the National Academy of Sciences, USA, 79: 555 - 558 109 44 Charles E Samuel (2001), Antiviral Actions of Interferon, Clinical Microbiology Reviews, Vol.14, No.4, P 778 - 809 45 Christian B., Gan Z., Folkert S., Takeshi K., and Dennis M.K (2011), CpG ADN as a vaccine adjuvant Expert Rev Vaccines, Apr 10(4): 499 - 511 46 Churchill A.E., Payne L.N., and Chubb R.C (1967), Immunization against Marek's disease using a live attenuated virus Nature, 211: 744 - 747 47 Cole R.K (1968) Studies on Genetic Resistance to Marek's Disease Avian Diseases, Vol 12, No 1, pag - 28 48 Cole R.K (1966), Genetic resistance to J.M leukosis virus Poultry Science, 45: 1.077 49 Davidson I and Borenshtain R (2002), The feather tips of commercial chickens are a favourable source of ADN for the amplification of MDV and ALV Jour Avian Pathol., 31: 237 - 240 50 Davidson I.L, Raibshtein I, Al Touri A (2013), Quantitation of Marek's disease and chicken anemia viruses in organs of experimentally infected chickens and commercial chickens by multiplex real-time PCR Avian Dis 57 (2 Suppl): 532-8 51 Djeraba A., Musset E., Bernardet N., Le Vern Y., and Quere P (2002), Similar pattern of iNOS expression, NO production and Cytokine response in genetic and vaccination-acquired resistance to Marek’s disease Veterinary Immunology and Immunopathology, 85: 63 - 75 52 Dunn JR (2014), Correlation between Marek's disease virus pathotype and replication Avian Dis 58(2): 287-92 53 Faiz NM (2016), Early infection with Marek's disease virus can jeopardize protection conferred by laryngotracheitis vaccines: a method to study MDVinduced immunosuppression Avian Pathol 4: 1-10 54 Faiz NM (2016), Efficacy of various Marek's disease vaccines protocols for prevention of Marek's disease virus-induced immunosuppression Vaccine 29; 34 55 Geerligs H (2013), Efficacy and safety of cell-associated vaccines against Marek's disease virus grown in QT35 cells or JBJ-1 cells Avian Dis 57 (2 Suppl): 448-53 110 56 Gimeno I.M (2008), Marek’s disease vaccines: a solution for today but a worry for tomorrow Vaccine, 26 Suppl 3, C31 - 41 57 Gimeno M.A (2012), Standardization of a model to study revaccination against Marek's disease under laboratory conditions Avian Pathol 41(1): 59-68 58 Gomis S., Babiuk I., Allan B., Willsion P., Waters E., Ambrose N (2004), Protection of neonatal chicks against a lethal challenge of Escherichia coli using ADN containing cytosine - phosphodiester guanine motif Avian Dis: 48(4): 813 - 22 59 Gong, Z., Zhang,L, Wang,J., Chen,L., Shan,H., Wang,Z., & Ma,H (2013) Isolation and analysis of a very virulent Marek's disease virus strain in China Virol J, 10, 155 60 Haiqi H., Kenneth J Genovesea C.L Swaggertya K.M., Mac Kinnonb, Michael H.K (2012), Co - stimulation with TLR3 and TLR21 ligands synergistically up - regulates Th1 - Cytokine IFN - c and regulatory Cytokine IL - 10 expression in chicken monocytes Develop and Comparative Immunology 36:756 - 760 61 Haq K., Brisbin J.T., Thanthrige D.N., Heidari M., and Sharif S (2010), Tran scriptome and proteome profiling of host responses to Marek’s disease virus in chickens Veterinary Immunology and Immunopathology 138: 292 - 302 62 Haq K., Schat K.A., Sharif S (2013), Immunity to Marek’s disease: when are we now Dev Comp Immunol 41(3):.439 - 46 63 Http://www.oie.int (2015) 64 Ionica F., Coman M (2009), An outbreak of Marek’s disease in Broiler chickens: epidemiological, clinical and anatomopathological aspects Lucrari Stintifice Medicin Veterinar, Vol XLII (1) 65 Islam A., Harrison B., Cheetham B.F., Mahony T.J., Young P.L & Walkden Brown S.W (2004), Differential amplification and quantitation of Marek’s disease viruses using real - time polymerase chain reaction Jour Virol Methods, 119 (2), 103 - 113 66 Jarosinski K.W., Jia W., Sekellick M.J., Marcus P.I., Schat K.A (2001), Cellular responses in chickens treated with IFN - alpha orally or inoculated with recombinant Marek's disease virus expressing IFN - alpha Jour Interferon Cytokine Res., 21(5): 287 - 296 111 67 Joseph M Cummins, Steven G Krakowka and Chad G.T (2005), Systemic effects of interferons after oral administration in animals and humans Am Jour Vet Resear., Vol 66, No.1 68 Juanita M.M., Catherine H., Giorgio T (1998), Role of Interleukin - 12 in Primary Influenza Virus Infection Jour Virol, vol 72, No 64: 425 - 483 69 Kaiser P., Underwood G and Davison F (2003), Differendtial Cytokine responses following Marek’s disease virus infection of chickens differing in resistance to Marek’s disease Jour Virol, 77: 762 - 768 70 Kanji Hirai (2001), Marek’s Disease Virology Journal, BioMed Central, vol 68, No 55: 365 - 380 71 Kano R., Konnai S., Onuma M and Ohashi K (2009), Cytokine profiles in chickens infected with virulent and avirulent Marek’s disease viruses: interferon - gamma is a key factor in the protection of Marek's disease by vaccination Jour Microbiology and Immunology, 53: 224 - 232 72 Karaca G., Anobile J., Downs D (2004), Herpesvirus of turkeys: microarray analysis of host gene responses to infection Virology, 318: 102 - 111 73 Katherine E (2015), Modelling Marek's Disease Virus (MDV) infection: parameter estimates for mortality rate and infectiousness Licensee Bio Med Central Ltd 74 Katz D and Kohn A (1971), Isolation and identification of Marek's disease herpesvirus by yolk sac inoculation method Avian Dis 15: 187 - 198 75 Kennedy D.A., Dunn J.R., Dunn P.A & Read A.F (2015) An observational study of the temporal and spatial patterns of Marek's-disease-associated leukosis condemnation of young chickens in the United States of America Prev Vet Med 120: 328-335 76 Kottaridis S.D., Luginbuhl R.E & Fredrickson T.N (1968), Marek’s disease Propagation of the Connecticut - A isolate in cell culture Avian Diseases, 12: 246 - 258 77 Laurent Hunt H D and Cheng H H (2001), Genetic Resistance to Marek’s Disease Current Topics in Microbiology and Immunology, 255: 121 - 141 78 Lee L.F., Kreager K.S., Arango J., Paraguassu A., Beckman B., Zhang H., Fadly A.M., Lupiani B & Reddy S.M (2010), Comparative evaluation of vaccine efficacy of recombinant Marek’s disease virus vaccine lacking Meq oncogene in commercial chickens, Vaccine, 28: 1.294 - 1.299 112 79 Levy A.M., Gilad O., Xia L., Izumiya Y., Choi J., Tsalenko A., Yakhini Z., Witter R., Lee L., Cardona C.J and Kung H.J (2005), Marek’s disease virus Meq transforms chicken cells via the v-Jun transcriptional cascade: a converging transforming pathway for avian oncoviruses Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America, 102: 14.831 - 14.836 80 Lobago F., Woldemeskel M (2014), An outbreak of Marek's disease in chickens in central Ethiopia Trop Ani Health Prod 36 (4): 397 - 406 81 Long J.E., Huang L.N., Qin Z.Q., Wang W.Y and Qu D (2005), IFN - gamma increases efficiency of ADN vaccine inprotecting ducks against infection World Journal of Gastroentorology, 11: 4.967 - 4.973 82 Lupiani B., Lee L.F and Reddy S.M (2001), Protein coding content of the sequence of Marek’s disease virus serotype Current Topics in Microbiology and Immunology, 255: 159 - 190 83 Mikami T, Bankowski R.A (1970), Plaque types and cell - free virus from tissue cultures infected with Cal-1 strain of herpesvirus associated with Marek's disease Jour N Cancer Inst., 45(2): 319 - 33 84 Mimeno I.M (2008), Marek’s disease vaccine: a solution for today but a worry for tomorrous Vaccine, 26 (Suppl 3): C31 - 41 85 Moran T.M., Isobe H., Fernandez S.A and Schulman J.L (1996), Interleukin causes delayed virus clearance in influenza virus - infected mice Jour Virol; 70(8): 5.230 - 5.235 86 Morgan R.W., Sofer L., Anderson A., Bernberg E., Cui J., Burnside J (2001), Induction of host gene expression following infection of chicken embryo fibroblasts with oncogenic Marek’s disease virus Jour of Virology, 75: 533 - 539 87 Moriguchi R., Yoshida H., Fujimoto Y., Mikami T and Izawa H (1987), Feather pulp lesions in chickens with naturally occurring Marek’s disease lymphomas Avian Diseases, 31: 156 - 168 88 Mosleuddin and Dewan M.L (1974), Incidence and diagnosis of Marek’s disease in two poultry farms of Bangladesh Bangl Vet Jour , 8: 45 - 48 89 Omar A.R., Schat K.A., Lee L.F., Hunt H.D (1998), Cytotoxic T lymphocyte response in chickens immunized with a recombinant fowlpox virus expressing Marek’s disease herpesvirus glycoprotein B Vet, Immunol Immunopathol, 62, 73 - 82 113 90 Osterrieder N., Kamil J.P., Schumacher D., Tischer B.K., Trapp S (2006), Marek's disease virus: from miasma to model, Nat Rev., Microbiol, (4), 283 - 294 91 Paludan S.R., Bowie A.G., Horan K.A and Fitzgerald K.A (2011), Recognition of herpesviruses by the innate immune system, Nature Reviews Immunology, 11: 143 - 154 92 Parcells M.S, Lin S.F., Dienglewicz R.L., Majerciak V., Robinson D.R., Chen H.C., Wu Z (2001), Marek’s disease virus (MDV) encodes an interleukin - homolog (vIL - 8): characterization of the vIL - protein and a vIL - deletion mutant MDV, Journal of Virology, 75: 5159 - 5173 93 Parcells Mark S., Arumugaswami V., Prigge J T., Pandya K., and Dienglewicz R.L (2003), Marek’s disease virus reactivation from latency: changes in gene expression at the origin of replication, Poultry Science, 82: 893 - 898 94 Park J.H., Sung H.W., Yoon B.I and Kwon H.M (2009), Protection of chicken against very virulent IBDV provided by in ovo priming with ADN vaccine and boosting with killed vaccine and the adjuvant effects of plasmid encoded chicken interleukin - and interferon - gamma Journal of Veterinary Science, 10: 131 - 139 95 Parvizi P., Mallick A.I., Haq K., Haghighi H.R., Orouji S., Thanthrige D.N., Paul M., Brisbin J.T., Read L.R., Behboudi S., Sharif S (2012), A toll like receptor ligand enhances protective effects of vaccination against Marek's disease virus and hinders tumor development in chickens Viral Immunol, 25(5): 394 - 401 96 Payne L.N., Frazier J.A., and Powell P.C (1976), Pathogenesis of Marek’s disease Int Rev Exp Pathol., 16: 59 - 154 97 Payvand P., Mohamed F., Abdul C., Amirul I.M., Kamran H., Hamid R.H., Shahriar O., Mohammad H., Shahriar B (2014), The effects of administration of ligands for Toll - like receptor and 21 against Marek’s disease in chickens, Vaccine, 32: 1.932 - 1.938 98 Purchase H (1971) Effect of vaccination with herpesvirus of turkey (HVT) on horizontal spread of Marek’disease herpes virus Avian Dis., 15: 391 - 397 114 99 Quéré P., Rivas C., Ester K., Novak R and Ragland W.L (2005), Abundance of IFN-alpha and IFN-gamma mRNA in blood of resistant and susceptible chickens infected with Marek’s disease virus (MDV) or vaccinated with turkey herpesvirus; and MDV inhibition of subsequent induction of IFN gene transcription Archives of Virology, 150: 507 - 519 100 Schat K.A and Baranowski E (2007), Animal vaccination and the evolution of viral pathogens Revue Scientifique et Technique, 26: 327 - 338 101 Schat K.A., Calnek B.W and Fabricant J (1982), Characterisation of two highly oncogenic strains of Marek disease virus Avian Pathol 11: 593 - 605 102 Schat K.A & Nair V (2008), Marek’s disease In: Diseases of Poultry 12th Edition, Blackwell Publishing, Ames Iowa, USA, 452 - 514 103 Sevoian M and Chamberlain D.M (1963), Avian lymphomatosis III Incidence and manifestations in experimentally infected chickens of various ages Avian Disease 7: 97 - 102 104 Sevoian M., Chamberlain D., Larose R.H (1962), Avian lymphomatosis Experimantal reproduction of the neural and visceral forms, Vet Med, 57: 500 - 50 105 Sevoian M., Chamberlain D.H and Counter F.T (1972), Avian lymphomatosis I Experimental reproduction of the neural and visceral forms Veterinary Medicine, 57: 500 - 50 106 Sharma J.M and Coulson B.D (1977), Cell - mediated cytotoxic response to cells bearing Marek's disease tumor - associated surface antigen in chickens infected with Marek's disease virus Journal of the National Cancer Institute, 58:1647 - 1651 107 Solomon J.J., Witter R.L., Nazerian K & Burmester B.R (1968), Studies on the etiology of Marek’s disease I Propagation of the agent in cell culture Proceedings of the Society of Experimental Biology and Medicine, 127, 173 - 177 108 Spencer J.L & Calnek B.W (1970), Marek’s disease: application of immunofluorescence for detection of antigen and antibody Am Jour Vet Res., 31, 345 - 58 109 St Paul M, Paolucci S, Read LR, Sharif S (2012), Characterization of responses elicited by Toll - like receptor agonist in cells of the bursa of Fabricius in chickens Vet Immunol Immunopathol: 149 (3 - 4): 237 - 44 115 110 Takeshi I., Izumi W., Satoshi I., Hideki F., Masami M., Shinichi T., Hidehiro T., Hirofumi S., Joe C., Takeshi K., Tetsutaro S and Hideki H (2005), Synthetic Double - Stranded R 111 NA, PolyI:C Combined with Mucosal Vaccine Protects against Influenza Virus Infection Jour Virol., Vol 79, No 5, 2.910 - 2.919 112 Therwa H., John B.B and Bingyun L (2010), Interleukin 12 a Key Immunoregulatory Cytokine in Infection Applications Int Jour Mol Sci., 11: 789 - 806 113 Tian M., Zhao Y., Lin Y., Zou N., Liu C., Liu P., Cao S., Wen X., & Huang Y (2011) Comparative analysis of oncogenic genes revealed unique evolutionary features ò field Marek’s disease virus prevalent in recent years in China Virol Jour., 8: 121 114 Tovey M.G and Lallemand C (2010), Adjuvant activity of Cytokines Methods in Molecular Biology, 626: 287 - 309 115 Tovey M.G., Bloch F., Launay O., Guillet J.G., Lebon P., Lallemand C., Meritet J.F., Maury C (2006), Adjuvant activity of interferon alpha in influenza vaccination Host defence in Eur Cytokine Netw., Vol.17, Special Issue “Cytokine 2006”, 124 - 132 116 Ulf Dittmer, Karin E.P., Ron M., Ingunn M.S., Brent R and Kim J.H (2001), Role of Interleukin - (IL - 4), IL - 12, and Gamma Interferon in Primary and Vaccine-Primed Immune Responses to Friend Retrovirus Infection Jour Virol Vol 75 2; 654 - 660 117 Vindel J.A (1964), Cytochemistry of neurolymphomatosis virus reproduction invitro Nat Cancer Inst Mono 17: 147 - 157 118 Volpini L.M., Calnek B.W., Sekellick M.J and Marcus P.I (1995), Stages of Marek’s disease virus latency defined by variable sensitivity to interferon modulation of viral antigen expression Vet Microbiol 47: 99 - 109 119 Von Bulow V (1977), Further characterization of the CVI988 strain of Marek’s disease virus Avian Pathology, 6: 394 - 403 120 Whitmire J.K., Tan J.T., Whitton J.L (2005), Interferon - gamma acts directly on CD8+ T cells to increase their abundance during virus infection Jour Exp Med 201: 1.053 - 1.059 116 121 Witter R.L (1983), Characteristics of Marek disease viruses isolated from vaccinated commercial chicken flocks: association of viral pathotype with lymphoma frequency Avian Dis 27:.113 - 132 122 Witter R L (2001), Protective efficacy of Marek’s disease vaccines In K Hirai (Ed.), Marek’s Disease, Vol 1, pp 57 - 91 123 Witter R.L and Lee L.F (1984), Polyvalent Marek’s disease vaccines: safety, efficacy and protective synergism in chickens with maternal antibodies Avian Pathol., 13: 75 - 92 124 Witter R.L and Schat K.A (2003), Marek’s disease In Y M Saif (Ed.), Diseases of Poultry Pag: 407 - 467 125 Witter R.L., Nazerian K., Purchase H.G & Burgoyne G.H (1970), Isolation from turkeys of a cell - associated herpesvirus antigenically related to Marek's disease virus American Journal of Veterinary Research, 31: 525 - 538 126 Witter R.L., Solomon J.J,Champion L.R and Nazerian K (1971), Long term studies of Marek’ disease infection in individual chickens Avian Disease 15: 346 - 365 127 Woźniakowski G1, Samorek Salamonowicz E (2014) Direct detection of Marek's disease virus in poultry dust by loop-mediated isothermal amplification Arch Virol 159(11): 3.083 128 Xing Z., Schat K.A (2001), Inhibitory effects of nitric oxide and gamma interferon on invitro and in vivo replication of Marek’s disease virus Jour Virol., 74 (8): 3605 - 12 129 Xinyu Z., Haitao Z., Huoying S., Hongxia S., Jianqiang Y., Ji M., Genghua W., and Aijian Q (2015), Outbreak of Marek’s disease in a vaccinated broiler breeding flock during its peak egg - laying period in China BMC Vet Res 11: 157 130 Zanella A & Granelli G (1974) Marek's disease control: comparative efficacy of cell-associated and cell-free lyophilized HVT vaccine Avian Pathol., 3: 45-50 131 Zelnik V.L., Harlin O., Fehler F., Kaspers B., Göbel T.W., Nair V.K., Osterrieder N (2004), An enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) for detection of Marek's disease virus-specific antibodies and its application in an experimental vaccine trial Jour Vet Med B Infect Dis Vet Public Health 51(2): 61-70 117 132 Zhang,Y.P., Li,Z.J., Bao,K.Y., Lv,H.C., Gao,Y.L., Gao,H.L., Qi,X.L., Cui,H.Y., Wang,Y.Q., Ren,X.G., Wang,X.M., & Liu,C.J (2015) Pathogenic characteristics of Marek's disease virus field strains prevalent in China and the effectiveness of existing vaccines against them Vet Microbiol, 177, 62-68 133 Zhenhua G.E., Lijuan Z., Jianlin W., Linlin C., Hu S., Zhiliang W and Hongchao M (2013), Isolation and analysis of a very virulent Marek’s disease virus strain in China Virology Journal, 10: 155 118 PHỤ LỤC MỘT SỐ HÌNH ẢNH TRONG PHỊNG THÍ NGHIỆM Hình 1: Thực phản ứng ELISA phát kháng thể đặc hiệu với virus Marek Hình 2: Thao tác đưa đĩa ELISA vào máy 119 Hình 3: Đọc kết phản ứng ELISA phát kháng thể đặc hiệu với virus Marek Bằng máy Elx 800 hãng BioTek Hình 4: Pha lỗng huyết để thực phản ứng trung hòa virus Marek 120 Hình 5: Chia mơi trường ni cấy môi trường tế bào xơ phôi vịt vào chai nuôi cấy 121 Hình 6: Kiểm tra bệnh tích mơi trường tế bào xơ phôi vịt sau gây nhiễm virus Marek 122 Hình 7: Chuẩn bị hóa chất thực phản ứng PCR Hình 8: Chạy phản ứng PCR phát gen hình thành khối u chủng MDV phân lập ... định số đặc tính virus gây bệnh Marek đàn gà nuôi công nghiệp tiêm vắc xin phòng bệnh Marek có biểu mắc bệnh số tỉnh phía Bắc Việt Nam Đánh giá khả gây bệnh, đặc điểm gây bệnh lý chủng virus. .. PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 2.1 Nội dung nghiên cứu 2.1.1 Phân lập virus gây bệnh Marek gà nuôi công nghiệp số tỉnh phía Bắc Việt Nam 2.1.2 Nghiên cứu xác định độc lực gây bệnh thực nghiệm virus Marek phân... liệu nghiên cứu 2.2.1 Đối tượng nghiên cứu - Virus gây bệnh Marek phân lập từ mẫu bệnh phẩm gà nuôi công nghiệp nghi mắc bệnh Marek số địa phương phía Bắc Việt Nam - Đáp ứng miễn dịch gà nuôi công