Nghiên cứu một số đặc điểm dịch tễ, yếu tố gây bệnh của vi khuẩn clostridium perfringens trong bệnh viêm ruột hoại tử ở lợn dưới 60 ngày tuổi tại thái nguyên và biện pháp phòng trị

ĐẠI HỌC THÁI NGUYÊN TRƯỜNG ĐẠI HỌC NÔNG LÂM ––––––––– ––––––––– NGUYỄN VĂN NGUYÊN NGHIÊN CỨU MỘT SỐ ĐẶC ĐIỂM DỊCH TỄ, YẾU TỐ GÂY BỆNH CỦA VI KHUẨN CLOSTRIDIUM PERFRINGENS TRONG BỆNH VIÊM RUỘT HOẠI TỬ Ở LỢN DƯỚI 60 NGÀY TUỔI TẠI THÁI NGUYÊN VÀ BIỆN PHÁP PHÒNG TRỊ Chuyên ngành: Thú y Mã số: 60 62 50 LUẬN VĂN THẠC SĨ KHOA HỌC NÔNG NGHIỆP Người hướng dẫn khoa học: TS NGUYỄN VĂN SỬU THÁI NGUYÊN - 2010 LỜI CAM ĐOAN Tôi xin cam đoan cơng trình nghiên cứu tơi trực tiếp thực với cộng tác giúp đỡ Th.S Nguyễn Thị Kim Oanh - Trưởng phòng Vi trùng - Trung tâm chẩn đoán thú y Trung Ương, TS Nguyễn Văn Sửu Trường Đại học Nông Lâm Thái Nguyên Các số liệu, hình ảnh kết luận văn trung thực chưa công bố cơng trình khác Tơi xin đảm bảo thơng tn, trích dẫn luận văn rõ nguồn gốc Tác giả luận văn Nguyễn Văn Nguyên LỜI CẢM ƠN Tôi xin chân thành cảm ơn Trường Đại học Nông Lâm Thái Nguyên, Trung tâm chẩn đoán thú y Trung Ương, cho phép tạo điều kiện giúp đỡ cho hồn thành luận văn Xin bày tỏ lòng biết ơn thầy, cô giáo, Th.S Nguyễn Thị Kim Oanh, TS Nguyễn Văn Sửu tận tnh hướng dẫn, bảo, giúp đỡ tơi hồn thành luận văn Tơi xin cảm ơn Khoa Sau đại học - Trường Đại học Nơng Lâm Thái Ngun; Phòng Vi trùng - Trung tâm chẩn đốn thú y Trung Ương, tồn thể bạn bè đồng nghiệp tận tình giúp đỡ tơi hồn thành luận văn Để góp phần thực thành công luận văn này, nhận giúp đỡ động viên lớn gia đình đồng nghiệp Nhân dịp này, tơi xin bày tỏ lòng biết ơn chân thành giúp đỡ quý báu Xin trân trọng cảm ơn! Thái Nguyên, tháng năm 2010 Nguyễn Văn Nguyên MỤC LỤC MỞ ĐẦU .1 Chương 1: TỔNG QUAN TÀI LIỆU .3 1.1 TÌNH HÌNH NGHIÊN CỨU TRONG VÀ NGỒI NƯỚC 1.1.1 Nghiên cứu nước 1.1.2 Nghiên cứu nước 1.2 MỘT SỐ HIỂU BIẾT VỀ VI KHUẨN Cl PERFRINGENS 1.2.1 Nghiên cứu vi khuẩn Cl perfringens 1.2.2 Đặc điểm hình thái, tnh chất nhuộm màu sức đề kháng vi khuẩn 1.2.3 Đặc tính ni cấy sinh vật hố học 10 1.2.4 Phân loại Cl perfringens đặc tnh gây bệnh 11 1.2.5 Các kháng nguyên độc tố Cl perfringens 14 1.3 NHỮNG NGHIÊN CỨU VỀ BỆNH DO CLOSTRDIUM PERFRINGENS GÂY RA 18 1.3.1 Bệnh viêm ruột xuất huyết gia súc (hemorrhagic enteritis) 18 1.3.2 Bệnh viêm ruột nhiễm độc tố ruột lợn 19 1.3.3 Bệnh viêm ruột hoại tử Cl perfringens typ C gây lợn 19 1.3.4 Bệnh viêm ruột hoại tử Cl perfringens typ A gây lợn 24 Chương 2: ĐỐI TƯỢNG, NGUYÊN LIỆU, NỘI DUNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 28 2.1 ĐỐI TƯỢNG, ĐỊA ĐIỂM VÀ THỜI GIAN NGHIÊN CỨU 28 2.1.1 Đối tượng nghiên cứu 28 2.1.2 Địa điểm nghiên cứu 28 2.1.3 Thời gian nghiên cứu 28 2.2 NGUYÊN LIỆU DÙNG TRONG NGHIÊN CỨU 28 2.2.1 Mẫu nghiên cứu 28 2.2.2 Các loại môi trường, hoá chất 29 2.2.3 Động vật thí nghiệm 29 2.3 NỘI DUNG NGHIÊN CỨU .29 2.3.1 Nghiên cứu số đặc điểm dịch tễ bệnh viêm ruột hoại tử lợn 60 ngày tuổi tỉnh Thái Nguyên 29 2.3.2 Kết phân lập vi khuẩn Cl perfringens lợn 30 2.3.3 Thử nghiệm phác đồ phòng điều trị bệnh viêm ruột hoại tử lợn 60 ngày tuổi 30 2.4 PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 30 2.4.1 Phương pháp nghiên cứu dịch tễ 30 2.4.2 Phương pháp thực 30 2.4.3 Nội dung điều tra, theo dõi 31 2.4.4 Các têu theo dõi dịch tễ 31 2.4.5 Phương pháp thu thập mẫu phân lập vi khuẩn 31 2.4.6 Phương pháp xác định số lượng vi khuẩn Cl perfringens gam phân lợn tiêu chảy nghi VRHT không têu chảy 35 2.4.7 Phương pháp giám định số tính chất sinh vật, hoá học chủng Cl perfringens phân lập 35 2.4.8 Phương pháp xác định yếu tố gây bệnh chủng vi khuẩn Cl perfringens phân lập 38 2.4.9 Phương pháp xác định khả mẫn cảm với kháng sinh chủng vi khuẩn phân lập 41 2.4.10 Thử nghiệm số phác đồ điều trị VRHT cho lợn 42 2.4.11 Phương pháp xử lý số liệu 43 Chương 3: KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU VÀ THẢO LUẬN 44 3.1 NGHIÊN CỨU MỘT SỐ ĐẶC ĐIỂM DỊCH TỄ BỆNH VIÊM RUỘT HOẠI TỬ Ở LỢN DƯỚI 60 NGÀY TUỔI TẠI HUYỆN THUỘC TỈNH THÁI NGUYÊN 44 3.1.1 Kết điều tra tnh hình lợn tiêu chảy chết nghi mắc bệnh viêm ruột hoại tử lợn số điểm nghiên cứu tỉnh Thái Nguyên 44 3.1.2 Kết điều tra tình hình bệnh viêm ruột hoại tử tỉnh Thái Nguyên theo mùa vụ 47 3.1.3 Điều tra tnh hình bệnh viêm ruột hoại tử lợn tỉnh Thái Nguyên theo giai đoạn phát triển 52 3.1.4 Điều tra tnh hình bệnh viêm ruột hoại tử lợn tỉnh Thái Nguyên theo phương thức chăn nuôi 57 3.1.5 Triệu chứng lâm sàng lợn nghi mắc VRHT 61 3.1.6 Bệnh tích lợn chết VRHT 62 3.2 KẾT QUẢ PHÂN LẬP VI KHUẨN CLOSTRIDIUM PERPRINGENS Ở LỢN .64 3.2.1 Kết xác định tỷ lệ mang trùng lợn 64 3.2.2 Kết phân lập vi khuẩn Cl perfringens bệnh phẩm lợn chết nghi viêm ruột hoại tử 65 3.2.3 Kết giám định đặc tính sinh hố vi khuẩn Cl perfringens phân lập 67 3.2.4 Xác định số lượng vi khuẩn Cl perfringens phân lợn bệnh lợn bình thường 69 3.2.5 Kết xác định serotype chủng vi khuẩn Cl Perfringens phản ứng PCR 72 3.2.6 Kết kiểm tra độc lực vi khuẩn Cl perfringens phân lập được phương pháp tiêm truyền chuột bạch 74 3.2.7 Kết xác định khả mẫn cảm với số loại kháng sinh vi khuẩn Cl perfringens phân lập 76 3.3 THỬ NGHIỆM PHÁC ĐỒ PHÒNG VÀ ĐIỀU TRỊ BỆNH VIÊM RUỘT HOẠI TỬ Ở LỢN DƯỚI 60 NGÀY TUỔI .79 3.3.1 Kết thử nghiệm vacxin phòng bệnh 79 3.3.2 Kết thử nghiệm phác đồ điều trị bệnh viêm ruột hoại tử lợn 60 ngày tuổi 81 3.4 KẾT LUẬN VÀ ĐỀ NGHỊ .85 3.4.1 KẾT LUẬN 85 3.4.2 ĐỀ NGHỊ 86 TÀI LIỆU THAM KHẢO .87 HÌNH ẢNH MINH HỌA DANH MỤC CÁC CHỮ VIẾT TẮT ADN : Acid Deoxyribonucleic BHI : Brain Heart Infusion CFU : Colony Forming Unit Cl perfringens : Clostridium perfringens E.coli : Escherichia coli FAO : Food and Agriculture Organization NCCLS : The National Communitee for Clinical Laboratory Standards (Hội đồng quốc gia Hoa Kỳ tiêu chuẩn lâm sàng phòng thí nghiệm) OIE : World organization for animal health Sp : Species TAE : Tris- Acetic - EDTA TBE : Tris- Borat - EDTA TGC : Thioglycollate Medium U.S.P VRHT : Viêm ruột hoại tử BT : Bình thường TC : Tiêu chảy Cs : Cộng 84 84 Qua kết bảng 3.18 cho thấy: với phác đồ điều trị, kết số lợn khỏi bệnh có chênh lệch định Tỷ lệ khỏi bệnh phác đồ 39/45 số lợn chiếm tỷ lệ cao (86,67%), phác đồ số lợn khỏi bệnh với tỷ lệ 43/52 (82,69%) số lợn điều trị Như để điều trị viêm ruột hoại tử lợn sử dụng phác đồ Đồng thời kết hợp với sử dụng loại thuốc như: bột - + - điện giải cho uống để bù nước lượng CL , Na , HCO bị tiêu chảy; ADE - B- Complex thuốc tổng hợp loại vitamin : A,D,E vitamin nhóm B để tăng cường sức đề kháng thể tăng q trình têu hố thức ăn, Glucose ưu trương làm tăng cường hoạt động lưới nội mơ, kích thích đơng máu, điều hồ nước thể tăng cường chức gan kích thích trình trao đổi chất hấp thụ vitamin, khống chất Bùi Thị Tho (2003) [34], Phạm Sỹ Lăng cs (2005) [17] 85 85 3.4 KẾT LUẬN VÀ ĐỀ NGHỊ 3.4.1 KẾT LUẬN Dựa kết nói trên, chúng tơi rút số kết luận sau: 3.4.1.1 Lợn từ sơ sinh đến 60 ngày tuổi tỉnh Thái Nguyên có tỷ lệ mắc bệnh viêm ruột hoại tử (22,40%) chết VRHT (6,66%) 3.4.1.2 Lợn mắc tiêu chảy nghi VRHT cao vào mùa xuân (25,43%), thấp vào mùa thu (18,84%), trung bình (22,40%) Lợn chết viêm ruột hoại tử cao vào mùa xuân (7,87%), thấp vào mùa thu (4,62%), trung bình năm (6,66%) 3.4.1.3 Lợn mắc VRHT cao từ sơ sinh đến 15 ngày tuổi (26,96 %) thấp từ 46 đến 60 ngày tuổi (17,76%) Tỷ lệ lợn chết VRHT cao từ sơ sinh đến 15 ngày tuổi (10,92%) thấp giai đoạn từ 46 - 60 ngày tuổi tỷ lệ (1,98%) 3.4.1.4 Lợn ni theo phương thức chăn ni khác có tỷ lệ mắc VRHT khác nhau, cao phương thức chăn nuôi bán công nghiệp (25,02%) thấp phương thức chăn nuôi công nghiệp (17,91%) Tỷ lệ chết theo VRHT theo phương thức chăn nuôi truyền thống cao chiếm tỷ lệ (8,39%) thấp phương thức chăn nuôi công nghiệp (4,48%) 3.4.1.5 Triệu chứng thường gặp phổ biến lợn mắc bệnh viêm ruột hoại tử tác động vi khuẩn Cl perfringens têu chảy, têu chảy lẫn máu kèm theo tổ chức hoại tử 3.4.1.6 Tỷ lệ phân lập Cl perfringens thấy gan, lách ruột Tỷ lệ phân lập C perfringens ruột chiếm tỷ lệ cao (81,82%), sau lách (34,55%), gan (25,45%) 3.4.1.7 Các chủng vi khuẩn Cl perfringens phân lập tỉnh Thái Nguyên mang đầy đủ đặc điểm hình thái, ni cấy đặc tính sinh hố học điển hình mà tài liệu ngồi nước mơ tả 86 86 3.4.1.8 Mức độ biến động số lượng vi khuẩn lợn VRHT lợn bình thường lứa tuổi có khác nhau: SS - 15 ngày tuổi (5,40 triệu vi khuẩn/gr phân) 16 - 30 (4,10 triệu vi khuẩn/gr phân), 31 - 45 (2,13 triệu vi khuẩn/gr phân), 46 - 60 ngày tuổi (1,92 triệu vi khuẩn/gr phân) Số lượng vi khuẩn tính chung lợn không mắc VRHT (16,05 triệu vi khuẩn/gr phân), lợn VRHT (53,19 triệu vi khuẩn/gr phân) 3.4.1.9 Định typ chủng vi khuẩn Cl perfringens PCR có (10,26%) chủng thuộc typ A (89,74%) chủng thuộc typ C Động lực chủng vi khuẩn Cl perfringens phân lập mạnh thể giết chết chuột bạch thời gian ngắn chết hoàn toàn trước 48 3.4.1.10 Vi khuẩn Cl perfringens mẫn cảm với kháng sinh Lincomycin, Amoxycilline (94,87%), Penecillin (92,31%), kháng mạnh với kháng sinh Colistin (92,31%), Enroflorxacin, Cefoxitn (89,74%), Sulfamethoxazol (87,18%), Tetramycin (76,92%) 3.4.1.11 Tiêm Vacxin SCOURMUNE - C cho lợn mẹ trước lúc đẻ tuần biện pháp tiêm phòng chủ động tích cực mang lại hiệu cao 3.4.1.12 Kết điều trị sử dụng MARPHAMOX-LA (Amoxycillin) kết hợp với chất điện giải, ADE Bcomplex, GLUCO-K-C-NAMIN cho kết cao kết điều trị sử dụng Lincomycin 3.4.2 ĐỀ NGHỊ 3.4.2.1 Do thời gian kinh phí thực đề tài có hạn nên chưa nghiên cứu đầy đủ yếu tố gây bệnh chủng vi khuẩn Cl perfringens phân lâp Thái Nguyên đề nghị tiếp tục nghiên cứu vấn đề kỹ cơng trình nghiên cứu sau 3.4.2.2 Chủ động têm phòng vacxin SCOURMUNE- C cho lợn mẹ để hạn chế thấp tỷ lệ lợn mắc têu chảy Cl perfringens biện pháp phòng bệnh VRHT đạt hiệu cao 87 87 TÀI LIỆU THAM KHẢO I Tài liệu tham khảo tiếng Việt Trần Kim Anh, Nguyễn Thanh Sơn, Phùng Thị Vân, Phạm Thị Kim Dung, Đoàn Khắc Húc, Nguyễn Thị Rật, Nguyễn Văn Hùng, Nguyễn Thanh Giang, Trịnh Thúy Mai, Nguyễn Minh Hải (2004), Kỹ thuật chăn nuôi lợn nông hộ, Nxb Nông nghiệp, Hà Nội Trần Văn Bình, Trần Văn Thiên (2006), Thuốc số phác đồ điều trị bệnh gia súc, gia cầm, Nxb Nông nghiệp, tr 27-28 Lê Minh Chí (1996), Bệnh tiêu chảy gia súc, Báo cáo Hội thảo khoa học thú y tháng 3-1996, Cục thú y Phạm Đức Chương, Trần Tố, Nguyễn Quang Tuyên, Nguyễn Văn Sửu, Độc chất học thú y, Nxb Nông nghiệp, Hà Nội, tr.176-177 Cù Xuân Dần, Nguyễn Xuân Tịnh, Tiết Hồng Ngân, Nguyễn Bá Mùi, Lê Mộng Loan (1996), Sinh lý học gia súc, NXB Nông nghiệp, Hà Nội, tr 122-141 Đào Trọng Đạt cs (1996), Viêm ruột hoại tử lợn con, Báo cáo KHKT thú y, (số 1) Đào Trọng Đạt, Phan Thanh Phượng, Lê Ngọc Mỹ, Huỳnh Văn Kháng (1996), Bệnh lợn nái lợn con, NXB Nông nghiệp, Hà Nội, tr 57.-147 Đào Trọng Đạt, Trần Thị Hạnh, Đặng Phương Kiệt (1998) Phân lập Cl perfringens số hộ gia đình tỉnh Vĩnh Phúc, Tạp chí thơng tin y dược, Bộ y tế (số 10), tr 28-30 Đậu Ngọc Hào (2007), Độc chất học thú y, Nxb Nông nghiệp, Hà Nội, tr.131-135 88 88 10 Trần Thị Hạnh (2000), Xác định vai trò E coli Cl perfringens bệnh ỉa chảy lợn bước đầu nghiên cứu chế tạo số sinh phẩm phòng bệnh, Kết nghiên cứu khoa học kỹ thuật thú y, NXB Nông nghiệp, Hà Nội, tr.190-199 11 Trần Thị Hạnh Đặng Xuân Bình (2004), Phân lập, định typ, lựa chọn chủng vi khuẩn E.coli Cl perfringens để chế tạo sinh phẩm phòng bệnh cho lợn giai đoạn theo mẹ, Báo cáo chăn nuôi thú y, NXB Nông nghiệp, Hà Nội, Tr.306-314 12 Trần Thị Hạnh, Đặng Xuân Bình (2002) Chế tạo, thử nghiệm số chế phẩm sinh học phòng trị bệnh têu chảy phân trắng lợn E coli Cl perfringens Tạp chí KHKT Thú y, tập IX, (số 1), tr.19-28 13 Nguyễn Bá Hiên (2001) Một số vi khuẩn thường gặp biến động số lượng chúng gia súc khoẻ mạnh bị tiêu chảy nuôi vùng ngoại thành Hà Nội, Điều trị thử nghiệm Luận án tến sĩ nông nghiệp, Hà Nội 14 Nguyễn Thị Kim Lan, Nguyễn Thị Minh, Lê Thị Ngân (2006a) Vai trò ký sinh trùng đường tiêu hoá hội chứng tiêu chảy lợn sau cai sữa Thái Nguyên, Tạp chí KHKT Thú y tập XIII (số 3), tr.36-40 15 Nguyễn Thị Kim Lan, Nguyễn Thị Thị Minh, Lê Thị Ngân (2006b), Một số đặc điểm dịch tễ hội chứng têu chảy lợn Thái Nguyên Tạp chí KHKT Thú y tập XIII 16 Phạm Sỹ Lăng (2009), Bệnh tiêu chảy vi khuẩn lợn biện pháp phòng trị, Tạp chí KHKT Thú y tập XVI, (số 6), tr 80-85 17 Phạm Sỹ Lăng, Phan Địch Lân, Trương Văn Dung (2005), Bệnh phổ biến lợn biện pháp phòng trị, NXB Nông nghiệp, Hà Nội, tr.74-75 89 89 18 Huỳnh Thị Mỹ Lệ, Đỗ Ngọc Thúy, Nguyễn Bá Hiên (2009), Một số đặc tính sinh học vi khuẩn Clostridium perfringen phân lập từ bò lợn mắc hội chứng tiêu chảy Hà Nội vùng phụ cận, Tạp chí khoa học thú y, tập XVI, (số 4), tr.58-63 19 Hồ Văn Nam, Nguyễn Thị Đào Nguyên, Trương Quang, Phùng Quốc Chướng, Chu Đức Thắng, Phạm Ngọc Thạch (1997), Bệnh viêm ruột ỉa chảy lợn, Tạp chí KHKT Thú y, (số 1), tr.15-22 20 Hồ Văn Nam, Nguyễn Bá Hiên (1995), Một số vi khuẩn thường gặp đường ruột trâu bò khoẻ mạnh ỉa chảy viêm ruột vùng ngoại thành Hà Nội, Kỷ yếu kết nghiên cứu khoa học chăn nuôi thú y (1991-1995), NXB nông nghiệp, Hà Nội, tr.140-145 21 Lê Văn Năm, Trần Văn Bình, Nguyễn Thị Hương (1999), Hướng dẫn phòng trị bệnh lợn cao sản, Nxb Nơng nghiệp, Hà Nội, tr.76 -77 22 Nguyễn Thị Nội, Nguyễn Ngọc Nhiên, Cù Hữu Phú, Nguyễn Thị Sở, Trần Thụ Hà (1989), Kết điều tra tình hình nhiễm khuẩn đường ruột số sở chăn nuôi (1985-1989), Kết nghiên cứu KHKT Thú y-Viện thú y, Hà Nội 23 Nguyễn Ngọc Nhiên, Trần Thị Hạnh, Phạm Bảo Ngọc, Vũ Đình Hưng, Ngơ Thị Nhu (1996), Viêm ruột hoại tử hươu nai vi khuẩn Cl perfringens kết phòng bệnh giải độc tố (thống báo), Tạp chí KHKT thú y, tập 3, tr.47-48 24 Võ Văn Ninh (2001), Kháng sinh thú y, Nhà xuất trẻ, tr 118-121 25 Nguyễn Thị Ngữ (2005), Nghiên cứu tình hình hội chứng tiêu chảy lợn huyện Chương Mỹ - Hà Tây, xác định số yếu tố gây bệnh vi khuẩn E.coli Salmonella, biện pháp phòng trị, Luận văn Thạc sĩ Nơng nghiệp, Hà Nội 90 90 26 Nguyễn Vĩnh Phước (1974), Vi sinh vật học thú y, NXB KHKT, Hà Nội, tr.57-79 27 Phan Thanh Phượng, Trần Thị Hạnh, Phạm Thị Ngọc, Ngơ Hồng Hưng (1996), Nghiên cứu xác định vai trò vi khuẩn yếm khí Cl perfringens hội chứng têu chảy lợn, Tạp chí Nơng nghiệp cơng nghiệp thực phẩm, (số 12), tr.495-496 28 Cù Hữu Phú, Nguyễn Ngọc Nhiên, Đỗ Ngọc Thuý, Nguyễn Xuân Huyên, Âu Xuân Tuấn, Văn Thị Hường, Đào Thị Hảo, Vũ Ngọc Quý, (20022003), Kết điều tra tnh hình tiêu chảy lợn theo mẹ số trại lợn miền Bắc Việt Nam, xác định tỉ lệ kháng sinh yếu tố gây bệnh chủng E.coli phân lập được, Báo cáo khoa học CNTY 29 Lê Văn Tạo (2006), Bệnh nhiễm máu độc tố ruột (Enterotoxaemia) trâu bò, Tạp chí KHKT thú y, tập 8, tr 82-89 30 Nguyễn Như Thanh, Nguyễn Bá Hiên, Trần Thị Lan Hương (1997), Vi sinh vật thú y, NXB Nông nghiệp, Hà Nội, tr 81-84 31 Nguyễn Như Thanh (2001) Cơ sở phương pháp nghiên cứu dịch tễ học thú y, Nxb Nông nghiệp, Hà Nội, tr 56-57 32 Tống Vũ Thắng, Đậu Ngọc Hào (2008), Nghiên cứu mối quan hệ ô nhiễm nấm mốc, E coli, Salmonella, Cl perfringens thức ăn hỗn hợp tỷ lệ lợn bị tiêu chảy mùa khô, mùa mưa sở chăn nuôi lợn sinh sản TP Hồ Chí Minh, Tạp chí KHKT thú y tập XV, số 1, tr 54-61 33 Nguyễn Văn Thiện, Nguyễn Khánh Quắc, Nguyễn Duy Hoan (2002), Giáo trình phương pháp nghiên cứu chăn nuôi, Nxb Nông nghiệp, Hà Nội 91 91 34 Bùi Thị Tho (2003), Thuốc kháng sinh nguyên tắc sử dụng chăn nuôi Nxb Hà Nội, tr.81-82 35 Hoàng Văn Tuấn, Lê Văn Tạo, Trần Thị Hạnh (1998), Kết điều tra tình hình tiêu chảy lợn trại giống hướng nạc, Tạp chí KHKT thú y tập V, (số 4) 36 Nguyễn Quang Tuyên (2008), Giáo trình vi sinh vật thú y Nxb Nông nghiệp, Hà Nội, tr 91-112 37 Nguyễn Văn Sửu, Nguyễn Quang Tuyên (2008), Tình hình dịch tễ bệnh Viêm ruột hoại tử lợn số huyện tỉnh Thái Nguyên Tạp chí KHKT thú y, tập XV, (số 3), tr 32-39 38 Nguyễn Văn Sửu, Nguyễn Quang Tuyên Trần Thị Hạnh (2008), Xác định tỉ lệ lợn têu chảy viêm ruột hoại tử số địa phương tỉnh Thái Nguyên, Tạp chí KHKT thú y, tập XV, (số5), tr 49-53 II Tài liệu tham khảo tiếng Anh 39 Arbuckle J.B.R (1972) Enteric colibacillosis (p.91), Intestnal samonellosis (p.102), Swine dysentery-blood scours (p.192), Clostridium perfringens typ Cl perfringens enterits (p.191) Edema th disease in the Merck veterinary manual, edition 40 Baldassi L, Barrbosa M.L, Bach E.E, laria S.T (2004) Virulence exaltation of Cl perfringens strains from bovine Trop Dis vol 10 No 3.2004 41 Bakhtn A.G (1956), Control of Edema Disease in Danish pig herds International pig veterinary society congress, p.256 42 Bergeland M.E (1986) Clostridium Infection Disease of Swine Sixth edition IOWA-USA 557 43 Choi Y.K, M.S Kang, H.S Yoo (2003) Clostridium perfringens typ E myonecrosis in a horse in Korea J.vet, Med Sci, 65 (11), p 1245-1247 92 92 44 NCCLS (1999) Quality Control Values for Veterinary- Use Fluoroquinolones, Performance standards for antmicrobial disk and dilution susceptibility tests for bacteria isolated from animals Approved standard M31-A 45 Garmony H.S, N Chanter, N.P French, D.Bueschel, J.G Songer.R.W Tiball (2000) Occurrence of Clostridium perfringens beta2 toxin amongst animal, determined using genotyping and subtyping PCR assay Epidermiology and infection 124, p.61-67 46 Hatheway C.L (1990), Toxigenic clostridia, Clin Microbiol Rev, 3, p.6798 47 Harbola P.C, Khera S.S (1990) Enterotoxaemia of calves due to Clostridium wechii typ E, Aust Vet J, 43.p 360-363 48 Hogh.P (1974) Porcine infection necrotizing due to Cl perfringens Theses copenhagen, p 287289 49 Kitasato Yamagishi, Kayo Sugitani, Kiyoo Tanishima, Schinichi Nakamura (1997) Polymerase chain section test for diferentnation of five toxin types of Clostridium perfringens , Microbiol Immunol, 41 (4), p 295-299 50 Kirby W.M.M, Bauer A.W, Sherris J.C and Turcle M (1996) Antibiotic susceptibility testing by a standardized single disk method 45 pp.493-596 51 Kohler B.Klostridien (1998) Infektionen and Intoxcatonen in Infekton krankheinten der Haustiere Jena, 1998 52 Niilo, Chalmers (1978) Enterotoxigenic Clostridium perfringens typ A isolated from intestinal contents of cattle, sheep and chichkens Can J Compmed 42 (3), p 357.363 93 93 53 Quinn P.J, Carter M.E, Mackey B.K, Carter G.R (1994) Clinical Verterynary Microbiology P 190-206 54 Quinn P.J, M.E Carter, B, Mackey, G.R Carter (1999) “Clostridium species”, in: Clinical Verterynary Microbiology, Elsevier Limited, chapter 17, p 191-208 55 Roeder B.L, Chengapa M.M and Nagaraja, T.G (1987) Isolation of Cl perfringens from neonatal calves with ruminal and abomas tympamy, abomsitis and abomasuucretion, Tam Vet Med Assoc, p.1150-1155 56 Radostits O.M, Blood.D.Cand Gay.C (1994) Veterinary med icine, the textbook of the catle, sheep, pig, goats and horrses, Diseases caused by Escherichia coli Lon don, Philadenphia, Sydney, Tokyo, Toronto, p.703-730 57 Songer J.G, A.Uzal Francisco (1996) Clostridial anteric infections in pigs J Vet Diagn Invest 17, p.528-536 58 Taylor D.J, Bergelan M.E (1986) Clostridial infecton diseases of swine IOWA state University Press/AMES U.S.Ath Editon, P.454-468 59 Timoney J.F, H.James W.Scot Gillepie Fredrie, Barlough E.Jeffrey (1994) Hagan and Bruneurs Microbioly and Infectious Diseases of domestic animal p.219-240 60 Walker H.W (2004) Food-borne illness from Cl perfringens Rev Food sci Nutri 2000 p 71-104 61 Waters M., A Savoie, H.S Gamory, D Bueschel, M.R Popff, J.G Songer, R.W Titball, B.A McClane and M.R Sarker (2003) Genotyping and Phenotyping of Beta2-Toxigenic Clostridium perfringens fecal isolates associated with Gastrointestinal diseases in piglets J Clin Microbiol Vol 41, N 8, p 3584-3591 94 94 HÌNH ẢNH MINH HỌA Ảnh 1: Hình thái vi khuẩn Cl perfringens kính hiển vi (độ phóng đại 1000 lần) Ảnh 2: Khuẩn lạc mọc môi trường thạch TSC 95 95 Hình ảnh 3: Khuẩn lạc Cl perfringens thạch yếm khí Hình ảnh 4: Vi khuẩn Cl perfringens gây dung huyết thạch máu cừu 96 96 Hình ảnh 5: Phản ứng lên men đường vi khuẩn Cl perfringens Hình ảnh 6: Khả mẫn cảm kháng kháng sinh vi khuẩn Cl perfringens 97 97 Hình ảnh 7: Tiêm truyền chuột bạch thử độc tố chủng vi khuẩn Cl perfringens Hình ảnh 8: Mổ khám lợn têu chảy VRHT 98 98 Hình Kết xác định Cl perfringens typ A PCR Hình 10 Kết xác định Cl perfringens typ C PCR ... hại dịch bệnh gây ra, tến hành nghiên cứu đề tài Nghiên cứu số đặc điểm dịch tễ, yếu tố gây bệnh vi khuẩn Clostridium perfringens bệnh vi m ruột hoại tử lợn 60 ngày tuổi Thái Nguyên biện pháp phòng. .. phòng trị Mục tiêu nghiên cứu - Xác định số đặc điểm dịch tễ bệnh vi m ruột hoại tử lợn giai đoạn 60 ngày tuổi Thái Nguyên - Nghiên cứu sinh vật học vi khuẩn Clostridium perfringens gây bệnh Vi m... Nghiên cứu số đặc điểm dịch tễ bệnh vi m ruột hoại tử lợn 60 ngày tuổi tỉnh Thái Nguyên 29 2.3.2 Kết phân lập vi khuẩn Cl perfringens lợn 30 2.3.3 Thử nghiệm phác đồ phòng điều trị bệnh