Nghiên cứu một số đặc điểm dịch tễ yếu tố gây bệnh của vi khuẩn clostridium perfringgens trong bệnh viêm ruột hoại tử ở lợn dưới 60 ngày tuổi ở thái

ĐẠI HỌC THÁI NGUYÊN TRƢỜNG ĐẠI HỌC NÔNG LÂM –––––––––––––––––– NGUYỄN VĂN NGUYÊN NGHIÊN CỨU MỘT SỐ ĐẶC ĐIỂM DỊCH TỄ, YẾU TỐ GÂY BỆNH CỦA VI KHUẨN CLOSTRIDIUM PERFRINGENS TRONG BỆNH VIÊM RUỘT HOẠI TỬ Ở LỢN DƢỚI 60 NGÀY TUỔI TẠI THÁI NGUYÊN VÀ BIỆN PHÁP PHÒNG TRỊ Chuyên ngành: Thú y Mã số: 60 62 50 LUẬN VĂN THẠC SĨ KHOA HỌC NÔNG NGHIỆP Ngƣời hƣớng dẫn khoa học: TS NGUYỄN VĂN SỬU THÁI NGUYÊN - 2010 Số hóa Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn LỜI CAM ĐOAN Tôi xin cam đoan cơng trình nghiên cứu tơi trực tiếp thực với cộng tác giúp đỡ Th.S Nguyễn Thị Kim Oanh - Trưởng phòng Vi trùng - Trung tâm chẩn đoán thú y Trung Ương, TS Nguyễn Văn Sửu Trường Đại học Nông Lâm Thái Nguyên Các số liệu, hình ảnh kết luận văn trung thực chưa cơng bố cơng trình khác Tơi xin đảm bảo thơng tin, trích dẫn luận văn rõ nguồn gốc Tác giả luận văn Nguyễn Văn Nguyên Số hóa Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn LỜI CẢM ƠN Tôi xin chân thành cảm ơn Trƣờng Đại học Nơng Lâm Thái Ngun, Trung tâm chẩn đốn thú y Trung Ƣơng, cho phép tạo điều kiện giúp đỡ cho chúng tơi hồn thành luận văn Xin bày tỏ lịng biết ơn thầy, giáo, Th.S Nguyễn Thị Kim Oanh, TS Nguyễn Văn Sửu tận tình hƣớng dẫn, bảo, giúp đỡ tơi hồn thành luận văn Tơi xin cảm ơn Khoa Sau đại học - Trƣờng Đại học Nông Lâm Thái Nguyên; Phịng Vi trùng - Trung tâm chẩn đốn thú y Trung Ƣơng, toàn thể bạn bè đồng nghiệp tận tình giúp đỡ tơi hồn thành luận văn Để góp phần thực thành cơng luận văn này, nhận đƣợc giúp đỡ động viên lớn gia đình đồng nghiệp Nhân dịp này, tơi xin bày tỏ lòng biết ơn chân thành giúp đỡ quý báu Xin trân trọng cảm ơn! Thái Nguyên, tháng năm 2010 Nguyễn Văn Nguyên Số hóa Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn MỤC LỤC MỞ ĐẦU .1 Chƣơng 1: TỔNG QUAN TÀI LIỆU .3 1.1 TÌNH HÌNH NGHIÊN CỨU TRONG VÀ NGỒI NƢỚC 1.1.1 Nghiên cứu nƣớc 1.1.2 Nghiên cứu nƣớc 1.2 MỘT SỐ HIỂU BIẾT VỀ VI KHUẨN Cl PERFRINGENS 1.2.1 Nghiên cứu vi khuẩn Cl perfringens 1.2.2 Đặc điểm hình thái, tính chất nhuộm màu sức đề kháng vi khuẩn 1.2.3 Đặc tính ni cấy sinh vật hố học 10 1.2.4 Phân loại Cl perfringens đặc tính gây bệnh 11 1.2.5 Các kháng nguyên độc tố Cl perfringens 14 1.3 NHỮNG NGHIÊN CỨU VỀ BỆNH DO CLOSTRDIUM PERFRINGENS GÂY RA 19 1.3.1 Bệnh viêm ruột xuất huyết gia súc (hemorrhagic enteritis) 19 1.3.2 Bệnh viêm ruột nhiễm độc tố ruột lợn 19 1.3.3 Bệnh viêm ruột hoại tử Cl perfringens typ C gây lợn 20 1.3.4 Bệnh viêm ruột hoại tử Cl perfringens typ A gây lợn 25 Chƣơng 2: ĐỐI TƢỢNG, NGUYÊN LIỆU, NỘI DUNG VÀ PHƢƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 29 2.1 ĐỐI TƢỢNG, ĐỊA ĐIỂM VÀ THỜI GIAN NGHIÊN CỨU 29 2.1.1 Đối tƣợng nghiên cứu 29 2.1.2 Địa điểm nghiên cứu 29 2.1.3 Thời gian nghiên cứu 29 2.2 NGUYÊN LIỆU DÙNG TRONG NGHIÊN CỨU 29 2.2.1 Mẫu nghiên cứu 29 2.2.2 Các loại môi trƣờng, hoá chất 30 2.2.3 Động vật thí nghiệm 30 2.3 NỘI DUNG NGHIÊN CỨU .30 Số hóa Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn 2.3.1 Nghiên cứu số đặc điểm dịch tễ bệnh viêm ruột hoại tử lợn dƣới 60 ngày tuổi tỉnh Thái Nguyên 30 2.3.2 Kết phân lập vi khuẩn Cl perfringens lợn 31 2.3.3 Thử nghiệm phác đồ phòng điều trị bệnh viêm ruột hoại tử lợn dƣới 60 ngày tuổi 31 2.4 PHƢƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 31 2.4.1 Phƣơng pháp nghiên cứu dịch tễ 31 2.4.2 Phƣơng pháp thực 31 2.4.3 Nội dung điều tra, theo dõi 32 2.4.4 Các tiêu theo dõi dịch tễ 32 2.4.5 Phƣơng pháp thu thập mẫu phân lập vi khuẩn 32 2.4.6 Phƣơng pháp xác định số lƣợng vi khuẩn Cl perfringens gam phân lợn tiêu chảy nghi VRHT không tiêu chảy 36 2.4.7 Phƣơng pháp giám định số tính chất sinh vật, hoá học chủng Cl perfringens phân lập đƣợc 36 2.4.8 Phƣơng pháp xác định yếu tố gây bệnh chủng vi khuẩn Cl perfringens phân lập đƣợc 39 2.4.9 Phƣơng pháp xác định khả mẫn cảm với kháng sinh chủng vi khuẩn phân lập đƣợc 42 2.4.10 Thử nghiệm số phác đồ điều trị VRHT cho lợn 44 2.4.11 Phƣơng pháp xử lý số liệu 45 Chƣơng 3: KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU VÀ THẢO LUẬN 45 3.1 NGHIÊN CỨU MỘT SỐ ĐẶC ĐIỂM DỊCH TỄ BỆNH VIÊM RUỘT HOẠI TỬ Ở LỢN DƢỚI 60 NGÀY TUỔI TẠI HUYỆN THUỘC TỈNH THÁI NGUYÊN 45 3.1.1 Kết điều tra tình hình lợn tiêu chảy chết nghi mắc bệnh viêm ruột hoại tử lợn số điểm nghiên cứu tỉnh Thái Nguyên 45 3.1.2 Kết điều tra tình hình bệnh viêm ruột hoại tử tỉnh Thái Nguyên theo mùa vụ 49 Số hóa Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn 3.1.3 Điều tra tình hình bệnh viêm ruột hoại tử lợn tỉnh Thái Nguyên theo giai đoạn phát triển 54 3.1.4 Điều tra tình hình bệnh viêm ruột hoại tử lợn tỉnh Thái Nguyên theo phƣơng thức chăn nuôi 60 3.1.5 Triệu chứng lâm sàng lợn nghi mắc VRHT 64 3.1.6 Bệnh tích lợn chết VRHT 65 3.2 KẾT QUẢ PHÂN LẬP VI KHUẨN CLOSTRIDIUM PERPRINGENS Ở LỢN .67 3.2.1 Kết xác định tỷ lệ mang trùng lợn 67 3.2.2 Kết phân lập vi khuẩn Cl perfringens bệnh phẩm lợn chết nghi viêm ruột hoại tử 68 3.2.3 Kết giám định đặc tính sinh hoá vi khuẩn Cl perfringens phân lập đƣợc 71 3.2.4 Xác định số lƣợng vi khuẩn Cl perfringens phân lợn bệnh lợn bình thƣờng 73 3.2.5 Kết xác định serotype chủng vi khuẩn Cl Perfringens phản ứng PCR 77 3.2.6 Kết kiểm tra độc lực vi khuẩn Cl perfringens phân lập đƣợc đƣợc phƣơng pháp tiêm truyền chuột bạch 79 3.2.7 Kết xác định khả mẫn cảm với số loại kháng sinh vi khuẩn Cl perfringens phân lập đƣợc 81 3.3 THỬ NGHIỆM PHÁC ĐỒ PHÒNG VÀ ĐIỀU TRỊ BỆNH VIÊM RUỘT HOẠI TỬ Ở LỢN DƢỚI 60 NGÀY TUỔI .84 3.3.1 Kết thử nghiệm vacxin phòng bệnh 84 3.3.2 Kết thử nghiệm phác đồ điều trị bệnh viêm ruột hoại tử lợn dƣới 60 ngày tuổi 86 3.4 KẾT LUẬN VÀ ĐỀ NGHỊ .90 3.4.1 KẾT LUẬN 90 3.4.2 ĐỀ NGHỊ 91 TÀI LIỆU THAM KHẢO .93 HÌNH ẢNH MINH HỌA Số hóa Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn Số hóa Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn DANH MỤC CÁC CHỮ VIẾT TẮT ADN : Acid Deoxyribonucleic BHI : Brain Heart Infusion CFU : Colony Forming Unit Cl perfringens : Clostridium perfringens E.coli : Escherichia coli FAO : Food and Agriculture Organization NCCLS : The National Communitee for Clinical Laboratory Standards (Hội đồng quốc gia Hoa Kỳ tiêu chuẩn lâm sàng phịng thí nghiệm) OIE : World organization for animal health Sp : Species TAE : Tris- Acetic - EDTA TBE : Tris- Borat - EDTA TGC : Thioglycollate Medium U.S.P VRHT : Viêm ruột hoại tử BT : Bình thƣờng TC : Tiêu chảy Cs : Cộng Số hóa Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn DANH MỤC CÁC BẢNG Bảng 1.1 Một số loại độc tố chủ yếu Cl perfringens sản sinh 18 Bảng 2.1 Trình tự Nucletide mồi dùng để xác định số loại độc tố vi khuẩn Cl perfringens 40 Bảng 2.2 Các chu kỳ nhiệt phản ứng PCR 40 Bảng 2.3 Tiêu chuẩn đánh giá mức độ mẫn cảm kháng sinh theo NCCLS (1999) [65] 43 Bảng 3.1 Tỷ lệ lợn tiêu chảy chết nghi VRHT số huyện tỉnh Thái Nguyên 47 Bảng 3.2 Kết lợn nghi mắc bệnh viêm ruột hoại tử theo mùa vụ 50 Bảng 3.3 Kết lợn chết nghi mắc bệnh viêm ruột hoại tử theo mùa vụ Thái Nguyên 53 Bảng 3.4 Kết điều tra tình hình bệnh viêm ruột hoại tử lợn tỉnh Thái Nguyên theo giai đoạn phát triển 55 Bảng 3.5 Kết điều tra tình hình lợn chết viêm ruột hoại tử điểm nghiên cứu theo giai đoạn phát triển 58 Bảng 3.6 Tình hình bệnh viêm ruột hoại tử lợn tỉnh Thái Nguyên theo phƣơng thức chăn nuôi 60 Bảng 3.7 Tình hình lợn chết bệnh viêm ruột hoại tử tỉnh Thái Nguyên theo phƣơng thức chăn nuôi 62 Bảng 3.8 Triệu chứng lâm sàng lợn mắc VRHT 64 Bảng 3.9 Bệnh tích lợn mắc VRHT 66 Bảng 3.10 Kết xác định tỷ lệ mang vi khuẩn Cl perfringens lợn 67 Bảng 3.11 Kết phân lập vi khuẩn Cl perfringens bệnh phẩm lợn chết nghi viêm ruột hoại tử 70 Bảng 3.12 Kết giám định đặc tính sinh hố vi khuẩn Cl perfringens phân lập đƣợc 71 Bảng 3.13 Biến động số lƣợng vi khuẩn Cl perfringens phân lợn bệnh lợn khỏe lợn mắc tiêu chảy nghi VRHT 74 Số hóa Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn 10 Bảng 3.14 Kết xác định serotype chủng vi khuẩn Cl perfringens phản ứng PCR 78 Bảng 3.15 Kết kiểm tra độc lực chủng vi khuẩn phân lập đƣợc phƣơng pháp tiêm truyền chuột bạch 80 Bảng 16 Kết xác định khả mẫn cảm với số loại kháng sinh hóa dƣợc 83 Bảng 3.17 Kết thử nghiệm vacxin phòng bệnh viêm ruột hoại tử 85 Bảng 3.18 Kết thử nghiệm phác đồ điều trị bệnh viêm ruột hoại tử lợn 88 Số hóa Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn 91 3.4.1.7 Các chủng vi khuẩn Cl perfringens phân lập đƣợc tỉnh Thái Nguyên mang đầy đủ đặc điểm hình thái, ni cấy đặc tính sinh hố học điển hình mà tài liệu ngồi nƣớc mô tả 3.4.1.8 Mức độ biến động số lƣợng vi khuẩn lợn VRHT lợn bình thƣờng lứa tuổi có khác nhau: SS - 15 ngày tuổi (5,40 triệu vi khuẩn/gr phân) 16 - 30 (4,10 triệu vi khuẩn/gr phân), 31 - 45 (2,13 triệu vi khuẩn/gr phân), 46 - 60 ngày tuổi (1,92 triệu vi khuẩn/gr phân) Số lƣợng vi khuẩn tính chung lợn khơng mắc VRHT (16,05 triệu vi khuẩn/gr phân), lợn VRHT (53,19 triệu vi khuẩn/gr phân) 3.4.1.9 Định typ chủng vi khuẩn Cl perfringens PCR có (10,26%) chủng thuộc typ A (89,74%) chủng thuộc typ C Động lực chủng vi khuẩn Cl perfringens phân lập mạnh thể giết chết chuột bạch thời gian ngắn chết hoàn toàn trƣớc 48 3.4.1.10 Vi khuẩn Cl perfringens mẫn cảm với kháng sinh Lincomycin, Amoxycilline (94,87%), Penecillin (92,31%), kháng mạnh với kháng sinh Colistin (92,31%), Enroflorxacin, Cefoxitin (89,74%), Sulfamethoxazol (87,18%), Tetramycin (76,92%) 3.4.1.11 Tiêm Vacxin SCOURMUNE - C cho lợn mẹ trƣớc lúc đẻ tuần biện pháp tiêm phòng chủ động tích cực mang lại hiệu cao 3.4.1.12 Kết điều trị sử dụng MARPHAMOX-LA (Amoxycillin) kết hợp với chất điện giải, ADE Bcomplex, GLUCO-K-C-NAMIN cho kết cao kết điều trị sử dụng Lincomycin 3.4.2 ĐỀ NGHỊ 3.4.2.1 Do thời gian kinh phí thực đề tài có hạn nên chƣa nghiên cứu đầy đủ yếu tố gây bệnh chủng vi khuẩn Cl perfringens phân lâp đƣợc Thái Nguyên đề nghị tiếp tục nghiên cứu vấn đề kỹ cơng trình nghiên cứu sau Số hóa Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn 92 3.4.2.2 Chủ động tiêm phòng vacxin SCOURMUNE- C cho lợn mẹ để hạn chế thấp tỷ lệ lợn mắc tiêu chảy Cl perfringens biện pháp phịng bệnh VRHT đạt hiệu cao Số hóa Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn 93 TÀI LIỆU THAM KHẢO I Tài liệu tham khảo tiếng Việt Trần Kim Anh, Nguyễn Thanh Sơn, Phùng Thị Vân, Phạm Thị Kim Dung, Đoàn Khắc Húc, Nguyễn Thị Rật, Nguyễn Văn Hùng, Nguyễn Thanh Giang, Trịnh Thúy Mai, Nguyễn Minh Hải (2004), Kỹ thuật chăn nuôi lợn nông hộ, Nxb Nông nghiệp, Hà Nội Trần Văn Bình, Trần Văn Thiên (2006), Thuốc số phác đồ điều trị bệnh gia súc, gia cầm, Nxb Nơng nghiệp, tr 27-28 Lê Minh Chí (1996), Bệnh tiêu chảy gia súc, Báo cáo Hội thảo khoa học thú y tháng 3-1996, Cục thú y Phạm Đức Chƣơng, Trần Tố, Nguyễn Quang Tuyên, Nguyễn Văn Sửu, Độc chất học thú y, Nxb Nông nghiệp, Hà Nội, tr.176-177 Cù Xuân Dần, Nguyễn Xuân Tịnh, Tiết Hồng Ngân, Nguyễn Bá Mùi, Lê Mộng Loan (1996), Sinh lý học gia súc, NXB Nông nghiệp, Hà Nội, tr 122-141 Đào Trọng Đạt cs (1996), Viêm ruột hoại tử lợn con, Báo cáo KHKT thú y, (số 1) Đào Trọng Đạt, Phan Thanh Phƣợng, Lê Ngọc Mỹ, Huỳnh Văn Kháng (1996), Bệnh lợn nái lợn con, NXB Nông nghiệp, Hà Nội, tr 57.-147 Đào Trọng Đạt, Trần Thị Hạnh, Đặng Phƣơng Kiệt (1998) Phân lập Cl perfringens số hộ gia đình tỉnh Vĩnh Phúc, Tạp chí thơng tin y dƣợc, Bộ y tế (số 10), tr 28-30 Đậu Ngọc Hào (2007), Độc chất học thú y, Nxb Nông nghiệp, Hà Nội, tr.131-135 Số hóa Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn 94 10 Trần Thị Hạnh (2000), Xác định vai trò E coli Cl perfringens bệnh ỉa chảy lợn bước đầu nghiên cứu chế tạo số sinh phẩm phòng bệnh, Kết nghiên cứu khoa học kỹ thuật thú y, NXB Nông nghiệp, Hà Nội, tr.190-199 11 Trần Thị Hạnh Đặng Xuân Bình (2004), Phân lập, định typ, lựa chọn chủng vi khuẩn E.coli Cl perfringens để chế tạo sinh phẩm phòng bệnh cho lợn giai đoạn theo mẹ, Báo cáo chăn nuôi thú y, NXB Nông nghiệp, Hà Nội, Tr.306-314 12 Trần Thị Hạnh, Đặng Xuân Bình (2002) Chế tạo, thử nghiệm số chế phẩm sinh học phòng trị bệnh tiêu chảy phân trắng lợn E coli Cl perfringens Tạp chí KHKT Thú y, tập IX, (số 1), tr.19-28 13 Nguyễn Bá Hiên (2001) Một số vi khuẩn thường gặp biến động số lượng chúng gia súc khoẻ mạnh bị tiêu chảy nuôi vùng ngoại thành Hà Nội, Điều trị thử nghiệm Luận án tiến sĩ nông nghiệp, Hà Nội 14 Nguyễn Thị Kim Lan, Nguyễn Thị Minh, Lê Thị Ngân (2006a) Vai trị ký sinh trùng đường tiêu hố hội chứng tiêu chảy lợn sau cai sữa Thái Nguyên, Tạp chí KHKT Thú y tập XIII (số 3), tr.36-40 15 Nguyễn Thị Kim Lan, Nguyễn Thị Thị Minh, Lê Thị Ngân (2006b), Một số đặc điểm dịch tễ hội chứng tiêu chảy lợn Thái Nguyên Tạp chí KHKT Thú y tập XIII 16 Phạm Sỹ Lăng (2009), Bệnh tiêu chảy vi khuẩn lợn biện pháp phịng trị, Tạp chí KHKT Thú y tập XVI, (số 6), tr 80-85 17 Phạm Sỹ Lăng, Phan Địch Lân, Trƣơng Văn Dung (2005), Bệnh phổ biến lợn biện pháp phịng trị, NXB Nơng nghiệp, Hà Nội, tr.74-75 Số hóa Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn 95 18 Huỳnh Thị Mỹ Lệ, Đỗ Ngọc Thúy, Nguyễn Bá Hiên (2009), Một số đặc tính sinh học vi khuẩn Clostridium perfringen phân lập từ bò lợn mắc hội chứng tiêu chảy Hà Nội vùng phụ cận, Tạp chí khoa học thú y, tập XVI, (số 4), tr.58-63 19 Hồ Văn Nam, Nguyễn Thị Đào Nguyên, Trƣơng Quang, Phùng Quốc Chƣớng, Chu Đức Thắng, Phạm Ngọc Thạch (1997), Bệnh viêm ruột ỉa chảy lợn, Tạp chí KHKT Thú y, (số 1), tr.15-22 20 Hồ Văn Nam, Nguyễn Bá Hiên (1995), Một số vi khuẩn thường gặp đường ruột trâu bò khoẻ mạnh ỉa chảy viêm ruột vùng ngoại thành Hà Nội, Kỷ yếu kết nghiên cứu khoa học chăn nuôi thú y (1991-1995), NXB nông nghiệp, Hà Nội, tr.140-145 21 Lê Văn Năm, Trần Văn Bình, Nguyễn Thị Hƣơng (1999), Hướng dẫn phịng trị bệnh lợn cao sản, Nxb Nơng nghiệp, Hà Nội, tr.76 -77 22 Nguyễn Thị Nội, Nguyễn Ngọc Nhiên, Cù Hữu Phú, Nguyễn Thị Sở, Trần Thụ Hà (1989), Kết điều tra tình hình nhiễm khuẩn đường ruột số sở chăn nuôi (1985-1989), Kết nghiên cứu KHKT Thú y-Viện thú y, Hà Nội 23 Nguyễn Ngọc Nhiên, Trần Thị Hạnh, Phạm Bảo Ngọc, Vũ Đình Hƣng, Ngơ Thị Nhu (1996), Viêm ruột hoại tử hươu nai vi khuẩn Cl perfringens kết phòng bệnh giải độc tố (thống báo), Tạp chí KHKT thú y, tập 3, tr.47-48 24 Võ Văn Ninh (2001), Kháng sinh thú y, Nhà xuất trẻ, tr 118-121 25 Nguyễn Thị Ngữ (2005), Nghiên cứu tình hình hội chứng tiêu chảy lợn huyện Chương Mỹ - Hà Tây, xác định số yếu tố gây bệnh vi khuẩn E.coli Salmonella, biện pháp phịng trị, Luận văn Thạc sĩ Nơng nghiệp, Hà Nội Số hóa Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn 96 26 Nguyễn Vĩnh Phƣớc (1974), Vi sinh vật học thú y, NXB KHKT, Hà Nội, tr.57-79 27 Phan Thanh Phƣợng, Trần Thị Hạnh, Phạm Thị Ngọc, Ngơ Hồng Hƣng (1996), Nghiên cứu xác định vai trị vi khuẩn yếm khí Cl perfringens hội chứng tiêu chảy lợn, Tạp chí Nơng nghiệp công nghiệp thực phẩm, (số 12), tr.495-496 28 Cù Hữu Phú, Nguyễn Ngọc Nhiên, Đỗ Ngọc Thuý, Nguyễn Xuân Huyên, Âu Xuân Tuấn, Văn Thị Hƣờng, Đào Thị Hảo, Vũ Ngọc Quý, (2002-2003), Kết điều tra tình hình tiêu chảy lợn theo mẹ số trại lợn miền Bắc Việt Nam, xác định tỉ lệ kháng sinh yếu tố gây bệnh chủng E.coli phân lập được, Báo cáo khoa học CNTY 29 Lê Văn Tạo (2006), Bệnh nhiễm máu độc tố ruột (Enterotoxaemia) trâu bị, Tạp chí KHKT thú y, tập 8, tr 82-89 30 Nguyễn Nhƣ Thanh, Nguyễn Bá Hiên, Trần Thị Lan Hƣơng (1997), Vi sinh vật thú y, NXB Nông nghiệp, Hà Nội, tr 81-84 31 Nguyễn Nhƣ Thanh (2001) Cơ sở phương pháp nghiên cứu dịch tễ học thú y, Nxb Nông nghiệp, Hà Nội, tr 56-57 32 Tống Vũ Thắng, Đậu Ngọc Hào (2008), Nghiên cứu mối quan hệ ô nhiễm nấm mốc, E coli, Salmonella, Cl perfringens thức ăn hỗn hợp tỷ lệ lợn bị tiêu chảy mùa khô, mùa mưa sở chăn nuôi lợn sinh sản TP Hồ Chí Minh, Tạp chí KHKT thú y tập XV, số 1, tr 54-61 33 Nguyễn Văn Thiện, Nguyễn Khánh Quắc, Nguyễn Duy Hoan (2002), Giáo trình phương pháp nghiên cứu chăn nuôi, Nxb Nông nghiệp, Hà Nội Số hóa Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn 97 34 Bùi Thị Tho (2003), Thuốc kháng sinh nguyên tắc sử dụng chăn ni Nxb Hà Nội, tr.81-82 35 Hồng Văn Tuấn, Lê Văn Tạo, Trần Thị Hạnh (1998), Kết điều tra tình hình tiêu chảy lợn trại giống hướng nạc, Tạp chí KHKT thú y tập V, (số 4) 36 Nguyễn Quang Tuyên (2008), Giáo trình vi sinh vật thú y Nxb Nông nghiệp, Hà Nội, tr 91-112 37 Nguyễn Văn Sửu, Nguyễn Quang Tuyên (2008), Tình hình dịch tễ bệnh Viêm ruột hoại tử lợn số huyện tỉnh Thái Nguyên Tạp chí KHKT thú y, tập XV, (số 3), tr 32-39 38 Nguyễn Văn Sửu, Nguyễn Quang Tuyên Trần Thị Hạnh (2008), Xác định tỉ lệ lợn tiêu chảy viêm ruột hoại tử số địa phương tỉnh Thái Nguyên, Tạp chí KHKT thú y, tập XV, (số5), tr 49-53 II Tài liệu tham khảo tiếng Anh 39 Arbuckle J.B.R (1972) Enteric colibacillosis (p.91), Intestinal samonellosis (p.102), Swine dysentery-blood scours (p.192), Clostridium perfringens typ Cl perfringens enteritis (p.191) Edema disease in the Merck veterinary manual, 7th edition 40 Baldassi L, Barrbosa M.L, Bach E.E, laria S.T (2004) Virulence exaltation of Cl perfringens strains from bovine Trop Dis vol 10 No 3.2004 41 Bakhtin A.G (1956), Control of Edema Disease in Danish pig herds International pig veterinary society congress, p.256 42 Bergeland M.E (1986) Clostridium Infection Disease of Swine Sixth edition IOWA-USA 557 Số hóa Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn 98 43 Choi Y.K, M.S Kang, H.S Yoo (2003) Clostridium perfringens typ E myonecrosis in a horse in Korea J.vet, Med Sci, 65 (11), p 1245-1247 44 NCCLS (1999) Quality Control Values for Veterinary- Use Fluoroquinolones, Performance standards for antimicrobial disk and dilution susceptibility tests for bacteria isolated from animals Approved standard M31-A 45 Garmony H.S, N Chanter, N.P French, D.Bueschel, J.G Songer.R.W Tiball (2000) Occurrence of Clostridium perfringens beta2 toxin amongst animal, determined using genotyping and subtyping PCR assay Epidermiology and infection 124, p.61-67 46 Hatheway C.L (1990), Toxigenic clostridia, Clin Microbiol Rev, 3, p.67-98 47 Harbola P.C, Khera S.S (1990) Enterotoxaemia of calves due to Clostridium wechii typ E, Aust Vet J, 43.p 360-363 48 Hogh.P (1974) Porcine infection necrotizing due to Cl perfringens Theses copenhagen, p 287-289 49 Kitasato Yamagishi, Kayo Sugitani, Kiyoo Tanishima, Schinichi Nakamura (1997) Polymerase chain section test for differentination of five toxin types of Clostridium perfringens , Microbiol Immunol, 41 (4), p 295-299 50 Kirby W.M.M, Bauer A.W, Sherris J.C and Turcle M (1996) Antibiotic susceptibility testing by a standardized single disk method 45 pp.493-596 51 Kohler B.Klostridien (1998) Infektionen and Intoxcatonen in Infektion krankheinten der Haustiere Jena, 1998 Số hóa Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn 99 52 Niilo, Chalmers (1978) Enterotoxigenic Clostridium perfringens typ A isolated from intestinal contents of cattle, sheep and chichkens Can J Compmed 42 (3), p 357.363 53 Quinn P.J, Carter M.E, Mackey B.K, Carter G.R (1994) Clinical Verterynary Microbiology P 190-206 54 Quinn P.J, M.E Carter, B, Mackey, G.R Carter (1999) “Clostridium species”, in: Clinical Verterynary Microbiology, Elsevier Limited, chapter 17, p 191-208 55 Roeder B.L, Chengapa M.M and Nagaraja, T.G (1987) Isolation of Cl perfringens from neonatal calves with ruminal and abomas tympamy, abomsitis and abomasuucretion, Tam Vet Med Assoc, p.1150-1155 56 Radostits O.M, Blood.D.Cand Gay.C (1994) Veterinary med icine, the textbook of the cattle, sheep, pig, goats and horrses, Diseases caused by Escherichia coli Lon don, Philadenphia, Sydney, Tokyo, Toronto, p.703-730 57 Songer J.G, A.Uzal Francisco (1996) Clostridial anteric infections in pigs J Vet Diagn Invest 17, p.528-536 58 Taylor D.J, Bergelan M.E (1986) Clostridial infection diseases of swine IOWA state University Press/AMES U.S.Ath Edition, P.454-468 59 Timoney J.F, H.James W.Scott Gillepie Fredrie, Barlough E.Jeffrey (1994) Hagan and Bruneurs Microbioly and Infectious Diseases of domestic animal p.219-240 60 Walker H.W (2004) Food-borne illness from Cl perfringens Rev Food sci Nutri 2000 p 71-104 Số hóa Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn 100 61 Waters M., A Savoie, H.S Gamory, D Bueschel, M.R Popff, J.G Songer, R.W Titball, B.A McClane and M.R Sarker (2003) Genotyping and Phenotyping of Beta2-Toxigenic Clostridium perfringens fecal isolates associated with Gastrointestinal diseases in piglets J Clin Microbiol Vol 41, N0.8, p 3584-3591 HÌNH ẢNH MINH HỌA Ảnh 1: Hình thái vi khuẩn Cl perfringens kính hiển vi (độ phóng đại 1000 lần) Số hóa Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn 101 Ảnh 2: Khuẩn lạc mọc mơi trường thạch TSC Hình ảnh 3: Khuẩn lạc Cl perfringens thạch yếm khí Số hóa Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn 102 Hình ảnh 4: Vi khuẩn Cl perfringens gây dung huyết thạch máu cừu Hình ảnh 5: Phản ứng lên men đường vi khuẩn Cl perfringens Số hóa Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn 103 Hình ảnh 6: Khả mẫn cảm kháng kháng sinh vi khuẩn Cl perfringens Hình ảnh 7: Tiêm truyền chuột bạch thử độc tố chủng vi khuẩn Cl perfringens Số hóa Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn 104 Hình ảnh 8: Mổ khám lợn tiêu chảy VRHT Hình Kết xác định Cl perfringens typ A PCR Số hóa Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn 105 Hình 10 Kết xác định Cl perfringens typ C PCR Số hóa Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn ... tố gây bệnh vi khuẩn Clostridium perfringens bệnh vi? ?m ruột hoại tử lợn 60 ngày tuổi Thái Nguyên biện pháp phòng trị” Mục tiêu nghiên cứu - Xác định số đặc điểm dịch tễ bệnh vi? ?m ruột hoại tử lợn. .. bệnh vi? ?m ruột hoại tử lợn giai đoạn dƣới 60 ngày tuổi Ý nghĩa khoa học thực tiễn Đề tài xác định đƣợc vai trò vi khuẩn Cl perfringens gây bệnh vi? ?m ruột hoại tử lợn dƣới 60 ngày tuổi huyện nghiên. .. điểm dịch tễ bệnh vi? ?m ruột hoại tử lợn dƣới 60 ngày tuổi tỉnh Thái Nguyên 2.3.1.1 Tình hình bệnh vi? ?m ruột hoại tử lợn số điểm nghiêm cứu tỉnh Thái Nguyên 2.3.1.2 Kết điều tra tình hình bệnh VRHT