Đánh giá hiệu quả vắc xin lở mồm long móng trong công tác phòng chống bệnh lở mồm long móng trên đàn lợn nái ông bà tại xí nghiệp giống gia súc thuận thành

Đánh giá hiệu quả vắc xin lở mồm long móng trong công tác phòng chống bệnh lở mồm long móng trên đàn lợn nái ông bà tại xí nghiệp giống gia súc thuận thành

Bộ giáo dục và đào tạo trờng đại học nông nghiệp I ------------------ lê thị minh thu Đánh giá hiệu quả vắc xin Lở mồm long móng trong công tác phòng chống bệnh Lở mồm long móng trên đàn lợn nái ông bà tại xí nghiệp giống gia súc Thuận Thành Luận văn thạc sĩ nông nghiệp Chuyên ngành: Thú y Mã số: 60.62.50 Ngời hớng dẫn khoa học: TS. tô long thành Hà Nội, 2006 2 lời cam đoan Tôi xin cam đoan, số liệu và kết quả nghiên cứu trình bày trong luận văn này là trung thực và cha đợc sử dụng để bảo vệ một học vị nào. Tôi xin cam đoan, mọi sự giúp đỡ cho việc thực hiện luận văn này đã đợc cám ơn và các thông tin trích dẫn trong luận văn đều đã đợc chỉ rõ nguồn gốc. Tác giả luận văn Lê Thị Minh Thu 3 Lời cảm ơn Trong suốt 2 năm học tập và hoàn thành luận văn, với nỗ lực của bản thân, tôi đã nhận đợc sự giúp đỡ, hớng dẫn tận tình của nhiều cá nhân và tập thể, cho phép tôi đợc tỏ lòng biết ơn và cảm ơn chân thành tới: Ban Giám hiệu Trờng Đại học Nông nghiệp I, khoa Sau Đại học, khoa Chăn nuôi - Thú y, Trung tâm Chẩn đoán Thú y Trung ơng, các thầy cô giáo đã giúp đỡ, tạo điều kiện để tôi học tập, tiếp thu kiến thức của chơng trình học. Các thầy cô giáo trong bộ môn Vi sinh vật - Truyền nhiễm - Bệnh lý khoa Chăn nuôi - Thú y Trờng Đại học Nông nghiệp I; các cán bộ thuộc bộ môn Vi rút, Trung tâm Chẩn đoán Thú y Trung ơng. Trực tiếp là thầy hớng dẫn TS. Tô Long Thành, Phó giám đốc Trung tâm Chẩn đoán Thú y Trung ơng. Ban Lãnh đạo công ty, Ban lãnh đạo xí nghiệp và toàn thể cán bộ công nhân xí nghiệp lợn giống Thuận Thành. Nhân dịp hoàn thành luận văn, cho phép tôi đợc gửi lời cảm ơn sâu sắc tới gia đình, ngời thân cùng bạn bè đã động viên giúp đỡ tôi vợt qua mọi khó khăn trong suốt quá trình học tập, nghiên cứu, thực hiện đề tài. Một lần nữa tôi xin đợc bày tỏ lòng biết ơn, cảm ơn chân thành tới những tập thể, cá nhân đã tạo điều kiện giúp đỡ tôi hoàn thành chơng trình học tập. Tác giả luận văn Lê Thị Minh Thu 4 Mục lục Lời cam đoan i Lời cảm ơn ii Mục lục iii Danh mục các chữ viết tắt vi Danh mục các bảng vii Danh mục các biểu đồ viii 1. Mở đầu i 1.1. Tính cấp thiết của đề tài 10 1.2. ý nghĩa khoa học và thực tiễn của đề tài 12 1.3. mục tiêu của đề tài 12 2. Tổng quan tài liệu .13 2.1. Lịch sử bệnh Lở mồm Long móng 13 2.1.1. Định nghĩa . 13 2.1.2. Lịch sử bệnh Lở mồm Long móng 13 2.2. Tình hình dịch bệnh Lở mồm Long móng trên thế giới và Đông Nam á . 14 2.2.1. Tình hình dịch bệnh Lở mồm Long móng trên thế giới 14 2.2.2. Tình hình dịch LMLM ở Đông Nam á . 16 2.2.3. Tình hình dịch Lở mồm Long móng ở Việt Nam . 18 2.3. Vi rút Lở mồm Long móng . 21 2.3.1. Hình thái, cấu trúc . 21 2.3.2. Phân loại và biến chủng của vi rút 24 2.3.3. Đặc tính nuôi cấy 26 2.3.4. Sức đề kháng .27 Trang 5 2.3.5. Độc lực, tính gây bệnh 28 2.3.6. Nguồn dịch và cách lây lan . 29 2.3.7. Triệu chứng . 31 2.3.8. Bệnh tích 32 2.3.9. Chẩn đoán 33 2.3.10. Đáp ứng miễn dịch . 41 2.4. Vắc xin 45 2.4.1. Vắc xin nhợc độc formol keo phèn .46 2.4.2. Vắc xin vô hoạt nuôi cấy trên môi trờng tế bào 46 2.4.3. Vắc xin sản xuất theo công nghệ gen . 47 3. đối tợng, nội dung, nguyên liệu và phơng pháp nghiên cứu .48 3.1. Đối tợng, thời gian, địa điểm nghiên cứu . 48 3.2. Nội dung nghiên cứu . 48 3.2.1. Đánh giá tình hình dịch LMLM năm 2006 . 48 3.2.2. Tình hình dịch bệnh tại xí nghiệp. 48 3.2.3. Khảo sát diễn biến đáp ứng miễn dịch của đàn lợn sau khi tiêm vắc xin LMLM. (Phơng pháp Elisa phát hiện kháng thể) 48 3.2.4. Đánh giá hiệu quả của việc sử dụng vắc xin phòng bệnh LMLM, so sánh với biện pháp tổng thể . 48 3.3. Địa điểm nghiên cứu . 49 3.4. Nguyên liệu . 49 3.4.1. Dụng cụ 49 3.4.2. Máy móc thiết bị: 49 3.4.3. Nguyên liệu làm thí nghiệm 50 3.5. Phơng pháp nghiên cứu . 50 3.5.1. Bố trí thí nghiêm . 50 3.5.2. Phơng pháp thu thập, vận chuyển và bảo quản bệnh phẩm . 51 6 3.5.3. Phơng pháp ELISA - 3ABC để phân biệt miễn dịch tự nhiên và miễn dịch bị động tự nhiên 52 3.5.4. Phơng pháp ELISA để đánh giá đáp ứng miễn dịch (Phát hiện kháng thể) 54 3.5.5. Phơng pháp ELISA để phát hiện kháng nguyên 58 3.5.6. Phơng pháp xử lý số liệu . 59 4. kết quả và thảo luận . 60 4.1. Tình hình dịch bệnh LMLM trong năm 2006 . 60 4.2. Tình hình dịch bệnh tại xí nghiệp . 62 4.3. Kết quả chẩn đoán phát hiện vi rút . 66 4.4. Khảo sát đáp ứng miễn dịch của nái mẹ sau khi tiêm vắc xin 69 4.5. Miễn dịch thụ động ở lợn con sinh ra từ đàn nái mẹ đã tiêm phòng . 72 4.6. Đáp ứng miễn dịch ở đàn lợn choai sau khi tiêm phòng 1 lần 75 4.7. Đáp ứng miễn dịch ở đàn lợn choai sau khi tiêm liều tăng cờng 77 4.8. Đánh giá biện pháp phòng bệnh bằng vắc xin trong biện pháp tổng thể 79 5. Kết luận và đề nghị . 83 5.1. Kết luận . 83 5.2. Đề nghị 83 tài liệu tham khảo 85 Phụ lục 7 Danh mục các chữ viết tắt ARN : Axít ribo nucleotit ELIZA : Enzyme Linked Immunosorbent Assay EU : Liên hiệp châu Âu FAO : Food and Argricultural Organization FMD : Foot And Mouth disease LMLM : Lở mồm long móng NXB : Nhà xuất bản OIE : Office Internationale des Epizooties OD : Đậm độ quang học (Optical Density) PCR : Polyme Chain Reaction PI : Phần trăm ức chế mẫu (Percentage Inhibition) RT- PCR : Reverse Transcriptase Polyme Chain Reaction RCU : Tiểu ban phòng chống bệnh LMLM SEA : South East Asia. TCID : Tissue Culture Infectious Degree 8 Danh mục các bảng Bảng 4.1. Tình hình dịch bệnh LMLM tại Việt Nam trong năm 2006 61 Bảng 4.2. Một số chỉ tiêu kỹ thuật của xí nghiệp trong 4 năm qua 63 Bảng 4.3. Tỷ lệ chết và loại thải đàn nái của xí nghiệp 64 Bảng 4.4. Một số bệnh thờng gặp trên đàn nái tại xí nghiệp 65 Bảng 4.5. Kết quả chẩn đoán phát hiện kháng thể bằng phơng pháp ELISA - 3ABC 69 Bảng 4.6. Kết quả xét nghiệm phát hiện kháng thể FMD ở đàn lợn nái tại xí nghiệp 70 Bảng 4.7. Kết quả theo dõi đáp ứng miễn dịch của đàn lợn nái tại xí nghiệp (có kháng thể trớc khi tiêm) 70 Bảng 4.8. Kết quả xét nghiệm phát hiện kháng thể FMD ở đàn lợn con theo mẹ và cai sữa tại xí nghiệp 73 Bảng 4.9. Kết quả theo dõi đáp ứng miễn dịch của đàn lợn con theo mẹ và cai sữa 74 Bảng 4.10. Kết quả xét nghiệm phát hiện kháng thể FMD ở đàn lợn choai tại xí nghiệp 75 Bảng 4.11. Kết quả theo dõi đáp ứng miễn dịch của đàn lợn choai tại xí nghiệp 76 Bảng 4. 12. Kết quả xét nghiệm phát hiện kháng thể FMD ở đàn lợn choai tại xí nghiệp 77 Bảng 4.13. Kết quả theo dõi đáp ứng miễn dịch của đàn lợn choai sau khi tiêm phòng liều tăng cờng tại xí nghiệp. 78 9 Danh mục biểu đồ ảnh 1: Phân bố vùng dịch LMLM trên thế giới năm 2005. . 15 ảnh 2: Bệnh tích do Vi rút LMLM gây ra ở môi và chân lợn. . 33 Hình 2.1: Biểu đồ biểu diễn số gia súc nhiễm bệnh LMLM qua các năm ở Việt Nam . 18 Hình 4.1. Biểu đồ biểu diễn tình hình dịch bệnh LMLM trong năm 2006 . 61 Hình 4.2. Biểu đồ biểu diễn tỷ lệ một số bệnh thờng gặp rên đàn lợn nái của xí nghiệp . 66 Hình 4.3: Biểu đồ biểu diễn tỷ lệ bảo hộ của đàn lợn nái sau khi tiêm vắc xin LMLM . 71 Hình 4.4: Biểu đồ biểu diễn diễn biến kháng thể thụ động của đàn lợn con sinh ra từ đàn nái đã tiêm phòng vắc xin . 74 Hình 4. 5: Biểu đồ biểu diễn tỷ lệ bảo hộ của đàn lợn choai sau khi tiêm phòng vắc xin 1 lần . 76 Hình 4.6: Biểu đồ biểu diễn tỷ lệ bảo hộ của đàn lợn choai sau khi tiêm phòng vắc xin liều tăng cờng 79 10 1. Mở đầu 1.1. Tính cấp thiết của đề tài Bệnh Lở mồm Long móng (LMLM) là một bệnh truyền nhiễm nguy hiểm do vi rút gây ra cho ngành chăn nuôi trên thế giới. Bệnh lây lan nhanh, mạnh, gây thiệt hại nặng đối với động vật thuộc loài móng guốc chẵn: trâu, bò, dê, lợn, cừu, hơu, nai Bệnh thờng xảy ra ở thể cấp tính, có thể lây lan trong phạm vi một nớc hoặc nhiều nớc, sự lây lan không chỉ do tiếp xúc mà còn qua nhiều đờng, kể cả qua không khí. Vì vậy, bệnh thờng phát thành đại dịch gây thiệt hại cho ngành chăn nuôi. Bệnh gây nên hậu quả nghiêm trọng về mặt kinh tế, xã hội và bảo vệ môi trờng. Bệnh LMLM có tính chất bệnh dịch địa phơng ở nhiều nớc, nhng vi rút có phân bố trên thế giới rất khác nhau. Bệnh LMLM đợc Tổ chức Dịch tễ thế giới (OIE - Office Internationale des Epizooties) xếp đầu tiên trong danh mục bảng A gồm 15 bệnh truyền nhiễm nguy hiểm của gia súc, gia cầm. Bệnh gây thiệt hại nghiêm trọng về kinh tế và ảnh hởng đến thơng mại, đặc biệt là việc buôn bán động vật và sản phẩm có nguồn gốc động vật. Việc phòng chống bệnh LMLM ở nhiều nớc trở nên một chính sách rất quan trọng, nhất là trong nền kinh tế thị trờng. Có hay không bệnh LMLM là một tiêu chí trong quan hệ buôn bán quốc tế và mọi quốc gia đều sử dụng nó nh một vũ khí thơng mại [14]. Vi rút gây bệnh LMLM thuộc họ Picornaviridae đợc chia thành 7 type huyết thanh là A, O, C, Asia-1, SAT-1, SAT-2 và SAT-3. Trong một type có các dới type (sub-type) và theo cách phân loại cũ có hơn 70 dới type [28]. Giữa 7 type nêu trên không có miễn dịch chéo, chúng gây bệnh với mức độ và diễn biến khác nhau nhng về triệu chứng lâm sàng lại hoàn toàn giống nhau. Chính vì vậy, chơng trình phòng chống bệnh bằng vắc xin gặp nhiều khó khăn do có sự thay đổi cấu trúc kháng nguyên của vi rút, nhiều khi ổ dịch đã tiêm phòng vẫn mắc đi, mắc lại [29]. . giá hiệu quả vắc xin Lở mồm Long móng trong công tác phòng chống bệnh Lở mồm Long móng trên đàn lợn nái ông bà tại xí nghiệp giống gia súc Thuận Thành 12. công tác phòng chống bệnh Lở mồm long móng trên đàn lợn nái ông bà tại xí nghiệp giống gia súc Thuận Thành Luận văn thạc sĩ nông nghiệp Chuyên ngành: Thú