Xây dựng dự thảo tiêu chuẩn kiểm nghiệm dược liệu cần tây

ĐẶT VẤN ĐỀ“Dược liệu là nền tảng của ngành Dược” đã là chủ trương của Bộ Y tế Việt Nam từ nhiều năm qua. Trong các thời kì, dược liệu đã khẳng định vị trí của nó đối với sự nghiệp Chăm sóc sức khoẻ nhân dân và bảo vệ Tổ quốc. Tuy nhiên, trong xu thế hội nhập của đất nước, đặc biệt là sau sự kiện Việt Nam chính thức trở thành thành viên của Tổ chức Thương mại Thế giới (WTO) đã đòi hỏi rất nhiều các ngành, lĩnh vực, trong đó có công tác Dược liệu phải có những giải pháp để phát triển và hội nhập quốc tế. Và để Dược liệu vẫn là con đường đưa ngành Dược nước ta đón đầu trong xu thế hội nhập, vẫn là nền tảng của ngành Dược, các cơ quan chức năng cần giải quyết một số vấn đề thực tiễn cấp bách, trong đó có tình trạng nhầm lẫn giả mạo dược liệu trên thị trường hiện nay. Tình trạng này ảnh hưởng không nhỏ tới hiệu quả phòng và chữa bệnh bằng dược liệu. Một trong các nguyên nhân dẫn tới tình trạng trên là chưa xây dựng được các tiêu chuẩn kiểm nghiệm dược liệu. Để có thể sử dụng dược liệu làm thuốc thì đòi hỏi phải xây dựng các tiêu chuẩn chất lượng, đồng thời xây dựng các phương pháp thử để đánh giá các tiêu chuẩn đó. Cây Cần tây là một loại cây quen thuộc đối với nhân dân ta. Nó có nguồn gốc từ châu Âu và được di thực vào Việt Nam. Cần tây được biết đến vừa là cây rau ăn vừa là cây thuốc. Từ xa xưa, cây Cần tây đã được sử dụng trong rất nhiều bài thuốc dân gian để chữa cơ thể suy nhược, tiêu hóa kém, tiểu tiện bí, đau khớp, cao huyết áp 13,16… Một số nghiên cứu trên thế giới gần đây đã chứng minh Cần tây có tác dụng hạ huyết áp, giảm đau, chống viêm, hạ lipid máu 11,15,24,26…

BỘ Y TẾ TRƯỜNG ĐẠI HỌC DƯỢC HÀ NỘI

**********

NGUYỄN THỊ THUỲ DƯƠNG

XÂY DỰNG DỰ THẢO TIÊU CHUẨN KIỂM NGHIỆM DƯỢC LIỆU CẦN TÂY

HÀ N ỘI - 2013

BỘ Y TẾ TRƯỜNG ĐẠI HỌC DƯỢC HÀ NỘI

NGUYỄN THỊ THUỲ DƯƠNG

XÂY DỰNG DỰ THẢO TIÊU CHUẨN KIỂM NGHIỆM DƯỢC LIỆU CẦN TÂY

NGUYỄN THỊ THUỲ DƯƠNG

XÂY DỰNG DỰ THẢO TIÊU CHUẨN KIỂM NGHIỆM DƯỢC LIỆU CẦN TÂY

L ỜI CẢM ƠN

Bằng tất cả sự chân thành và lòng biết ơn sâu sắc, em xin gửi lời cảm ơn tới

TS Nguy ễn Thu Hằng, Bộ môn Dược liệu, trường ĐH Dược Hà Nội là người đã

trực tiếp hướng dẫn, tận tình chỉ bảo và giúp đỡ em trong suốt quá trình thực hiện

và hoàn thành khóa luận

Nhân đây em cũng xin gửi lời cảm ơn tới:

DS Nguyễn Thị Hồng Vân, các thầy cô, các anh chị kỹ thuật viên trong bộ môn Dược liệu đã tạo mọi điều kiện, giúp đỡ để em có thể hoàn thành khóa luận

học tập tại trường cũng như trong thời gian thực hiện khóa luận

Em xin chân thành cảm ơn

Hà N ội, tháng 5 năm 2013

Sinh viên

Nguyễn Thị Thuỳ Dương

MỤC LỤC

Danh mục các ký hiệu, chữ viết tắt

Danh mục các bảng

Danh mục các hình

ĐẶT VẤN ĐỀ 1

Chương 1 TỔNG QUAN 3

1.1 Tên gọi 3

1.2 Đặc điểm thực vật 3

1.3 Phân bố 3

1.4 Thu hái, chế biến 4

1.5 Thành phần hóa học 4

1.6 Tác dụng sinh học 11

1.7 Công dụng 13

Chương 2 NGUYÊN LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 15

2.1 Nguyên liệu và phương tiện nghiên cứu 15

2.2 Nội dung nghiên cứu 16

2.3 Phương pháp nghiên cứu 17

Chương 3 THỰC NGHIỆM VÀ KẾT QUẢ 19

3.1 Khảo sát xây dựng một số chỉ tiêu kiểm nghiệm dược liệu Cần tây 19

3.1.1 Mô tả dược liệu 19

3.1.2 Soi bột 19

3.1.3 Vi phẫu 24

3.1.4 Định tính 29

3.1.5 SKLM 30

3.1.6 Độ ẩm 33

3.1.7 Tro toàn phần 33

3.1.8 Xác định chất chiết được trong ethanol (phương pháp chiết nóng) 34

3.2 Dự thảo tiêu chuẩn kiểm nghiệm dược liệu Cần tây 35

BÀN LU ẬN 40

K ẾT LUẬN, ĐỀ XUẤT 42

DANH M ỤC CÁC KÝ HIỆU, CHỮ VIẾT TẮT

DANH M ỤC CÁC BẢNG

1.1 Thành phần hóa học của tinh dầu Cần tây

4 1.2 Một số flavonoid được phân lập từ thân lá cây Cần tây 7 1.3 Các coumarin được phân lập từ cây Cần tây 8 1.4 Một số thành phần khác có trong cây Cần tây 10 3.1 Độ ẩm trong 3 mẫu dược liệu Cần tây 33 3.2 Tỷ lệ phần trăm của tro toàn phần trong các mẫu Cần tây 34 3.3 Phần trăm chất chiết được trong 3 mẫu dược liệu Cần tây 35

DANH MỤC CÁC HÌNH

2.1 Ảnh chụp cây Cần tây 15 3.1 Ảnh chụp các đặc điểm bột thân mẫu CT1, CT2, CT3 dưới KHV 21 3.2 Ảnh chụp các đặc điểm bột rễ mẫu CT1, CT2, CT3 dưới KHV 22 3.3 Ảnh chụp các đặc điểm bột lá mẫu CT1, CT2, CT3 dưới KHV 23 3.4 Ảnh chụp đặc điểm vi phẫu thân mẫu CT1, CT2, CT3 dưới KHV 26 3.5 Ảnh chụp đặc điểm vi phẫu rễ mẫu CT1, CT2, CT3 dưới KHV 27 3.6 Ảnh chụp đặc điểm vi phẫu lá mẫu CT1, CT2, CT3 dưới KHV 28 3.7 Ảnh chụp sắc ký đồ dịch chiết EtOH dược liệu Cần tây với hệ

ĐẶT VẤN ĐỀ

“Dược liệu là nền tảng của ngành Dược” đã là chủ trương của Bộ Y tế Việt Nam từ nhiều năm qua Trong các thời kì, dược liệu đã khẳng định vị trí của nó đối

với sự nghiệp Chăm sóc sức khoẻ nhân dân và bảo vệ Tổ quốc Tuy nhiên, trong xu

thế hội nhập của đất nước, đặc biệt là sau sự kiện Việt Nam chính thức trở thành thành viên của Tổ chức Thương mại Thế giới (WTO) đã đòi hỏi rất nhiều các ngành, lĩnh vực, trong đó có công tác Dược liệu phải có những giải pháp để phát triển và hội nhập quốc tế Và để Dược liệu vẫn là con đường đưa ngành Dược nước

ta đón đầu trong xu thế hội nhập, vẫn là nền tảng của ngành Dược, các cơ quan

chức năng cần giải quyết một số vấn đề thực tiễn cấp bách, trong đó có tình trạng nhầm lẫn giả mạo dược liệu trên thị trường hiện nay Tình trạng này ảnh hưởng không nhỏ tới hiệu quả phòng và chữa bệnh bằng dược liệu Một trong các nguyên nhân dẫn tới tình trạng trên là chưa xây dựng được các tiêu chuẩn kiểm nghiệm dược liệu Để có thể sử dụng dược liệu làm thuốc thì đòi hỏi phải xây dựng các tiêu chuẩn chất lượng, đồng thời xây dựng các phương pháp thử để đánh giá các tiêu chuẩn đó

Cây Cần tây là một loại cây quen thuộc đối với nhân dân ta Nó có nguồn gốc

từ châu Âu và được di thực vào Việt Nam Cần tây được biết đến vừa là cây rau ăn

vừa là cây thuốc Từ xa xưa, cây Cần tây đã được sử dụng trong rất nhiều bài thuốc dân gian để chữa cơ thể suy nhược, tiêu hóa kém, tiểu tiện bí, đau khớp, cao huyết

áp [13],[16]… Một số nghiên cứu trên thế giới gần đây đã chứng minh Cần tây có tác dụng hạ huyết áp, giảm đau, chống viêm, hạ lipid máu [11],[15],[24],[26]…

Với rất nhiều công dụng hữu ích, cây Cần tây đang ngày càng nhận được sự quan tâm và được sử dụng rộng rãi Tuy nhiên, dược liệu Cần tây vẫn chưa được tiêu chuẩn hóa Vì vậy, đề tài “Xây dựng dự thảo tiêu chuẩn kiểm nghiệm dược liệu

Cần tây” nhằm góp phần nâng cao giá trị sử dụng dược liệu này Đề tài được thực

hiện với mục tiêu: Khảo sát xây dựng một số chỉ tiêu kiểm nghiệm dược liệu Cần tây (toàn cây)

Các chỉ tiêu kiểm nghiệm được khảo sát và xây dựng như sau:

1, Mô tả dược liệu

Chương 1 TỔNG QUAN

1.1 Tên gọi

- Tên khoa học: Apium graveolens L họ Cần (Apiaceae)[12],[13],[16]

- Tên nước ngoài: Celery (Anh); céléri, persil des marais, ache des marais

hoặc xẻ 3, thùy cuối có hình thoi, kích thước 1.2-2.5×0.8-2.5 cm, có răng cưa hoặc

có khía Lá trên có cuống ngắn, phiến lá hình tam giác rộng, xẻ sâu 3 thùy, thùy

cuối có hình trứng [41] Cụm hoa dạng tán, rộng 1,5-4,0 cm, mọc đối diện với lá,

gồm nhiều tán dài, ngắn không đều, các tán ở đầu có cuống dài hơn các tán bên trong và có kích thước 4-15mm [41],[16], mang 8-12 tán đơn [12],[16] tán hoa có 7-25 hoa, kích thước 6-9mm theo chiều ngang Hoa phía ngoài có 3-8 (-16) cánh hoa mảnh, kích thước 0,5-2,5cm[41] Hoa nhỏ màu trắng hoặc lục nhạt, không có

tổng bao và tiểu bao[16], cánh hoa mẫu 5, dài 1mm [12], đài có răng rất ngắn, tràng

có cánh khum, bầu nhỏ[16] Quả đôi dạng trứng, hơi dẹt, nhẵn, có cánh lồi chạy

dọc thân [16], có 5 cạnh, 2n=22[12], kích thước 1.3-1.5 x 2mm Cuống quả dài

- A graveolens L var secalinum Alef (Cần tây cho lá): trồng nhiều ở Trung

Quốc, Việt Nam và các nước Đông Nam Á khác

- A graveolens L var dulce (Miller) Pers (Cần tây cho cuống): trồng nhiều ở vùng ôn đới ấm của châu Âu hay châu Á (Tây Liên bang Nga, Ucraina )

- A graveolens L var rapaceum (Miller) Gaudin (Cần tây cho củ): trồng ở châu Âu

Nhìn chung, tất cả các loại rau Cần tây đều ưa khí hậu ẩm mát, nhiệt độ trung bình từ 15 đến 21o

C (ở Việt Nam và Đông Nam Á [16]

Ở Việt Nam, loài A.graveolens L thường gọi là cây Cần tây Cây mới di nhập

vào nước ta và được trồng rộng rãi ở nhiều nơi để làm rau ăn

1.4 Thu hái, chế biến

Cần tây sinh trưởng mạnh vào vụ đông xuân.Trồng bằng cây con, sau 30 –

35 ngày có thể thu hoạch Nếu làm rau ăn cần thu lúc cây còn non, nhổ cả cây Nếu làm thuốc có thể để già hơn, thu và phơi hay sấy khô Nếu cất tinh dầu đợi đến khi cây bắt đầu ra hoa [16]

1.5 Thành phần hóa học

Các nhóm chất được phát hiện trong cây Cần tây (Apium graveolens L.) gồm

tinh dầu, flavonoid, coumarin và 1 số nhóm chất khác

1.5.1.Tinh d ầu

Hàm lượng tinh dầu trong thân, lá tươi là 0.145% [8]

Hàm lượng tinh dầu trong rễ khô là 0.0148% [8]

Hàm lượng tinh dầu toàn cây Cần tây là 0.1% [16]

Trong đó thành phần chính của tinh dầu Cần tây là 3-isobutyliden-3α, dihydrophthalid; 3-iso validin-3α, 3-isobutidin phthalid; 3-isovaliden phthalid; cis-3-hexen-1-yl pyruvat; α-limonen; myrcen; anhydrid sedanonic, neral [16] Thành phần hóa học của tinh dầu Cần tây được tổng kết ở bảng 1.1

4-B ảng 1.1: Thành phần hóa học của tinh dầu Cần tây

STT Tên chất Bộ phận Hàm lượng (%)(nếu có) TLTK

1 d- limonen Rễ 24,18 [8]

Thân lá 31,48 [8]

12 3-methylbutanal Toàn cây [44]

13 2-methylbutanal Toàn cây [44]

14 Pyridin Toàn cây [44]

15 Hexanal Toàn cây [44]

16 n-octanal Rễ 1,62 [8]

17 Paracimen Rễ 3,07 [8]

Thân lá 0,93 [8]

18 Cis- oximen Thân lá 16,00 [8]

19 Neo- alloximen Thân lá 0,12 [8]

20 Furfural Toàn cây [44]

21 3-methyl-4-ethylhexan Toàn cây [44]

22 Nonan Rễ 0,51 [8]

23 3-hexen-1-ol Thân lá 0,25 [8]

24 Heptanal Rễ 0,25 [8]

25 Sedanolid Toàn cây [16]

26 3-n- butylphthalid Toàn cây [16]

27 Butidenphthalid Thân lá 1,43 [14]

28 Butylidenephthalid Toàn cây [44]

29 Butylhexahydrophthalid Toàn cây [44]

30 Ligustilid Toàn cây [30]

31 Falcarinol Toàn cây 2,28 [14]

32 Cnidilid Toàn cây [30]

Một số tác dụng sinh học của các hợp chất phthalid như: tác dụng trên hệ thần kinh trung ương, chống kết tập tiểu cầu, điều tiết chức năng tim và chống đau thắt ngực,

chống thiếu máu cục bộ não, giãn cơ trơn đã được chứng minh [37]

Một số hợp chất Phthalid có trong tinh dầu Cần tây:

3-n- butylphthalid (3nB)

 Công thức cấu tạo:

O O

3-n-butylphthalid

 Hợp chất 3nB được phân lập từ rễ, lá cây Cần tây

 Tác dụng: hạ huyết áp, hạ cholesterol máu [37], giải độc gan, ức chế sự phát triển của khối u [29], ức chế quá trình sinh tổng hợp acid uric [32], chống viêm [37], giảm nhiễm độc Acrylamid [22], ngăn chặn phát triển bệnh Parkinson [33]

Sedanolid (neocnidilid)

 Công thức cấu tạo:

OO

Sedanolid

 Phân lập từ toàn cây Cần tây

 Tác dụng: giải độc gan [29], làm giảm nhiễm độc Acrylamid [23],

chống viêm [37], diệt ấu trùng Aedes aegyptii [36]

1.5.2.H ợp chất Flavonoid

Có 4 chất thuộc nhóm flavonoid đã được phát hiện từ thân lá cây Cần tây, được

tổng kết ở bảng 1.2

B ảng 1.2: Một số flavonoid được phân lập từ thân lá cây Cần tây

STT Tên chất Công thức cấu tạo Bộ

phận

Tác dụng sinh học TLTK

1 Apigenin

O

O

OH HO

- Chống kết tập

tiểu cầu trên in

vitro (trên thỏ) [43]

[10]

1.5.3 Hợp chất coumarin

Có 9 hợp chất thuộc nhóm coumarin đã được phát hiện từ cây Cần tây

Các hợp chất coumarin được phân lập từ cây Cần tây được tổng kết ở bảng 1.3

B ảng 1.3: Các coumarin được phân lập từ cây Cần tây

STT Tên chất Công thức cấu tạo Bộ phận TLTK

OH

O O

OH HO HO

[35]

7 Kaempferol

O

OH HO

3 Apigravin

O HO

1.5.4 M ột số thành phần khác có trong cây Cần tây

B ảng 1.4: Một số thành phần khác có trong cây Cần tây

Nhóm chất Tên chất Bộ phận TLTK

Acid hữu cơ

Citric acid Rễ [16] Isocitric acid Rễ [16] 5-p-trans-coumaroylquinic acid Toàn cây [46] Benzoic acid Toàn cây [46] Caffeic acid Toàn cây [45] Caffeoylquinic acid Toàn cây [46] Eugenic acid Toàn cây [46] Ferulic acid Toàn cây [45] Lunularic acid Toàn cây [46] p-coumaric acid Toàn cây [45] Succinic acid Toàn cây [46] Trans-cinnamic acid Toàn cây [46] Trans-ferulic acid Toàn cây [46]

Đường

D-galactose (Gal) Thân [38] D-galacturonic acid (GalA) Thân [38] L-arabinose (Ara) Thân [38] L-rhamnose (Rha) Thân [38]

Chất khoáng Ca, P, Fe, Na, K Toàn cây [16] Sterol

Sitosterol Thân lá [9] Stigmasterol Thân lá [9]

1.6 Tác dụng sinh học

1.6.1 Tác d ụng hạ huyết áp

Tác dụng hạ huyết áp của Cần tây (A graveolens L.) là do 3-n-butylphthalid,

một thành phần của tinh dầu Cần tây

Dịch chiết nước của phần trên mặt đất (thân, lá) và rễ, flavonoid toàn phần

có tác dụng lợi tiểu trên chuột cống trắng với liều 1ml/100 mg thể trọng , trên mèo

với liều 10g/ kg thể trọng [15]

Dịch chiết Flavonoid 10% của toàn bộ cây Cần tây với liều 4ml/kg thể trọng

có tác dụng hạ huyết áp trên chó 90 phút sau uống, liều 1 ml/kg thể trọng có tác

dụng lợi tiểu chuột cống trắng [6]

1.6.2 Tác d ụng hạ lipid máu

Dịch chiết nước cây Cần tây có tác dụng giảm đáng kể lượng cholesterol toàn

phần, LDL-C và triglycerid trên nhóm chuột Wistar đã được cho ăn một chế độ giàu

chất béo trong 8 tuần để làm tăng lipid máu [24]

Sử dụng một phần nhỏ phân đoạn butanol và phân đoạn nước chiết xuất Cần tây với 7 ngày tiêm phúc mạc có hiệu quả giảm Cholesterol toàn phần trong huyết thanh và HDL-C trên chuột Rico trưởng thành [25]

1.6.3 Tác d ụng chống viêm

Dịch chiết nước của thân Cần tây được chứng minh là có tác dụng chống viêm trên tai chuột và ức chế carrageenan tác nhân gây phù nề [26]

Dịch chiết cồn/nước (1:1) của lá cây Cần tây có tác dụng chống viêm Trong

mô hình invitro dịch chiết Cần tây có tác dụng ức chế hoạt tính của iNOS ở IC50 là 0.095mg/ml, ức chế sự tổng hợp NO ở IC50 là 0.073 mg/ml Trong mô hình in-vivo,

dịch chiết Cần tây có tác dụng chống viêm trên tai chuột ở ID50 là 730 µg/cm2 [35]

1.6.4 Tác d ụng giảm đau, an thần

Các thành phần phthalid trong tinh dầu Cần tây có tác dụng giảm đau an dịu trên chuột 3-n-butylphthalid có tác dụng chống co giật trên chuột cống thí nghiệm Tác dụng chống co giật yếu hơn dẫn chất diazepam nhưng không độc trên tế bào não [11]

Nghiên cứu vào những năm 1970 và 1980 đã chứng minh rằng tinh dầu Cần tây dễ bay hơi có tác dụng làm dịu hệ thần kinh trung ương [1]

1.6.5 Tác d ụng giải độc, bảo vệ gan

Dịch chiết nước từ rễ, lá và quả Cần tây có tác dụng làm giảm độc tính của acrylamid trên chuột Kết quả được đánh giá qua các thông số hóa sinh ASAT, ALAT, lactate dehydrogenase, cholinesterase, protein toàn phần, albumins Kết quả cho thấy có khả năng giải độc đáng kể của dịch chiết Cần tây [22]

Dịch chiết trong methanol của quả Cần tây có tác dụng bảo vệ gan chống lại

sự nhiễm độc khi dùng quá liều paracetamol và thioacetamid [11]

1.6.7 Tác d ụng chống oxi hóa

Dịch chiết ether, chloroform, ethyl acetate, n-butanol và nước của lá và rễ

Cần tây có khả năng chống oxi hóa, làm giảm các gốc tự do OH˙ và DPPH˙ và làm

giảm LPx (liposomal peroxidation) trong liposome Kết quả được đánh giá trên thử nghiệm invitro và invivo trên chuột Trong đó dịch chiết n-buthanol có ảnh hưởng

lớn nhất [39]

1.6.8 Tác d ụng kháng khuẩn, kháng nấm

Tinh dầu quả Cần tây có tác dụng ức chế một số chủng vi khuẩn:

Staphylococcus aureus, Listeria monocytogenes và Listeria ivanovii strains [28]

Các dịch chiết methanol, chloroform, n-hexan, etyl acetate, tinh dầu thân lá, tinh dầu quả có tính kháng khuẩn với Gr (-) E.coli, P.aeruginosa, Gr (+)

B.subtillis, S.aureus, n ấm mốc Asp.niger, F.oxyporum và nấm men S.cererisiae[9]

Cắn chiết Chloroform của quả Cần tây kháng P aeuginosa với nồng độ ức chế tối

thiểu là 200μg/ml [10]

1.6.9.Tác d ụng chống loét dạ dày

Dịch chiết cồn của Cần tây có tác dụng bảo vệ tốt niêm mạc dạ dày và ức chế

sự bài tiết dịch vị của dạ dày chuột ở 2 mức liều 250mg và 500 mg/kg thể trọng [20]

Dịch chiết cồn thô của quả Cần tây được đánh giá có tác dụng chống lại

Helicobacter pylori gây bệnh trên dạ dày và những vi khuẩn khác Nồng độ ức chế

tối thiểu và kháng khuẩn tối thiểu là 3.15μg/ml và 6.25-12.5μg/ ml [47]

1.6.10.Tác d ụng chống kết tập tiểu cầu

Apigenin trong Cần tây có tác dụng ức chế sự kết tập tiểu cầu trong máu thỏ gây ra bởi collagen, ADP, acid arachidonic, và các nhân tố hoạt động của tiểu cầu nhưng không tác dụng trong trường hợp đông máu gây ra bởi thrombin hay ionophore [43]

1.6.11.Tác d ụng trên sự thải trừ acid uric

Với liều 500mg/kg dịch chiết ether dầu hỏa, dịch chiết methanol lá Cần tây có tác dụng làm giảm acid uric trong nước tiểu, giảm nồng độ acid uric trong huyết tương sau 3-6 h tiêm kali oxonat (trên chuột), trong đó dịch chiết ether dầu hỏa có tác dụng mạnh nhất [27]

1.7.1.2 B ộ phận trên mặt đất

- Nước ép từ lá Cần tây có tác dụng bổ dưỡng [1], [16], chữa loét miệng, viêm

họng, khản tiếng [16]

- Lá Cần tây giã đắp vết thương, mụn nhọt, nước sắc lá gội đầu để làm bền chân tóc [16]

- Nước sắc thân dùng ngâm chân chữa nứt nẻ [6]

1.7.1.3 H ạt Cần tây

- Tác dụng lợi tiểu nhẹ và tác dụng kháng khuẩn, là phương thuốc hữu hiệu cho

bệnh viêm bàng quang, giúp khử trùng bàng quang và ống dẫn nước tiểu [1]

- Trong y học dân gian Ấn Độ, quả khô của Cần tây được dùng làm thuốc kích thích tiêu hóa, gây trung tiện và bổ[16]

- Giảm triệu chứng các bệnh phổi như bệnh suyễn, viêm phế quản [1]

- Chữa một số bệnh về khớp (thấp khớp, viêm khớp, đau xương khớp) trong y học

Ấn Độ, Australia[16]

- Kết hợp với các thảo dược khác làm giảm huyết áp [1]

1.7.1.4 R ễ

Rễ Cần tây sử dụng để hồi phục chức năng, điều trị phù toàn thân, đau bụng,

lợi tiểu, gây trung tiện và là thực phẩm cung cấp vitamin C cho cơ thể [16]

1.7.1.5 Tinh d ầu

- Tinh dầu Cần tây có trong thành phần thuốc bổ, thuốc an thần, thông đường ruột

- Tinh dầu còn được dùng trong bệnh phù thũng, đau bàng quang, làm thuốc an dịu

thần kinh, chống co thắt và trong trường hợp thấp khớp [18]

1.7.2 Trong k ỹ nghệ hương liệu

Tinh dầu Cần tây làm hương liệu trong nước hoa, xà phòng, chất tẩy rửa [18]

1.7.3 Trong th ực phẩm

Cây Cần tây từ lâu đã được sử dụng phổ biến làm rau ăn [2],[13], [18]

Tinh dầu quả Cần tây được sử dụng rộng rãi làm hương liệu trong các sản

phẩm thực phẩm (món tráng miệng có sữa lạnh, kẹo bánh, thịt đông, đồ gia vị, súp, nước sốt, đồ ăn nhẹ …), đồ uống có cồn và không có cồn …[3], [13], [18]

Thân Cần tây được dùng như một loại rau bổ dưỡng và để ép nước uống [1]

C hương 2 NGUYÊN LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU

2.1 Nguyên liệu và phương tiện nghiên cứu

2.1.1 Nguyên li ệu

Mẫu nghiên cứu là toàn cây Cần tây được thu hái ở 3 địa điểm : Từ Liêm – Hà Nội,

Hồng Tiến- Khoái Châu- Hưng Yên, Vân Nội- Đông Anh- Hà Nội

Ký hiệu mẫu Địa điểm thu hái Thời gian thu mẫu CT1 Từ Liêm- Hà Nội 26-11-2012

CT2 Khoái Châu- Hưng Yên 1-12-2012

CT3 Đông Anh- Hà Nội 1-2013

Xử lý mẫu: Mẫu được phơi, sấy khô và được bảo quản riêng trong túi nilon, để nơi khô ráo, thoáng mát

2.1.2 Hóa ch ất và dụng cụ

∗ Hóa chất dùng cho nghiên cứu đạt tiêu chuẩn phân tích, gồm có:

- Các dung môi: Cồn 90o

, cồn tuyệt đối, EtOAc, toluen…

- Hóa chất vô cơ: NaOH, FeCl3, HCl, Mg, acid acetic 5%, Javen…

- Apigenin chuẩn của hãng Tauto Biotech, độ tinh khiết ≥ 98%

- Thuốc nhuộm vi phẫu: Xanh methylen, Son phèn

∗ Dụng cụ thí nghiệm:

- Pipet, ống nghiệm, bình cầu, cốc cỏ mỏ, ống đong, phễu

- Bộ dụng cụ chiết hồi lưu

2.1.3 Thi ết bị và máy móc sử dụng

- Cân phân tích Mettler Toledo AB204-S9 (Thụy Sĩ)

- Máy đo độ ẩm Sartorius

2.2 Nội dung nghiên cứu

Đề tài khảo sát và xây dựng các chỉ tiêu kiểm nghiệm sau của dược liệu Cần tây:

1, Mô tả dược liệu

2.3 Phương pháp nghiên cứu

2.3.1 C ảm quan

Quan sát mẫu ở ánh sáng thường Mô tả hình dạng, kích thước, màu sắc, mùi, vị và

thể chất của dược liệu[4]

2.3.2 Ki ểm nghiệm bằng phương pháp hiển vi

- Soi bột: Sấy khô dược liệu (lá, thân, rễ) trong tủ sấy ở nhiệt độ 1000C sau đó dùng thuyền tán và chày cối sứ nghiền nhỏ Rây lấy bột mịn, dùng kim mũi mác lấy

bột dược liệu cho lên phiến kính đã nhỏ sẵn một giọt nước cất, đặt lamen lên và quan sát dưới kính hiển vi để xác định các đặc điểm bột

- Đặc điểm vi phẫu: mẫu thân, lá, rễ Cần tây được cắt vi phẫu bằng máy cắt

cầm tay, tẩy nước Javen, nhuộm vi phẫu theo phương pháp nhuộm kép, quan sát dưới kính hiển vi xác định đặc điểm vi phẫu [3]

- Mô tả và chụp ảnh đặc điểm bột và vi phẫu bằng máy ảnh Canon

2.3.3 Ki ểm nghiệm bằng phương pháp hoá học

- Định tính flavonoid, coumarin có trong dược liệu cần tây bằng phản ứng hóa

học theo phương pháp ghi trong tài liệu [3]

• Định tính flavonoid: phản ứng Cyanidin, phản ứng với kiềm, với FeCl3 5%

• Định tính coumarin: phản ứng mở, đóng vòng lacton, quan sát hiện tượng huỳnh quang

- SKLM: Định tính dược liệu Cần tây bằng SKLM theo phụ lục 5.4 Dược điển

Việt Nam IV [5]

- Xác định lượng chất chiết được trong dược liệu bằng phương pháp chiết nóng với ethanol tuyệt đối theo phụ lục 12.10 Dược điển Việt Nam IV [5]

2.3.4 Độ ẩm

- Dược liệu thường được quy định một giới hạn độ ẩm nhất định gọi là độ ẩm

an toàn, quá độ ẩm đó thì dược liệu dễ bị mốc, hư hỏng Việc xây dựng chỉ tiêu độ ẩm cho dược liệu là xác định giới hạn tối đa cho phép của một dược

liệu để nó có thể giữ được chất lượng trong quá trình bảo quản [4]

- Xác định độ ẩm bằng phương pháp mất khối lượng do làm khô hay phương pháp sấy theo phụ lục 9.6 Dược điển Việt Nam IV [5]

Chương 3 THỰC NGHIỆM VÀ KẾT QUẢ

3.1 Khảo sát xây dựng một số chỉ tiêu kiểm nghiệm dược liệu Cần tây

3.1 1 Mô tả dược liệu

Toàn cây phơi hay sấy khô hoặc cây tươi của cây Cần tây (Apium graveolens

L.), họ Cần (Apiaceae)

- Mô tả: Những đoạn thân màu xanh nhạt, khô, dai, có nhiều rãnh dọc, dài 4 – 6cm Đoạn thân ở ngọn mang lá hay cuống lá, đoạn cuống ở sát gốc có bẹ Lá màu xanh lục, mỏng, khô quăn, chia 3 thuỳ, mép có răng cưa không đều, dài 1,5 – 3cm

Rễ chùm màu nâu nhạt, có nhiều rễ con, một số rễ con phát triển to hơn Dược liệu không vị, có mùi thơm đặc trưng

3.1 2 Soi bột

- Đặc điểm bột thân: Bột màu xanh xám, mùi thơm, không vị Soi dưới kính

hiển vi, bột thân cả 3 mẫu CT1, CT2, CT3 đều có những đặc điểm sau:

6 Tinh thể calci oxalate hình khối, hình hộp chữ nhật

Ảnh chụp các đặc điểm bột thân mẫu CT1, CT2, CT3 dưới kính hiển vi được trình bày ở hình 3.1

- Đặc điểm bột rễ: Bột màu nâu xám, không mùi, không vị Soi dưới kính hiển

vi, bột rễ cả 3 mẫu CT1, CT2, CT3 đều có những đặc điểm sau: