Tiến hành: Cân 10g bột dược liệu Cần tây cho vào bình nón dung tích 100 ml. Thêm khoảng 30 ml ethanol 90º, đun sôi cách thủy 10 phút, lọc nóng. Dùng dịch lọc làm các phản ứng định tính sau:
• Định tính coumarin
- Phản ứng mở, đóng vòng lacton
Cho vào 2 ống nghiệm, mỗi ống 1 ml dịch chiết ethanol. Ống 1: Thêm 0,5 ml dung dịch NaOH 10%
Ống 2: Để nguyên
Đun cả 2 ống đến sôi, để nguội, quan sát thấy: Ống 1: Xuất hiện tủa vàng
Ống 2: Trong
Thêm vào cả 2 ống nghiệm mỗi ống 2 ml nước cất. Lắc đều rồi quan sát thấy Ống 1: Trong suốt
Ống 2: Có tủa đục
Acid hóa ống 1 bằng vài giọt HCl đặc, ống 1 trở lại tủa đục như ống 2. Kết quả: Phản ứng dương tính (+).
- Quan sát hiện tượng huỳnh quang
Nhỏ 2-3 giọt dịch chiết ethanol lên một khoanh giấy thấm. Nhỏ 2-3 giọt dung dịch NaOH 5% lên vị trí có dịch chiết. Sấy nhẹ. Che một phần diện tích dịch chiết trên giấy lọc bằng một miếng kim loại, rồi chiếu tia tử ngoại trong vài phút. Bỏ miếng kim loại ra, quan sát tiếp dưới đèn tử ngoại thấy phần không bị che có huỳnh quang sáng hơn phần bị che. Nếu tiếp tục chiếu tia tử ngoại, phần bị che sáng dần lên, sau vài phút cả 2 phần đều phát quang như nhau.
Kết quả: Phản ứng dương tính (+) với cả 3 mẫu CT1, CT2, CT3. Kết luận: Trong dược liệu Cần tây có chứa coumarin.
• Định tính flavonoid
Phần dịch chiết ethanol còn lại đem cô tới cắn, thêm vào khoảng 10ml nước nóng rồi lọc nóng thu được dịch chiết nước. Cô dịch chiết nước tới cắn rồi thêm khoảng 10ml ethanol 90othu được dịch chiết cồn để làm phản ứng định tính flavonoid.
- Phản ứng Cyanidin: Cho 1ml dịch chiết ethanol vào ống nghiệm, thêm một ít bột magnesi kim loại. Nhỏ từng giọt HCl đặc (3-5 giọt). Để yên một vài phút, dung dịch sẽ chuyển từ màu vàng sang màu đỏ cam .
Kết quả: Phản ứng dương tính (+) với cả 3 mẫu CT1, CT2, CT3.
- Phản ứng với kiềm:
Phản ứng với NH3: Nhỏ 1-2 giọt dịch chiết ethanol lên một mảnh giấy lọc. Hơ khô rồi để lên miệng lọ amoniac đặc đã được mở nút, sẽ thấy màu vàng của vết dịch chiết được tăng lên.
Kết quả: Phản ứng dương tính (+) với cả 3 mẫu CT1, CT2, CT3.
Phản ứng với dd NaOH: Cho vào ống nghiệm 1 ml dịch chiết. Thêm vài giọt dung dịch NaOH 10% thấy xuất hiện tủa vàng. Thêm 1 ml nước cất thấy tủa tan và màu vàng của dung dịch tăng lên.
Kết quả: Phản ứng dương tính (+) với cả 3 mẫu CT1, CT2, CT3.
- Phản ứng với dd FeCl3 5%: Cho vào ống nghiệm 1 ml dịch chiết ethanol. Thêm vào 2-3 giọt dung dich Sắt (III) clorid 5% thấy xuất hiện tủa xanh đen.
Kết quả: Phản ứng dương tính (+) với cả 3 mẫu CT1, CT2, CT3. Kết luận: Trong dược liệu Cần tây có flavonoid.