IV. KĨ THUẬT CÔNG NGHỆC ẤY TRUYỀN PHÔI TRÊN BÒ
3. Kỹ thuật tạo chu kì động dục, gây siêu bài noã nở gia súc cái cho phôi, gây động dục cùng pha ở cái nhận và các nhân tốảnh hưởng
3.1. Kỹ thuật tạo chu kì động dục
Nếu trong chương trình cấy phôi có nhiều bò cho phôi, thì cần phải gây động dục
đồng pha những con bò này. Những bò cho phôi
đang ở ngày 8-14 của chu kỳ động dục có thể nhóm lại với nhau và bắt đầu tiến hành gây rụng nhiều trứng. Các phương pháp sau đây thường được sử dụng: Chu kỳ tự nhiên: Phải nhận biết được động dục của tất cả bò cho phôi và lựa chọn những con ở giữa ngày 8-14 của chu kỳ để đưa vào chương trình cấy phôi. Tiêm một liều prostaglandin: Phải nhận biết được động dục của tất cả bò cho phôi, loại bỏ những con ở ngày 3-4 của của kỳ và tiêm cho
tất cả những con còn lại bằng một liều prostaglandin (PG) để gây động dục đồng pha.
Tiêm 2 liều prostaglandin:
Tiêm tất cả bò cho bằng một liều PG ở ngày 1. Sau đó 11 ngày tiêm PG lần 2. Quan sát
động dục trong 4-5 ngày. Bắt đầu gây rụng nhiều trứng 10 ngày sau khi động dục của đa số bò cho phôi.
Synchromate-B:
Đặt SMB ở ngày 1, prostaglandin vào sáng ngày 9 và rút SMB vào chiều cùng ngày. Quan sát động dục trong 3 ngày. Đưa tất cả bò động dục vào chương trình cấy phôi.
3.2. Kĩ thuật gây siêu bài noãn (rụng trứng nhiều).
Nguyên tắc của siêu bài noãn khá đơn giản, đó là làm cho nhiều noãn xuất hơn bình thường bằng cách dùng kích dục tố ở thời điểm quan trọng của nang noãn đang phát triển. Sau đó, kiểm soát sự thoái hóa thể vàng, gây xuất noãn đồng loạt, thụ tinh nhiều noãn và phát triển phôi giai đoạn sớm. phần lớn bò đáp ứng tốt nếu xử lý trong ngày 8- 14 của chu kỳ sinh dục.
Điều quan trọng là phải sờ khám buồng trứng của bò cho phôi một ngày trước khi bắt
đầu tiến hành gây rụng nhiều trứng để đảm bảo chắc chắn sự có mặt của thể vàng vì
một số gia súc, mặc dầu có biểu hiện tất cả các triệu chứng động dục, nhưng không rụng trứng. Hiện tượng này phổ biến ở bò Bos indicus hơn so với ở bò Bos taurus. Gây rụng nhiều trứng ở những gia súc kém như thế sẽ dẫn đến không rụng trứng, tỷ lệ thu phôi kém và chất lượng phôi kém.
Những sản phẩm để gây siêu bài noãn bao gồm: - Huyết thanh ngựa chửa (PMSG)
Thông thường người ta dùng một liều PMSG 1.500 – 3.000 UI vào giữa thời kỳ thể vàng của chu kỳ (ngày thứ 10 – 12). Một liều PGF2α được gây thoái hóa thể vàng được tiêm vào 2-3 ngày sau. Bò có thểđộng dục sau khi tiêm PGF2α 2 ngày. Như thế, bò động dục tử lúc tiêm PMSG khoảng 4 ngày.
- FSH
Có chứng cứ cho thấy tiêm FSH làm tăng đáp ứng của thú so với PMSG. Qui trình thông dụng nhất hiện nay là tiêm FSH mỗi ngày 2 mũi (cách nhau 12 giờ) trong thời gian 4 ngày (thường giảm liều dần). Thời gian bán rã của FSH ước tính khoảng 5 giờ. Trong nhiều năm qua, liều FSH là 5, 5, 4, 4, 3, 3, 2 mg và sau đó là 2 mg PGF2α (có thể tiêm vào lân tiêm FSH thứ 5 hoặc 6) để làm thoái hóa thể vàng.
- hMG, human menopausal gonadotropin (kích tố từ phụ nữ mãn kinh)
hMG có tác dụng như FSH lẫn LH. Gần đây người ta khẳng định rằng một liều tiêm 450- 600 UI hMG trong polyvinylpyrrolidone đủđể gây siêu bài noãn. [3]