VI. KỸ THUẬT KIỂM TRA PHẨM CHẤT TINH DỊCH
2. Những chỉ tiêu đánh giá định kỳ
2.4. Tỷ lệ tinh trùng kỳ hình (K) và hệ
số bệnh lý của tinh trùng (B)
a. Khái niệm
Tinh trùng kỳ hình là những tinh trùng có hình dạng khác thường so với tinh trùng bình thường.
Villiam (1921) đã cho thấy tinh trùng kỳ hình có ảnh hưởng xấu đến tỷ lệ thụ thai. V.K. Milovanov cho thấy có hai thời kỳ có thể gây ra tình trạng kỳ hình của tinh trùng :
- Ngay trong quá trình sinh tinh. Điều này xảy ra thường bắt nguồn từ những nguyên nhân liên quan đến các bệnh
tật, đặc biệt là các loại bệnh đường sinh dục.
- Chế độ chăm sóc nuôi dưỡng như: thức ăn không đảm bảo đầy đủ và cân đối về chất, chế độ tắm chải không thường xuyên, chế độ sử dụng không hợp lý.
97
- Sau khi tinh trùng bài xuất ra ngoài. Điều này thường liên quan đến các yếu tố ngoại cảnh như: kỹ thuật lấy tinh, quá trình xử lý tinh dịch.
- Người ta chia tinh trùng kỳ hình ra làm bốn loại: + Tinh trùng kỳ hình đầu. + Tinh trùng kỳ hình cổ. + Tinh trùng kỳ hình thân. + Tinh trùng kỳ hình đuôi. Để đánh giá tinh trùng kỳ hình, thường dùng phương pháp nhuộm màu tinh trùng bằng một số loại thuốc nhuộm như Xanh mêthlen, tím Violet, Giêm xa, đỏ Methyl.
Hình 41. Tinh trùng kỳ hình đầu và cổ
b. Cách tiến hành
Đặt một giọt tinh lên một đầu phiến kính đã được rửa sạch, sấy khô và tẩy mỡ. Nếu tinh dịch đặc có thể pha loãng bằng vài giọt dung dịch Natricitrat 2,9% (hoặc nước sinh lý (0,85%). Dùng đầu đũa thủy tinh trộn đều hỗn hợp này. Dùng cạnh của một phiến kính khác phiết nhẹ thành tiêu bản (phiết một lần, càng mỏng càng tốt, không chà đi xát lại gây ra kỳ hình nhân tạo dẫn đến sự không chính xác). Để cho tiêu bản tự khô trong không khí (không hơ nóng bất kỳ hình thức nào). Sau khi tiêu bản đã khô, cố định tiêu bản trên ngọn lửa đèn cồn. Dùng thuốc nhuộm (được lọc kỹ, không có cặn), nhỏ đều trên tiêu bản. Đợi cho tiêu bản khô (mùa hè 5-10 phút, mùa đông khoảng 10-15 phút). Dùng nước cất rửa sạch tiêu bản.
* Chú ý: không dội mạnh nước cất mà để nghiêng tiêu bản một góc 450, dùng pipet hoặc buret nhỏ từ từ trên phần phiến kính không có tiêu bản cho nước tràn qua phần có tiêu bản để rửa trôi thuốc nhuộm.
Rửa đến khi tiêu bản vẫn còn màu xanh nhạt thì dừng lại (không rửa trắng tiêu bản). Đợi cho tiêu bản tự khô, đặt lên kính hiển vi có độ phóng đại 400-600 lần để kiểm tra.
Đếm tổng số 300 hoặc 500 tinh trùng xem trong đó có bao nhiêu tinh trùng kỳ hình và tính tỷ lệ tinh trùng kỳ hình theo công thức sau:
K = M.100/300 (500)
Trong đó: K : tỷ lệ phần trăm tinh trùng kỳ hình M : tổng số tinh trùng kỳ hình đếm được 300 hoặc 500 là tổng số tinh trùng đếm
Thông thường tinh dịch của các loài gia súc có tỷ lệ kỳ hình nhỏ hơn 20% là đạt yêu cầu.