Định tính: Từ 91 chủng ưa nhiệt được nuôi trên đĩa thạch sàng lọc phytase (PSM) sau 5 ngày, lựa chọn được 2 chủng xuất hiện vùng phân giải trong là SP1901 và D15 (hình 9).
Hình 9. Sinh trưởng và vùng phân giải của phytase chủng SP1901 (trái) và D15 (phải) trên PSM
Định lượng trên môi trường lên dịch thể và lên men xốp: chúng tôi đã tiến hành lên men dịch thể chủng SP1901, D15 để sản xuất phytase trên 5 loại môi trường khác nhau, sau 3 ngày xác định hoạt tính phytase và lên men xốp trên môi trường chứa gạo lức và bột đỗ tương, sau 3,5 ngày mẫu được chiết xuất để xác định hoạt tính phytase.
Bảng 5. Hoạt tính phytase của 2 chủng SP1901 và D15 trong lên dịch thể và lên men xốp
Chủng
Hoạt tính phytase Môi trường lên men dịch thể
(U/ml) Môi trường
lên men xốp (U/g)
G H J K1 K2
SP1901 0 0 0,63 0,35 0,26 3,9
D15 0 0 0,5 0,34 0,19 3,1
Với các kết quả thu được ở bảng 5 môi trường J cho hoạt tính phytase cao nhất ở cả 2 chủng, tuy nhiên lại thấp hơn nhiều khi so sánh với hoạt tính phytase được sinh ra trên môi trường lên men xốp. Mặt khác, môi trường J bổ sung cơ chất Na- phytate tinh khiết rất đắt tiền, trong khi đó môi trường lên men xốp sử dụng các cơ chất tự nhiên, dễ kiếm, rẻ tiền do đó chúng tôi quyết định sử dụng lên men xốp cho các nghiên cứu tiếp theo.
Như vậy từ 91 chủng vi sinh vật ưa nhiệt, chúng tôi đã chọn ra 2 chủng vi khuẩn là: SP1901 và D15 có sinh tổng hợp phytase trên môi trường lên men xốp. Dịch enzyme của 2 chủng này được dùng để xác định khả năng bền nhiệt.