BC
Tế bào nấm men Y. lipolytica và S. cerevisiae sau khi hoạt hĩa ở mơi trường
YPDA trong 48h ở 27 °C được tiền tăng sinh trong mơi trường YPD sau đĩ chuyển sang nuơi ở các mơi trường được chọn ở 2.2.3 và thời gian thu sinh khối căn cứ trên kết quả đường cong sinh trưởng ở mục 2.2.3.
Sinh khối thu được sau khi rửa 2 lần với nước cất tuyệt trùng và li tâm ở 8000 rpm trong 5 phút, cho tiếp xúc qua đêm với dầu BC. Sinh khối sau khi tiếp xúc đem đi rửa với đệm phosphate và được mang đi tách chiết ướt để xác định hiệu suất chuyển chất BC của hai chủng giống nấm men.
Hình 2.3: Khảo sát ảnh hưởng của chủng giống nấm men lên hiệu suất chuyển chất BC Tách chiết ướt
Li tâm, rửa 2 lần ở 8000 rpm, 5 phút, 4°C
Tiếp xúc qua đêm với dầu BC
Li tâm, rửa 2 lần ở 8000 rpm, 5 phút, 4°C Nuơi cấy ở 27°C, pH mơi trường và lắc 150 rpm
Chủng nấm men truyền thống và khơng truyền thống
Nuơi cấy trên mơi trường được chọn ở 2.2.3 và nhiệt độ ở 2.2.1, thể tích lắc 200ml, tốc độ lắc 150 rpm
2.2.5. Khảo sát ảnh hưởng của mơi trường nuơi cấy đến hiệu suất chuyển chất BC
Tế bào nấm men được chọn từ 2.2.4 sau khi hoạt hĩa ở mơi trường YPDA trong 48h ở 27 °C được tiền tăng sinh trong mơi trường YPD sau đĩ chuyển sang nuơi ở các mơi trường được chọn ở 2.2.3 và thời gian thu sinh khối căn cứ trên kết quả đường cong sinh trưởng ở mục 2.2.3.
Sinh khối thu được sau khi rửa 2 lần với nước cất tuyệt trùng và li tâm ở 8000 rpm trong 5 phút. Tế bào thu được đem đi phân tích sterol, đánh giá tính lỏng màng tế bào và cho tiếp xúc qua đêm với dầu BC. Sinh khối sau khi tiếp xúc đem đi rửa với đệm phosphate và được mang đi tách chiết ướt để xác định hiệu suất chuyển chất BC của nấm men trên các mơi trường khác nhau.
Hình 2.4: Khảo sát ảnh hưởng của mơi trường nuơi cấy lên hiệu suất chuyển chất BC Nuơi cấy ở 27°C, pH mơi trường
và lắc 150 rpm Nấm men được chọn từ mục
2.2.4
Nuơi cấy trên mơi trường được chọn ở 2.2.3 và nhiệt độ ở 2.2.1, thể tích lắc 200ml, tốc độ lắc 150 rpm
Li tâm, rửa 2 lần ở 8000 rpm, 5 phút, 4°C
Tiếp xúc qua đêm với dầu BC
Tách chiết ướt
Li tâm, rửa 2 lần ở 8000 rpm, 5 phút, 4°C
Phân tích sterol và đánh giá tính lỏng màng tế bào nấm men