Dựa trên những phân tích về ưu nhược điểm của các chủng dengue đang được phát triển trên thế giới, công ty VABIOTECH đã lựa chọn 6 chủng dengue tái tổ hợp thuộc 4 týp huyết thanh của phòng thí nghiệm về bệnh truyền nhiễm (NIAID,NIH, Hoa Kỳ) để đưa vào phát triển và sản xuất vắcxin dengue trong tương lai. Các chủng dengue tái tổ hợp này đều đã được chứng minh tính an toàn, giảm độc lực trên động vật thí nghiệm cũng như trên người (mục 1.6).
Không giống các công nghệ giảm độc lực bằng phương pháp cấy chuyển nhiều đời truyền thống, việc sử dụng công nghệ di truyền tái tổ hợp và đưa các đột biến mất đoạn để giảm độc lực tạo nên tính bền vững di truyền của các chủng này cao hơn, khả năng chủng tái độc rất thấp do đó vắcxin khi đưa ra trên thị trường sẽ an toàn hơn với cộng đồng
Hệ thống chủng gốc giống là yêu cầu đầu tiên trong việc phát triển bất cứ loại vắcxin nào. Trên cơ sở hệ thống chủng xây dựng được các nhà nghiên cứu sẽ phát triển quy trình sản xuất, tối ưu hóa các bước từ quy mô phòng thí nghiệm cho tới quy mô công nghiệp sau này.
Để đáp ứng được yêu cầu sản xuất hàng triệu liều vắcxin dengue tại Việt Nam, phục vụ cho nhu cầu phòng và trừ bệnh SXHD, 6 chủng dengue nhập về cần được nghiên cứu các thông số phù hợp để gây nhiễm nhân nuôi với số lượng lớn, sau đó chúng được đánh giá hiệu giá, sự ổn định tính qua các đời nuôi cấy, đặc biệt đánh
44
giá tính ổn định di truyền xem có xuất hiện các đột biến so với chủng nhận được hay không.
Xây dựng thành công hệ thống chủng sẽ góp phần giúp công ty làm chủ hoàn toàn về mặt công nghệ sản xuất vắcxin dengue tại Việt Nam, nhanh chóng đáp ứng được đòi hỏi cấp thiết trong phòng chống dịch bệnh dengue đang hoành hoành hàng năm một cách có hiệu quả hơn và kinh tế hơn, nâng cao chất lượng chăm sóc sức khỏe cộng đồng tại Việt Nam đặc biệt đối với trẻ em đối tượng chính chịu ảnh hưởng bởi dịch dengue.
45
CHƯƠNG 2: VẬT LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP
Cả 06 chủng virút dengue tái tổ hợp: rDEN1∆30, rDEN2/4∆30(ME), rDEN3∆30/31, rDEN3-3’D4∆30 rDEN4∆30, rDEN4∆30-200,201 được công ty VABIOTECH nhận về từ viện NIH, Hoa Kỳ là cơ sở để nghiên cứu phát triển ngân hàng chủng gốc giống cho sản xuất vắcxin dengue tại Việt Nam. Các chủng này sẽ được nghiên cứu để nhân nuôi trong các điều kiện khác nhau để đạt hiệu giá cao, phù hợp khi đưa vào sản xuất ở các quy mô nhỏ đến lớn. Sau khi xác định được các thông số nuôi cấy virút của từng chủng dengue tái tổ hợp, các chủng sẽ được nhân nuôi với lượng thể tích lớn trong điều kiện đảm bảo tiêu chuẩn sạch và an toàn sinh học.
Chủng gốc giống sau thu hoạch được phân chia khoảng 200 ống týp/chủng và được kiểm tra các tiêu chuẩn về chất lượng hiệu giá, độ sạch, và tiếp tục đánh giá tính ổn định về hiệu giá qua các đời nuôi cấy, đánh giá sự biến đổi về mặt di truyền.