Một vài vắcxin dự tuyển DENV-3 giảm độc lực đã được nghiên cứu phát triển bởi phòng thí nghiệm bệnh truyền nhiễm (NIAID). Chủng đầu tiên, rDEN∆30, chứa đột biến mất đoạn ∆30 bên trong 3’-UTR của virút hoang dại DENV-3 Slemen/78. Tương phản với những gì quan sát được trên DEN1∆30 và DEN4∆30, đột biến ∆30 trong rDEN3∆30 dường như không giới hạn sự sao chép của virút trên chuột SCID-HuH-7 hoặc trên khỉ rhesus, do vậy chủng này không được tiếp tục đánh giá. Chiến lược giảm độc lực thứ hai được sử dụng để thay thể vùng mã hóa protein prM và E của rDEN4 và rDEN4∆30 với các protein tương ứng của DENV-3 Slemen/78 tạo ra virút khảm rDEN3/4(ME) và rDEN3/4∆30(ME). Thể khảm của các gen DENV-3 ME với rDEN4 giới hạn sự sao chép 100 lần trên chuột SCID-HuH-7 nhưng đưa đột biến ∆30 không tạo ra sự khác biệt trên mô hình này. Cả rDEN3/4(ME) và rDEN3/4∆30 (ME) đều giảm độc lực trên khỉ rhesus. Tất cả động vật đều được bảo vệ khi thử thách với chủng hoang dại DENV-3 Slemen/78. Do có mặt đột biến ∆30 có thể làm tăng tính ổn định virút khảm, rDEN3/4∆30 (ME) được lựa chọn để đánh giá thử nghiệm lâm sàng sâu hơn. Các thử nghiệm tiêm rDEN3/4∆30 (ME) với một liều tiêm đơn dưới da 103
PFU 105 PFU ở 20 người khỏe mạnh. Kết quả thử nghiệm cho thấy chỉ có 25% người tiêm có huyết thanh phản ứng với DEN-3 hoang dại sau 42 ngày tiêm ở liều tiêm 105 PFU.
42
Do kết quả rDEN3/4∆30(ME) đáp ứng trên người chưa tốt, hai dự tuyển vắcxin DENV-3 đã được phát triển lấy từ chủng DENV-3 Slemen/73 hoang dại và chứa tất cả các proteins cấu trúc và không cấu trúc của DENV-3. Virút rDEN3∆30/31, chứa cả đột biến mất đoạn ∆30 đã được mô tả ở trên và thêm một đột biến mất 31 nucleotide ở 3’-UTR ở vị trí 55 nucleotide phía trên của đột biến ∆30. Virút thứ hai, rDEN3-3’D4∆30, là một virút khảm với toàn bộ 3’-UTR của rDEN3 được thay thế bằng 3’-UTR của rDEN4∆30. Các virút này giảm độc lực trên chuột SCID-HuH-7 và trên khỉ rhesus. Mặc dù không tạo ra nhiễm virút huyết có thể phát hiện ở khỉ rhesus, cả hai đều làm tăng kháng thể trung hòa trên 4 lần trong huyết thanh ở tất cả động vật được tiêm và bảo vệ được chúng đối với chủng thử thách DEN3 hoang dại. Cả 2 virút DEN3 giảm độc lực này đều được đánh giá tiếp trong các thử nghiệm lâm sàng [10].
Hình 8. Sơ đồ gen các chủng dengue tái tổ hợp được lựa chọn để làm vắcxin sống giảm độc lực [12].
43
rDEN3-3’D4∆30 và rDEN3∆30/31 được đánh giá trên người lớn khỏe mạnh ở 2 thử nghiệm lâm sàng riêng biệt. 20 người được tiêm 103 PFU của rDEN3- 3’D4∆30 và rDEN3∆30/31 và 8 người tiêm placebo. Cả 2 vắcxin đều tạo ra nhiễm virút huyết có thể phát hiện được ở 20% số người tiêm với nồng độ đỉnh trung bình đều thấp. Phản ứng đối với các 2 vắcxin tương tự nhau: ban đỏ và đau đầu tồn tại phổ biến. Cả hai vắcxin đều sinh miễn dịch, với 80% và 95% phản ứng huyết thanh sau khi tiêm rDEN3-3’D4∆30 và rDEN3∆30/31. Cả 2 vắcxin đều cho thấy độ an toàn và đang được đánh giá như là thành phần trong vắcxin tứ liên.