CHƯƠNG 3 KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN
3.4. TÁCH CHIẾT VÀ TINH CHẾ CKSTC-54
3.4.3. Xỏc định Rf của chất khỏng sinh
CKS T-41 được hoà tan vào axeton và chấm lờn bảng giấy sắc ký Whatman số 1, chạy trong cỏc hệ dung mụi. Xỏc định Rf bằng phương phỏp hiện hỡnh sinh học với vi sinh vật kiểm định là F.oxysporum. Kết quả thớ nghiệm xỏc định được Rf
trong cỏc hệ dung mụi là:
Hệ dung mụi: n-butanol: H20 ( 84: 16 ) cú Rf = 0.73 Hệ dung mụi: n-butanol: a.axetic: H20 ( 1: 2: 1 ) cú Rf = 0.89 Hệ dung mụi: metanol : axit axetic : H20 (2 : 1 : 1) cú Rf=0,67
CKS thụ của chủng D-42 được hoà tan vào trong etylaxetat và chấm lờn băng giấy sắc ký Whatman No1 (kớch thước 2x20 cm). Sau đú chạy trờn 3 hệ dung mụi n - butanol: axit axetic: H20 (1 : 2 : 1); n - butanol : H20 (86:14); metanol : axit axetic: H20 (2 : 1 : 1). Khi dung mụi đó chạy đến điểm dừng bỏ giấy sắc ký ra khỏi hệ dung mụi, để khụ tự nhiờn. Sau đú xỏc định Rf bằng phương phỏp hiện hỡnh sinh học với VSV kiểm định là F.oxysporum.
Kết quả ở bảng 3.17 cho thấy trong mỗi hệ dung mụi ta sẽ thu được một hệ số Rf, tuỳ khả năng hoà tan của CKS D-42 và lực kộo của hệ dung mụi mà Rf cú thể lớn hay nhỏ. Tương tự, CKS TC-54 thụ được hoà tan trong axeton và chấm lờn băng giấy sắc ký Whatman, chạy trong trờn 3 hệ dung mụi n - butanol: axit axetic: H20 (1 : 2 : 1); n - butanol : H20 (86:14); metanol : axit axetic: H20 (2 : 1 : 1). Xỏc
Kết quả thớ nghiệm xỏc định được Rf trong n - butanol: axit axetic: H20 (2 : 1: 1) là 0,45~0,77, cũn trong hệ n - butanol: H20 (84 : 16) là 0,5; metanol: axeton: H20 (16 : 6 : 75) là 0,65. Kết quả sắc ký cho thấy đối với CKS TC-54, khi khai triển trong hệ dung mụi n - butanol: axit axetic: H20 (2 : 1: 1) cú hệ số Rf từ 0,45~0,77. Ở đõy xuất hiện nhiều vệt sắc ký nờn chỳng tụi tiến hành phõn lập TC-54 bằng cỏc phương phỏp tiếp theo được trỡnh bày dưới đõy.
Bảng 3.17. Hệ số Rf của CKS T-41, D-42, TC-54 trờn cỏc hệ dung mụi khỏc nhau
Chất khỏng sinh Hệ dung mụi Rf
T-41
n-butanol: H20 ( 84: 16 ) 0.73
n-butanol: a.axetic: H20( 1: 2: 1 ) 0.89
metanol : axit axetic : H20 (2 : 1 : 1) 0,67
D-42
n - butanol: axit axetic: H20 (2 : 1: 1) 0,81
n - butanol: H20 (84 : 16) 0,78
metanol: axeton: H20 (16 : 6 : 75) 0,11
TC-54
n - butanol: axit axetic: H20 (2 : 1: 1) 0,45~ 0,77
n - butanol: H20 (84 : 16) 0,5
metanol: axeton: H20 (16 : 6 : 75) 0,65