3.4.2. Xác định các dạng phân tử của phân lớp phospholipid
3.4.2.1. Dạng phân tử phosphatic acid (PA)
CTPT: CxHyO8P
Đầu phân cực PA chứa gốc axit phosphoric (-H2PO4). Tùy thuộc vào cấu tạo của đuơi khơng phân cực, PA được chia thành 3 loại: diacyl, ankyl acyl hoặc ankenyl acyl. Để xác định dạng phân tử của PA căn cứ vào 5 dấu hiệu:
(i) Thời gian lưu dự kiến: (3,5- 5,6) n phút.
(ii) Trên event 3 xuất hiện ion [M-H]-, theo quy tắc nitrogen, m/z của ion này là số lẻ.
(iii) Trên event 1, khơng cĩ ion dương [M+H]+ và dạng adduct [M+Na]+. (iv) Khối lượng phân tử tùy thuộc vào cấu tạo của đuơi khơng phân cực, thường nằm trong khoảng m/z 600 - 1000.
(v) Cơng thức phân tử tương ứng cĩ dạng -O8P hoặc -O7P.
Các dữ kiện phổ khối:
+ Lồi rong Nâu Lobophora sp.: cĩ 01 dạng phân tử PA duy nhất tại thời
gian lưu (Retention Time (Rt)):
Rt 4,37 phút: PA 40:8; MS- m/z 743,4609 [M-H]-; MS2- m/z 457,2260 [M-H- C20H30O]-, 439,2215 [M-H-C20H32O2]- và 303,2243 [C20H31O2]-.
+ Lồi rong Lục Halimeda incrasata Lamx. khơng cĩ dạng phân tử PA.
3.4.2.2. Dạng phân tử phosphatidylglycerol (PG)
CTPT: CxHyO10P
CTCT: Dạng diacyl của phân tử phosphatidylglycerol
Đầu phân cực PG chứa nhĩm glycerolphosphat (C3H8O6P). Tùy thuộc vào cấu tạo của đuơi khơng phân cực, PG được chia thành 3 loại: diacyl, ankyl acyl hoặc ankenyl acyl. Để xác định dạng phân tử của PG căn cứ vào 5 dấu hiệu:
(i) Thời gian lưu dự kiến: (5,4 – 6,8) n phút.
(ii) Trên event 3 xuất hiện ion âm [M-H]-, theo quy tắc nitrogen, m/z của ion này là số lẻ.
(iii) Trên event 1, khơng cĩ ion dương [M+H]+ và dạng adduct [M+Na]+. (iv) Khối lượng phân tử tùy thuộc vào cấu tạo của đuơi khơng phân cực, thường nằm trong khoảng m/z 600 - 900.
(v) Cơng thức phân tử tương ứng cĩ dạng -O10P hoặc -O9P.
Các dữ kiện phổ khối:
+ Lồi rong Nâu Lobophora sp.: cĩ 22 dạng phân tử PG xác định theo giá trị khối lượng tăng dần và thời gian lưu:
Rt 6,89: PG 30:1; MS- m/z 691,4524 [M-H]-; MS2- m/z 455,2423 [M-H- C16H28O]- và 253,21 [C16H29O2]-. Rt 6,59: PG 30:0; MS- m/z 693,4960 [M-H]-; MS2- m/z 255,2311 [C16H31O2]- và 227,2023 [C14H27O2]-. Rt 6,62: PG 32:2; MS- m/z 717,4698 [M-H]-; MS2- m/z 253,2223 [C16H29O2]-, 481,2521 [M-H-C16H28O]- và 509,2823 [M-H-C14H24O]-. Rt 6,38: PG 32:1; MS- m/z 719,4851 [M-H]-; MS2- m/z 255,2412 [C16H31O2]-, 391,2311 [M-H-C16H28O-C3H8O3]- và 483,2682 [M-H-C16H28O]-. Rt 6,08: PG 32:0; MS- m/z 721,5006 [M-H]-; MS2- m/z 255,2311 [C16H31O2]-. Rt 6,71: PG 34:4; MS- m/z 741,4682 [M-H]-; MS2- m/z 277,2223 [C18H29O2]- và 505,2612 [M-H-C16H28O]-. Rt 6,41: PG 34:3; MS- m/z 743,4833 [M-H]-; MS2- m/z 255,2304 [C16H31O2]-, 279,2325[C18H31O2]-; 281,2525 [C18H33O2]-, 415,2311 [[M-H-C16H28O-C3H8O3]- và 507,2712 [M-H-C16H28O]-.
Rt 6,08: PG 34:2; MS- m/z 745,4985 [M-H]-; MS2- m/z 253,2137 [C16H29O2]-, 279,2349 [C18H31O2]-, 281,2485 [C18H33O2]-, 417,2395 [M-H-C16H26O-C3H8O3]-, 491,2738 [M-H-C16H32O2]- và 509,2958 [M-H-C16H26O]-.
Rt 5,9: PG 34:1; MS- m/z 747,5158 [M-H]-; MS2- m/z 255,2311 [C16H31O2]-, 281,2521 [C18H33O2]-, 391,2322 [M-H-C18H32O-C3H8O3]-, 417,2412 [M-H- C16H30O- C3H8O3]-, 465,2711 [M-H-C18H34O2]-, 491,2845 [M-H-C16H32O2]- và 511,3131 [M-H-C16H28O]-.
Rt 6,62: PG 36:6; MS- m/z 765,4675 [M-H]-; MS2- m/z 257,2312 [C20H29O2- CO2]-, 301,2228 [C20H29O2]-, 437,2123 [M-H-C16H26O-C3H8O3]- và 529,2622 [M- H-C16H26O]-. Rt 6,41: PG 36:5; MS- m/z 767,4820 [M-H]-; MS2- m/z 255,2312 [C16H31O2]-, 257,2334 [C19H29]-, 259,2523 [C19H31]- (20:4), 303,2411 [C20H31O2]-, 437,2142 [M- H-C16H28O-C3H8O3]-, 439,2334 [M-H-C16H26O-C3H8O3]- và 531,2745 [M-H- C16H26O]-. Rt 6,11: PG 36:4; MS- m/z 769,4938 [M-H]-; MS2- m/z 303,2256 [C20H31O2]- và 533,2911 [M-H-C16H28O]-.
Rt 5,9: PG 36:3; MS- m/z 771,5138 [M-H]-; MS2- m/z 305,2423 [C20H33O2]-. Rt 5,78: PG 36:2; MS- m/z 773,5316 [M-H]-; MS2- m/z 281,2823 [C18H33O2]-, 417,2411[M-H-C3H8O3-C18H30O]-, 491,2812[M-H-C18H34O2]-, 509,2923 [M-H- C18H32O]-
Rt 6,26: PG 38:6; MS- m/z 793,4985 [M-H]-; MS2- m/z 281,2531 [C18H33O2]-. + Lồi rong Lục Halimeda incrassata Lamx.: cĩ 04 dạng phân tử PG xác định theo giá trị khối lượng tăng dần và thời gian lưu:
Rt 6,99: PG 32:2; MS- m/z 717,4591 [M-H]-; MS2- m/z 481,2523 [M-H- C16H28O]- và 253,2112 [C16H29O2]-. Rt 7,08: PG 34:4; MS- m/z 741,4642 [M-H]-; MS2- m/z 505,2500 [M-H- C16H28O]-. Rt 6,72: PG 34:3; MS- m/z 743,4772 [M-H]-; MS2- m/z 279,2294 [C18H31O2]-, 415,2241 [M-H-C3H8O3-C16H28O]- và 507,2671 [M-H-C16H28O]-. Rt 6,54: PG 34:2; MS- m/z 745,4902 [M-H]-; MS2- m/z 281,2523 [C18H33O2]-, 417,2467 [M-H-C3H8O3-C16H28O]- và 509,2812 [M-H-C16H28O]-. 3.4.2.3. Dạng phân tử phosphatidylcholine (PC) CTPT: CxHyNO8P
CTCT: Dạng diacyl của phân tử PC
Đầu phân cực PC chứa gốc cholinephosphat (C5H13NO4P). Tùy thuộc vào cấu tạo của đuơi khơng phân cực, PC được chia thành 3 loại: diacyl, ankyl acyl, ankenyl acyl. Để xác định dạng phân tử của PC căn cứ vào 6 dấu hiệu:
(i) Thời gian lưu dự kiến: (7,5 - 11,5) n phút.
(ii) Trên event 3 khơng xuất hiện ion âm [M-H]-, thay vào đĩ là các ion [M+HCOO]-, [M+CH3COO]- và [M-CH3]- với m/z là số chẵn.
(iii) Trên event 1, xuất hiện ion dương [M+H]+ với cường độ peak lớn nhất và m/z là số chẵn.
(iv) Khối lượng phân tử tùy thuộc vào cấu tạo của đuơi khơng phân cực, thường nằm trong khoảng m/z 650 - 850.
(v) Cơng thức phân tử tương ứng cĩ dạng -NO8P hoặc -NO7P.
(vi) Trên MS2-của ion [M+HCOO]- thường xuất hiện peak [M-CH3]- cách nhau 60 u.
Các dữ kiện phổ khối:
+ Lồi rong Nâu Lobophora sp.: cĩ 14 dạng phân tử PC xác định theo giá trị khối lượng tăng dần và thời gian lưu:
Rt 11,38: PC 28:0; MS- m/z 678,5056 [M+H]+, m/z 722,4901 [M+HCOO]-, m/z 662,4712 [M-CH3]-; MS2- [M-CH3]- m/z 227,2042 [C14H27O2]-. Rt 10,30: PC 30:0; MS- m/z 706,5375 [M+H]+, m/z 750,5226 [M+HCOO]-, m/z 690,5025 [M-CH3]-; MS2- [M-CH3]- m/z 227,2042 [C14H27O2]- và 255,2262 [C16H31O2]-. Rt 9,85: PC 32:1; MS- m/z 732,5494 [M+H]+, m/z 776,5369 [M+HCOO]-, m/z 716,5145 [M-CH3]-; MS2- [M-CH3]- m/z 281,2449 [C18H33O2]-, 227,2005 [C14H27O2]- và 253,2104 [C16H29O2]-, m/z 452,2690 [M-CH3-C18H32O]-.
Rt 9,4: PC 32:0; MS- m/z 734,5677 [M+H]+, m/z 778,5543 [M+HCOO]-, m/z 718,5247 [M-CH3]-; MS2- [M-CH3]- m/z 480,3068 [M-CH3-C16H30O]- và 255,2314 [C16H31O2]-. Rt 10,21: PC 34:4; MS- m/z 754,5364 [M+H]+, m/z 798,5217 [M+HCOO]- và m/z 738,5033 [M-CH3]-; MS2- [M-CH3]- m/z 452,2713 [M-CH3-C20H30O]- và 303,225 [C20H31O2]-. Rt 9,91: PC 34:3; MS- m/z 756,5515 [M+H]+, m/z 800,5418 [M+HCOO]-, m/z 740,5082 [M-CH3]-; MS2- [M-CH3]- m/z 305,2434 [C20H33O2]-. Rt 9,25: PC 34:2; MS- m/z 758,5678 [M+H]+, m/z 802,5605 [M+HCOO]- và m/z 742,5293 [M-CH3]-; MS2- [M-CH3]- m/z 279,2314 [C18H31O2]-. Rt 9,01: PC 34:1; MS- m/z 760,5819 [M+H]+, m/z 804,5687 [M+HCOO]-, m/z 744,5522 [M-CH3]-; MS2- [M-CH3]- m/z 281,2412 [C18H33O2]- và 255,2316 [C16H31O2]-. Rt 8,65: PC 34:0; MS- m/z 762,6003 [M+H]+, m/z 806,5817 [M+HCOO]-, m/z 746,5542 [M-CH3]-; MS2- [M-CH3]- m/z 311,2960 [C20H39O2]-. Rt 9,25: PC 36:4; MS- m/z 782,5719 [M+H]+, m/z 826,5533 [M+HCOO]- và m/z 766,5321 [M-CH3]-; MS2- [M-CH3]- m/z 255,2271 [C16H31O2]-, 303,2243 [C20H31O2]-.
Rt 9,07: PC 36:3; MS- m/z 784,5839 [M+H]+, m/z 828,5682[M +HCOO]-, m/z 768,5552 [M-CH3]-; MS2- [M-CH3]- m/z 305,2423 [C20H33O2]- và 255,2316 [C16H31O2]-. Rt 8,74: PC 36:2; MS- m/z 786,5978 [M+H]+, m/z 830,5841 [M+HCOO]- và m/z 770,5715 [M-CH3]-; MS2- [M-CH3]- m/z 307,2693 [C20H35O2]-. Rt 9,01: PC 38:5; MS- m/z 808,5837 [M+H]+, m/z 852,5666 [M+HCOO]-, m/z 792,5555 [M-CH3]-; MS2- [M-CH3]- m/z 281,248 [C18H33O2]- và 303,2316 [C20H31O2]-.
+ Lồi rong Lục Halimeda incrasata Lamx.: khơng cĩ dạng phân tử PC.
3.4.2.4. Dạng phosphatidyl inositol (PI)
CTPT: CxHyO13P CTCT: Dạng diacyl
Đầu phân cực PI chứa gốc inositolphotphat (C6H12O9P). Tùy thuộc vào cấu tạo của đuơi khơng phân cực, PI được chia thành 3 loại: diacyl, ankyl acyl hoặc ankenyl acyl. Để nhận dạng phân tử của PI căn cứ vào 5 dấu hiệu:
(i) Thời gian lưu dự kiến: (16,5 - 20) n phút.
(ii) Trên event 3 xuất hiện ion [M-H]-, theo quy tắc nitrogen, m/z của ion này là số lẻ.
(iii) Trên event 1, cĩ ion dương [M+H]+ và dạng adduct [M+HCOO]+, tuy nhiên cường độ peak khơng lớn nên với những phân tử PI cĩ hàm lượng ít thì khơng xuất hiện.
(iv) Khối lượng phân tử tùy thuộc vào cấu tạo của đuơi khơng phân cực, thường nằm trong khoảng m/z 800 - 1200.
(v) Cơng thức phân tử tương ứng cĩ dạng -O13P hoặc -O12P.
Các dữ kiện phổ khối:
+ Lồi rong Nâu Lobophora sp.: cĩ 11 dạng phân tử PI xác định theo giá trị khối lượng tăng dần và thời gian lưu:
Rt 19,7: PI 30:0; MS- m/z 781,4797 [M-H]-; MS2- m/z 255,2349 [C16H31O2]- và 525,2413 [M-H-C16H32O2]-.
Rt 19,76: PI 32:2; MS- m/z 805,4831 [M-H]-; MS2- m/z 577,2709 [M-H-
C14H28O2]-.
Rt 19,52: PI 32:1; MS- m/z 807,4966 [M-H]-; MS2- m/z 281,2425 [C18H33O2]- 297,0423 [C9H14O9P]-, 363,1915 [M-H-C18H34O2-C6H10O5]-, 391,2280 [M-H- C16H30O2-C6H10O5]-, 525,2423 [M-H-C18H34O2]- và 543,2551 [M-H-C18H32O]-.
Rt 19,31: PI 32:0; MS- m/z 809,5144 [M-H]-; MS2- m/z 255,2322 [C16H31O2]- , 391,2225 [M-H-C16H32O2-C6H10O5]-, 553,2821 [M-H-C16H32O2]- và 571,2910 [M- H-C16H30O]-. Rt 19,52: PI 34:3; MS- m/z 831,4957 [M-H]-; MS2- m/z 553,2712 [M-H- C18H30O2]-. Rt 19,34: PI 34:2; MS- m/z 833,5120 [M-H]-; MS2- m/z 255,2360 [C16H31O2]- , 279,2291 [C18H31O2]- , 297,0378 [C9H14O9P]-, 391,2260 [M-H-C18H32O2-C6H10O5- ]-, 415,2191 [M-H-C16H32O2-C6H10O5]-, 553,2740 [M-H-C18H32O2]- và 577,2821 [M-H-C16H32O2]-.
Rt 19,04: PI 34:1; MS- m/z 835,5283 [M-H]-; MS2- m/z 255,2338 [C16H31O2]- 281,2471 [C18H33O2]-, 297,0334 [C9H14O9P]-, 391,2226 [M-H-C18H34O2-C6H10O5]-, 409,2304 [M-H-C18H32O-C6H10O5]-, 417,2373 [M-H-C16H32O2-C6H10O5]-, 553,2744 [M-H-C18H34O2]-, 571,2832 [M-H-C18H32O]- và 579,2906 [M-H-C16H32O2]-.
Rt 19,49: PI 36:5; MS- m/z 855,4971 [M-H]-; MS2- m/z 391,2280 [M-H-
C20H30O2-C6H10O5]- và 553,2671 [M-H-C20H30O2]-.
Rt 19,25: PI 36:4; MS- m/z 857,5103 [M-H]-; MS2- m/z 255,2330 [C16H31O2]- 297,0311 [C9H14O9P]-, 303,2352 [C20H31O2]-, 391,2239 [M-H-C20H32O2-C6H10O5]-, 553,2751 [M-H-C20H32O2]-, 571,2760 [M-H-C20H30O]- và 601,2703 [M-H- C16H32O2]-.
Rt 18,83: PI 36:3; MS- m/z 859,5269 [M-H]-; MS2- m/z 571,2859 [M-H-
C20H32O]-, 553,2741 [M-H-C20H34O2]-, 391,2257 [M-H-C20H34O2-C6H10O5]-, 305,2382 [C20H33O2]- và 297,0298 [C9H14O9P]-.
+ Lồi rong Lục Halimeda incrasata Lamx.: cĩ 03 dạng phân tử PI xác định theo giá trị khối lượng tăng dần và thời gian lưu:
Rt 18,09: PI 32:0; MS- m/z 809,5076 [M-H]-; MS2- m/z 553,2717 [M-H-
Rt 17,39: PI 34:0; MS- m/z 837,5479 [M-H]-; MS2- m/z 581,2859 [M-H-
C16H32O]-, 419,2523 [M-H-C16H32O2-C6H10O5]- và 391,2233 [M-H-C18H36O2- C6H10O5]-.
Rt 16,68: PI 36:4; MS- m/z 857,4986 [M-H]-; MS2- m/z 601,2548 [M-H-
C16H32O2]-.
3.4.3. Xác định các dạng phân tử của phân lớp glycolipid
3.4.3.1. Dạng phân tử monogalactosyldiacylglycerol (MGDG)
CTPT: CxHyO10
CTCT: Dạng diacyl của phân tử MGDG
Đầu phân cực MGDG chứa gốc monogalactosyl (-C6H11O6). Tùy thuộc vào cấu tạo của đuơi khơng phân cực, MGDG được chia thành 3 loại: diacyl, ankyl acyl, ankenyl acyl. Để xác định dạng phân tử của MGDG căn cứ vào 5 dấu hiệu:
(i) Thời gian lưu dự kiến: (2,5 - 3,5) n phút.
(ii) Trên event 3, xuất hiện các ion âm [M-H]- và dạng adduct [M+HCOO]- với m/z là số lẻ.
(iii) Trên event 1, xuất hiện ion dương [M+Na]+ với cường độ peak lớn và ion [M+NH4]+ với cường độ peak khơng lớn nên với những phân tử MGDG cĩ hàm lượng ít thì khơng xuất hiện
(iv) Khối lượng phân tử tùy thuộc vào cấu tạo của đuơi khơng phân cực, thường nằm trong khoảng m/z 700 - 900.
(v) Cơng thức phân tử tương ứng cĩ dạng -O10 hoặc -O9.
Các dữ kiện phổ khối:
+ Lồi rong Nâu Lobophora sp.: cĩ 09 dạng phân tử MGDG xác định theo
giá trị khối lượng tăng dần và thời gian lưu:
Rt 2,96: MGDG 32:1; MS- m/z 727,5375 [M-H]-, m/z 773,5388 [M+HCOO]-
và m/z 751,5297 [M+Na]+; MS2- [M-H]- m/z 281,2423 [C18H33O2]-, MS2-
[M+HCOO]- m/z 727,5412 [M-H]- và 281,2422 [C18H33O2]-, MS2- [M+Na]+ m/z
Rt 2,78: MGDG 34:1; MS- m/z 755,5666 [M-H]-, m/z 801,5678 [M+HCOO]- và m/z 779,5654 [M+Na]+; MS2- [M-H]- m/z 255,2423 (16:0), MS2- [M+HCOO]- m/z
775,5622 [M-H]- và 281,2581 [C18H33O2]-, MS2-[M+Na]+ m/z 523,3234 [M+Na-
C16H32O2]+ và 497,3112 [M+Na-C18H34O2]+.
Rt 2,96: MGDG 36:5; MS- m/z 775,5346 [M-H]-, m/z 821,5364 [M+HCOO]- và m/z 799,5326 [M+Na]+; MS2- [M+HCOO]- m/z 301,2118 [C20H29O2]-.
Rt 3,26: MGDG 38:9; MS- m/z 795,5046 [M-H]-, m/z 841,5021 [M+HCOO]- và m/z 819,5023 [M+Na]+; MS2- [M+HCOO]- m/z 537,2978, 513,2974, 275,2023 [C18H27O2]- và 301,2171 [C20H29O2]-, MS2- [M+Na]+ m/z 543,2932 [M+Na-
C18H28O2]+, 541,2822 [M+Na-C18H26O2]+, 519,2942 [M+Na-C20H28O2]+ và 517,2795 [M+Na-C20H30O2]+.
Rt 3,14: MGDG 38:8; MS- m/z 797,5267 [M-H]-, m/z 843,5168 [M+HCOO]- và m/z 821,5147 [M+Na]+; MS2- [M+HCOO]- m/z 797,5212, 515,3222, 301,2112
[C20H29O2]- và 277,2115 [C18H29O2]-, MS2- [M+Na]+ m/z 543,3312 [M+Na-
C18H30O2]+, 519,3232 [M+Na-C20H30O2]+ và 517,2822 [M+Na-C20H32O2]+.
Rt 3,02: MGDG 38:7; MS- m/z 799,0121 [M-H]-, m/z 845,5315 [M+HCOO]-
m/z 823,5270 [M+Na]+; MS2- [M+HCOO]- m/z 800,5399 và 303,2324 [C20H31O2]-.
Rt 2,93: MGDG 38:6; MS- m/z 801,0110 [M-H]-, m/z 847,5482 [M+HCOO]- và m/z 825,555 [M+Na]+; MS2- [M+HCOO]- m/z 801,5512 và 301,2113 [C20H29O2]-
Rt 2,90: MGDG 40:8; MS- m/z 825,5567 [M-H]-, m/z 871,5517 [M+HCOO]-; MS2- [M+HCOO]- m/z 303,2324 [C20H31O2]-.
+ Lồi rong Lục Halimeda incrasata Lamx.: cĩ 12 dạng phân tử MGDG (3
dạng là đồng phân) xác định theo giá trị khối lượng tăng dần và thời gian lưu:
Rt 3,11: MGDG 30:2; MS- m/z 721,4803 [M+Na]+; MS2- [M+Na]+ m/z
467,3534 và 254,1303 [C16H30O2].
Rt 2,92: MGDG 30:0; MS- m/z 725,5139 [M+Na]+; MS2- [M+Na]+ m/z
497,3108 [M+Na-C14H28O2]+ và 469,2757 [M+Na-C16H32O2]+.
Rt 3,14: MGDG 32:4; MS- m/z 745,4813 [M+Na]+; MS2- [M+Na]+ m/z
495,3112 [M+Na-C16H26O2]+, 491,2704 [M+Na-C16H30O2]+, 467,2707 [M+Na- C18H30O2]+.
Rt 2,96: MGDG 32:2; MS- m/z 749,5127 [M+Na]+; MS2- [M+Na]+ m/z
521,2823 [M+Na-C14H28O2]+, 495,3333 [M+Na-C16H30O2]+ và 469,2728 [M+Na- C18H32O2]+.
Rt 2,78: MGDG 32:0; MS- m/z 753,5542 [M+Na]+; MS2- [M+Na]+ m/z 497,3132 [M+Na-C16H32O2]+. Rt 3,21: MGDG 34:6; MS- m/z 769,4804 [M+Na]+; MS2- [M+Na]+ m/z 491,2522 [M+Na-C18H30O2]+. Rt 3,08: MGDG 34:5; MS- m/z 771,4951 [M+Na]+; MS2- [M+Na]+ m/z 521,2322 [M+Na-C16H26O2]+ và 491,2622 [M+Na-C18H32O2]+. Rt 2,91: MGDG 34:3; MS- m/z 775,5240 [M+Na]+; MS2- [M+Na]+ m/z 521,2910 [M+Na-C16H30O2]+ và 495,2812 [M+Na-C18H32O2]+. Rt 2,81: MGDG 36:4; MS- m/z 801,5442 [M+Na]+; MS2- [M+Na]+ m/z 545,3112 [M+Na-C16H32O2]+ và 497,3113 [M+Na-C20H32O2]+. 3.4.3.2. Dạng phân tử digalactosyldiacylglycerol (DGDG) CTPT: CxHyO15
CTCT: Dạng diacyl của phân tử DGDG
Đầu phân cực DGDG chứa gốc digalactosyl (-C12H21O11). Tùy thuộc vào cấu tạo của đuơi khơng phân cực, DGDG được chia thành 3 loại: diacyl, ankyl acyl, ankenyl acyl. Để xác định dạng phân tử của DGDG căn cứ vào 5 dấu hiệu:
(i) Thời gian lưu dự kiến: (8,5 - 14) n phút.
(ii) Trên event 3, xuất hiện các ion âm [M-H]- với m/z là số lẻ và dạng adduct [M+HCOO]- cĩ cường độ peak khơng lớn nên khơng thấy xuất hiện với hàm lượng thấp.
(iii) Trên event 1, xuất hiện ion dương [M+Na]+ cĩ cường độ peak lớn nhất với m/z là số lẻ và ion [M+NH4]+ cĩ cường độ peak khơng lớn nên với những phân tử DGDG cĩ hàm lượng ít thì khơng xuất hiện.
(iv) Khối lượng phân tử tùy thuộc vào cấu tạo của đuơi khơng phân cực, thường nằm trong khoảng m/z 850 - 1000.
(v) Cơng thức phân tử tương ứng cĩ dạng -O15 hoặc -O14.
Các dữ kiện phổ khối:
+ Lồi rong Nâu Lobophora sp.: cĩ 01 dạng phân tử DGDG xác định theo
hàm lượng lipid thấp từ 0,1 - 0,31% và 25% (15 mẫu) cĩ hàm lượng lipid cao từ 0,64 - 1,7%. Ở ngành rong Đỏ (Rhodophyta) các giá trị lipid tổng theo tính tốn thống kê thấp nhất trong 3 ngành rong biển với hàm lượng lipid trung bình là 0,48% (dao động từ 0,17 - 1,6%) trong đĩ 50% số mẫu (10 mẫu) nằm trong khoảng 0,29 - 0,51%, giá trị trung vị là 0,35%. Ở ngành rong Nâu (Phaeophyta) hàm lượng lipid tổng cao hơn ngành rong Đỏ, trung bình là 0,58%, trong đĩ 50% số mẫu (15 mẫu) nằm trong khoảng 0,33- 0,72%, giá trị trung vị là 0,46%. Tương tự như vậy ở ngành rong Lục với số lượng mẫu ít nhất (9 mẫu) cĩ độ tập trung dữ liệu hàm lượng lipid cao khi phân tích, trong đĩ giá trị trung vị gần bằng giá trị trung bình, tương ứng là 0,48 và 0,50%. 50% mẫu tương ứng 5 mẫu cĩ hàm lượng lipid nằm trong khoảng 0,46 - 0,53%, mẫu cao nhất cĩ hàm lượng lipid là 0,78% và thấp nhất là 0,30%.
Bảng 4.2. Giá trị các tham số đo lường xu hướng tập trung hàm lượng lipid tổng của 60
mẫu rong biển nghiên cứu
Lipid tổng
(%)
Lipid tổng các ngành rong biển (%) Rhodophyta Phaeophyta Chlorophyta
N (số mẫu) 60 20 31 9 Trung bình 0,53 0,48 0,58 0,50 Min 0,10 0,17 0,10 0,30 Q1 0,31 0,29 0,33 0,46 Trung vị 0,44 0,35 0,46 0,48 Q3 0,64 0,51 0,72 0,53 Max 1,70 1,60 1,70 0,78
Ghi chú: Min là giá trị nhỏ nhất; Max là giá trị lớn nhất; Q1, Q3 là các giá trị tứ phân vị
thứ nhất (Q1) và thứ ba (Q3); Trung vị là giá trị tứ phân vị thứ hai, chia tập hợp bộ dữ liệu lipid tổng thành hai phần cĩ số lượng mẫu bằng nhau.
Nhìn chung các mẫu rong biển nghiên cứu của 14 họ thuộc 3 ngành rong biển chủ yếu ở Việt Nam cĩ hàm lượng lipid tổng khơng cao, kết quả này phù hợp các cơng bố trước đây của các tác giả trong và ngồi nước khi nghiên cứu đối tượng này [63,67,102,103,104,105]. Hàm lượng lipid tổng cũng khơng cĩ sự phân biệt rõ các ngành hay các họ mà chỉ phụ thuộc vào nhiều yếu tố khác như lồi, mơi trường sống, dinh dưỡng, thời kì sinh trưởng phát triển của lồi rong... như một số nghiên cứu đã cơng bố [106-108]. Các mẫu cùng lồi thu ở địa điểm và thời gian khác nhau cũng cĩ sự khác biệt. Chẳng hạn cùng lồi S. mcclerei Setchell (28KT) thu ở Cơn
Đảo vào tháng 6/2017 cĩ hàm lượng lipid là 0,48%, cịn mẫu thu ở Lăng Cơ vào tháng 5/2016 (RCB08) là 0,11%. Cùng những thời điểm đĩ lồi S. heterocystum
Mont. thu ở Cơn Đảo (26KT) cĩ hàm lượng lipid là 0,41% nhưng mẫu thu ở Lăng Cơ (RCB 26) lại cĩ hàm lượng cao vượt trội 0,99%. Cần tiếp tục phân tích, đánh giá chất lượng lipid thơng qua các lớp chất lipid, thành phần các axit béo để thấy được giá trị lipid của từng lồi rong biển nghiên cứu cũng như các định hướng nghiên cứu chuyên sâu tiếp theo.
Phân tích hàm lượng lipid tổng đã cho thấy một số mẫu rong biển cĩ hàm lượng lipid tổng vượt trội so với các mẫu cịn lại (hàm lượng >1% khối lượng tươi) như mẫu 29KT, lồi Sargassum paniculatum (1,7%); mẫu 18KT, lồi Glacilaria
tenuistipitata (1,6%); mẫu 10A, lồi Turbinaria ornata (1,49%); mẫu 9A, lồi
Pseudochnoospora implexa (1,34%); mẫu 33KT, lồi Hynea frageliformis (1,1%)
và mẫu 1KT, lồi Lobophora sp. (1,06%). Đây sẽ là một trong các căn cứ để chúng tơi lựa chọn mẫu rong biển cho các nghiên cứu tiếp theo.
Các lớp chất trong lipid tổng
Từ kết quả ở bảng 4.1, chúng tơi đã xử lý thống kê các tham số đo lường xu hướng tập trung của dữ liệu về hàm lượng các lớp chất trong lipid tổng và được trình bày ở bảng 4.3.
Bảng 4.3. Giá trị các tham số đo lường xu hướng tập trung các lớp chất lipid
của 60 mẫu rong biển nghiên cứu